24.11.202227.05.2017

], սակայն, հակաօքսիդանտների՝ որպես քիմիական միացությունների սահմանումը չի տալիս ուսումնասիրվող օբյեկտի պաշտպանիչ հատկությունների ամբողջական պատկերը. դրանք որոշվում են ոչ միայն որոշակի հակաօքսիդանտի քանակով, այլև դրանցից յուրաքանչյուրի ակտիվությամբ: Հակաօքսիդանտ ակտիվություն կամ հակաօքսիդանտ ակտիվություն՝ AOA, հակաօքսիդանտի ռեակցիայի արագության հաստատունն է ազատ ռադիկալով (kInH): Քիմիալյումինեսցենցիայի (CL) մեթոդը թույլ է տալիս որոշել ռադիկալների ընդհանուր քանակը, որոնք կապում են հակաօքսիդանտները նմուշի մեջ (ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորություն, TAU), և CL կինետիկայի մաթեմատիկական մոդելավորման մեթոդի կիրառման ժամանակ՝ նաև ռադիկալների ձևավորման և ռեակցիայի արագությունը։ հակաօքսիդանտներով, այսինքն՝ AOA [, ,]։

Ընդհանուր հակաօքսիդիչ հզորությունը որոշելու համար քիմլյումինեսցենցիայի մեթոդի ամենատարածված փոփոխությունը հիմնված է լյումինոլի օգտագործման վրա՝ որպես քիմլյումինեսցենտային ակտիվացնող [, , ,]: Նմուշը տեղադրվում է քիմիլյումինոմետրի կյուվետի մեջ՝ լյումինոլի, ջրածնի պերօքսիդի և միացության, որը կարող է ռադիկալներ առաջացնել ինքնաբուխ տարրալուծման (թերմոլիզի) արդյունքում, օրինակ՝ 2,2'-ազոբիս-(2-ամիդինոպրոպան) երկհիդրոքլորիդ (ABAP): ): ABAP → 2R. Մոլեկուլային թթվածնի առկայության դեպքում ալկիլ ռադիկալ R-ն առաջացնում է պերօքսիլ ռադիկալ ROO՝ R + O 2 → ROO: Այնուհետև պերօքսիլային ռադիկալը օքսիդացնում է քիմլյումինեսցենտային զոնդը՝ լյումինոլը (LH 2), և առաջանում է լյումինոլի ռադիկալը (LH)՝ ROO + LH 2 → ROOH + LH: LH-ից միջանկյալ նյութերի (լումինոլի հիդրոպերօքսիդ և լյումինոլ էնդոպերօքսիդ) առաջացման միջոցով էլեկտրոնային գրգռված վիճակում ձևավորվում է լյումինոլի օքսիդացման վերջնական արտադրանքի մոլեկուլը՝ ամինոֆտալաթթուն, որն արտանետում է ֆոտոն, և արդյունքում նկատվում է քիմլյումինեսցենտ։ . CL-ի ինտենսիվությունը համաչափ է ֆոտոնների արտադրության արագությանը, և այն, իր հերթին, համամասնական է համակարգում LH-ի ստացիոնար կոնցենտրացիայի հետ: Փոխազդելով ռադիկալների հետ՝ հակաօքսիդանտներն ընդհատում են վերափոխումների նկարագրված շղթան և կանխում ֆոտոնի առաջացումը։

Թերմոլիզին ենթակա միացությունները ռադիկալների միակ հնարավոր աղբյուրը չեն, երբ վերլուծում են նմուշի հակաօքսիդանտային հզորությունը՝ օգտագործելով քիմլյումինեսցենտ մեթոդը: Այլընտրանքներն են ծովաբողկ պերօքսիդազ–ջրածնի պերօքսիդ [, ], հեմին–ջրածնի պերօքսիդ, ցիտոքրոմ համակարգերը։ Հետ–կարդիոլիպին–ջրածնի պերօքսիդ և այլն։ Լյումինոլի պերօքսիդազներով օքսիդացման ռեակցիայի սխեման դիտարկված է Cormier et al-ի աշխատություններում։ .

CL կինետիկ կորերը այս համակարգերի համար արտացոլում են ռեակցիայի երկու փուլերը՝ CL ինտենսիվության բարձրացման փուլը և բարձրության աստիճանը կամ լյումինեսցենտության աստիճանական անկման փուլը, երբ CL ինտենսիվությունը կա՛մ հաստատուն է, կա՛մ դանդաղորեն նվազում է: Աշխատանքը նկարագրում է ընդհանուր հակաօքսիդիչ հզորությունը չափելու երկու մոտեցում, որոնք հաշվի են առնում կորերի այս հատկանիշը: TRAP (ընդհանուր ռեակտիվ հակաօքսիդանտ պոտենցիալ) մեթոդը հիմնված է CL-ի թաքնված շրջանի չափման վրա: τ և կարող են օգտագործվել հակաօքսիդանտներ որոշելու համար, ինչպիսիք են Trolox-ը կամ ասկորբինաթթուն. դրանք բնութագրվում են ռադիկալների հետ ռեակցիայի բարձր արագությամբ և այդ պատճառով կարող են կոչվել ուժեղ հակաօքսիդանտներ: Լատենտային շրջանում տեղի է ունենում դրանց ամբողջական օքսիդացում։ TAR (ընդհանուր հակաօքսիդանտ ռեակտիվություն) մեթոդը չափում է քիմիլյումինեսցենցիայի մարման աստիճանը քՔիմիլյումինեսցենտության կորի բարձրավանդակում կամ առավելագույնը. բանաձև, որտեղ I-ը քիմլյումինեսցենցիայի ինտենսիվությունն է առանց հակաօքսիդանտի, իսկ I 1-ը CL-ի ինտենսիվությունն է հակաօքսիդանտի առկայության դեպքում: Այս մեթոդը կիրառվում է, եթե համակարգը պարունակում է հիմնականում թույլ հակաօքսիդանտներ՝ ռադիկալների հետ փոխազդեցության ցածր արագության հաստատուններով՝ շատ ավելի ցածր՝ համեմատած լյումինոլի հաստատունի հետ:

Հակաօքսիդանտների ազդեցությունը բնութագրվում է ոչ միայն ցուցանիշներով τ Եվ ք. Ինչպես երևում է [,] աշխատանքներից, հակաօքսիդանտների ազդեցությունը, ինչպիսին է միզաթթուն, հեմին–H 2 O 2 – լյումինոլ համակարգում կամ տոկոֆերոլի, ռուտինի և կվերցետինի ազդեցությունը ցիտոքրոմային համակարգում։ Հետ- կարդիոլիպին - H 2 O 2 - լյումինոլ, որը բնութագրվում է CL-ի բարձրացման առավելագույն արագության փոփոխությամբ ( vmax) Ինչպես ցույց են տալիս կինետիկայի մաթեմատիկական մոդելավորման արդյունքները, այս հակաօքսիդանտների ռադիկալների հետ փոխազդեցության արագության հաստատունների արժեքները մոտ են լյումինոլի հաստատունի արժեքին, հետևաբար նման հակաօքսիդանտները կարելի է անվանել միջին ուժի հակաօքսիդանտներ:

Եթե ուսումնասիրվող նյութը, մասնավորապես բուսական հումքը, պարունակում է միայն մեկ տեսակի հակաօքսիդանտներ, ապա դրանց պարունակությունը կարող է բնութագրվել վերը թվարկված երեք ցուցանիշներից մեկով ( τ , քկամ vmax) Բայց բուսական նյութերը պարունակում են տարբեր հզորության հակաօքսիդանտների խառնուրդ: Այս խնդիրը լուծելու համար որոշ հեղինակներ [ , , , ] օգտագործել են քիմիլյումինեսցենցիայի լուսային գումարի փոփոխությունը որոշակի ժամանակի ΔS, որը հաշվարկվում է բանաձեւով, որտեղ ∆. S 0և ∆ Ս Ս- CL թեթեւ գումարներ տվյալ ժամանակի համար տհամապատասխանաբար հսկողության և փորձարկման նմուշներում: Ժամանակը պետք է բավարար լինի համակարգի բոլոր հակաօքսիդանտների օքսիդացման համար, այսինքն, որպեսզի փորձանմուշի CL կորը հասնի վերահսկիչ նմուշի CL կորի մակարդակին: Վերջինս ենթադրում է, որ հետազոտողները ոչ միայն պետք է գրանցեն փայլի լուսային գումարը, այլև բավական երկար ժամանակ գրանցեն CL կինետիկայի կորը, ինչը միշտ չէ, որ արվում է։

Քանի որ բոլոր չափված ցուցանիշները կախված են սարքից և չափման պայմաններից, ուսումնասիրվող համակարգում նյութի հակաօքսիդանտ ազդեցությունը սովորաբար համեմատվում է որպես ստանդարտ ընդունված հակաօքսիդանտի ազդեցության հետ, օրինակ՝ Trolox [,]:

Ծովաբողկի պերօքսիդազ-ջրածնի պերօքսիդ համակարգը օգտագործվել է բազմաթիվ հեղինակների կողմից բուսական նյութերի հակաօքսիդանտային ընդհանուր հզորությունը վերլուծելու համար: [ , ] աշխատանքներում CL-ի թաքնված շրջանը (TRAP մեթոդ) օգտագործվել է նմուշներում հակաօքսիդանտների քանակի գնահատման համար, իսկ [ , , ] աշխատանքներում՝ CL զարգացման կորի տակ գտնվող տարածքը։ Այնուամենայնիվ, թվարկված աշխատանքները հստակ հիմնավորում չեն տալիս OAU-ի գնահատման այս կամ այն պարամետրի ընտրությանը:

Հետազոտության նպատակն էր որոշել, թե ինչպես է հակաօքսիդանտների տարբեր տեսակների հարաբերակցությունը ազդում TOA-ի վրա և փոփոխել քիմլյումինեսցենցիայի մեթոդն այնպես, որ կարողանանք ավելի ճշգրիտ որոշել TOA-ն բույսերի նյութերում: Դա անելու համար մենք մեզ մի քանի խնդիր դրեցինք. Նախ՝ համեմատեք ուսումնասիրված օբյեկտների CL կինետիկան երեք տիպի (ուժեղ, միջին և թույլ) ստանդարտ հակաօքսիդանտների կինետիկայի հետ՝ հասկանալու համար, թե որ տեսակի հակաօքսիդանտներն են հիմնական ներդրումն ունենում ուսումնասիրվող օբյեկտների ՕԱԱ-ում: Երկրորդ, հաշվարկեք ուսումնասիրվող օբյեկտների OAE-ն՝ չափելով CL լույսի գումարի նվազումը այս օբյեկտների ազդեցության տակ՝ համեմատած հակաօքսիդանտի ազդեցության հետ, որն ամենամեծ ներդրումն է ապահովում OAE-ում:

ՆՅՈՒԹԵՐ ԵՒ ՄԵԹՈԴՆԵՐ

Հետազոտության առարկաներն էին «Կրասնոգորսկլեքսրեդստվա» ԲԲԸ-ի կողմից արտադրված ալոճենու, վարդի և վարդի ազդրերի արդյունաբերական նմուշները, ինչպես նաև ազնվամորու պտուղները, որոնք հեղինակները հավաքել էին Մոսկվայի մարզում բնական աճի պայմաններում և չորացրած 60-80 ° ջերմաստիճանում: C, քանի դեռ նրանք դադարել են արձակել հյութ և դեֆորմացիա սեղմելիս:

Քիմիլոյումինեսցենտային մեթոդով հակաօքսիդանտային հզորության վերլուծության ռեակտիվներն էին. KH 2 PO 4, 20 մՄ բուֆերային լուծույթ (pH 7.4); պերօքսիդազ ծովաբողկի արմատներից (ակտիվություն 112 միավոր/մգ, M = 44,173.9), 1 մՄ ջրային լուծույթ; լյումինոլ (5-ամինո-1,2,3,4-տետրահիդրո-1,4-ֆտալազինեդիոն, 3-ամինոֆտալաթթվի հիդրազիդ, M=177,11), 1 մՄ ջրային լուծույթ; ջրածնի պերօքսիդ (H 2 O 2, M = 34.01), 1 մՄ ջրային լուծույթ; հակաօքսիդանտների լուծույթներ (ասկորբինաթթու, կվերցետին, տոկոֆերոլ): Բոլոր ռեակտիվները արտադրվում են Sigma Aldrich (ԱՄՆ) կողմից:

Ալոճենի, լեռնային մոխրի և վայրի վարդի մրգերի թուրմերը և ազնվամորու մրգերի թուրմը պատրաստվել են ԽՍՀՄ Պետական դեղագրքի մեթոդաբանության համաձայն, որը ներկայացված է «Թուրմեր և եփուկներ» ընդհանուր դեղագրքի հոդվածում:

Ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորությունը որոշվել է քիմլյումինեսցենտությունը գրանցելով Lum-100 քիմիլյումինոմետրի վրա (DISoft, Ռուսաստան) PowerGraph 3.3 ծրագրաշարի միջոցով: Բուսական հումքում TAU-ն որոշելու համար 40 մկլ լյումինոլ 1 մՄ կոնցենտրացիայով, 40 մկլ ծովաբողկի պերօքսիդազա 0,1 մկմ կոնցենտրացիայով, 10-ից 50 մկլ թուրմ կամ ինֆուզիոն (կախված կոնցենտրացիայից) և ֆոսֆատային բուֆեր։ չափով, որն անհրաժեշտ է նմուշի ընդհանուր ծավալը 1 մլ հասցնելու համար: Կյուվետը տեղադրվել է սարքի մեջ և CL-ն ձայնագրվել է՝ դիտարկելով ֆոնային ազդանշանը։ Ֆոնային ազդանշանի գրանցումից 48 վրկ հետո 100 μl H2O2 1 մՄ կոնցենտրացիայով ավելացվել է կյուվետին և CL-ի ձայնագրումը շարունակվել է 10 րոպե: Պատրաստվել է չորս նմուշ՝ յուրաքանչյուր բուսական օբյեկտի տարբեր կոնցենտրացիաներով: CL գրանցվել է նաև ասկորբինաթթվի, կվերցետինի և տոկոֆերոլի լուծույթների համար հինգ տարբեր կոնցենտրացիաներով յուրաքանչյուր հակաօքսիդանտի համար: Այնուհետև, թուրմերի և թուրմերի նմուշների OAU-ն վերահաշվարկվեց մինչև կվերցետին:

Լյումինոլի, ծովաբողկի պերօքսիդազի և ջրածնի պերօքսիդի կոնցենտրացիաները ընտրվել են այնպես, որ որոշվի դեղաբույսերի նյութերի ջրային էքստրակտների հակաօքսիդանտ հզորությունը ընդունելի ժամանակում (ոչ ավելի, քան 10 րոպե): Այս ընթացքում քիմլյումինեսցենցիայի կորերը հակաօքսիդանտների ասկորբատի և ֆլավոնոիդ կվերցետինի (բուսական նյութերի հիմնական հակաօքսիդանտները) համար հասել են բարձրության, ինչը ցույց է տալիս համակարգում հակաօքսիդանտների ամբողջական ոչնչացումը: Ուսումնասիրված նմուշների նոսրացումները և ստանդարտ հակաօքսիդանտների լուծույթների կոնցենտրացիաները (նշված են նկարների լեգենդներում) ընտրվել են այնպես, որ CL-ի բոլոր կինետիկ կորերը չափվել են սարքի նույն զգայունությամբ:

