RYSKA FEDERATIONENS HÄLSOMINISTIE
ALLMÄN ARBETSARTIKEL
Validering av analysmetoder OFS.1.1.0012.15
Introducerad för första gången
Validering av en analysmetod är ett experimentellt bevis på att metoden är lämplig för att lösa de avsedda problemen.
Denna allmänna farmakopémonografi reglerar egenskaperna hos analysmetoder som fastställts i syfte att validera dem, och motsvarande kriterier för lämpligheten av validerade metoder avsedda för kvalitetskontroll av läkemedel: farmaceutiska substanser och läkemedel.
Metoder för kvantitativ bestämning är föremål för validering, inklusive metoder för att bestämma föroreningar och metoder för att bestämma innehållsgränsen. Autentiseringsmetoder valideras när det är nödvändigt att bekräfta deras specificitet.
Under valideringen bedöms analysmetoden enligt de egenskaper som anges nedan, vald med hänsyn till standardrekommendationerna i tabellen:
- specificitet;
- detektionsgräns;
- kvantifieringsgräns;
- analytiskt område (intervall);
- linjäritet;
- korrekthet (sannhet);
- precision;
- robusthet.
Tabell 1 - Egenskaper för metoder fastställda under validering
|
namn egenskaper |
Huvudtyper av tekniker | ||||
| Äkthetstest | Främmande föremål | kvantifiering | |||
| Kvantitativa metoder | Innehållsgräns | Huvudsaklig ingrediens, standardiserade komponenter | Aktiv ingrediens i "Dissolution"-testet | ||
| Specificitet **) | Ja | Ja | Ja | Ja | Ja |
| Detektionsgräns | Nej | Nej | Ja | Nej | Nej |
| Kvantifieringsgräns | Nej | Ja | Nej | Nej | Nej |
| Analytiskt område | Nej | Ja | Nej | Ja | Ja |
| Linjäritet | Nej | Ja | Nej | Ja | Ja |
| Höger | Nej | Ja | * | Ja | Ja |
| Precision :
– repeterbarhet (konvergens) – mellanliggande (i-laboratoriet) precision |
|||||
| Hållbarhet | Nej | * | * | * | * |
*) kan definieras vid behov;
**) bristen på specificitet för en analysteknik kan kompenseras genom att använda en annan analysteknik.
Revalidering (omvalidering) av metoder utförs när det sker en förändring:
- Teknik för att erhålla analysobjektet;
- läkemedlets sammansättning (analysobjekt);
- tidigare godkänd analysmetod.
Specificitet
Specificitet är förmågan hos en analytisk teknik att entydigt bedöma analyten i närvaro av medföljande komponenter.
Bevis på specificiteten hos ett validerat förfarande baseras vanligtvis på övervägande av data som erhållits med hjälp av det från analys av modellblandningar med känd sammansättning.
Specificiteten hos den validerade metoden kan också bevisas genom lämplig statistisk bearbetning av resultaten av analyser av verkliga objekt som utförts med den och parallellt med en annan, uppenbarligen specifik, metod (metod vars specificitet har bevisats).
1.1 För äkthetstestmetoder
Den validerade metoden (eller uppsättningen av metoder) måste ge tillförlitlig information om förekomsten av en given aktiv substans i en substans eller doseringsform om den innehåller de komponenter som anges i receptet, vilket är föremål för experimentell bekräftelse.
Äktheten av den aktiva substansen i en farmaceutisk substans eller ett läkemedel bestäms genom jämförelse med ett standardprov eller av fysikalisk-kemiska eller kemiska egenskaper som inte är karakteristiska för andra komponenter.
1.2 För förfaranden för kvantifiering och föroreningstestning
Metoden för kvantifiering och föroreningstestning som valideras är föremål för samma tillvägagångssätt: dess specificitet för analyten måste bedömas, dvs. det måste experimentellt verifieras att närvaron av samtidiga komponenter inte påverkar analysresultatet i onödan.
Det är möjligt att bedöma specificiteten hos den validerade metoden både genom att analysera modellblandningar av känd sammansättning som innehåller analyten, och genom att jämföra resultaten av analyser av verkliga objekt som erhållits samtidigt med den validerade och en annan, uppenbart specifik metod. Resultaten av relevanta experiment måste bearbetas statistiskt.
Bristen på testspecificitet kan kompenseras av andra ytterligare test(er).
Vid validering av metoder, om så är lämpligt, kan läkemedelsprover användas som har exponerats för extrema förhållanden (ljus, temperatur, fuktighet) eller kemiskt modifierats med någon lämplig metod för att ackumulera föroreningar.
För kromatografiska tekniker visas upplösningen mellan de två mest eluerande ämnena vid lämpliga koncentrationer.
DETEKTIONSGRÄNS
Detektionsgränsen är den minsta mängd (koncentration) av analyten i ett prov som kan detekteras (eller approximeras) med den metod som valideras.
Detektionsgränsen i de fall som anges i tabellen uttrycks vanligtvis som koncentrationen av analyten (i % relativ eller miljondelar - ppm).
Beroende på typ av teknik (visuell eller instrumentell) används olika metoder för att bestämma detektionsgränsen.
2.1 För metoder med visuell bedömning av analysresultatet
Testa prover med olika kända kvantiteter (koncentrationer) av analyten och ställ in det lägsta värde vid vilket analysresultatet kan bedömas visuellt. Detta värde är en uppskattning av detektionsgränsen.
2.2 För metoder med instrumentell bedömning av analysresultatet
2.2.1 Genom signal-brusförhållande
Detta tillvägagångssätt är tillämpbart på metoder för vilka baslinjebrus observeras. Storleken på de signaler som erhållits för kontrollexperimentet och för prover med låga koncentrationer av analyten jämförs. Ställ in den minsta mängden (koncentrationen) av analyten i provet där förhållandet mellan analyssignalen och brusnivån är 3.
Det hittade värdet är en uppskattning av detektionsgränsen.
2.2.2 Med värdet på standardavvikelsen för signalen och lutningen på kalibreringsgrafen
Detektionsgränsen (DL) hittas med hjälp av ekvationen:
PO = 3,3 · S/b,
Var S
b– Känslighetskoefficient, vilket är förhållandet mellan den analytiska signalen och det värde som bestäms (kalibreringskurvans lutning).
S Och b
S S a fri term för ekvationen i denna graf. Det erhållna värdet för detektionsgränsen, om nödvändigt, kan bekräftas genom direkt experiment vid kvantiteter (koncentrationer) av analyten som ligger nära det funna värdet för detektionsgränsen.
I allmänhet, om det finns bevis för att ett förfarande är lämpligt för att tillförlitligt detektera ett ämne i koncentrationer både över och under dess specifikationsgränser, är det inte nödvändigt att fastställa den faktiska detektionsgränsen för det förfarandet.
KVANTIFIKATIONSGRÄNS
Kvantifieringsgränsen är den minsta mängden (koncentrationen) av ett ämne i ett prov som kan kvantifieras med hjälp av ett validerat förfarande med erforderlig noggrannhet och laboratorieprecision (mellanliggande).