Հակաօքսիդանտային հզորությունը հաշվարկվել է տարածքի փոփոխությունից (∆ Ս) քիմիլյումինեսցենցիայի կինետիկ կորի տակ (թեթև գումար) հակաօքսիդանտ պարունակող նյութի ավելացմամբ։ Այդ նպատակով մենք հաշվարկել ենք S 0հակաօքսիդանտ չունեցող համակարգի համար և դրանից հանել է տարածքը Ս Ս, բնութագրելով այն համակարգը, որին ավելացվել է հակաօքսիդանտը։ Արժեք ∆ Սկախված է քիմիլյումինոմետրի զգայունությունից և չափման պայմաններից: Հարաբերակցություն ∆ Ս/Կ Վ(Որտեղ Գ- ուսումնասիրվող կենսաբանական նյութի կոնցենտրացիան կյուվետում, գ/լ, և Վ- կյուվետի ծավալը, լ) արտահայտում է ուսումնասիրվող նյութի, այսինքն՝ բուսական հումքի 1 գ հակաօքսիդանտ հզորությունը։

Նույն կերպ են հաշվարկվել Δ հակաօքսիդանտ հզորությունը Ս Աստանդարտ հակաօքսիդանտի լուծույթ, օրինակ՝ կվերցետին, որը տեղադրված է ռեակցիայի խառնուրդի նույն ծավալում։ Հարաբերակցություն ∆ S A /C A V(Որտեղ Գ Ա- հակաօքսիդանտի քաշային կոնցենտրացիան կյուվետում, գ/լ) արտահայտում է 1 գ հակաօքսիդանտի հակաօքսիդանտ հզորությունը:

Ստանդարտ հակաօքսիդանտներից յուրաքանչյուրի համար մի քանի կոնցենտրացիաների լուծույթներից ստացված ազդանշանը գրանցվեց՝ համոզվելու համար, որ հաշվարկները գծային հարաբերությունների մեջ են, և ստացված արդյունքները վերարտադրելի են: Իրոք, ստացվել է գծային կախվածություն (∆ Ս Ա = k A C A) ազդանշան այն կոնցենտրացիայից, որից հաշվարկվել է ստոյխիոմետրիկ գործակիցը կ Ա. Ֆիշերի չափանիշի համաձայն, ստանդարտ հակաօքսիդանտների համար ստացված արժեքները կ Ավիճակագրորեն նշանակալի՝ 0,975 հավանականությամբ։ Այնուհետև չորս կոնցենտրացիաներից ստացված ազդանշանը գրանցվեց բույսերի չորս նմուշներից յուրաքանչյուրի համար, և բոլոր նմուշների համար ստացվեց ազդանշանի գծային կախվածություն կոնցենտրացիայից (∆. Ս = k·C), որից հաշվարկվել է ստոյխիոմետրիկ գործակիցը կ. 0,975 հավանականությամբ (Ֆիշերի թեստ) բույսերի նմուշների համար ստացված k արժեքները վիճակագրորեն նշանակալի են: Բուսական նյութի ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորությունը ստանդարտ հակաօքսիդանտի զանգվածի առումով (մգ%) հայտնաբերվել է բանաձևի միջոցով:

Արժեքները ներկայացվել են որպես միջին թվաբանական ± ստանդարտ շեղում (M ± δ) p

ՀԵՏԱԶՈՏՈՒԹՅԱՆ ԱՐԴՅՈՒՆՔՆԵՐԸ

Քիմիալյումինեսցենցիայի կինետիկայի ուսումնասիրություն նատրիումի ասկորբատի առկայության դեպքում (նկ. 1. Նատրիումի ասկորբատի ազդեցությունը քիմիլյումինեսցենցիայի կինետիկայի վրա" data-note="Համակարգի բաղադրիչների կոնցենտրացիաները՝ լյումինոլ - 40 μM, ծովաբողկի պերօքսիդազ - 4 նՄ, ջրածնի պերօքսիդ - 100 μM: Կորեր. 1 - հսկիչ նմուշ; 2 - 0,05 μM; 3 - 0,10 μM; 4 - 0,15 μM; 5 - 0,2 μM; 6 - 0,25 μM նատրիումի ասկորբատ:">Նկար 1) ցույց է տվել, որ այս հակաօքսիդանտը բնութագրվում է թաքնված շրջանով, երբ CL-ը գրեթե ամբողջությամբ ճնշված է: Դրա տևողությունը համաչափ է համակարգում հակաօքսիդանտի քանակին: Միևնույն ժամանակ, ոչ CL կորերի թեքությունը, ոչ էլ CL-ի ինտենսիվությունը բարձրավանդակի վրա չեն փոխվում: Սա բացատրվում է: այն փաստով, որ ասկորբինաթթուն ուժեղ հակաօքսիդանտ է, որը ընդհատում է համակարգում ձևավորված բոլոր ռադիկալները, ներառյալ լյումինոլի ռադիկալները, և CL-ն չի զարգանում մինչև ամբողջ ասկորբատը օքսիդացված լինի:

Այլ հետազոտողներ նույնպես ցույց են տվել, որ քիմիական անալիզի արդյունքները և քիմլյումինեսցենտային մեթոդով որոշված TAU արժեքը հաճախ չեն համընկնում։ Աշխատանքում պերօքսիդազ-լյումինոլ-ջրածնի պերօքսիդ համակարգում որոշված հակաօքսիդանտային ընդհանուր հզորությունը փոխկապակցված է տրիտերպենային միացությունների պարունակության հետ: Այնուամենայնիվ, նույն հեղինակների աշխատության մեջ, որտեղ ուսումնասիրության առարկան մեկ այլ բույս էր, նրանք չեն նկատել OAE-ի հարաբերակցությունը որևէ խմբի նյութերի, ներառյալ ֆլավոնոիդների պարունակության հետ:

Նման անհամապատասխանությունները կապված են առնվազն երեք գործոնի հետ. Առաջին հերթին կարևոր է հակաօքսիդանտների ակտիվությունը, այսինքն՝ դրանց փոխազդեցության արագությունը ռադիկալների հետ, որը տարբեր է բույսերի նմուշում ընդգրկված տարբեր հակաօքսիդանտների համար: Ըստ Իզմայիլովի՝ մեքսիդոլի, տոկոֆերոլի և կվերցետինի համար համապատասխան ռեակցիաների արագության հաստատունները փոխկապակցված են 0,04: 2:60: Երկրորդ, յուրաքանչյուր հակաօքսիդանտ մոլեկուլ, մտնելով քիմիական ռեակցիա, կարող է անջատել տարբեր քանակությամբ ռադիկալներ: Աշխատանքի համաձայն՝ քվերցետինը, միզաթթուները և ասկորբինաթթուները արձագանքել են հակաօքսիդանտի մեկ մոլեկուլի համար համապատասխանաբար 3,6 ± 0,1, 1,4 ± 0,1 և 0,5 ± 0,2 ռադիկալներ (օգտագործվել է հեմին–H2O2 համակարգը՝ լյումինոլ)։ Երրորդ, հետազոտության արդյունքների վրա կարող է ազդել բույսի նմուշներում պերօքսիդազի ակտիվության առկայությունը, ինչպես աշխատանքի մեջ, ինչպես նաև նմուշներում կալցիումի առկայությունը, որը, ինչպես ցույց է տրված աշխատանքում, կարող է մեծացնել: ծովաբողկի պերօքսիդազի ակտիվությունը որոշակի պայմաններում. Սա սովորաբար առաջացնում է ավելի բարձր CL ինտենսիվություն սարահարթում, քան կառավարման կորերի վրա, ինչը մենք, այնուամենայնիվ, չենք նկատել:

Առաջին գործոնը կտրուկ սահմանափակում է այնպիսի պարամետրի օգտագործումը, ինչպիսին է լույսի գումարի փոփոխությունը, քանի որ քիմլյումինեսցենտության չափման ժամանակը պետք է լինի ավելի երկար, քան փորձարկման նմուշում բոլոր հակաօքսիդանտների սպառման ժամանակը: Այս պահի առաջացման մասին կարելի է դատել միայն քիմլյումինեսցենցիայի կինետիկան չափելով։ Բացի այդ, թույլ հակաօքսիդանտների ներդրումը TAU-ում կտրուկ թերագնահատված է, քանի որ դրանց ամբողջական օքսիդացման ժամանակը շատ անգամ ավելի երկար է, քան ընդունելի չափման տևողությունը (10–20 րոպե):

Առավել կարևոր է հակաօքսիդանտի ստոյխիոմետրիկ գործակիցը։ Ռադիկալների թիվը nընդհատված դրա կողմից հավասար է , որտեղ ρ ստոյխիոմետրիկ գործակիցն է, և ∆ մ- չափման ընթացքում հակաօքսիդանտի կոնցենտրացիայի փոփոխություն, մեր դեպքում՝ փորձանմուշում փորձարկվող նյութի սկզբնական կոնցենտրացիան:

Լյումինեսցենցիայի լույսի գումարի տարբերությունը հակաօքսիդանտի բացակայության և դրա առկայության դեպքում համաչափ է n. Կալանված ռադիկալների ընդհանուր թիվը , որտեղ ρ iկոնկրետ հակաօքսիդանտի ստոյխիոմետրիկ գործակիցն է, և m i- չափման ընթացքում դրա կոնցենտրացիան. Ընդհատված ռադիկալների ընդհանուր թիվը ակնհայտորեն հավասար չէ հակաօքսիդանտների ընդհանուր քանակին, քանի որ գործակիցները. ρ iոչ միայն հավասար չեն միասնությանը, այլև էապես տարբերվում են տարբեր հակաօքսիդանտների համար:

Արժեք nհամեմատական է հակաօքսիդանտ պարունակող նմուշի և հակաօքսիդանտ չպարունակող հսկիչ նմուշի միջև որոշակի ժամանակի ընթացքում չափված լուսային գումարների տարբերությանը. Ս = k n, Որտեղ կ- գործակից, հաստատուն նույն չափման պայմաններում:

Հոդվածում քննարկված մեթոդը թույլ է տալիս որոշել հակաօքսիդանտների ընդհանուր հզորությունը, մինչդեռ քիմիական վերլուծությունը թույլ է տալիս որոշել արտադրանքի մեջ հակաօքսիդանտների ընդհանուր պարունակությունը: Հետևաբար, քիմիլյումինեսցենցիայի մեթոդը կարծես ավելի տեղեկատվական է, քան քիմիական անալիզները:

Պայմանները, որոնք մենք ընտրել ենք բույսերի հումքի ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորությունը գնահատելու համար՝ գրանցելով քիմիլյումինեսցենցիայի կինետիկան մի համակարգում, որը բաղկացած է ծովաբողկի պերօքսիդազից, ջրածնի պերօքսիդից և լյումինոլից (բաղադրիչի կոնցենտրացիաները՝ համապատասխանաբար 4 նՄ, 100 մՄ և 40 մՄ, 20 մՄ ֆոսֆատ։ բուֆեր, pH 7.4), ապահովել է ուժեղ հակաօքսիդանտների (ասկորբինաթթու) և միջին հզորության հակաօքսիդանտների (կվերցետին) օքսիդացում 10 րոպեում։ Այս չափման տևողությունը հարմար է և ապահովում է չափման պահանջվող որակը:

Քիմիլոյումինեսցենցիայի կինետիկայի վերլուծությունը ցույց է տվել, որ ուսումնասիրված առարկաներում (շագանակի մրգերի թուրմեր, վարդի ազդրեր, ալոճենի և ազնվամորու մրգերի թուրմ) հիմնական հակաօքսիդանտներն են միջին ուժի հակաօքսիդանտները՝ ներառյալ ֆլավոնոիդները, և թույլ ուժի (տոկոֆերոլ և այլն): Ելնելով քիմիլյումինեսցենցիայի լուսային գումարի նվազման հիման վրա՝ հաշվարկվել է ուսումնասիրված օբյեկտների հակաօքսիդանտային ընդհանուր հզորությունը: Ստացված TAU արժեքների համեմատությունը քիմիական վերլուծության արդյունքների հետ ցույց է տվել, որ տարբեր հարաբերակցությամբ նույն քանակությամբ հակաօքսիդանտներ պարունակող արտադրանքները կարող են տարբերվել օրգանիզմն ազատ ռադիկալների վնասակար ազդեցությունից արդյունավետ պաշտպանելու ունակությամբ: Նկարագրված տեխնիկան խոստումնալից է բույսերի օբյեկտների ուսումնասիրության համար, որոնք պարունակում են տարբեր հակաօքսիդանտների խառնուրդ: Միևնույն ժամանակ, այն բնութագրվում է հետազոտության պարզությամբ և ցածր գնով: Քիմիալյումինեսցենցիայի կինետիկայի չափման համադրությունը ռեակցիաների մաթեմատիկական մոդելավորման հետ ոչ միայն կավտոմատացնի TAU-ի որոշման գործընթացը, այլև կորոշի հակաօքսիդանտների առանձին խմբերի ներդրումը ցուցիչում:

Հիմնաբառեր

ազատ ռադիկալ/հակաօքսիդանտ/ հակաօքսիդիչ ակտիվություն / ընդհանուր հակաօքսիդիչ հզորություն / քիմլյումինեսցենտություն/ լյումինոլ / ազատ ռադիկալ / հակաօքսիդիչ / հակաօքսիդիչ ակտիվություն / ընդհանուր հակաօքսիդիչ հզորություն / քիմիլյումինեսցենտություն / լյումինոլ

անոտացիա Գիտական հոդված քիմիական գիտությունների վերաբերյալ, գիտական աշխատության հեղինակ՝ Գեորգի Կոնստանտինովիչ Վլադիմիրով, Է.Վ.Սերգունովա, Դ.Յու.Իզմայլով, Յու.Ա.Վլադիմիրով

Դեղորայքային բուսական նյութերը մարդու օրգանիզմի համար հակաօքսիդանտների աղբյուրներից են։ Բուսական օբյեկտներում հակաօքսիդանտների պարունակության որոշման մեթոդներից տարածված է քիմլյումինեսցենտային անալիզի մեթոդը։ Այս աշխատանքում այն օգտագործվել է գնահատելու համար ընդհանուր հակաօքսիդիչ հզորություն(OAE) թուրմերի, վարդի կոնքերի և ալոճենի եփուկներ և ազնվամորու մրգերի թուրմ: Կինետիկան արձանագրվել է փորձի ժամանակ քիմլյումինեսցենտությունմի համակարգում, որը բաղկացած է ծովաբողկի պերօքսիդազից, ջրածնի պերօքսիդից և լյումինոլից։ Համակարգի բաղադրիչների կոնցենտրացիաները և ծավալը նմուշում ընտրվել են այնպես, որ չափման ժամանակ (10 րոպե) ուժեղ հակաօքսիդանտները (ասկորբինաթթու) և չափավոր հակաօքսիդանտները (կվերցետին) ամբողջությամբ օքսիդացվեն: Առաջարկվում և հիմնավորված է OAE-ի հաշվարկման մեթոդ՝ հիմնված թեթև գումարի փոփոխության վրա քիմլյումինեսցենտությունբույսերի նմուշների առկայության դեպքում. Կինետիկ վերլուծություն քիմլյումինեսցենտությունցույց է տվել, որ ուսումնասիրված օբյեկտներում գերակշռում են միջին հզորության հակաօքսիդանտները, այդ թվում՝ ֆլավոնոիդները, և թույլ հակաօքսիդանտները (տոկոֆերոլ և այլն): Ուսումնասիրված օբյեկտների համար հաշվարկված OAE արժեքների համեմատությունը և դրանց քիմիական վերլուծության տվյալները ցույց են տվել, որ նույն քանակությամբ հակաօքսիդանտներ պարունակող արտադրանքները տարբեր հարաբերակցությամբ ըստ տեսակի կարող են տարբերվել մարմինը ազատ ռադիկալների վնասակար ազդեցությունից պաշտպանելու ունակությամբ: . Նկարագրված տեխնիկան խոստումնալից է տարբեր տեսակի հակաօքսիդանտների խառնուրդ պարունակող բուսական առարկաների ուսումնասիրության համար:

Առնչվող թեմաներ գիտական աշխատություններ քիմիական գիտություններում, գիտական աշխատության հեղինակ՝ Գեորգի Կոնստանտինովիչ Վլադիմիրով, Է.Վ.Սերգունովա, Դ.Յու.Իզմայլով, Յու.Ա.Վլադիմիրով

2016 / Գեորգի Վլադիմիրով, Սերգունովա Է.Վ., Իզմայլով Դ.Յու., Վլադիմիրով Յու.Ա.
Հակաօքսիդանտների որոշում ակտիվացված քիմիլյումինեսցենտությամբ՝ օգտագործելով 2,2"-ազո-բիս(2-ամիդինոպրոպան)
2012 / Alekseev A.V., Proskurnina E.V., Vladimirov Yu.A.
Դիհիդրոկերցետինի և ռուտինի հակաօքսիդանտ ազդեցությունը պերօքսիդազային ռեակցիաներում, որոնք կատալիզացվում են ցիտոքրոմ c-ով
2008 / Demin E.M., Proskurnina E.V., Vladimirov Yu.A.
Կենսաբանական սուբստրատների օքսիդատիվ և հակաօքսիդանտ հզորության գնահատում ֆենտոնի ռեակցիայի արդյունքում առաջացած քիմլյումինեսցենտության միջոցով
2016 / Պիսկարև Իգոր Միխայլովիչ, Ի.Պ. Իվանովան
Շիճուկի լիպոպրոտեիններում լիպոհիդրոպերօքսիդների պարունակության որոշում միկրոպերօքսիդազա-լյումինոլ համակարգի միջոցով
2011 / Տեսելկին Յուրի Օլեգովիչ, Բաբենկովա Իրինա Վլադիմիրովնա
Հակաօքսիդանտ հետազոտության մեթոդներ
2004 / Khasanov V.V., Ryzhova G.L., Maltseva E.V.
Տուվայի էթնոբժշկության մեջ օգտագործվող բույսերի հակաօքսիդիչ ակտիվությունը
2012 / Չեխանի Ն.Ռ., Տեսելկին Յու.Օ., Պավլովա Լ.Ա., Կոզին Ս.Վ., Լյուբիցկի Օ.Բ.
Ֆոսպրենիլի հակաօքսիդանտ հատկությունների ուսումնասիրություն տարբեր կենսաբանական փորձարկման համակարգերում
2017 / A. V. Sanin, A. N. Narovlyansky, A. V. Pronin, T. N. Kozhevnikova, V. Yu. Sanina, A. D. Agafonova
Պոլիքլորացված բիֆենիլների տարբեր չափաբաժինների ազդեցությունը ամբողջական արյան ինքնաբուխ և իմունոգոլոբուլինից առաջացած լյումինոլից կախված քիմլյումինեսցենտության վիճակի վրա
2016 / Գաբդուլխակովա Ի.Ռ., Կայումովա Ա.Ֆ., Սամոխոդովա Օ.Վ.
Էական զարկերակային հիպերտոնիայով երեխաների մոտ հակաօքսիդանտային պաշտպանության լիպիդային պերօքսիդացման համակարգի գնահատումը սպեկտրոֆոտոմետրիայի և քիմլյումինեսցենցիայի մեթոդներով
2014 / Նատյագանովա Լարիսա Վիկտորովնա, Գավրիլովա Օքսանա Ալեքսանդրովնա, Կոլեսնիկովա Լարիսա Ռոմանովնա

Քիմիալյումինեսցենտային ընդհանուր հակաօքսիդանտային հզորության որոշում բուժիչ բույսերում

Դեղորայքային բուսանյութը մարդու օրգանիզմի համար հակաօքսիդանտների աղբյուրներից մեկն է։ Քիմիալյումինեսցենտային անալիզը բույսերի նյութերում հակաօքսիդանտների պարունակության որոշման ընդհանուր մեթոդներից մեկն է: Մեր աշխատանքում քիմիլյումինեսցենտային անալիզն օգտագործվել է լեռնային մոխրի, վարդի և ալոճենի մրգային թուրմերի, ինչպես նաև ազնվամորու մրգի թուրմերի ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորությունը (TAC) որոշելու համար: Փորձերը հաստատել են ծովաբողկի պերօքսիդազից, ջրածնի պերօքսիդից և լյումինոլից բաղկացած համակարգի քիմիլյումինեսցենցիայի կինետիկան: Համակարգի բաղադրիչների կոնցենտրացիաները և ծավալներն ընտրվել են այնպես, որ չափումների ընթացքում (10 րոպե) ուժեղ հակաօքսիդանտները (ասկորբինաթթու) և միջին ուժի հակաօքսիդանտները (կվերցետին) ամբողջությամբ օքսիդացել են: Առաջարկվել և հիմնավորվել է TAC-ի հաշվարկման մեթոդ, որը հիմնված է բույսերի նմուշների առկայության դեպքում քիմլյումինեսցենցիայի լուսային գումարի փոփոխության վրա: Քիմիալյումինեսցենցիայի կինետիկայի վերլուծությունը ցույց է տվել, որ ուսումնասիրված առարկաներում գերակշռում են միջին ուժի հակաօքսիդանտները, այդ թվում՝ ֆլավոնոիդները և թույլ հակաօքսիդանտները (տոկոֆերոլ և այլն): Հետազոտվող օբյեկտների համար հաշվարկված TAC արժեքների համեմատությունը և դրանց քիմիական վերլուծության տվյալները ցույց են տվել, որ նույն քանակությամբ հակաօքսիդանտներ պարունակող արտադրանքները հակաօքսիդանտների տարբեր հարաբերակցությամբ ըստ տեսակների կարող են տարբերվել մարմինը ազատ ռադիկալների վնասակար ազդեցությունից պաշտպանելու ունակությամբ: . Նկարագրված տեխնիկան խոստումնալից է տարբեր տեսակի հակաօքսիդանտների խառնուրդ պարունակող բույսերի օբյեկտների ուսումնասիրության համար:

Գիտական աշխատանքի տեքստ «Դեղաբույսերի նյութերում հակաօքսիդանտային ընդհանուր հզորության որոշման քիմիական լյումինեսցենտ մեթոդ» թեմայով

քիմիլյումինեսցենտ մեթոդ՝ բուժիչ բույսերում հակաօքսիդանտների ընդհանուր հզորության որոշման համար

G. K. Vladimirov1^, E. V. Sergunova2, D. Yu. Izmailov1, Yu. A. Vladimirov1

1 Բժշկական կենսաֆիզիկայի ամբիոն, Ֆունդամենտալ բժշկության ֆակուլտետ, Մ.Վ.Լոմոնոսովի անվան Մոսկվայի պետական համալսարան, Մոսկվա

2 Դեղագիտության ֆակուլտետի Ֆարմակոգնոզիայի ամբիոն,

Ի.Մ.Սեչենովի անվան Մոսկվայի առաջին պետական բժշկական համալսարան, Մոսկվա

Դեղորայքային բուսական նյութերը մարդու օրգանիզմի համար հակաօքսիդանտների աղբյուրներից են։ Բուսական օբյեկտներում հակաօքսիդանտների պարունակության որոշման մեթոդներից տարածված է քիմլյումինեսցենտային անալիզի մեթոդը։ Այս աշխատանքում այն օգտագործվել է թուրմերի, մասուրի և ալոճենի մրգերի թուրմերի ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորությունը (TAC) և ազնվամորու մրգերի թուրմը գնահատելու համար: Փորձի ժամանակ քիմլյումինեսցենցիայի կինետիկան արձանագրվել է ծովաբողկի պերօքսիդազից, ջրածնի պերօքսիդից և լյումինոլից բաղկացած համակարգում: Համակարգի բաղադրիչների կոնցենտրացիաները և ծավալը նմուշում ընտրվել են այնպես, որ չափման ժամանակ (10 րոպե) ուժեղ հակաօքսիդանտները (ասկորբինաթթու) և չափավոր հակաօքսիդանտները (կվերցետին) ամբողջությամբ օքսիդացվեն: Առաջարկվել և հիմնավորվել է OAE-ի հաշվարկման մեթոդ, որը հիմնված է բույսերի նմուշների առկայության դեպքում քիմիլյումինեսցենցիայի լույսի գումարի փոփոխության վրա: Քիմիալյումինեսցենցիայի կինետիկայի վերլուծությունը ցույց է տվել, որ ուսումնասիրված օբյեկտներում գերակշռում են միջին հզորության հակաօքսիդանտները, այդ թվում՝ ֆլավոնոիդները, և թույլ հակաօքսիդանտները (տոկոֆերոլ և այլն): Ուսումնասիրված օբյեկտների համար հաշվարկված OAE արժեքների համեմատությունը և դրանց քիմիական վերլուծության տվյալները ցույց են տվել, որ նույն քանակությամբ հակաօքսիդանտներ պարունակող արտադրանքները տարբեր հարաբերակցությամբ ըստ տեսակի կարող են տարբերվել մարմինը ազատ ռադիկալների վնասակար ազդեցությունից պաշտպանելու ունակությամբ: . Նկարագրված տեխնիկան խոստումնալից է տարբեր տեսակի հակաօքսիդանտների խառնուրդ պարունակող բուսական առարկաների ուսումնասիրության համար:

Բանալի բառեր՝ ազատ ռադիկալ, հակաօքսիդանտ, հակաօքսիդանտ ակտիվություն, ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորություն, քիմլյումինեսցենտություն, լյումինոլ

Ֆինանսավորում. աշխատանքին աջակցել է Ռուսաստանի գիտական հիմնադրամը, դրամաշնորհ թիվ 14-15-00375:

Ex3 Նամակագրության համար՝ Գեորգի Կոնստանտինովիչ Վլադիմիրով

119192, Մոսկվա, Լոմոնոսովսկի պր-տ, 31, շենք 5; [էլփոստը պաշտպանված է]

Հոդվածը ստացվել է՝ 10.03.2016 Հոդվածն ընդունված է հրապարակման՝ 18.03.2016թ.

քիմիլյումինեսցենտային ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորության որոշում դեղաբույսերի նյութում

1 Բժշկական կենսաֆիզիկայի ամբիոն, հիմնարար բժշկության ֆակուլտետ, Լոմոնոսովի անվան Մոսկվայի պետական համալսարան, Մոսկվա, Ռուսաստան

2 Դեղագիտության ֆակուլտետի Ֆարմակոգնոզիայի ամբիոն,

Սեչենովի անվան Մոսկվայի առաջին պետական բժշկական համալսարան, Մոսկվա, Ռուսաստան

Ֆինանսավորում. այս աշխատանքը աջակցվել է Ռուսաստանի գիտական հիմնադրամի կողմից, դրամաշնորհ թիվ. 14-15-00375։

Երախտագիտություն. հեղինակները շնորհակալություն են հայտնում Անդրեյ Ալեքսեևին Լոմոնոսովի անվան Մոսկվայի պետական համալսարանից փորձի անցկացման գործում ցուցաբերած աջակցության համար: Նամակագրությունը պետք է հասցեագրվի՝ Գեորգի Վլադիմիրով

Լոմոնոսովսկի պողոտա, դ. 31, կ. 5, Մոսկվա, Ռուսաստան, 119192 թ.; ur [էլփոստը պաշտպանված է]Ստացված՝ 10.03.2016 Ընդունված՝ 18.03.2016թ.

Օրգանիզմում առաջացած ազատ ռադիկալները խաթարում են բջջային թաղանթների կառուցվածքը, ինչն էլ իր հերթին հանգեցնում է տարբեր պաթոլոգիական վիճակների զարգացման։ Ռադիկալների կործանարար օքսիդատիվ ազդեցությունը կանխում է օրգանիզմի հակաօքսիդանտ պաշտպանական համակարգը, որում կարևոր դեր են խաղում ցածր մոլեկուլային քաշի միացությունները՝ ռադիկալների միջատները (թակարդները): Հակաօքսիդանտների աղբյուրներից են բուժիչ բույսերի նյութերը, ինչպես նաև դրանց վրա հիմնված դեղամիջոցները, որոնց հակաօքսիդանտային ներուժի ուսումնասիրությունն օգնում է բարձրացնել դրանց կանխարգելիչ և բուժիչ ազդեցությունը։

Աշխատանքներում քննարկվում են հակաօքսիդանտների որոշման հիմնական մեթոդները, սակայն հակաօքսիդանտների սահմանումը որպես քիմիական միացություններ չի տալիս ուսումնասիրվող օբյեկտի պաշտպանիչ հատկությունների ամբողջական պատկերը. դրանք որոշվում են ոչ միայն որոշակի հակաօքսիդանտի քանակով, այլեւ նրանցից յուրաքանչյուրի գործունեությամբ։ Հակաօքսիդանտ ակտիվություն կամ հակաօքսիդանտ ակտիվություն՝ AOA, հակաօքսիդանտի ռեակցիայի արագության հաստատունն է ազատ ռադիկալով (kInH): Քիմիալյումինեսցենցիայի (CL) մեթոդը հնարավորություն է տալիս որոշել ռադիկալների ընդհանուր քանակը, որոնք կապում են հակաօքսիդանտները նմուշի մեջ (ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորություն, TCA), և CL կինետիկայի մաթեմատիկական մոդելավորման մեթոդի կիրառման դեպքում՝ նաև առաջացման և ռեակցիայի արագությունը։ ռադիկալներ հակաօքսիդանտներով, այսինքն՝ AOA:

Ընդհանուր հակաօքսիդիչ հզորությունը որոշելու համար քիմլյումինեսցենցիայի մեթոդի ամենատարածված փոփոխությունը հիմնված է լյումինոլի օգտագործման վրա՝ որպես քիմլյումինեսցենտային ակտիվացնող: Նմուշ՝ լյումինոլի, ջրածնի պերօքսիդի և միացության ավելացումով, որը կարող է ինքնաբուխ տարրալուծման (թերմոլիզի) արդյունքում ռադիկալներ առաջացնել, օրինակ՝ 2,2»-ազոբիս-(2-ամիդինոպրոպան) դիհիդրոքլորիդ (ABAP).