Kvantifieringsgränsen är en nödvändig valideringsegenskap för metoder som används för att bedöma små mängder (koncentrationer) av ämnen i ett prov och i synnerhet för att bedöma innehållet av föroreningar.
Beroende på typ av teknik används följande metoder för att hitta gränsen för kvantifiering.
3.1 För metoder med visuell bedömning av analysresultatet
Testa prover med olika kända kvantiteter (koncentrationer) av analyten och ställ in det lägsta värde vid vilket analysresultatet kan erhållas visuellt med erforderlig noggrannhet och intralaboratorie- (mellanliggande) precision.
3.2 För metoder med instrumentell bedömning av analysresultatet
3.2.1 Genom signal-brusförhållande
Ställ in den lägsta koncentrationen av analyten i provet vid vilken förhållandet mellan analyssignalen och brusnivån är cirka 10:1.
3.2.2 Baserat på standardavvikelsen för signalen och lutningen för kalibreringsgrafen
Kvantifieringsgränsen (LOQ) beräknas med hjälp av ekvationen:
PKO = 10 · S/b,
Var S– Standardavvikelse för den analytiska signalen.
b– Känslighetskoefficient, som är förhållandet mellan analyssignalen och det fastställda värdet.
I närvaro av experimentella data i ett brett spektrum av uppmätta kvantiteter S Och b kan uppskattas med minsta kvadratmetoden.
För en linjär kalibreringsplot, värdet S lika med standardavvikelsen S a fri term för ekvationen i denna graf. Det erhållna värdet av kvantifieringsgränsen, om nödvändigt, kan bekräftas genom direkt experiment med kvantiteter (koncentrationer) av ämnet som bestäms som ligger nära det funna värdet för kvantifieringsgränsen.
Om det finns data om förmågan hos en teknik att på ett tillförlitligt sätt bestämma analyten vid koncentrationer över och under normen för dess innehåll som fastställts i specifikationen, är det som regel inte att fastställa det verkliga värdet av kvantifieringsgränsen för en sådan teknik. nödvändig.
METODENS ANALYTISKA OMRÅDE
Det analytiska området för tekniken är intervallet mellan de övre och nedre värdena för de analytiska egenskaperna hos komponenten som bestäms i analysobjektet (dess kvantitet, koncentration, aktivitet, etc.). Inom detta intervall måste resultaten som erhålls med den metod som valideras ha en acceptabel nivå av noggrannhet och laboratorieprecision (mellanliggande).
Följande krav gäller för storleken på det analytiska området för metoderna:
– Kvantitativa bestämningsmetoder måste vara tillämpliga i intervallet från 80 till 120 % av det nominella värdet för den analytiska egenskap som ska bestämmas.
– Metoder för att bedöma enhetlig dosering bör vara tillämpliga i intervallet från 70 till 130 % av den nominella dosen.
– De kvantifieringsmetoder som används i upplösningstestet bör i allmänhet vara tillämpliga inom intervallet 50 till 120 % av den förväntade koncentrationen av den aktiva substansen i upplösningsmediet.
– Renhetstestmetoder måste vara tillämpliga i intervallet från "Kvantifieringsgräns" eller "Detektionsgräns" till 120 % av den tillåtna halten av föroreningen som bestäms.
Teknikens analytiska omfattning kan fastställas från den mängd experimentella data som uppfyller den linjära modellen.
LINEARITET
Linjäritet hos en teknik är närvaron av ett linjärt beroende av den analytiska signalen på koncentrationen eller mängden av analyten i det analyserade provet inom teknikens analysområde.
Vid validering av en metod kontrolleras dess linjäritet i den analytiska domänen experimentellt genom att mäta analytiska signaler för minst 5 prover med olika kvantiteter eller koncentrationer av analyten. Experimentella data bearbetas med minsta kvadratmetoden med hjälp av en linjär modell:
y = b · x + a,
X– Mängden eller koncentrationen av det ämne som bestäms.
y– Svarsstorlek.
b– vinkelkoefficient;
a– gratis medlem (OFS "Statistisk bearbetning av kemiska experimentresultat").
Värden ska beräknas och presenteras b, a och korrelationskoefficient r. I de flesta fall används linjära beroenden som uppfyller villkoret 0,99, och endast när man analyserar spårkvantiteter används linjära beroenden för vilka 0,9 beaktas.
I vissa fall tillhandahålls möjligheten till linjär approximation av experimentella data först efter deras matematiska transformation (till exempel logaritm).
För vissa analysmetoder, som i princip inte kan baseras på ett linjärt samband mellan experimentella data, bestäms koncentrationen eller mängden av ett ämne med hjälp av icke-linjära kalibreringsgrafer. I detta fall kan den analytiska signalens beroende av mängden eller koncentrationen av analyten approximeras med en lämplig olinjär funktion med användning av minsta kvadratmetoden, vilket är möjligt med lämplig validerad programvara.
HÖGER
Riktigheten av en teknik kännetecknas av avvikelsen mellan det genomsnittliga resultatet av bestämningar gjorda med den från det värde som accepteras som sant.
Den validerade metoden anses vara korrekt om värdena som accepteras som sanna ligger inom konfidensintervallen för motsvarande genomsnittliga testresultat som erhållits experimentellt med denna metod.
För att bedöma korrektheten av kvantifieringsmetoder är följande tillvägagångssätt tillämpliga:
a) Analys med hjälp av en validerad metod av standardprover eller modellblandningar med ett känt innehåll (koncentration) av ämnet som bestäms.
b) jämförelse av de resultat som erhållits med användning av den validerade metoden och referensmetoden, vars riktighet tidigare har fastställts;
c) övervägande av resultaten av att studera linjäriteten hos den validerade metoden: om den fria termen i ekvationen i avsnitt 5 inte är statistiskt signifikant skild från noll, ger användningen av en sådan metod resultat fria från systematiska fel.
För tillvägagångssätt "a" och "b" är det möjligt att presentera de erhållna data i form av en ekvation av linjärt beroende (regression) mellan de experimentellt hittade och sanna värdena. För denna ekvation testas hypoteser om likheten mellan tangenten för lutningsvinkeln till enhet b och om jämställdheten till noll av den fria tiden a. Som regel, om dessa hypoteser erkänns som sanna med en tillförlitlighetsgrad lika med 0,05, ger användningen av den validerade metoden korrekta, d.v.s. fria från systematiska fel, resultat.
PRECISION
Precisionen hos en teknik kännetecknas av spridningen av resultaten som erhålls med dess användning i förhållande till värdet av det genomsnittliga resultatet. Ett mått på sådan spridning är värdet av standardavvikelsen för resultatet av en individuell bestämning, erhållen för ett prov av tillräckligt stor storlek.
Precisionen bedöms för varje kvantitativ bestämningsmetod baserat på resultaten av minst tre bestämningar för var och en av de tre nivåerna av bestämda värden (nedre, mitten och övre) som ligger inom metodens analytiska omfång. Repeterbarhet kan också bedömas för varje kvantifieringsförfarande baserat på resultaten av minst sex bestämningar för prover med nära nominellt analytinnehåll. I många fall kan precisionen bedömas baserat på resultaten av bearbetning av experimentella data med hjälp av minsta kvadratmetoden, som anges i General Pharmacopoeia Monograph "Statistisk bearbetning av kemiska experimentresultat."