Մոլեկուլային թթվածնի առկայության դեպքում ալկիլ ռադիկալը R^ կազմում է պերօքսիլ ռադիկալ ROO^:

ROO^ + LH2 ^ ROOH + LHv LH-ից միջանկյալ նյութերի առաջացման միջոցով (լյումինոլ հիդրոպերօքսիդ և լյումինոլ էնդոպերօքսիդ) էլեկտրոնային գրգռված վիճակում ձևավորվում է լյումինոլի օքսիդացման վերջնական արտադրանքի մոլեկուլը, որը արձակում է ֆոտոն։ , և արդյունքում նկատվում է քիմլյումինեսցենտություն։ CL-ի ինտենսիվությունը համաչափ է ֆոտոնների արտադրության արագությանը, և այն, իր հերթին, համամասնական է համակարգում LH-ի ստացիոնար կոնցենտրացիայի հետ: Փոխազդելով ռադիկալների հետ՝ հակաօքսիդանտներն ընդհատում են վերափոխումների նկարագրված շղթան և կանխում ֆոտոնի առաջացումը։

Թերմոլիզին ենթակա միացությունները ռադիկալների միակ հնարավոր աղբյուրը չեն, երբ վերլուծում են նմուշի հակաօքսիդանտային հզորությունը՝ օգտագործելով քիմլյումինեսցենտ մեթոդը: Այլընտրանքներն են ծովաբողկի պերօքսիդազ-ջրածնի պերօքսիդ, հեմին-ջրածնի պերօքսիդ, ցիտոքրոմ c-կարդիոլիպին-ջրածնի պերօքսիդ և այլն: Լյումինոլի պերօքսիդազներով օքսիդացման ռեակցիայի սխեման քննարկված է Cormier et al-ի աշխատություններում: .

Այս համակարգերի համար CL կինետիկ կորերը արտացոլում են ռեակցիայի երկու փուլերը՝ CL ինտենսիվության բարձրացման փուլը և բարձրության կամ լյումինեսցիայի աստիճանական անկման փուլը, երբ

CL ինտենսիվությունը կա՛մ հաստատուն է, կա՛մ դանդաղորեն նվազում է: Աշխատանքը նկարագրում է ընդհանուր հակաօքսիդիչ հզորությունը չափելու երկու մոտեցում, որոնք հաշվի են առնում կորերի այս հատկանիշը: TRAP (ընդհանուր ռեակտիվ հակաօքսիդանտ պոտենցիալ) մեթոդը հիմնված է CL t-ի թաքնված ժամանակահատվածի չափման վրա և կարող է օգտագործվել հակաօքսիդանտներ որոշելու համար, ինչպիսիք են Trolox-ը կամ ասկորբինաթթուն. կոչվում է ուժեղ հակաօքսիդանտներ: Լատենտային շրջանում տեղի է ունենում դրանց ամբողջական օքսիդացում։ TAR (ընդհանուր հակաօքսիդանտային ռեակտիվություն) մեթոդը չափում է քիմլյումինեսցենտության մարման աստիճանը քիմլյումինեսցենտության կորի սարահարթում կամ առավելագույնը.

որտեղ I-ը քիմիլյումինեսցենցիայի ինտենսիվությունն է առանց հակաօքսիդանտի, իսկ 11-ը CL ինտենսիվությունն է հակաօքսիդանտի առկայության դեպքում: Այս մեթոդը կիրառվում է, եթե համակարգը պարունակում է հիմնականում թույլ հակաօքսիդանտներ՝ ռադիկալների հետ փոխազդեցության ցածր արագության հաստատուններով՝ շատ ավելի ցածր՝ համեմատած լյումինոլի հաստատունի հետ:

Հակաօքսիդանտների ազդեցությունը բնութագրվում է ոչ միայն t և c ցուցանիշներով: Ինչպես երևում է աշխատանքներից, հակաօքսիդանտների, ինչպիսիք են միզաթթունը հեմին-H202-լումինոլ համակարգում կամ տոկոֆերոլը, ռուտինը և կվերցետինը ցիտոքրոմ c-cardiolipin-H202-luminol համակարգում, բնութագրվում է առավելագույն արագության փոփոխությամբ: CL-ի բարձրացում (utx): Ինչպես ցույց են տալիս կինետիկայի մաթեմատիկական մոդելավորման արդյունքները, այս հակաօքսիդանտների ռադիկալների հետ փոխազդեցության արագության հաստատունների արժեքները մոտ են լյումինոլի հաստատունի արժեքին, հետևաբար նման հակաօքսիդանտները կարելի է անվանել միջին ուժի հակաօքսիդանտներ:

Եթե ուսումնասիրված նյութը, մասնավորապես, բուսական հումքը պարունակում է միայն մեկ տեսակի հակաօքսիդանտներ, ապա դրանց պարունակությունը կարող է բնութագրվել վերը թվարկված երեք ցուցանիշներից մեկով (m, q կամ V): Բայց բուսական նյութերը պարունակում են տարբեր հզորության հակաօքսիդանտների խառնուրդ: Այս խնդիրը լուծելու համար որոշ հեղինակներ օգտագործել են քիմլյումինեսցենցիայի լույսի գումարի փոփոխությունը որոշակի DE ժամանակի ընթացքում՝ հաշվարկված բանաձևով.

DE = DE0 - DE,

որտեղ DE0 և DE5 են CL լուսային գումարները տվյալ ժամանակի համար: համապատասխանաբար հսկողության և փորձարկման նմուշներում: Ժամանակը պետք է բավարար լինի համակարգի բոլոր հակաօքսիդանտների օքսիդացման համար, այսինքն, որպեսզի փորձանմուշի CL կորը հասնի վերահսկիչ նմուշի CL կորի մակարդակին: Վերջինս ենթադրում է, որ հետազոտողները ոչ միայն պետք է գրանցեն փայլի լուսային գումարը, այլև բավական երկար ժամանակ գրանցեն CL կինետիկայի կորը, ինչը միշտ չէ, որ արվում է։

Քանի որ բոլոր չափված ցուցանիշները կախված են գործիքից և չափման պայմաններից, ուսումնասիրվող համակարգում նյութի հակաօքսիդանտ ազդեցությունը սովորաբար համեմատվում է որպես ստանդարտ ընդունված հակաօքսիդանտի ազդեցության հետ, օրինակ՝ Trolox:

Ծովաբողկի պերօքսիդազ-ջրածնի պերօքսիդ համակարգը օգտագործվել է բազմաթիվ հեղինակների կողմից բուսական նյութերի հակաօքսիդանտային ընդհանուր հզորությունը վերլուծելու համար: Աշխատանքներում նմուշներում հակաօքսիդանտների քանակությունը գնահատելու համար օգտագործվել է CL լատենտային շրջանը (TRAP մեթոդ), իսկ աշխատանքներում՝ CL զարգացման կորի տակ գտնվող տարածքը։ Սակայն թվարկված աշխատանքները հստակ հիմնավորում չեն տալիս

OAU-ի գնահատման այս կամ այն պարամետրի ընտրությունը:

Հետազոտության նպատակն էր որոշել, թե ինչպես է հակաօքսիդանտների տարբեր տեսակների հարաբերակցությունը ազդում TOA-ի վրա և փոփոխել քիմլյումինեսցենցիայի մեթոդն այնպես, որ կարողանանք ավելի ճշգրիտ որոշել TOA-ն բույսերի նյութերում: Դա անելու համար մենք մեզ մի քանի խնդիր դրեցինք. Նախ՝ համեմատեք ուսումնասիրված օբյեկտների CL կինետիկան երեք տիպի (ուժեղ, միջին և թույլ) ստանդարտ հակաօքսիդանտների կինետիկայի հետ՝ հասկանալու համար, թե որ տեսակի հակաօքսիդանտներն են հիմնական ներդրումն ունենում ուսումնասիրվող օբյեկտների ՕԱԱ-ում: Երկրորդ, հաշվարկել ուսումնասիրված օբյեկտների TAE-ն՝ չափելով CL լույսի գումարի նվազումը այս օբյեկտների ազդեցության տակ հակաօքսիդանտի գործողության համեմատ, որն ամենամեծ ներդրումն է ապահովում TAE-ում:

ՆՅՈՒԹԵՐ ԵՒ ՄԵԹՈԴՆԵՐ

Հետազոտության առարկա են հանդիսացել ալոճենի, լեռնային մոխրի և վայրի վարդի մրգերի արդյունաբերական նմուշները, որոնք արտադրվել են «Կրասնոգորսկլեքսրեդստվա» ԲԲԸ-ի կողմից (Ռուսաստան), ինչպես նաև ազնվամորու պտուղները, որոնք հեղինակները հավաքել են Մոսկվայի մարզում բնական աճի պայմաններում և չորացրած 60 ջերմաստիճանում: -80 ° C, մինչև նրանք դադարեն մեկուսացնել հյութը և դեֆորմացիան սեղմելիս:

Քիմիլոյումինեսցենտային մեթոդով հակաօքսիդանտային հզորության վերլուծության ռեակտիվներն են՝ KH2PO4, 20 մՄ բուֆերային լուծույթ (pH 7,4); պերօքսիդազ ծովաբողկի արմատներից (ակտիվություն 112 միավոր/մգ, M = 44,173.9), 1 մՄ ջրային լուծույթ; լյումինոլ (5-ամինո-1,2,3,4-տետրահիդրո-1,4-ֆտալազինեդիոն, 3-ամինոֆտալաթթվի հիդրազիդ, M=177,11), 1 մՄ ջրային լուծույթ; ջրածնի պերօքսիդ (H2O2, M = 34.01), 1 մՄ ջրային լուծույթ; հակաօքսիդանտների լուծույթներ (ասկորբինաթթու, կվերցետին, տոկոֆերոլ): Բոլոր ռեակտիվները արտադրվում են Sigma Aldrich (ԱՄՆ) կողմից:

Ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորությունը որոշվել է քիմլյումինեսցենտությունը գրանցելով Lum-100 քիմիլյումինոմետրի վրա (DISoft, Ռուսաստան) PowerGraph 3.3 ծրագրաշարի միջոցով: Բուսական հումքում TAU-ն որոշելու համար 40 մկլ լյումինոլ 1 մՄ կոնցենտրացիայով, 40 մկլ ծովաբողկի պերօքսիդազա 0,1 մկմ կոնցենտրացիայով, 10-ից 50 մկլ թուրմ կամ ինֆուզիոն (կախված կոնցենտրացիայից) և ֆոսֆատային բուֆեր։ չափով, որն անհրաժեշտ է նմուշի ընդհանուր ծավալը 1 մլ հասցնելու համար: Կյուվետը տեղադրվել է սարքի մեջ և CL-ն ձայնագրվել է՝ դիտարկելով ֆոնային ազդանշանը։ Ֆոնային ազդանշանի գրանցումից 48 վրկ հետո 100 մկլ H2O2 1 մՄ կոնցենտրացիայով ավելացվել է կյուվետին, և CL գրանցումը շարունակվել է 10 րոպե: Պատրաստվել է չորս նմուշ՝ յուրաքանչյուր բուսական օբյեկտի տարբեր կոնցենտրացիաներով: CL արձանագրվել է նաև ասկորբինաթթվի, կվերցետինի և տոկոֆերոլի լուծույթների համար հինգ տարբեր կոնցենտրացիաներով հակաօքսիդանտներից յուրաքանչյուրի համար: Այնուհետև, թուրմերի և թուրմերի նմուշների OAU-ն վերահաշվարկվեց մինչև կվերցետին:

հասել է բարձրավանդակի, ինչը ցույց է տալիս համակարգում հակաօքսիդանտների ամբողջական ոչնչացումը: Ուսումնասիրված նմուշների նոսրացումները և ստանդարտ հակաօքսիդանտների լուծույթների կոնցենտրացիաները (նշված են նկարների վերնագրերում) ընտրվել են այնպես, որ CL-ի բոլոր կինետիկ կորերը չափվել են սարքի նույն զգայունությամբ:

Հակաօքսիդանտային հզորությունը հաշվարկվել է քիմիլյումինեսցենտության կինետիկ կորի տակ գտնվող տարածքի (AS) փոփոխությունից՝ հակաօքսիդանտ պարունակող նյութի ավելացման ժամանակ: Դա անելու համար մենք հաշվարկեցինք S0 համակարգի համար առանց հակաօքսիդանտի և դրանից հանեցինք SS տարածքը, որը բնութագրում է այն համակարգը, որին ավելացվել է հակաօքսիդանտը: AS-ի արժեքը կախված է քիմիլյումինոմետրի զգայունությունից և չափման պայմաններից: AS/C ■ V հարաբերակցությունը (որտեղ C-ն ուսումնասիրվող կենսաբանական նյութի կոնցենտրացիան է կյուվետում, գ/լ, իսկ V-ը՝ կյուվետի ծավալը, լ) արտահայտում է ուսումնասիրված նյութի 1 գ հակաօքսիդանտ հզորությունը, այսինքն՝ բուսական հումք։

Նման ձևով մենք հաշվարկել ենք ASa հակաօքսիդիչ հզորությունը ստանդարտ հակաօքսիդանտի, օրինակ՝ կվերցետինի լուծույթի, որը տեղադրված է ռեակցիայի խառնուրդի նույն ծավալում։ AS/CÄ ■ V հարաբերակցությունը (որտեղ CA-ն հակաօքսիդանտի քաշի կոնցենտրացիան է կյուվետում, գ/լ) արտահայտում է 1 գ հակաօքսիդանտի հակաօքսիդանտ հզորությունը:

Ստանդարտ հակաօքսիդանտներից յուրաքանչյուրի համար մի քանի կոնցենտրացիաների լուծույթներից ստացված ազդանշանը գրանցվեց՝ համոզվելու համար, որ հաշվարկները գծային հարաբերությունների մեջ են, և ստացված արդյունքները վերարտադրելի են: Իրոք, ստացվել է ազդանշանի գծային կախվածություն (ASa = kA ■ CA) կոնցենտրացիայից, որից հաշվարկվել է kA ստոյխիոմետրիկ գործակիցը։ Ֆիշերի չափանիշի համաձայն՝ ստանդարտ հակաօքսիդանտների համար ստացված kA արժեքները վիճակագրորեն նշանակալի են՝ 0,975 հավանականությամբ: Այնուհետև չորս կոնցենտրացիաներից ստացված ազդանշանը գրանցվեց բույսերի չորս նմուշներից յուրաքանչյուրի համար, և բոլոր նմուշների համար ստացվեց ազդանշանի գծային կախվածություն կոնցենտրացիայից (AS = k ■ C), որից հաշվարկվեց k stoichiometric գործակիցը: 0,975 հավանականությամբ (Ֆիշերի թեստ) բույսերի նմուշների համար ստացված k արժեքները վիճակագրորեն նշանակալի են: Բուսական նյութի ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորությունը ստանդարտ հակաօքսիդանտի զանգվածի առումով (մգ%) հայտնաբերվել է բանաձևի միջոցով.

ՕԱԷ = կ ■ 105. կ

Արժեքները ներկայացվել են որպես միջին թվաբանական ± ստանդարտ շեղում (M ± 5) p.<0,05.

ՀԵՏԱԶՈՏՈՒԹՅԱՆ ԱՐԴՅՈՒՆՔՆԵՐԸ

Նատրիումի ասկորբատի առկայության դեպքում քիմիլյումինեսցենցիայի կինետիկայի ուսումնասիրությունը (նկ. 1) ցույց է տվել, որ այս հակաօքսիդանտը բնութագրվում է լատենտային շրջանով, երբ CL-ը գրեթե ամբողջությամբ ճնշված է: Դրա տեւողությունը համաչափ է համակարգում առկա հակաօքսիդանտի քանակին: Այս դեպքում ոչ CL կորերի թեքությունը, ոչ էլ սարահարթի վրա CL ինտենսիվությունը չի փոխվում: Սա բացատրվում է նրանով, որ ասկորբինաթթուն ուժեղ հակաօքսիդանտ է, որը ընդհատում է համակարգում ձևավորված բոլոր ռադիկալները, ներառյալ լյումինոլի ռադիկալները, և CL-ն չի զարգանում այնքան ժամանակ, քանի դեռ ամբողջ ասկորբատը չի օքսիդացվել:

Տոկոֆերոլի ազդեցությունը (նկ. 2) դրսևորվել է բարձրավանդակում CL ինտենսիվության նվազմամբ, ինչը բնորոշ է թույլ հակաօքսիդանտներին, թեև տոկոֆերոլը համարվում է ամենաշատերից մեկը։

հզոր հակաօքսիդանտներ. Թերևս այս անհամապատասխանությունը պայմանավորված է նրանով, որ մեր փորձի ժամանակ ազատ ռադիկալները գտնվում էին ջրային լուծույթում, մինչդեռ տոկոֆերոլի ազդեցությունը սովորաբար ուսումնասիրվում է ոչ բևեռային միջավայրերում: Հետազոտության մեջ, որտեղ ռադիկալների աղբյուրը ցիտոքրոմ c-ի կոմպլեքսն էր կարդիոլիպինի հետ, իսկ լյումինոլի հետ ռեակցիան տեղի էր ունենում այս համալիրի ներսում, տոկոֆերոլն ուներ միջին հզորության հակաօքսիդանտի հատկություններ:

Ուսումնասիրելով մեր համակարգի վրա կվերցետինի տարբեր կոնցենտրացիաների ազդեցությունը (նկ. 3) և համեմատելով նրա և նատրիումի ասկորբատի և տոկոֆերոլի կինետիկ կորերը՝ կարելի է նկատել, որ քվերցետինի հիմնական ազդեցությունը դրսևորվում է լանջի թեքության փոփոխությամբ։ կորեր, այսինքն՝ CL-ի զարգացման արագությունը, որը բնորոշ է միջին հզորության հակաօքսիդանտներին։

CL կորերը բոլոր ուսումնասիրված թուրմերի համար (նկ. 4) նման են կվերցետինի կորերին՝ վերջում CL ինտենսիվության մի փոքր նվազմամբ, այսինքն.

Ժամանակ, րոպե

Բրինձ. 1. Նատրիումի ասկորբատի ազդեցությունը քիմիլյումինեսցենցիայի կինետիկայի վրա

Համակարգի բաղադրիչների կոնցենտրացիաները՝ լյումինոլ՝ 40 մկմ, ծովաբողկի պերօքսիդազ՝ 4 նՄ, ջրածնի պերօքսիդ՝ 100 մկՄ: Կորեր՝ 1 - հսկիչ նմուշ; 2 - 0,05 մկՄ; 3 - 0.10 մկՄ; 4 - 0,15 մկՄ; 5 - 0,2 մկՄ; 6 - 0,25 մկՄ նատրիումի ասկորբատ:

սարահարթ. Ինչպես ցույց է տրված աշխատանքում, այս վարքագիծը բնորոշ է միջին ուժգնության հակաօքսիդանտներին, որոնք մեր դեպքում ներառում են պոլիֆենոլներ՝ ֆլավոնոիդներ և դաբաղանյութեր։ Ազնվամորու մրգերի ներարկման համար (նկ. 4, Դ) սարահարթի մակարդակում նկատելի է քիմիլյումինեսցենտության նվազում, ինչը բնորոշ է թույլ հակաօքսիդանտներին, որն այս դեպքում տոկոֆերոլն է։ Կվերցետինի և տոկոֆերոլի առումով ազնվամորու ինֆուզիոն պարունակում է 4,7 ± 0,9 մկմոլ/գ կվերցետին և 11,9 ± 0,8 մկմոլ/գ տոկոֆերոլ:

Բուսական նյութերից չորս ուսումնասիրված ջրային էքստրակտների տարբեր կոնցենտրացիաների համար ձեռք բերված քիմիլյումինեսցենցիայի կորերը համեմատելիս ցույց է տրվել, որ միջին և թույլ հակաօքսիդանտների ներդրումը նմուշների ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորության մեջ նվազել է հետևյալ շարքում՝ ազնվամորու մրգի ներարկում (նկ. 4): , Դ), վարդի ազդրի թուրմ (նկ. 4, Բ), թուրմի մրգերի թուրմ (նկ. 4, Ա), ալոճենու պտուղների թուրմ (նկ. 4, Բ)։ AS-ի արժեքները, որոնք հիմնված են կյուվետում ուսումնասիրված նյութի C կոնցենտրացիայի վրա և կվերցետինի առումով ընդհանուր հակաօքսիդանտային հզորության արժեքները ներկայացված են աղյուսակում:

ԱՐԴՅՈՒՆՔՆԵՐԻ ՔՆՆԱՐԿՈՒՄԸ

Փորձերի ընթացքում ստացված տվյալները և դրանց հիման վրա հաշվարկված ուսումնասիրված օբյեկտների OAE արժեքները համեմատվել են դրանցում առկա հիմնական հակաօքսիդանտների պարունակության հետ՝ որոշվելով վերլուծության քիմիական մեթոդներով: Չնայած այն հանգամանքին, որ տարբեր օբյեկտներում հակաօքսիդանտների ընդհանուր քանակի և TAU-ի միջև դրական հարաբերակցությունը անհերքելի է, այնուամենայնիվ այս ցուցանիշների միջև նկատելի տարբերություններ կան: Օրինակ, եթե վերցնենք ֆլավոնոիդների, դաբաղանյութերի և ասկորբինաթթվի պարունակության գումարը, ապա պարզվում է, որ այն ավելի մեծ է, քան հաշվարկված TAU-ն բոլոր ուսումնասիրված առարկաների համար, բացառությամբ ալոճենի մրգերի թուրմից (աղյուսակ):

Այլ հետազոտողներ նույնպես ցույց են տվել, որ քիմիական անալիզի արդյունքները և քիմլյումինեսցենտային մեթոդով որոշված TAU արժեքը հաճախ չեն համընկնում։ Գործողության ընթացքում որոշվում է ընդհանուր հակաօքսիդիչ հզորությունը

46 Ժամանակ, րոպե

Ես» «հ չի----.

Բրինձ. 2. Տոկոֆերոլի ազդեցությունը քիմիլյումինեսցենցիայի կինետիկայի վրա

Համակարգի բաղադրիչների կոնցենտրացիաները՝ լյումինոլ՝ 40 մկմ, ծովաբողկի պերօքսիդազ՝ 4 նՄ, ջրածնի պերօքսիդ՝ 100 մկՄ: Կորեր՝ 1 - հսկիչ նմուշ; 2 - 0.01 մկՄ; 3 - 0,025 մկՄ; 4 - 0.06 մկՄ; 5 - 0,1 մկՄ; 6 - 0,2 մկմ տոկոֆերոլ:

46 Ժամանակ, րոպե

Բրինձ. 3. Կվերցետինի ազդեցությունը քիմիլյումինեսցենցիայի կինետիկայի վրա Համակարգի բաղադրիչների կոնցենտրացիաները՝ լյումինոլ՝ 40 մկՄ, ծովաբողկի պերօքսիդազ՝ 4 նՄ, ջրածնի պերօքսիդ՝ 100 մկՄ։ Կորեր՝ 1 - հսկիչ նմուշ; 2 - 0,02 մկՄ; 3 - 0.03 մկՄ; 4 - 0,04 մկՄ; 5 - 0,05 մկՄ; 6 - 0,06 մկմ կվերցետին:

Ժամանակ, րոպե

46 Ժամանակ, րոպե

120 I 100 80\60 40 20

46 Ժամանակ, րոպե

Բրինձ. 4. Թուրմերի (A), ալոճենի (B), վարդի կոնքերի (C) և ազնվամորու մրգերի (D) թուրմերի ազդեցությունը քիմլյումինեսցենցիայի կինետիկայի վրա Համակարգի բաղադրիչների կոնցենտրացիաները՝ լյումինոլ՝ 40 մկմ, ծովաբողկի պերօքսիդազ՝ 4։ nM, ջրածնի պերօքսիդ - 100 մկմ: (A) կորեր. 1 - հսկիչ նմուշ; 2 - 0.002 գ / լ; 3 - 0.004 գ / լ; 4 - 0.006 գ / լ; 5 - 0,008 գ/լ թուրմ թուրմ. (B) կորեր. 1 - հսկիչ նմուշ; 2 - 0,005 գ / լ; 3 - 0,0075 գ / լ; 4 - 0.01 գ / լ; 5 - 0,0125 գ/լ ալոճենի պտուղների թուրմ. (B) կորեր. 1 - հսկիչ նմուշ; 2 - 0.001 գ / լ; 3 - 0,0015 գ / լ; 4 - 0.002 գ / լ; 5 - 0,0025 գ/լ մասուրի թուրմ։ (D) կորեր. 1 - հսկիչ նմուշ; 2 - 0.001 գ / լ; 3 - 0.003 գ / լ; 4 - 0.004 գ / լ; 5 - 0,005 գ/լ ազնվամորու մրգերի թուրմ։

պերօքսիդազ-լյումինոլ-ջրածնի պերօքսիդ համակարգում՝ կապված տրիտերպենային միացությունների պարունակության հետ։ Այնուամենայնիվ, նույն հեղինակների աշխատության մեջ, որտեղ ուսումնասիրության առարկան մեկ այլ բույս էր, նրանք չեն նկատել OAE-ի հարաբերակցությունը որևէ խմբի նյութերի, ներառյալ ֆլավոնոիդների պարունակության հետ:

Նման անհամապատասխանությունները կապված են առնվազն երեք գործոնի հետ. Առաջին հերթին կարևոր է հակաօքսիդանտների ակտիվությունը, այսինքն՝ դրանց փոխազդեցության արագությունը ռադիկալների հետ, որը տարբեր է բույսերի նմուշում ընդգրկված տարբեր հակաօքսիդանտների համար: Ըստ Իզմայիլովի՝ մեքսիդոլի, տոկոֆերոլի և կվերցետինի համար համապատասխան ռեակցիաների արագության հաստատունները փոխկապակցված են 0,04: 2:60: Երկրորդ, յուրաքանչյուր հակաօքսիդանտ մոլեկուլ, մտնելով քիմիական ռեակցիա, կարող է անջատել տարբեր քանակությամբ ռադիկալներ: Աշխատանքի համաձայն՝ քվերցետինը, միզաթթուները և ասկորբինաթթուները արձագանքել են հակաօքսիդանտի մեկ մոլեկուլում համապատասխանաբար 3,6 ± 0,1, 1,4 ± 0,1 և 0,5 ± 0,2 ռադիկալներ (օգտագործվել է հեմին-H202-լումինոլ համակարգը): Երրորդ, հետազոտության արդյունքների վրա կարող է ազդել բույսի նմուշներում պերօքսիդազի ակտիվության առկայությունը, ինչպես աշխատանքի մեջ, ինչպես նաև նմուշներում կալցիումի առկայությունը, որը, ինչպես ցույց է տրված աշխատանքում, կարող է մեծացնել: ծովաբողկի պերօքսիդազի ակտիվությունը որոշակի պայմաններում. Սա սովորաբար հանգեցնում է ավելիի

CL-ի ավելի բարձր ինտենսիվություն սարահարթում, քան հսկիչ կորերի վրա, ինչը մենք, այնուամենայնիվ, չնկատեցինք:

Առաջին գործոնը կտրուկ սահմանափակում է այնպիսի պարամետրի օգտագործումը, ինչպիսին է լույսի գումարի փոփոխությունը, քանի որ քիմլյումինեսցենտության չափման ժամանակը պետք է լինի ավելի երկար, քան փորձարկման նմուշում բոլոր հակաօքսիդանտների սպառման ժամանակը: Այս պահի առաջացման մասին կարելի է դատել միայն քիմլյումինեսցենցիայի կինետիկան չափելով։ Բացի այդ, թույլ հակաօքսիդանտների ներդրումը OAU-ում կտրուկ թերագնահատված է, քանի որ դրանց ամբողջական օքսիդացման ժամանակը շատ անգամ ավելի երկար է, քան ընդունելի չափման տևողությունը (10-20 րոպե):

Առավել կարևոր է հակաօքսիդանտի ստոյխիոմետրիկ գործակիցը։ Նրա կողմից խափանված n ռադիկալների թիվը հավասար է

որտեղ p-ն ստոյխիոմետրիկ գործակիցն է, իսկ Am-ը չափման ժամանակ հակաօքսիդանտի կոնցենտրացիայի փոփոխությունն է, մեր դեպքում՝ փորձանմուշում փորձարկվող նյութի սկզբնական կոնցենտրացիան:

Լյումինեսցենցիայի լույսի գումարի տարբերությունը հակաօքսիդանտի բացակայության և դրա առկայության դեպքում համաչափ է n-ի: Ընդհատված ռադիկալների ընդհանուր թիվը հավասար է n = Y.p. մ,

որտեղ է որոշակի հակաօքսիդանտի ստոյխիոմետրիկ գործակիցը, իսկ m-ը չափման ընթացքում դրա կոնցենտրացիան է

Ուսումնասիրության առարկա Ֆլավոնոիդներ, մգ%* Տանիններ, մգ%* Ասկորբինաթթու, մգ%* AS/C ■ 10-8, արբ. միավորներ TAU, մգ% կվերցետին

Rowan մրգային թուրմ 8,87 ± 0,01 210,00 ± 10,00 0,67 ± 0,02 7,13 ± 0,96 56,53 ± 7,61

Մասուրի թուրմ 4,66 ± 0,04 850,00 ± 20,00 3,70 ± 0,12 16,60 ± 3,40 131,63 ± 27,26

Ալոճենու մրգային թուրմ 3,01 ± 0,06 12,00 ± 3,00 0,23 ± 0,002 3,18 ± 0,29 25,20 ± 2,32

Ազնվամորու չորացրած մրգերի թուրմ 90,00 ± 4,00 40,00 ± 20,00 3,91 ± 0,08 6,65 ± 1,21 52,69 ± 9,56

Ծանոթագրություն՝ * - գրականության տվյալներ, . AS - նմուշի լույսի գումարի փոփոխություն, rel. միավորներ, C - նմուշի կոնցենտրացիան կուվետում, գ/լ. Հաշվարկված արժեքները հուսալի են p<0,05. Число измерений для каждого образца - четыре.

Ռենիա. Ընդհատված ռադիկալների ընդհանուր թիվը, անշուշտ, հավասար չէ հակաօքսիդանտների ընդհանուր քանակին, քանի որ pt գործակիցները ոչ միայն հավասար չեն միասնությանը, այլև էապես տարբերվում են տարբեր հակաօքսիդանտների համար:

n-ի արժեքը համաչափ է հակաօքսիդանտ պարունակող նմուշի և հակաօքսիդանտ չպարունակող հսկիչ նմուշի միջև որոշակի ժամանակի ընթացքում չափված լուսային գումարների տարբերությանը.