Precisionen bör studeras på homogena prover och kan bedömas på tre sätt:
– som repeterbarhet (konvergens);
– som intralaboratorisk (mellanliggande) precision;
– som interlaboratorisk precision (reproducerbarhet).
Resultaten av att bedöma den analytiska tekniken för vart och ett av precisionsalternativen kännetecknas vanligtvis av motsvarande värde för standardavvikelsen för resultatet av en separat bestämning.
Vanligtvis, när man utvecklar en originalmetod, bestäms repeterbarheten (konvergens) för de resultat som erhålls med den. Om det är nödvändigt att inkludera den utvecklade metoden i den regulatoriska dokumentationen, bestäms dess intralaboratoriska (mellanliggande) precision. En metods interlaboratorieprecision (reproducerbarhet) bedöms efter dess avsedda inkludering i ett utkast till allmän farmakopémonografi, en farmakopémonografi eller i regulatorisk dokumentation för farmakopéreferensmaterial.
7.1 Repeterbarhet (konvergens)
Repeterbarheten av en analysteknik bedöms av oberoende resultat erhållna under samma reglerade förhållanden i samma laboratorium (samma utförare, samma utrustning, samma uppsättning reagenser) inom en kort tidsperiod.
7.2 Intralaboratorisk (mellanliggande) precision
Den intralaboratoriska (mellanliggande) precisionen av den validerade metoden bedöms under driftsförhållandena för ett laboratorium (olika dagar, olika utförare, olika utrustning, etc.).
7.3 Interlaboratorisk precision (reproducerbarhet)
Interlaboratorisk precision (reproducerbarhet) av den validerade metoden bedöms när testning utförs i olika laboratorier.
HÅLLBARHET
Stabiliteten hos en validerad metod är förmågan att bibehålla de egenskaper som finns för den under optimala (nominella) förhållanden, som anges i tabellen, med troliga små avvikelser från dessa analysförhållanden.
Ett förfarandes robusthet bör inte bestämmas i förhållande till lättkontrollerade analytiska förhållanden. Detta minskar dramatiskt behovet av dedikerade hållbarhetsstudier.
Stabilitet bör endast studeras när det förfarande som valideras baseras på användning av särskilt känsliga analysmetoder, såsom olika typer av kromatografi och funktionsanalys. Vid behov utvärderas metodikens stabilitet vid utvecklingsstadiet. Om stabiliteten hos en metod sannolikt är låg måste dess lämplighet kontrolleras direkt under praktisk användning.
Testa analyssystemets lämplighet
Validering av ett analyssystems lämplighet är en kontroll av att de grundläggande kraven för det uppfylls. Systemet vars lämplighet testas är en samling specifika instrument, reagenser, standarder och prover som ska analyseras. Kraven på ett sådant system anges vanligtvis i den allmänna farmakopémonografin för motsvarande analysmetod. Testning av det analytiska systemets lämplighet blir således en procedur som ingår i proceduren som valideras.
Presentation av valideringsresultat
Protokollet för validering av analytiska procedurer bör innehålla:
– Dess fullständiga beskrivning, tillräcklig för reproduktion och som återspeglar alla villkor som krävs för att utföra analysen.
– Egenskaper som bedöms.
– Alla primära resultat som ingick i statistisk databehandling.
– Resultat av statistisk bearbetning av data som erhållits experimentellt under utvecklingen eller testningen av den validerade metoden.
– Illustrativa material, såsom kopior av kromatogram erhållna genom högpresterande vätskekromatografi eller gaskromatografi. elektroferogram, elektroniska och infraröda spektra; fotografier eller ritningar av kromatogram erhållna med tunnskikts- eller papperskromatografimetoder; ritningar av titreringskurvor, kalibreringsgrafer;
– Slutsats om lämpligheten av den validerade metoden för att inkluderas i det föreskrivande dokumentet.
Det är tillrådligt att dokumentera valideringsmaterialet för enskilda analysmetoder i form av en kombinerad valideringsrapport.
Varje instrumentell metod kännetecknas av en viss ljudnivå som är associerad med detaljerna i mätprocessen. Därför finns det alltid en innehållsgräns under vilken ett ämne inte alls kan detekteras tillförlitligt.
Detektionsgräns C min , P – det lägsta innehållet vid vilket denna metod kan detektera närvaron av en komponent med en given konfidenssannolikhet.
Detektionsgränsen kan också ställas in av den minsta analytiska signalen y min, som med säkerhet kan särskiljas från signalen från kontrollexperimentet - y bakgrund.
Statistiska metoder som använder Chebyshevs ojämlikhet har bevisat att detektionsgränsen kan bestämmas kvantitativt med hjälp av uttrycket
Där s bakgrund är standardavvikelsen för den analytiska bakgrundssignalen; S - känslighetskoefficient (ibland kallad helt enkelt "känslighet"), den kännetecknar den analytiska signalens svar på innehållet i komponenten. Känslighetskoefficienten är värdet av den första derivatan av kalibreringsfunktionen för en given koncentrationsbestämning. För rätlinjiga kalibreringsgrafer är detta tangenten för lutningsvinkeln:
(uppmärksamhet: förväxla inte känslighetsfaktorS med standardavvikelses!)
Det finns andra sätt att beräkna detektionsgränsen, men denna ekvation är den som används oftast.
Vid kvantitativ kemisk analys ges vanligtvis ett intervall av bestämda halter eller koncentrationer. Det betyder intervallet av värden för de bestämda halterna (koncentrationerna) som tillhandahålls av denna teknik och begränsas av de nedre och övre gränserna för de fastställda koncentrationerna.
Analytikern är ofta intresserad av den nedre gränsen för bestämda koncentrationer Med n eller innehåll m n komponent bestäms med denna metod. Bortom den nedre gränsen för fastställt innehåll tar vanligtvis den minsta mängd eller koncentration som kan bestämmas med en relativ standardavvikelse
. .
Exempel
Masskoncentrationen av järn i lösningen bestämdes genom den spektrofotometriska metoden, mätning av de optiska densiteterna för lösningar färgade som ett resultat av interaktionen av Fe 3+-jonen med sulfosalicylsyra. För att konstruera kalibreringsberoendet mättes de optiska densiteterna för lösningar med ökande (specificerade) järnkoncentrationer behandlade med sulfosalicylsyra.
De optiska densiteterna för referenslösningen (kontrollexperiment för reagens, dvs. utan tillsats av järn, (bakgrund) var 0,002; 0,000; 0,008; 0,006; 0,003.
Beräkna järndetektionsgräns.
Lösning
1) Som ett resultat av beräkningar med minsta kvadratmetoden (se exempel för testuppgift nr 5) erhölls värdena för att konstruera en kalibreringsgraf.
Beräknade värden för att konstruera en kalibreringsgraf
2) Vi beräknar känslighetskoefficienten, det vill säga vinkelkoefficienten för kalibreringsberoendet (S) enligt tabelldata.
3) Beräkna standardavvikelse för bakgrundssignalen, vad är 0,0032 enheter för optisk densitet.
4) Detektionsgränsen kommer att vara, mg/cm 3
Testuppgift nr 6
Bestäm detektionsgränsen för järn i vatten.
Inledande data : de optiska densitetsvärdena för bakgrunden (referenslösning) vid konstruktion av kalibreringsgrafen för bestämning av järn var 0,003; 0,001; 0,007; 0,005; 0,006; 0,003; 0,001; 0,005. Värdena för optiska densiteter som motsvarar koncentrationerna av järn i lösningen presenteras i tabellen för kontrolluppgift nr 5.
Beräkna detektionsgränsen för järn i mg/cm 3 med hjälp av känslighetskoefficienterna S beräknade baserat på data som erhållits för att konstruera en kalibreringsgraf med användning av minsta kvadratmetoden när du utför kontrolluppgift nr 5;
Kvantifieringsgräns
"... Kvantifieringsgräns (LOQ) (i analytiska definitioner): den lägsta koncentrationen eller analyten i ett analytprov som kan kvantifieras med en acceptabel nivå av precision och noggrannhet, vilket visas genom laboratorietestning eller annan lämplig metodvalidering. .."
Källa:
"LIVSMEDEL. ANALYSMETODER FÖR DETEKTION AV GENETISKT MODIFIERADE ORGANISMER OCH PRODUKTER ERHÅLLDA FRÅN DEM. ALLMÄNNA KRAV OCH DEFINITIONER. GOST R 53214-2008 (ISO 24276:2006)"
(godkänd genom order av Rostekhregulirovaniya daterad 25 december 2008 N 708-st)
Officiell terminologi. Akademik.ru. 2012.
Se vad "Limit of Quantification" är i andra ordböcker:
kvantifieringsgräns- 3,7 kvantifieringsgräns (LOQ): En tiofaldig ökning av standardavvikelsen för provmassan. Notera LOQ-värdet används som ett tröskelvärde, över vilket massan... ...
repeterbarhetsgräns- 3.7 repeterbarhetsgräns: Den absoluta skillnaden mellan resultaten av maximala och lägsta värden från det specificerade antalet mätningar utförda under repeterbarhetsförhållanden enligt GOST R ISO 5725 1. Källa ... Ordboksuppslagsbok med termer för normativ och teknisk dokumentation
reproducerbarhetsgräns- 2,9 reproducerbarhetsgräns: Värdet under vilket, med en sannolikhet på 95 %, ligger det absoluta värdet av skillnaden mellan två testresultat erhållna under reproducerbarhetsförhållanden. Källa … Ordboksuppslagsbok med termer för normativ och teknisk dokumentation
repeterbarhetsgräns (konvergens)- 3.11 repeterbarhetsgräns: Ett värde som, med en konfidenssannolikhet på 95 %, inte överskrids av det absoluta värdet av skillnaden mellan resultaten av två mätningar (eller tester) erhållna under repeterbarhetsförhållanden... Ordboksuppslagsbok med termer för normativ och teknisk dokumentation
Intralaboratorieprecisionsgräns- 3.11 Gräns för intralaboratorieprecision: Den absoluta diskrepansen som tillåts för den accepterade sannolikheten P mellan två analysresultat erhållna under förhållanden med intralaboratorieprecision. Källa … Ordboksuppslagsbok med termer för normativ och teknisk dokumentation
reproducerbarhetsgräns R- 2.19.2 reproducerbarhetsgräns R: Det absoluta värdet av skillnaden mellan två testresultat under reproducerbarhetsförhållanden (se 2.19.1) med en konfidensnivå på 95 %. 2.19.1, 2.19.2 (Ändrad upplaga, titel= Ändring nr 1, IUS 12 2002).… … Ordboksuppslagsbok med termer för normativ och teknisk dokumentation
MI 2881-2004: Rekommendation. GSI. Metoder för kvantitativ kemisk analys. Rutiner för att kontrollera acceptansen av analysresultat- Terminologi MI 2881 2004: Rekommendation. GSI. Metoder för kvantitativ kemisk analys. Procedurer för att kontrollera acceptansen av analysresultat: 3.17 kritisk skillnad: Den absoluta skillnaden tillät en accepterad sannolikhet på 95 % mellan ... ... Ordboksuppslagsbok med termer för normativ och teknisk dokumentation
GOST R 50779.11-2000: Statistiska metoder. Statistisk kvalitetsledning. Termer och definitioner- Terminologi GOST R 50779.11 2000: Statistiska metoder. Statistisk kvalitetsledning. Termer och definitioner originaldokument: 3.4.3 (övre och undre) kontrollgränser Gränsen på kontrolldiagrammet, över vilken den övre gränsen, ... ... Ordboksuppslagsbok med termer för normativ och teknisk dokumentation
GOST R 50779.10-2000: Statistiska metoder. Sannolikhet och grundläggande statistik. Termer och definitioner- Terminologi GOST R 50779.10 2000: Statistiska metoder. Sannolikhet och grundläggande statistik. Termer och definitioner originaldokument: 2.3. (allmän) population Uppsättningen av alla enheter som beaktas. Obs För en slumpvariabel... ... Ordboksuppslagsbok med termer för normativ och teknisk dokumentation
RMG 61-2003: Statligt system för att säkerställa enhetlighet i mätningar. Indikatorer för noggrannhet, korrekthet, precision av metoder för kvantitativ kemisk analys. Bedömningsmetoder- Terminologi RMG 61 2003: Statligt system för att säkerställa enhetlighet i mätningar. Indikatorer för noggrannhet, korrekthet, precision av metoder för kvantitativ kemisk analys. Bedömningsmetoder: 3.12 intralaboratorieprecision: Precision ... Ordboksuppslagsbok med termer för normativ och teknisk dokumentation
HÖGSKOLA
LÖSNING
I enlighet med artikel 30 i fördraget om den eurasiska ekonomiska unionen av den 29 maj 2014 och artikel 3.2 i avtalet om gemensamma principer och regler för cirkulation av läkemedel inom ramen för den eurasiska ekonomiska unionen av den 23 december 2014 , styrelsen för Eurasian Economic Commission
bestämt:
1. Godkänn bifogade riktlinjer för validering av analysmetoder för att testa läkemedel.
2. Detta beslut träder i kraft sex månader från dagen för det officiella offentliggörandet.
styrelseordförande
Eurasian Economic Commission
T. Sargsyan
Vägledning om validering av analytiska metoder för drogtester
GODKÄND
Efter beslut av styrelsen
Eurasian Economic Commission
daterad 17 juli 2018 N 113
I. Allmänna bestämmelser
1. Denna guide definierar reglerna för validering av analysmetoder för att testa läkemedel, samt en lista över egenskaper som ska bedömas under valideringen av dessa metoder och inkluderas i registreringsunderlag som lämnas in till de auktoriserade organen i medlemsstaterna i Eurasian Economic Union (nedan kallad medlemsländerna respektive). Union).
2. Syftet med att validera ett analysförfarande för att testa läkemedel är en dokumenterad bekräftelse på dess lämplighet för det avsedda syftet.