որտեղ k-ն նույն չափման պայմաններում հաստատուն գործակից է:

Մենք ընտրել ենք բույսերի հումքի ընդհանուր հակաօքսիդանտ հզորությունը գնահատելու պայմանները՝ գրանցելով քիմլյումինեսցենցիայի կինետիկան ծովաբողկի պերօքսիդազից, ջրածնի պերօքսիդից և լյումինոլից բաղկացած համակարգում (բաղադրիչի կոնցենտրացիաները՝ համապատասխանաբար 4 նՄ, 100 մկՄ և 40 մկմ, 20 մՄ ֆոսֆատ։ բուֆեր, pH 7.4),

ապահովել է ուժեղ հակաօքսիդանտների (ասկորբինաթթու) և միջին հզորության հակաօքսիդանտների (կվերցետին) օքսիդացում 10 րոպեում։ Այս չափման տևողությունը հարմար է և ապահովում է չափման պահանջվող որակը:

գրականություն

1. Proskurnina E. V., Vladimirov Yu. A. Ազատ ռադիկալները որպես կարգավորիչ և պաթոլոգիական գործընթացների մասնակիցներ: Գրիգորև Ա.Ի., Վլադիմիրով Յու.Ա., խմբագիրներ։ Հիմնական գիտություններ՝ բժշկություն։ Բիոֆիզ. մեղր. տեխնոլ. M.: MAX Press; 2015. հատոր 1. էջ. 38-71 թթ.

3. Khasanov V.V., Ryzhova G.L., Maltseva E.V. Հակաօքսիդանտների ուսումնասիրման մեթոդներ. Քիմ. ռաստ. հումք. 2004 թ. (3): 63-75:

4. Vasiliev R. F., Kancheva V. D., Fedorova G. F., Butovska D. I., Trofimov A. V. Չալկոնների հակաօքսիդիչ ակտիվություն: Քիմիալյումինեսցենտային ռեակտիվության որոշում և ռեակտիվների և միջանկյալ նյութերի էներգիաների և կառուցվածքների քվանտաքիմիական հաշվարկ: Կինետիկա և կատալիզ. 2010 թ. 51 (4): 533-41։

6. Ֆեդորովա Գ.Ֆ., Տրոֆիմով Ա.Վ., Վասիլ»և Ռ.Ֆ., Վեպրինցև Տ.Լ. Պերոքսի-

Ռադիկալ միջնորդավորված քիմլյումինեսցենտություն. մեխանիկական բազմազանություն և հակաօքսիդանտների հետազոտության հիմունքներ: Արկիվոկ. 2007 թ. 8։163-215։

8. Bastos EL, Romoff P, Eckert CR, Baader WJ. Հակառադիկալային հզորության գնահատում H2O2-հեմինով պայմանավորված լյումինոլի քիմլյումինեսցենտով: J Agric Food Chem. 2003 Դեկտեմբեր 3; 51 (25): 7481-8.

9. Vladimirov Yu. A., Proskurnina E. V. Ազատ ռադիկալներ և բջջային քիմիլյումինեսցենտություն: Ուսպեխի բիոլ. քիմ. 2009 թ. 49: 341-88։

10. Vladimirov Yu. A., Proskurnina E. V., Izmailov D. Yu. Kinetic chemiluminescence որպես ազատ ռադիկալների ռեակցիաների ուսումնասիրման մեթոդ: Կենսաֆիզիկա. 2011 թ. 56 (6): 1081-90 թթ.

11. Izmailov D. Yu., Demin E. M., Vladimirov Yu. A. Հակաօքսիդանտային ակտիվության որոշում՝ քիմիլյումինեսցենցիայի կինետիկայի չափման միջոցով: Ֆոտոկենսաբանություն և ֆոտոբժշկություն. 2011 թ. 7 (2): 70-6.

12. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. Լյումինոլի լյումինեսցենցիան առաջացել է 2.2"-ազո-բիս(2-ամիդինոպրոպան) թերմոլիզով: Անվճար

Radic Res Commun. 1992 թ. 17 (5): 299-311:

13. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. SOD-ի ակտիվությունը գնահատելու համար լյումինոլի լյումինեսցենցիայի մարման օգտագործման մասին: Free Radic Biol Med. 1994 Հուն. 16 (6): 833-7.

15. Lissi EA, Salim-Hanna M, Pascual C, Del Castillo MD: Ընդհանուր հակաօքսիդիչ ներուժի (TRAP) և հակաօքսիդանտի ընդհանուր ռեակտիվության գնահատում լյումինոլով ուժեղացված քիմլյումինեսցենցիայի չափումներից: Free Radic Biol Med. 1995 Փետ. 18 (2): 153-8.

17. Cormier MJ, Prichard PM. Լյումինոլի լյումինեսցենտային պերօքսիդացման մեխանիզմի ուսումնասիրություն դադարեցված հոսքի տեխնիկայով: Ջ Բիոլ Քիմ. 1968 սեպտեմբերի 25; 243 (18): 4706-14.

21. Alekseev A. V., Proskurnina E. V., Vladimirov Yu. A. Հակաօքսիդանտների որոշում ակտիվացված քիմիլյումինեսցենտով, օգտագործելով 2,2'-azo-bis(2-amidinopropane): Մոսկվայի պետական համալսարանի տեղեկագիր Ser. 2. Khim. 2012; 53 ( 3): 187-93:

24. Առողջապահության նախարարություն ԽՍՀՄ պետական դեղագրքի ԽՍՀՄ XI հրատ. Հատ. 2 «Վերլուծության ընդհանուր մեթոդներ. Դեղաբույսերի հումք»։ Մ.: Բժշկություն; 1987. էջ. 147-8 թթ.

25. Sergunova E. V., Sorokina A. A., Kornyushina M. A. Մասուրի մզվածքի պատրաստուկների ուսումնասիրություն: Դեղատուն. 2012 թ. (2): 14-6.

26. Sergunova E. V., Sorokina A. A., Avrach A. S. Ալոճենի պտուղի ուսումնասիրությունը պահպանման և ջրի արդյունահանման տարբեր եղանակներով: Դեղատուն. 2010 թ. (5): 16-8.

27. Avrach A. S., Sergunova E. V., Kuksova Ya. V. Մրգերի կենսաբանորեն ակտիվ նյութեր և սովորական ազնվամորու ջրային քաղվածքներ: Դեղատուն. 2014 թ. (1): 8-10.

28. Avrach A. S., Samylina I. A., Sergunova E. V. Ալոճենի պտուղների կենսաբանորեն ակտիվ նյութերի ուսումնասիրություն - հումք հոմեոպաթիկ մատրիցային թուրմերի պատրաստման համար: Շաբաթ օրը գիտական tr. XXIV Մոսկի նյութերի հիման վրա: միջազգ. հոմեոպաթ. կոնֆ. «Հոմեոպաթիկ մեթոդի մշակում ժամանակակից բժշկության մեջ»; Հունվարի 24-25, 2014; Մոսկվա. Մ. 2014. էջ. 146-7 թթ.

29. Sergunova E. V., Sorokina A. A. Պահպանման տարբեր մեթոդների բուժիչ բույսերի հումքի կենսաբանական ակտիվ նյութերի բաղադրության ուսումնասիրություն: Շաբաթ օրը թեզեր՝ հիմնված XX Ross-ի նյութերի վրա: ազգային կոնգր. «Մարդը և բժշկությունը»; 2013 թվականի ապրիլի 15-19; Մոսկվա. Մոսկվա՝ EkoOnis; 2013. էջ. 184-90 թթ.

30. Aleksandrova E. Yu., Orlova M. A., Neiman P. L. Ուսումնասիրել պերօքսիդազային ակտիվությունը ծովաբողկի կոճղարմատներից և արմատներից քաղվածքներում և դրա կայունությունը տարբեր ազդեցությունների նկատմամբ: Վեստն. Մոսկվայի պետական համալսարան. Սեր. 2. Քիմ. 2006 թ. 47 (5): 350-2:

1. Պրոսկուրնինա Է.Վ., Վլադիմիրով ՅուԱ. Svobodnye radikaly kak uchastniki regulyatornykh i patologicheskikh protsessov. Գրիգորև Ա.Ի., Վլադիմիրով Յու.Ա., խմբագիրներ։ Բիոֆիզիկական մեդիտցինյան տեխնոլոգիա. Մոսկվա՝ MAKS Press; 2015. v. 1. էջ. 38-71 թթ. ռուսերեն.

2. Chanda S, Dave R. In vitro մոդելներ հակաօքսիդիչ ակտիվության գնահատման համար և որոշ բուժիչ բույսեր, որոնք ունեն հակաօքսիդիչ հատկություններ. Afr J Microbiol Res. 2009 դեկտ. 3 (13): 981-96.

3. Khasanov VV, Ryzhova GL, Mal"tseva EV. Metody issledovaniya antioksidantov. Khimija Rastitel"nogo Syr"ja. 2004; (3): 63-75. Ռուս.

4. Vasil"ev RF, K""ncheva VD, Fedorova GF, B""tovska DI, Trofimov AV. Antioksidantnaya aktivnost" khalkonov. Khemilyuminestsentnoe opredelenie reaktsionnoi sposobnosti i kvantovo-khimicheskii raschet energii i stroeniya reagentov i intermediatov. Կինետիկա և կատալիզ. 2010 թ. 51 (4): 533-41։ ռուսերեն.

5. Slavova-Kazakova AK, Angelova SE, Veprintsev TL, Denev P, Fabbri D, Dettori MA, et al. Կուրկումինի հետ կապված միացությունների հակաօքսիդանտային ներուժը ուսումնասիրվել է քիմլյումինեսցենցիայի կինետիկայի, շղթա կոտրելու արդյունավետության, մաքրող ակտիվության (ORAC) և DFT հաշվարկների միջոցով: Beilstein J Org Chem. 2015 օգոստոսի 11; 11: 1398-411 թթ.

6. Fedorova GF, Trofimov AV, Vasil"ev RF, Veprintsev TL. Peroxy-radical-mediated chemiluminescence. Mechanistic Diversity and Funds for Antioxidant Assay. Arkivoc. 2007; 8: 163-215.

7. Ֆեդորովա Գ.Ֆ., Մենշով Վ.Ա., Տրոֆիմով Ա.Վ., Վասիլ»և ՌԴ: Բուսական լիպիդների հակաօքսիդիչ հատկությունների համար պարզ քիմիլյումինեսցենտային վերլուծություն. հիմունքներ և պատկերավոր օրինակներ: Վերլուծաբան 2009 թ. հոկտ; 134 (10): 2128-34:

8. Bastos EL, Romoff P, Eckert CR, Baader WJ. Հակառադիկալային հզորության գնահատում H2O2-հեմին-առաջացած լյումինոլով

9. Վլադիմիրով Յու.Ա., Պրոսկուրնինա Է.Վ. Svobodnye radikaly i kletochnaya khemilyuminestsentsiya. Ուսպ Բիոլ Խիմ. 2009 թ. 49: 341-88։ ռուսերեն.

10. Վլադիմիրով ՅուԱ, Պրոսկուրնինա Է.Վ., Իզմայլով ԴՅու. Kineticheskaya khemilyuminestsentsiya kak metod izucheniya reaktsii svobodnykh radikalov. Կենսաֆիզիկա. 2011 թ. 56 (6): 1081-90 թթ. ռուսերեն.

11. Իզմայիլով ԴՅու, Դեմին Է.Մ., Վլադիմիրով Յու.Ա. Opredelenie aktivnosti antioksidantov metodom izmereniya kinetiki khemilyuminestsen-tsii. Ֆոտոկենսաբանություն և ֆոտոմեդիա. 2011 թ. 7 (2): 70-6. ռուսերեն.

12. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. Լյումինոլի լյումինեսցենցիան առաջացած 2,2"-Ազո-բիս(2-ամիդինոպրոպան) թերմոլիզով: Free Radic Res Commun. 1992; 17 (5): 299-311:

14. Lissi EA, Escobar J, Pascual C, Del Castillo MD, Schmitt TH, Di Mascio P. Տեսանելի քիմլյումինեսցենտություն՝ կապված մետեմոգլոբինի կամ օքսիհեմոգլոբինի ջրածնի պերօքսիդի հետ ռեակցիայի հետ: Photochem Photobiol. 1994 նոյ. 60 (5): 405-11.

16. Landi-Librandi AP, de Oliveira CA, Azzolini AE, Kabeya LM, Del Ciampo JO, Bentley MV, et al. HRP-H2O2-luminol համակարգի կողմից լիպոսոմային ֆլավոնոլների հակաօքսիդանտ ակտիվության in vitro գնահատում: J Microencapsul. 2011 թ. 28 (4): 258-67:

17. Cormier MJ, Prichard PM. Մեխանիզմի ուսումնասիրություն

Լյումինոլի լյումինեսցենտային պերօքսիդացման դադարեցված հոսքի տեխնիկայով: Ջ Բիոլ Քիմ. 1968 սեպտեմբերի 25; 243 (18): 4706-14.

18. Chang CL, Lin CS, Lai GH. Բուսաքիմիական բնութագրեր, ազատ ռադիկալների մաքրման գործողություններ և հինգ բուժիչ բույսերի քաղվածքների նեյրոպաշտպանություն: Evid Based Complement Alternat Med. 2012 թ. 2012: 984295. doi: 10.1155/2012/984295. Epub 2011 օգոստոսի 10:

19. Chang CL, Lin CS. Terminalia chebula Retzius-ի էքստրակտների ֆիտոքիմիական բաղադրությունը, հակաօքսիդիչ ակտիվությունը և նյարդապաշտպան ազդեցությունը: Evid Based Complement Alternat Med. 2012 թ. 2012: 125247. doi: 10.1155/2012/125247. Epub 2011 հուլիսի 5:

20. Georgetti SR, Casagrande R, Di Mambro VM, Azzolini AE, Fonseca MJ. Տարբեր ֆլավոնոիդների հակաօքսիդիչ ակտիվության գնահատում քիմլյումինեսցենցիայի մեթոդով. AAPS PharmSci. 2003 թ. 5 (2): 111-5.

21. Ալեքսեև Ա.Վ., Պրոսկուրնինա Է.Վ., Վլադիմիրով Յու.Ա. Opredelenie antioksidantov metodom aktivirovannoi khemilyuminestsentsii s ispol "zovaniem 2.2" -azo-bis (2-amidinopropana): Մոսկվայի համալսարանի քիմիայի տեղեկագիր. 2012 թ. 53 (3): 187-93. ռուսերեն.

22. Pogacnik L, Ulrih NP. Օպտիմալացված քիմիլյումինեսցենտային վերլուծության կիրառում բուսական էքստրակտների հակաօքսիդանտային հզորության որոշման համար: Լյումինեսցենտություն. 2012 նոյ-դեկտ. 27 (6): 505-10.

23. Saleh L, Plieth C. Ընդհանուր ցածր մոլեկուլային հակաօքսիդանտներ որպես ամփոփ պարամետր, քանակականացված կենսաբանական նմուշներում քիմիլյումինեսցենցիայի արգելակման վերլուծության միջոցով: Նատ Պրոտոկ. 2010 սեպտ. 5 (10): 1627-34 թթ.