II. Definitioner
3. I den här guiden används begrepp som betyder följande:
"analytisk procedur" - en metod för att testa läkemedel, som inkluderar en detaljerad beskrivning av sekvensen av åtgärder som krävs för att utföra ett analytiskt test (inklusive en beskrivning av beredningen av testprover, standardprover, reagenser, användning av utrustning, konstruktion av en kalibreringskurva, använda beräkningsformler, etc.);
"reproducerbarhet" är en egenskap som kännetecknar precision i interlaboratorietest;
"användningsområde (analytiskt område)" (intervall) - intervallet mellan den högsta och lägsta koncentrationen (mängden) av analyten i ett prov (inklusive dessa koncentrationer), för vilket analysförfarandet har visat sig ha en acceptabel precisionsnivå , noggrannhet och linjäritet;
"linjäritet" är ett direkt proportionellt beroende av den analytiska signalen på koncentrationen (mängden) av analyten i provet inom teknikens tillämpningsområde (analytiska område).
"återhämtning" (återhämtning) - förhållandet mellan det erhållna medelvärdet och de sanna (referens) värdena, med hänsyn tagen till motsvarande konfidensintervall;
"repeterbarhet (precision inom analys)" - precisionen hos en metod när upprepade tester utförs under samma driftsförhållanden (till exempel av samma analytiker eller grupp av analytiker, på samma utrustning, med samma reagenser, etc.) under en kort tidsperiod;
"riktighet" (noggrannhet, sannhet) - närheten mellan det accepterade sanna (referens) värdet och det resulterande värdet, vilket uttrycks av öppningsvärdet;
"kvantifieringsgräns" - den minsta mängd av ett ämne i ett prov som kan kvantifieras med lämplig precision och noggrannhet;
"detektionsgräns" - den minsta mängd av analyten i ett prov som kan detekteras, men inte nödvändigtvis exakt kvantifieras;
"precision" (precision) - ett uttryck för närheten (graden av spridning) av resultaten (värdena) mellan en serie mätningar utförda på flera prov tagna från samma homogena prov, under de förhållanden som föreskrivs av metoden;
"intermediär (intralaboratorisk) precision" (mellanprecision) - påverkan av variationer inom laboratoriet (olika dagar, olika analytiker, olika utrustning, olika serier (partier) av reagens, etc.) på testresultaten av identiska prover tagna från samma serie;
"specificitet" - förmågan hos en analysteknik att entydigt utvärdera det ämne som bestäms, oavsett andra ämnen (föroreningar, nedbrytningsprodukter, hjälpämnen, matris (medium) etc.) som finns i testprovet;
"robusthet" är förmågan hos en analysteknik att vara motståndskraftig mot påverkan av små specificerade förändringar i testförhållanden, vilket indikerar dess tillförlitlighet vid normal (standard) användning.
III. Typer av analysmetoder som ska valideras
4. Den här guiden diskuterar metoder för validering av de fyra vanligaste typerna av analysmetoder:
a) tester för identifiering (äkthet).
b) tester för att bestämma det kvantitativa innehållet av föroreningar (kvantitativa tester för föroreningsinnehåll).
c) tester för att bestämma det maximala innehållet av föroreningar i provet (gränstest för kontrollföroreningar).
d) Kvantitativa tester (för innehåll eller aktivitet) för att bestämma den aktiva delen av molekylen av den aktiva substansen i testprovet.
5. Alla analysmetoder som används för att kontrollera kvaliteten på läkemedel måste valideras. Denna guide omfattar inte validering av analysmetoder för typer av tester som inte ingår i punkt 4 i dessa riktlinjer (till exempel upplösningstester eller bestämning av partikelstorlek (dispergering) för en farmaceutisk substans, etc.).
6. Identifierings- (äkthets)test består vanligtvis av att jämföra egenskaperna (till exempel spektrala egenskaper, kromatografiskt beteende, kemisk aktivitet etc.) hos testprovet och standardprovet.
7. Tester för att fastställa det kvantitativa innehållet av föroreningar och tester för att fastställa det begränsande innehållet av föroreningar i ett prov syftar till att korrekt beskriva provets renhet. Kraven för validering av metoder för kvantitativ bestämning av föroreningar skiljer sig från kraven för validering av metoder för att bestämma det begränsande innehållet av föroreningar i ett prov.
8. Kvantitativa testmetoder syftar till att mäta innehållet av analyten i testprovet. I dessa riktlinjer avser kvantifiering den kvantitativa mätningen av huvudkomponenterna i en farmaceutisk substans. Liknande valideringsparametrar gäller för den kvantitativa bestämningen av den aktiva substansen eller andra komponenter i läkemedlet. Kvakan användas i andra analytiska förfaranden (t.ex. upplösningstestning).
Syftet med analytiska förfaranden måste vara tydligt definierade, eftersom detta avgör valet av valideringsegenskaper som måste bedömas under valideringen.
9. Följande typiska valideringsegenskaper för ett analysförfarande är föremål för bedömning:
a) noggrannhet (sannhet);
b) precision:
repeterbarhet;
intermediär (intralaboratorisk) precision;
c) specificitet;
d) detektionsgräns;
e) kvantifieringsgräns;
f) linjäritet;
g) användningsområde (analytiskt område).
10. De viktigaste valideringsegenskaperna för validering av olika typer av analysmetoder anges i tabellen.
Tabell. Valideringsegenskaper för validering av olika typer av analysmetoder
Godkännande | Typ av analytisk procedur |
||||
karakteristisk | tester för | föroreningstest | kvantitativa tester |
||
(äkthet) | kvantitativ | begränsa innehållet | upplösning (endast mätning), innehåll (aktivitet) |
||
Höger | |||||
Precision | |||||
repeterbarhet | |||||
mellanprecision | |||||
Specificitet** | |||||
Detektionsgräns | |||||
Kvantifieringsgräns | |||||
Linjäritet | |||||
Användningsområde | |||||
________________
*Om reproducerbarhet bestäms krävs inte bestämning med mellanliggande precision.
** Bristen på specificitet för en analysteknik kan kompenseras genom att använda en eller flera ytterligare analystekniker.
*** Kan krävas i vissa fall (till exempel när detektionsgränsen och den normaliserade gränsen för innehållet av föroreningen som bestäms är nära).
Notera. "-" - egenskapen utvärderas inte, "+" - egenskapen utvärderas.
Den specificerade listan bör betraktas som en standard vid validering av analysmetoder. Det kan finnas undantag som kräver en separat motivering från tillverkaren av läkemedlet. En sådan egenskap hos en analytisk teknik som stabilitet (robusthet) visas inte i tabellen, men den bör övervägas vid lämpligt stadium av utvecklingen av en analysteknik.
Omvalidering (förlängning) kan vara nödvändig i följande fall (men inte begränsat till):
ändra syntesschemat för en farmaceutisk substans;
förändring i läkemedlets sammansättning;
förändring i analytisk metodik.
Förnyad validering utförs inte om tillverkaren tillhandahåller lämplig motivering. Omfattningen av förlängningen beror på vilken typ av ändringar som görs.
IV. Metodik för validering av analysmetoder
1. Allmänna krav på metodiken för validering av analysmetoder
11. Detta avsnitt beskriver de egenskaper som beaktas vid valideringen av analysmetoder och ger några tillvägagångssätt och rekommendationer för att fastställa de olika valideringsegenskaperna för varje analysmetod.
12. I vissa fall (till exempel när specificitet bevisas) kan en kombination av flera analystekniker användas för att säkerställa kvaliteten på en farmaceutisk substans eller läkemedelsprodukt.
13. Alla relevanta data som samlats in under valideringen och de formler som används för att beräkna valideringsegenskaper bör presenteras och analyseras.
14. Det är tillåtet att använda andra metoder än de som anges i dessa riktlinjer. Valet av valideringsförfarande och protokoll är den sökandes ansvar. I det här fallet är huvudmålet med att validera en analysmetod att bekräfta metodens lämplighet för dess avsedda syfte. På grund av deras komplexitet kan tillvägagångssätt för analysmetoder för biologiska och biotekniska produkter skilja sig från de som beskrivs i denna guide.
15. Referensmaterial med kända, dokumenterade egenskaper bör användas under hela valideringsstudien. Den erforderliga renhetsgraden för standardprover beror på det avsedda syftet.
16. Olika valideringsegenskaper diskuteras i separata underavsnitt i detta avsnitt. Strukturen i detta avsnitt återspeglar framstegen i den analytiska metodutvecklingen och utvärderingsprocessen.
17. Experimentellt arbete bör utformas så att relevanta valideringsegenskaper studeras samtidigt, för att erhålla tillförlitliga data om det analytiska förfarandets kapacitet (t.ex. specificitet, linjäritet, tillämpningsområde, noggrannhet och precision).
2. Specificitet
18. Specificitetsstudier bör utföras under validering av identifierings-, förorenings- och kvantifieringstest. Förfaranden för att bekräfta specificitet beror på det avsedda syftet med analysförfarandet.
19. Metoden för att bekräfta specificitet beror på de uppgifter för vilka analystekniken är avsedd att lösa. Det är inte alltid möjligt att bekräfta att en analytisk procedur är specifik för en given analyt (fullständig selektivitet). I det här fallet rekommenderas det att använda en kombination av 2 eller flera analystekniker.
Bristen på specificitet för en analysteknik kan kompenseras genom användning av en eller flera ytterligare analytiska tekniker.
20. Specificitet för olika typer av tester innebär följande:
a) vid testning för identifiering - bekräftelse på att metoden tillåter identifiering av det ämne som bestäms;
b) vid testning för föroreningar, bekräftelse på att proceduren korrekt kan identifiera föroreningar i provet (till exempel testning för besläktade föreningar, tungmetaller, resthalt av lösningsmedel etc.);
c) i kvantitativa tester - bekräftelse på att metoden gör det möjligt att bestämma innehållet eller aktiviteten av det ämne som bestäms i provet.
Identifiering
21. Ett tillfredsställande identifieringstest måste kunna skilja mellan strukturellt närbesläktade föreningar som kan finnas i provet. Selektiviteten hos ett analytiskt förfarande kan påvisas genom att erhålla positiva resultat (kanske genom jämförelse med en känd referensstandard) för prover som innehåller analyten och negativa resultat för prover som inte innehåller den.
22. För att bekräfta frånvaron av falskt positiva resultat kan ett identifieringstest utföras för ämnen med liknande struktur eller ämnen som åtföljer det ämne som ska bestämmas.
23. Valet av potentiellt störande ämnen måste motiveras.
Kvantifiering och testning för föroreningar
24. När specificitet påvisas för en analysmetod med hjälp av en kromatografisk separationsmetod bör representativa kromatogram tillhandahållas, med enskilda komponenter korrekt identifierade. Liknande tillvägagångssätt bör användas för andra separationsbaserade tekniker.
25. Kritiska separationer i kromatografi bör studeras på lämplig nivå. Vid kritiska separationer bör upplösningsvärdet för de två närmast eluerande komponenterna ställas in.
26. När en ospecifik kvantifieringsmetod används bör ytterligare analystekniker användas och specificiteten för hela uppsättningen av tekniker bör bekräftas. Till exempel, om den kvantitativa bestämningen utförs med en titrimetrisk metod vid frisättning av en farmaceutisk substans, kan den kompletteras med ett lämpligt test för föroreningar.
27. Tillvägagångssättet är liknande för både kvantifiering och föroreningstestning.
Tillgänglighet av föroreningsprover
28. Om prover av föroreningar finns tillgängliga, är bestämningen av specificiteten för ett analysförfarande enligt följande:
a) under kvantitativ bestämning är det nödvändigt att bekräfta selektiviteten för bestämning av ämnet i närvaro av föroreningar och (eller) andra komponenter i provet. I praktiken görs detta genom att tillsätta föroreningar och (eller) hjälpämnen i lämplig mängd till provet (läkemedel eller läkemedelsprodukt) och om det finns bevis för att de inte påverkar resultatet av den kvantitativa bestämningen av den aktiva substansen;
b) vid föroreningstestning kan specificitet fastställas genom att tillsätta föroreningar till den farmaceutiska substansen eller läkemedelsprodukten i specificerade mängder och tillhandahålla bevis på separationen av dessa föroreningar från varandra och (eller) från andra komponenter i provet.
Inga föroreningsprover
29. Om standardprover av föroreningar eller nedbrytningsprodukter inte finns tillgängliga, kan specificitet bekräftas genom att jämföra testresultaten för prover som innehåller föroreningar eller nedbrytningsprodukter med resultaten från ett annat validerat förfarande (till exempel en farmakopé eller annan validerad analytisk (oberoende) procedur). När så är lämpligt bör referensstandarder för föroreningar inkludera prover som utsätts för lagring under specificerade stressförhållanden (ljus, värme, fuktighet, syra (bas) hydrolys och oxidation).
30. Vid kvantitativ bestämning är det nödvändigt att jämföra 2 resultat.
31. Vid föroreningstestning måste föroreningsprofiler jämföras.
32. För att bevisa att toppen av analyten bestäms av endast en komponent, är det tillrådligt att utföra studier på renheten hos topparna (till exempel användning av dioduppsättningsdetektion, masspektrometri).
3. Linjäritet
33. Det linjära sambandet måste bedömas över analysteknikens hela tillämpningsområde. Det kan bekräftas direkt på den farmaceutiska substansen (genom att späda huvudstandardlösningen) och (eller) på individuella prover av konstgjorda (modell)blandningar av läkemedelskomponenter med den föreslagna metoden. Den senare aspekten kan studeras under bestämningen av teknikens tillämpningsområde (analytiska område).
34. Linjäriteten bedöms visuellt genom att plotta den analytiska signalen som en funktion av koncentrationen eller mängden av analyten. Om det finns ett tydligt linjärt samband måste de erhållna resultaten bearbetas med lämpliga statistiska metoder (till exempel genom att beräkna en regressionslinje med minsta kvadratmetoden). För att erhålla linjäritet mellan analysresultat och provkoncentrationer kan matematiska transformationer av testresultaten krävas före regressionsanalys. Resultaten av regressionslinjeanalys kan användas för att matematiskt uppskatta graden av linjäritet.