24. Նախարարստվո ազդրավոխրանենիյա ԽՍՀՄ. Gosudarsvennaya farmakopeya ԽՍՀՄ. 11-րդ հրատ. Iss. 2. «Obshchie metody վերլուծություն».

Lekarstvennoe rastitel "noe syr" e", Մոսկվա: Մեդլցինա, 1987, էջ 147-8 Ռուս.

25. Սերգունովա Է.Վ., Սորոկինա Ա.Ա., Կորնյուշինա Մ.Ա. Izuchenie ekstraktsionnykh preparatov shipovnika. Դեղատուն. 2012 թ. (2): 14-6. ռուսերեն.

26. Սերգունովա Է.Վ., Սորոկինա Ա.Ա., Ավրաչ Ա.Ս. Izuchenie plodov boyaryshnika razlichnykh sposobov konservatsii i vodnykh izvlechenii. Ֆարմացիա. 2010 թ. (5): 16-8. ռուսերեն.

27. Ավրաչ Ա.Ս., Սերգունովա Է.Վ., Կուկսովա Յավ. Biologicheski aktivnye veshchestva plodov i vodnykh izvlechenii maliny obyknovennoi. Ֆարմացիա. 2014 թ. (1): 8-10. ռուսերեն.

28. Ավրաչ Ա.Ս., Սամիլինա Ի.Ա., Սերգունովա Է.Վ. Izuchenie biologicheski aktivnykh veshchestv plodov boyaryshnika - syr"ya dlya prigotovleniya nastoek gomeopaticheskikh matrichnykh. Մոսկովյան 14-րդ միջազգային հոմեոպաթիկ կոնֆերանսի նյութեր "Razvitie gomeopaticheskogo methoda v sovremennoi p.2.214"; 146- 7. Ռուսերեն.

29. Սերգունովա Է.Վ., Սորոկինա Ա.Ա. Izuchenie sostava biologicheski aktivnykh veshchestv v lekarstvennom rastitel "nom syr" e razlichnykh sposobov konservatsii. Ռուսական 20-րդ ազգային կոնգրեսի «Չելովեկ ի լեկարստո» ժողովածուի նյութեր. 2013 ապրիլի 1519; Մոսկվա. Մոսկվա՝ ԷկՕՆիս; 2013. էջ. 184-90 թթ. ռուսերեն.

30. Aleksandrova EYu, Orlova MA, Neiman PL. Izuchenie peroksidaznoi aktivnosti v ekstraktakh iz kornevishcha i kornei khrena i ee stabil"nosti k razlichnym vozdeistviyam. Մոսկվայի համալսարանի քիմիայի տեղեկագիր. 2006; 47 (5): 350-2. Ռուս.

1 Բոլշակովա Լ.Ս. 1Միլենթև Վ.Ն. 2Սաննիկով Դ.Պ. 3Կազմին Վ.Մ. 2

1 Բարձրագույն մասնագիտական կրթության դաշնային պետական բյուջետային ուսումնական հաստատություն «Օրյոլի պետական տնտեսագիտության և առևտրի ինստիտուտ».

2 Դաշնային պետական բյուջետային հիմնարկ «Օրլովսկի քիմիականացման և գյուղատնտեսական ճառագայթաբանության կենտրոն»

3 Բարձրագույն մասնագիտական կրթության դաշնային պետական բյուջետային ուսումնական հաստատություն «Պետական Համալսարան – Ուսումնական, Հետազոտական և Արտադրական Համալիր»

Հետազոտվել է քիմիլյումինեսցենցիայի օգտագործման հնարավորությունը՝ սնուցիչների հակաօքսիդանտ ակտիվությունը գնահատելու համար: Առաջարկվող մեթոդը հիմնված է ալկալային միջավայրում լյումինոլի քիմլյումինեսցենտության վրա, որի ինտենսիվությունը կախված է քիմլյումինեսցենտ նմուշի պերօքսիդների քանակից: Քիմիալյումինեսցենցիան արձանագրվել է մշակված ինստալացիայի միջոցով, որը պարունակում է դոզավորման պոմպ, լուսակայուն խցիկ, ապակե վակուումային ֆոտոբազմապատկիչ և համակարգչային համակարգ: Քիմիալյումինեսցենտությունը բարձրացնելու համար լյումինոլին ավելացվել է կալիումի երկաթի սուլֆիդի լուծույթ: Քիմիալյումինեսցենցիայի ինտենսիվության փոփոխությունները գրանցվել են վերլուծված նմուշը լյումինոլի լուծույթի մեջ ներդնելու պահին: Որպես վերլուծված նմուշ օգտագործվել է դանդելիոնի քաղվածք, որը ստացվել է չոր ցածր ջերմաստիճանի թորման արդյունքում: Այն պարունակում է ֆենոլային միացություններ, որոնք հայտնի են իրենց բարձր հակաօքսիդիչ ակտիվությամբ: Հաստատվել է, որ քիմիլյումինեսցենցիայի մեթոդը կարող է օգտագործվել սննդամթերքի տարբեր միացությունների հակաօքսիդանտ հատկությունները որոշելու համար։

Մատենագիտական հղում

Panichkin A.V., Bolshakova L.S., Milentyev V.N., Sannikov D.P., Kazmin V.M. ՔԻՄԻԼՈՒՄԻՆԵՍՑԵՆՑԻԱՅԻ ՕԳՏԱԳՈՐԾՈՒՄԸ ՍՆՆԴԻ ՆՅՈՒԹԵՐԻ ՀԱԿԱՔՍԻԴԱՆՏ ՀԱՏԿՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐԸ ԳՆԱՀԱՏԵԼՈՒ ՀԱՄԱՐ // Ռացիոնալ սնուցում, սննդային հավելումներ և կենսախթանիչներ։ – 2014. – No 6. – P. 36-37;
URL՝ http://journal-nutrition.ru/ru/article/view?id=283 (մուտքի ամսաթիվ՝ 17.12.2019): Ձեր ուշադրությանն ենք ներկայացնում «Բնական գիտությունների ակադեմիա» հրատարակչության հրատարակած ամսագրերը.

ավարտական աշխատանք

1.4 Հակաօքսիդանտ հետազոտության մեթոդներ

հակաօքսիդիչ ակտիվությունը դասակարգվում է. ըստ դրսևորված AOA-ի գրանցման մեթոդների (ծավալային, լուսաչափական, քիմլյումինեսցենտ, լյումինեսցենտ, էլեկտրաքիմիական); ըստ օքսիդացման աղբյուրի տեսակի; ըստ օքսիդացված միացության տեսակի; օքսիդացված միացության չափման մեթոդով։

Այնուամենայնիվ, հակաօքսիդիչ ակտիվությունը որոշելու ամենահայտնի մեթոդներն են.

1 TEAC (տրոլոքսի համարժեք հակաօքսիդանտ հզորություն). մեթոդը հիմնված է հետևյալ ռեակցիայի վրա.

Մետմիոգլոբին + H 2 O 2 > Ferrylglobin + ABTS > ABTS * + AO:

Trolox-ի համարժեքների մեթոդը (TEAC) հիմնված է հակաօքսիդանտների ունակության վրա՝ նվազեցնելու 2,2-azinobis արմատական կատիոնները (ABTS) և դրանով իսկ արգելակելու կլանումը սպեկտրի երկար ալիքի (600 նմ) տարածքում: Մեթոդի զգալի թերությունը ռադիկալ արտադրելու երկքայլ ռեակցիան է: Սա երկարացնում է վերլուծության ժամանակը և կարող է մեծացնել արդյունքների ցրվածությունը, չնայած այն հանգամանքին, որ վերլուծության համար օգտագործվում է ռեակտիվների ստանդարտացված հավաքածու:

2 FRAP (երկաթի նվազեցնող հակաօքսիդիչ հզորություն). մեթոդը հիմնված է հետևյալ ռեակցիայի վրա.

Fe(III)-Tripyriditriazine+AO>Fe(II)-Tripyridyltriazine.

Երկաթի նվազեցնող/հակաօքսիդանտ հզորություն (FRAP): Այստեղ օգտագործվող ռեակցիան Fe(III)-tripyridyltriazine-ի Fe(II)-tripyridyltriazine-ի վերականգնումն է: Այնուամենայնիվ, այս մեթոդը չի կարող որոշել որոշ հակաօքսիդանտների, օրինակ, գլուտատիոնի որոշումը: Այս մեթոդը թույլ է տալիս ուղղակիորեն որոշել ցածր մոլեկուլային քաշի հակաօքսիդանտները: Ցածր pH-ի դեպքում Fe(III)-tripyridyltriazine համալիրի կրճատումը Fe(II) համալիրի ուղեկցվում է ինտենսիվ կապույտ գույնի տեսքով: Չափումները հիմնված են հակաօքսիդանտների ունակության վրա՝ ճնշելու ռեակցիայի տեսակների օքսիդատիվ ազդեցությունը, որոնք առաջանում են ռեակցիայի խառնուրդում: Այս մեթոդը պարզ, արագ և էժան է իրագործման համար:

3 ORAC (թթվածնի ռադիկալների կլանման հզորություն). մեթոդը հիմնված է հետևյալ ռեակցիայի վրա.

Fe(II)+H 2 O 2 >Fe(III) + OH*+AO>OH* + Luminol.

Թթվածնի ռադիկալները կլանելու ունակության որոշում (ORAC): Այս մեթոդով գրանցվում է սուբստրատի (ֆիկոերիտրին կամ ֆլուորեսցեին) ֆլյուորեսցենցիան, որն առաջանում է ROS-ի հետ փոխազդեցության արդյունքում։ Եթե փորձանմուշը պարունակում է հակաօքսիդանտներ, ապա նկատվում է ֆլյուորեսցենցիայի նվազում՝ համեմատած հսկիչ նմուշի հետ։ Այս մեթոդն ի սկզբանե մշակվել է դոկտոր Գուոհուա Կաոյի կողմից Ծերացման ազգային ինստիտուտում 1992թ.-ին: 1996թ.-ին դոկտոր Ռոնալդ Փրայերի հետ համատեղ խմբում է եղել USDA ծերացման հետազոտական կենտրոնում, որտեղ կիսաավտոմատացված մեթոդն էր: ստեղծված։

4 TRAP (ընդհանուր արմատական թակարդման հակաօքսիդանտ պարամետր). մեթոդը հիմնված է հետևյալ ռեակցիայի վրա.

AAPH+AO>AAPH* + PL (FE):

Այս մեթոդն օգտվում է հակաօքսիդանտների ունակությունից՝ փոխազդելու պերօքսիլ ռադիկալ 2,2-ազոբիս(2-ամիդինոպրոպան) դիհիդրոքլորիդի (AAPH) հետ: TRAP-ի փոփոխությունները բաղկացած են վերլուծական ազդանշանի գրանցման մեթոդներից: Ամենից հաճախ, վերլուծության վերջնական փուլում, պերօքսի արմատական AAPH-ը փոխազդում է լյումինեսցենտային (լումինոլ), լյումինեսցենտային (դիքլորֆլուորեսցեին դիացետատ, DCFH-DA) կամ այլ օպտիկական ակտիվ սուբստրատի հետ:

Ջրի լուծվող վիտամին E-ի ածանցյալ Trolox-ը (6-հիդրօքսի-2,5,7,8-տետրամեթիլքրոմ-2-կարբոքսի թթու) օգտագործվում է որպես ստանդարտ TEAC, ORAC և TRAP մեթոդների համար:

Վերջերս հակաօքսիդիչ ակտիվությունը գնահատելու համար էլեկտրաքիմիական մեթոդների կիրառման նկատմամբ հետաքրքրությունը մեծացել է: Այս մեթոդներն ունեն բարձր զգայունություն և արագ վերլուծություն:

Որոշ սննդամթերքի հակաօքսիդիչ ակտիվության գնահատումն իրականացվում է պոտենցիոմետրիայի մեթոդով՝ հիմնված էնոլ (-OH) և սուլֆհիդրիլ (-SH) խմբերի պատճառով հակաօքսիդանտ նյութերի ռեդոքս ռեակցիաներին մասնակցելու հատկության օգտագործման վրա:

Լուծույթների հակաօքսիդանտ հատկությունների որոշումը հիմնված է միջնորդ համակարգի հետ հակաօքսիդանտների քիմիական փոխազդեցության վրա, ինչը հանգեցնում է դրա ռեդոքսային ներուժի փոփոխության: Էլեկտրաքիմիական բջիջը կոնտեյներ է, որը պարունակում է K-Na-ֆոսֆատ բուֆերային լուծույթ, Fe(III)/Fe(II) մեդիատոր համակարգ և բարդ էլեկտրոդ՝ նախքան ռեդոքսի պոտենցիալը չափելը: Հակաօքսիդանտային ակտիվությունը գնահատվում է g-eq/l:

Հակաօքսիդիչ ակտիվության որոշման ամպերաչափական մեթոդը հիմնված է էլեկտրական հոսանքի չափման վրա, որը տեղի է ունենում փորձնական նյութի օքսիդացման ժամանակ աշխատանքային էլեկտրոդի մակերեսին, որը գտնվում է որոշակի ներուժի տակ: Ամպերաչափական մեթոդի զգայունությունը որոշվում է ինչպես աշխատանքային էլեկտրոդի բնույթով, այնպես էլ դրա վրա կիրառվող ներուժով: Պոլիֆենոլների և ֆլավոնոիդների ամպերաչափական դետեկտորի հայտնաբերման սահմանը գտնվում է նանո-պիկոգրամի մակարդակում, նման ցածր կոնցենտրացիաների դեպքում տարբեր հակաօքսիդանտների փոխադարձ ազդեցության ավելի ցածր հավանականություն կա, երբ դրանք միասին են, մասնավորապես՝ սիներգիայի երևույթի դրսևորումը: . Մեթոդի թերությունները ներառում են դրա առանձնահատկությունը. այս պայմաններում հակաօքսիդանտները, որոնք իրենք օքսիդացված կամ նվազեցված են թթվածնի էլեկտրավերականգնման պոտենցիալների շրջանում, չեն կարող վերլուծվել: Մեթոդի առավելությունները ներառում են դրա արագությունը, շագանակագեղձը և զգայունությունը:

Գալվանոստատիկ կուլոմետրիայի մեթոդ՝ օգտագործելով էլեկտրական առաջացած օքսիդանտներ. մեթոդը կիրառելի է ճարպային լուծվող հակաօքսիդանտների վերլուծության համար:

Ասկորբինաթթվի որոշման համար մշակվել են տարբեր մեթոդներ.

ամպերաչափական մեթոդ՝ օգտագործելով ալյումինե էլեկտրոդ, որը ձևափոխված է նիկելի (II) հեքսացիանոֆերատի թաղանթով լուծույթի մեջ պարզ ընկղմմամբ.

ասկորբինաթթվի պինդ ֆազային սպեկտրոֆոտոմետրիկ և տեսողական թեստային որոշման մեթոդ՝ օգտագործելով սիլիցիումային թթու քսերոգել՝ փոփոխված Wawele ռեագենտով և պղնձով (II) որպես ցուցիչ փոշի.