35. I avsaknad av linjäritet bör testdata utsättas för matematisk transformation innan regressionsanalys utförs.
36. För att bekräfta linjäritet måste korrelationskoefficienten eller bestämningskoefficienten, skärningstermen för den linjära regressionen, lutningen på regressionslinjen och restsumman av kvadrerade avvikelser bestämmas och presenteras, samt en graf med alla experimentella data .
37. Om linjäritet inte observeras med någon typ av matematisk transformation (till exempel under validering av immunanalytiska metoder), måste den analytiska signalen beskrivas med en lämplig funktion av koncentrationen (mängden) av analyten i provet.
V. Användningsområde (analytiskt område)
39. Användningsområdet för en analysteknik beror på dess syfte och bestäms genom att studera linjäritet. Inom tillämpningsområdet måste proceduren ge den linjäritet, noggrannhet och precision som krävs.
40. Följande användningsområden (analytiska områden) för analysmetoder bör anses vara minimalt acceptabla:
a) för kvantitativ bestämning av den aktiva substansen i en farmaceutisk substans eller ett läkemedel - från en koncentration (innehåll) på 80 procent till en koncentration (innehåll) på 120 procent av den nominella koncentrationen (innehåll);
b) för enhetlig dosering - från en koncentration (innehåll) på 70 procent till en koncentration (halt) på 130 procent, såvida inte ett bredare intervall är motiverat för läkemedlet beroende på doseringsform (till exempel inhalatorer med uppmätt dos);
c) för upplösningstestning - ±20 procent (absolut) av det nominella applikationsområdet. Till exempel, om specifikationerna för ett läkemedel med modifierad frisättning täcker intervallet från 20 procent under den första timmen till 90 procent av det deklarerade innehållet under 24 timmar, bör det validerade applikationsintervallet vara från 0 till 110 procent av det deklarerade innehållet;
d) för bestämning av föroreningar - från föroreningsdetekteringsgränsen till 120 procents värde som anges i specifikationen;
(e) För föroreningar som är extremt potenta eller har en toxisk eller oväntad farmakologisk effekt, bör detektionsgränsen och kvantifieringsgränsen stå i proportion till den nivå vid vilken föroreningarna måste kontrolleras. För att validera föroreningstestförfaranden som används under utvecklingen kan det vara nödvändigt att ställa in den analytiska domänen nära den förväntade (möjliga) gränsen;
f) Om analys och renhet studeras samtidigt i ett enda test och endast 100 %-standarden används, bör förhållandet vara linjärt över hela tillämpningsområdet för den analytiska proceduren från rapporteringströskeln för föroreningen (i enlighet med reglerna) för studier av föroreningar i läkemedel och fastställande av krav på dem i specifikationer som godkänts av Eurasian Economic Commission) upp till 120 procents innehåll som anges i specifikationen för kvantitativ bestämning.
VI. Höger
41. Noggrannhet måste fastställas för hela tillämpningsområdet för analysförfarandet.
1. Kvantitativ bestämning av den aktiva farmaceutiska substansen
Farmaceutisk substans
42. Flera metoder för att bedöma riktigheten kan användas:
tillämpning av ett analytiskt förfarande på en analyt av känd renhet (till exempel på ett standardmaterial);
Jämförelse av analysresultat erhållna med ett validerat analysförfarande och resultat erhållna med ett känt förfarande och/eller ett oberoende förfarande.
En slutsats om noggrannhet kan göras efter att ha fastställt precision, linjäritet och specificitet.
Medicin
43. Flera metoder för att bedöma riktigheten kan användas:
tillämpning av analytiska tekniker på artificiella (modell)blandningar av läkemedelskomponenter, till vilka en förkänd mängd av analyten har tillsatts;
I avsaknad av prover av alla komponenter i läkemedlet är det möjligt att tillsätta en tidigare känd mängd av den farmaceutiska substansen till läkemedlet eller jämföra resultaten som erhållits med en annan metod, vars noggrannhet är känd, och (eller) en oberoende metod.
En slutsats om noggrannhet kan göras efter fastställande av precision, linjäritet och specificitet.
2. Kvantitativ bestämning av föroreningar
44. Noggrannheten bestäms med hjälp av prover (av farmaceutisk substans och läkemedelsprodukt) till vilka en känd mängd föroreningar har tillsatts.
45. I avsaknad av prover av identifierbara föroreningar och (eller) nedbrytningsprodukter är jämförelse av resultat med resultat erhållna med hjälp av en oberoende teknik acceptabel. Det är tillåtet att använda en analytisk signal för den aktiva substansen.
46. En specifik metod för att uttrycka innehållet av enskilda föroreningar eller deras summa bör specificeras (till exempel som en viktprocent eller som en procentandel av topparean, men i alla fall i förhållande till huvudanalyten).
47. Noggrannheten bedöms för minst 9 bestämningar vid 3 olika koncentrationer som täcker hela applikationsområdet (dvs 3 koncentrationer och 3 replikat för varje koncentration). Definitioner bör omfatta alla stadier av metodiken.
48. Noggrannhet uttrycks som den procentuella öppningsbarheten baserad på resultaten av den kvantitativa bestämningen av ett ämne som tillsatts i en känd mängd till det analyserade provet, eller skillnaden mellan det erhållna medelvärdet och de sanna (referens)värdena, med hänsyn tagen till motsvarande konfidensintervall.
VII. Precision
49. Validering av kvantifiering och föroreningstest innefattar bestämning av precision.
50. Precision etableras på 3 nivåer: repeterbarhet, mellanprecision och reproducerbarhet. Precision bör fastställas med hjälp av homogena, autentiska prover. Om det är omöjligt att få ett homogent prov är det tillåtet att bestämma precisionen med hjälp av konstgjorda (modell)prover eller en provlösning. Precisionen för en analysteknik uttrycks vanligtvis i termer av varians, standardavvikelse eller variationskoefficient för en serie mätningar.
VIII. Repeterbarhet
51. Repeterbarheten bestäms genom att utföra minst 9 koncentrationsbestämningar inom analysförfarandets tillämpningsområde (3 koncentrationer och 3 replikat för varje koncentration), eller minst 6 koncentrationsbestämningar för prover med 100 % analythalt.
IX. Intermediär (i laboratoriet) precision
52. Den grad i vilken mellanprecision fastställs beror på villkoren för användningen av analystekniken. Den sökande måste fastställa inverkan av slumpmässiga faktorer på precisionen i analysförfarandet. Typiska faktorer som studeras (variabler) är olika dagar, analytiker, utrustning osv. Det är inte nödvändigt att studera dessa influenser separat. När man studerar påverkan av olika faktorer är det att föredra att använda experimentell design.
X. Reproducerbarhet
53. Reproducerbarhet kännetecknar precision i ett interlaboratorieexperiment. Reproducerbarheten bör fastställas i händelse av standardisering av analysförfarandet (till exempel när det ingår i unionens farmakopé eller i medlemsstaternas farmakopéer). Inkludering av reproducerbarhetsdata i registreringsunderlaget krävs inte.
XI. Datapresentation
54. För varje typ av precision är det nödvändigt att ange standardavvikelse, relativ standardavvikelse (variationskoefficient) och konfidensintervall.
XII. Detektionsgräns
55. Olika metoder för att bestämma detektionsgränsen är möjliga, beroende på om tekniken är instrumentell eller icke-instrumentell. Andra tillvägagångssätt kan också användas.
XIII. Visuell bedömning
56. Visuell bedömning kan användas för både icke-instrumentella och instrumentella tekniker. Detektionsgränsen fastställs genom att analysera prover med kända koncentrationer av analyten och bestämma dess lägsta innehåll vid vilket den detekteras tillförlitligt.
XIV. Uppskattning av detektionsgränsen baserat på signal-brusförhållandet
57. Detta tillvägagångssätt är endast tillämpligt på analystekniker för vilka baslinjebrus observeras.
58. Bestämning av signal-brusförhållandet utförs genom att jämföra signalerna som erhålls från prover med kända låga koncentrationer med signalerna som erhålls från blankprover, och fastställa den lägsta koncentration vid vilken analyten kan detekteras tillförlitligt. För att bedöma detektionsgränsen anses ett signal-brusförhållande på 3:1 till 2:1 vara acceptabelt.
XV. Uppskattning av detektionsgränsen från standardavvikelsen för den analytiska signalen och lutningen för kalibreringskurvan
59. Detektionsgränsen (LOD) kan uttryckas på följande sätt:
Var:
60. K-värdet beräknas från kalibreringskurvan för analyten. Uppskattning av s kan göras på flera sätt:
b) enligt kalibreringskurvan. Den resulterande kalibreringskurvan, konstruerad för prover med ett analytinnehåll nära detektionsgränsen, bör analyseras. Den återstående standardavvikelsen för regressionslinjen eller standardavvikelsen för skärningspunkten med ordinataaxeln (standardavvikelse för den fria termen för linjär regression) kan användas som standardavvikelse.
XVI. Datapresentation
61. Det är nödvändigt att ange detektionsgränsen och metoden för dess bestämning. Om fastställandet av detektionsgränsen baseras på visuell bedömning eller signal-brusförhållande, anses presentationen av motsvarande kromatogram vara tillräcklig för att motivera det.
62. Om detektionsgränsvärdet erhålls genom beräkning eller extrapolering, måste uppskattningen bekräftas genom oberoende testning av ett tillräckligt antal prover som innehåller analyten vid eller nära detektionsgränsen.
XVII. Kvantifieringsgräns
63. Kvantifieringsgränsen är en nödvändig valideringsegenskap för metoder som används för att fastställa låga halter av ämnen i ett prov, särskilt för bestämning av föroreningar och (eller) nedbrytningsprodukter.
64. Flera metoder för att bestämma kvantifieringsgränsen är möjliga, beroende på om tekniken är instrumentell eller icke-instrumentell. Andra tillvägagångssätt kan användas.
XVIII. Visuell bedömning
65. Visuell bedömning kan användas för både icke-instrumentella och instrumentella tekniker.
66. Kvantifieringsgränsen fastställs vanligtvis genom att analysera prover med kända koncentrationer av analyten och bedöma den lägsta koncentration vid vilken analyten kan kvantifieras med acceptabel noggrannhet och precision.
XIX. Uppskattning av gränsen för kvantifiering från signal-brusförhållandet
67. Detta tillvägagångssätt är endast tillämpligt på mätmetoder där baslinjebrus observeras.
68. Bestämning av signal-brusförhållandet utförs genom att jämföra de uppmätta signalerna som erhållits från prover med kända låga koncentrationer av analyten med signalerna som erhålls från blankprover, och fastställa den lägsta koncentration vid vilken analyten kan kvantifieras tillförlitligt. . Det typiska signal-brusförhållandet är 10:1.
XX. Uppskattning av kvantifieringsgränsen från standardavvikelsen för signalen och lutningen för kalibreringskurvan
69. Kvantifieringsgränsen (LOQ) kan uttryckas på följande sätt:
Var:
s är standardavvikelsen för den analytiska signalen;
k är tangenten för lutningsvinkeln för kalibreringskurvan.
70. K-värdet beräknas från kalibreringskurvan för analyten. Uppskattning av s kan göras på flera sätt:
a) enligt standardavvikelsen för blindprovet. Storleken på den analytiska signalen för ett tillräckligt antal blankprover mäts och standardavvikelsen för deras värden beräknas;
b) enligt kalibreringskurvan. Den resulterande kalibreringskurvan, konstruerad för prover med ett analytinnehåll nära gränsen för kvantifiering, bör analyseras. Den återstående standardavvikelsen för regressionslinjen eller standardavvikelsen för skärningspunkten med ordinataaxeln (standardavvikelse för den fria termen för linjär regression) kan användas som standardavvikelse.
XXI. Datapresentation
71. Det är nödvändigt att ange kvantifieringsgränsen och metoden för dess bestämning.
72. Kvantifieringsgränsen måste därefter bekräftas genom att analysera ett tillräckligt antal prover som innehåller analyten vid eller nära gränsen för kvantifiering.
73. Andra tillvägagångssätt än de som anges ovan kan vara acceptabla.
XXII. Stabilitet (robusthet)
74. Studiet av stabilitet (robusthet) måste utföras på utvecklingsstadiet, forskningens omfattning beror på vilken analysteknik som övervägs. Det är nödvändigt att påvisa analysens tillförlitlighet med avsiktliga variationer i parametrarna (villkoren) för metoden.
75. Om mätresultaten beror på förändringar i användningsvillkoren för analysförfarandet, är det nödvändigt att strikt kontrollera efterlevnaden av sådana villkor eller föreskriva försiktighetsåtgärder under testet.
76. För att säkerställa att ett analytiskt förfarandes giltighet bibehålls under dess användning, bör en av konsekvenserna av robusthetsstudier vara upprättandet av en serie systemlämplighetsparametrar (t.ex. ett upplösningstest).
77. Vanliga varianter av parametrar är:
stabilitet hos lösningar som används i analytiska tekniker;
utvinningstid.
Variationsparametrarna för vätskekromatografi är:
förändring i pH i den mobila fasen;
förändring i sammansättningen av den mobila fasen;
olika högtalare (olika serier och leverantörer);
temperatur;
den mobila fasens hastighet (flödeshastighet).
Variationsparametrarna för gaskromatografi är:
olika högtalare (olika serier och leverantörer);
temperatur;
bärgasens hastighet.
XXIII. Systemets lämplighetsbedömning
78. Att bedöma systemets lämplighet är en integrerad del av många analystekniker. Dessa tester bygger på idén att den utrustning, elektronik, analytiska operationer och prover som analyseras utgör ett komplett system och måste utvärderas som sådant. Systemlämplighetskriterier måste fastställas för ett specifikt förfarande och beror på vilken typ av analysförfarande som valideras. Ytterligare information kan erhållas från unionens farmakopé eller från medlemsstaternas farmakopéer.
Elektronisk dokumenttext
utarbetad av Kodeks JSC och verifierad mot:
officiella webbplats
Eurasiska ekonomiska unionen
www.eaeunion.org, 2018-07-20