Ասկորբինաթթվի քիմլյումինեսցենտային որոշումը կարող է իրականացվել հոսքի ներարկման մեթոդով՝ օգտագործելով ռոդամինի B-ի քիմլյումինեսցենտ ռեակցիան ցերիումի (IV) հետ ծծմբաթթվային միջավայրում:

ասկորբինաթթվի որոշում 10 -8 -10 -3 գ/սմ 3 անոդային վոլտամետրիայի միջոցով ջրային և ջրային օրգանական միջավայրերում:

Ամենատարածվածը FRAP մեթոդն է, քանի որ այն արագ է և շատ զգայուն: Վերջին մի քանի տասնամյակների ընթացքում մշակվել են հակաօքսիդանտային ակտիվության որոշման բազմաթիվ մեթոդներ՝ օգտագործելով FRAP մեթոդը (Աղյուսակ 1):

Աղյուսակ 1 FRAP մեթոդի մշակումը և դրա կիրառումը տարբեր առարկաների հակաօքսիդանտ ակտիվությունը որոշելու համար

	Վերլուծության օբյեկտներ	Նշումներ
	Արյան պլազմա	t=4 րոպե Ուսումնասիրվել են ռեակցիայի ստոյքիոմետրիան և հավելումը։
	Թեյ, գինի	Պոլիֆենոլների պատճառով AOA-ի որոշումը
		Համեմատվել են թեյի տարբեր տեսակների AOA արժեքները
Պուլիդո, Բրավո, Սաուրա-Կալիքստո	Մոդելային լուծումներ	t=30 րոպե Բացահայտվել է ոչ ջրային լուծիչի ազդեցությունը
	Բույսեր
	Արյուն, հյուսվածք	PIA մեթոդ. Փորձարկվել է օտար նյութերի ազդեցությունը։
Ֆիրուզի, Լականնա, Պետրուչի է.ա.	Մոդելային լուծումներ	Ուսումնասիրվել է տարբեր ԱՕ-ների որոշման զգայունությունը՝ կախված դրանց կառուցվածքից և ռեդոքսային ներուժից:
Կատալինիչ, Միլոս,	Տարբեր գինիներ
Տեմերդաշևը, Ցյուպկոն և ուրիշներ։	Մոդելային խառնուրդներ
Լոգինովա, Կոնովալովա	Դեղեր Դեղեր	Փորձարկման մեթոդ
Տեմերդաշևը, Ցյուպկոն և ուրիշներ։	Չոր կարմիր գինիներ	AOA-ի հարաբերակցությունը գինու որակի այլ ցուցանիշների հետ
Աղյուսակ 1-ի շարունակությունը
	Մոդելային խառնուրդներ	Ուսումնասիրվել է տարբեր ԱՕ-ների որոշման զգայունությունը
Վերշինին, Վլասովա, Ցյուպկո	Մոդելային խառնուրդներ	Պարզվել է, որ ազդանշանը ոչ հավելանյութ է, երբ օքսիդացնող նյութի պակաս կա
Անիսիմովիչը, Դեյնեկան և ուրիշներ։	Մոդելային լուծումներ	Առաջարկվել են AOA-ի գնահատման կինետիկ պարամետրեր:

Ծանոթագրություններ. Պայմանականորեն նշանակված է. FIA-հոսքի ներարկման վերլուծություն, TPTZ-տրիպիրիդիլտրիազին, DIP-2,2,-dipyridyl, PHEN-o-phenanthroline, DPA-pyridinedicarboxylic acid, FZ-ferrozine, AA-ascorbic acid, CT-catechol, t - ազդեցության ժամանակը, min.

Սպիտակուցների և պոլիէլեկտրոլիտների փոխազդեցությունը ջրային լուծույթներում

Սպիտակուց-պոլիէլեկտրոլիտային համալիրները բնութագրելու համար օգտագործվում են անալիտիկ տարբեր մեթոդներ։ Գործիքային մեթոդները տեղեկատվություն են տրամադրում կառուցվածքային և օպտիկական հատկությունների մասին, ինչպես նաև որոշում են ՏԸՀ-ների կապակցման դինամիկան և բնույթը...

D-մետաղների միացությունների ազդեցությունը երկբևեռ թաղանթում ջրի մոլեկուլի տարանջատման արագության վրա

Նոր BPM-ների սինթեզման գործընթացում մեծ ուշադրություն պետք է դարձնել ստացված նմուշների հատկությունների ուսումնասիրությանը սինթեզի պայմանների հետագա ընտրության համար, որոնք ապահովում են սինթեզված թաղանթների էլեկտրաքիմիական բնութագրերի բարելավումը...

Դիզայներական դեղամիջոցներ և սինթետիկ կանաբինոիդներ

Բույսերի խառնուրդներում սինթետիկ կանաբինոիդների հայտնաբերումը կարող է իրականացվել տարբեր ֆիզիկաքիմիական մեթոդներով, ինչպիսիք են քրոմատոգրաֆիա-զանգվածային սպեկտրոմետրիան, գազային քրոմատագրումը, բարակ շերտի քրոմատագրումը և բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատագրումը...

Դեղաբույսերի նյութերում ֆլավոնոիդների որոշման մեթոդի մշակում

Քինոլինոնների սինթեզ և դեղաբանական հատկություններ-2

Ուսումնասիրության առարկա՝ Քինոլինոն-2։ Հետազոտության մեթոդ. «Marvin JS» համակարգչային ծրագրի միջոցով ստեղծվել է նյութի կառուցվածքը: Այնուհետև նրան ուղարկեցին «http://www.way2drug.com/PASSONline/predict.php» կայք՝ հետագա հետազոտության համար...

Էպոքսիդային պոլիմերային գոլորշիացման արտադրանքի ուսումնասիրման ջերմային սպեկտրային մեթոդ

Խեցգետնակերպերի պատյաններից բարձր մաքրված խիտոզանի արտադրության տեխնոլոգիա

Խիտոզանի մոլեկուլային քաշի որոշում Խիտոզանի մոլեկուլային քաշը որոշվել է վիսկոմետրիկորեն՝ օգտագործելով ստանդարտ մեթոդ: Պատրաստվել են 0,05 և 0,5 գ/դլ կոնցենտրացիայի լուծույթներ՝ պոլիմերային փոշու նմուշը ացետատի բուֆերում լուծելով (0...

Բնական պարկի տարածքի ֆիզիոգրաֆիկ բնութագրերը

1 Միլենթև Վ.Ն. 2Սաննիկով Դ.Պ. 3Կազմին Վ.Մ. 2

քիմլյումինեսցենտություն

հակաօքսիդիչ ակտիվություն

պերօքսիդներ

սննդանյութեր

1. Վասիլև Ռ.Ֆ. Քիմիական փայլ // Քիմիա և քիմիկոսներ, 21.01.10. – URL՝ http://chemistry-chemists.com: (մուտքի ամսաթիվ՝ 22.08.13):

2. Վլադիմիրով Յու.Ա. Ազատ ռադիկալներ և հակաօքսիդանտներ // Vestn. RAMS. – 1998. – No 7. – P. 43–51:

3. Կոնդրաշովա Է.Ա. Քիմիալյումինեսցենցիան որպես ֆերմենտային իմունային հետազոտության և դրա կիրառման առավել զգայուն մեթոդ // Կլինիկական լաբորատոր ախտորոշում. – 1999. – No 9. – P. 32:

4. Լյուբիմով, Գ.Յու. Քիմիալյումինեսցենտային վերլուծություն // Իմունոլոգիա. – 1991. – No 1. – P. 40–49.

5. Մայանսկի Ա.Ն., Նևմյատուլին Ա.Լ., Չեբոտար Ի.Վ. Ռեակտիվ քիմիլյումինեսցենցիան ֆագոցիտոզի համակարգում // Մանրէաբանություն. – 1987. – No 1. – P. 109–115.

6. Շերսթնև Մ.Պ. Կալցիումից կախված և կալցիումից անկախ ուղիներ բջջային քիմլյումինեսցենցիայի առաջացման համար // Քիմիալյումինեսցենցիայի հարցեր. – 1991. – No 2. – P. 1–4.

Այսօր քիմիլյումինեսցենցիան ներկայացնում է գիտության մեծ տարածք, որը գտնվում է քիմիայի, ֆիզիկայի և կենսաբանության միջերեսում: Քիմիալյումինեսցենցիայի դեպքում տեղի է ունենում քիմիական էներգիայի ուղղակի փոխակերպում էլեկտրամագնիսական թրթռումների էներգիայի, այսինքն. դեպի աշխարհ Օգտագործելով քիմիլյումինեսցենտությունը, դուք կարող եք պարզել, թե ինչպես է ընթանում ռեակցիան, որն է դրա մեխանիզմը, ինչն է անհրաժեշտ տեխնոլոգիական գործընթացների արդյունավետ և արդյունավետ իրականացման համար: Եթե քիմիական արտադրանքի արտադրության տեխնոլոգիական գործընթացն ուղեկցվում է քիմլյումինեսցենտությամբ, ապա դրա ինտենսիվությունը կարող է ծառայել որպես գործընթացի արագության չափիչ. որքան արագ է ռեակցիան, այնքան ավելի պայծառ է փայլը: Քիմիալյումինեսցենտային ռեակցիայի ընթացքում ստացվում են էներգիայով հարուստ արտադրանք, որոնք այնուհետև լույս են արձակում էներգիա, այսինքն՝ քիմիական էներգիան վերածվում է էլեկտրամագնիսական ճառագայթման էներգիայի։

Հետազոտության նպատակն է ուսումնասիրել քիմիլյումինեսցենտության օգտագործման հնարավորությունը՝ սնուցիչների հակաօքսիդանտ ակտիվությունը գնահատելու համար:

Հետազոտության արդյունքներ և քննարկում

Շատ արդիական է սննդանյութերի հակաօքսիդանտ ակտիվության գնահատման խնդիրը։ «Հակաօքսիդիչ ակտիվություն» տերմինի օգտագործումը՝ որոշակի արտադրանքի օգտակարությունը ցույց տալու համար, հաճախ կատարվում է առանց որևէ քիմիական կամ կենսաքիմիական փաստարկների: Որպես կանոն, ցանկացած նյութի հակաօքսիդանտ ակտիվությունը նշանակում է պերօքսիդի արժեքի նվազեցման արդյունավետություն։ Պերօքսիդի արժեքի հենց հայեցակարգը նույնպես լիովին չի բացահայտում դրա քիմիական էությունը, քանի որ այն լիովին չի համապատասխանում որոշակի սննդամթերքի նյութափոխանակության փուլերի կինետիկային և թերմոդինամիկային: Բացի այդ, այս արժեքը օգտագործվում է ճարպերի տեսքով լիպիդները բնութագրելու համար: Սակայն օրգանիզմում օքսիդացման և պերօքսիդների առաջացման գործընթացները տեղի են ունենում ոչ միայն ճարպեր օգտագործելիս, այլ նաև այլ մթերքներ։ Այլ կերպ ասած, կոնկրետ արտադրանքում պերօքսիդի պարունակությունը կարելի է ասել, որ «կշռված» է մի տեսակ կշեռքի վրա, որտեղ «տեղեկատու կշիռը» պերօքսիդներով օքսիդացված յոդիդի իոնի թթվային միջավայրում կոնցենտրացիայի միավորն է, որպես որի արդյունքում առաջանում է մոլեկուլային յոդ.

I- - e → I; (1)

I + I → I20. (2)

Երբ մոլեկուլային յոդը տիտրում են նատրիումի թիոսուլֆատ պարունակող լուծույթով, հաստատվում է դրա կոնցենտրացիան և, հետևաբար, որոշվում է օքսիդացող յոդիդի իոնների քանակը, այսինքն. պերօքսիդի միացություններ, որն իրականում կոչվում է պերօքսիդի թիվ։ Այս տեսակի «կշռման» միջոցով պերօքսիդի քանակի որոշումը հիմնված է Նկ. 1.

Բրինձ. 1. Պերօքսիդի արժեքի որոշում՝ օգտագործելով նատրիումի թիոսուլֆատ

Այսպիսով, պերօքսիդների կոնցենտրացիան որոշվում է հավասարումից

С(I2) = ϒ(C[-O-O-]), (3)

որտեղ ϒ-ը մոլեկուլային յոդի և պերօքսիդների կոնցենտրացիայի միջև հարաբերակցության գործակիցն է:

Արտադրանքում պերօքսիդների որոշման մեր առաջարկած մեթոդը հիմնված է ալկալային միջավայրում լյումինոլի (C[lm]) քիմլյումինեսցենտության վրա, որի ինտենսիվությունը (Ichl) կախված է պերօքսիդների (C[-O-O-]) կոնցենտրացիայից: chemiluminescent նմուշ:

IHL = Ϧхл ω, (4)

որտեղ Ϧhl-ը քիմլյումինեսցենցիայի քվանտային ելքն է. ω - ռեակցիայի արագությունը, որը ներառում է պերօքսիդներ.

khlC[-O-O-] C[lm] = ω, (5)

որտեղ khl-ը ռեակցիայի արագության հաստատուն է կամ ժամը՝

C[lm] khl Ϧkhl = K, (6)

IHL = K C[ -O-O-]: (7).

Պերօքսիդների քանակը (-O-O-) որոշվում է լուսային գումարով (S):

S-ի արժեքը կախված է քիմլյումինեսցենտ ռեակցիայում պերօքսիդի ամբողջական սպառման աստիճանից։

K հաստատունը որոշելու համար կառուցվում է տրամաչափման կոր՝ S լույսի գումարի կախվածության համար պերօքսիդի կոնցենտրացիայից, որը սահմանվում է տիտրման միջոցով.

S = f(C[-O-O-]): (9)

Ջրածնի պերօքսիդ H2O2 օգտագործվում է որպես պերօքսիդ:

Այնուհետև համեմատվում են (3) և (9) հավասարումից ստացված տվյալները: ϒ-ի և K-ի համեմատության հիման վրա եզրակացություն է արվում այս մեթոդներով պերօքսիդների որոշման հիմքում ընկած ռեակցիայի մեխանիզմների համաձայնության մասին: Պարզվել է, որ պերօքսիդի կոնցենտրացիաների այս միջակայքում ϒ և K իրականում համընկնում են միմյանց հետ և, հետևաբար, դրանք կարող են օգտագործվել պերօքսիդի թիվը որոշելու համար:

Լյումինոլ պարունակող ալկալային միջավայրում (5-ամինո-1,2,3,4-տետրահիդրո-1,4-ֆտալազինեդիոն, 3-ամինոֆտալաթթվի հիդրազիդ, H2L) նկատվել է քիմիլյումինեսցենտություն: Այն արձանագրվել է քիմլյումինեսցենտ սարքավորման միջոցով, որը ներառում է ապակու վակուումային ֆոտոմուլտիպլիկատոր: Ֆոտոմուլտիպլիկատորը սնուցվում է բարձր լարման ուղղիչով (7), որը միացված է բլոկին (9), որն ուժեղացնում է ֆոտոբազմապատկիչի ազդանշանը, որը գրանցվում է համակարգչի մոնիտորի էկրանին (5):

Բրինձ. 2. Վերլուծված արտադրանքի քիմլյումինեսցենտության գրանցում. 1 - դոզավորման պոմպ; 2 - լուսակայուն խցիկ; 3 - հայելի; 4 - cuvette; 5 - համակարգչային համակարգ; 6 - ֆոտոմուլտիպլիկատոր; 7 - բարձր լարման ուղղիչ; 8 - սարք, որը թույլ է տալիս որոշել քիմլյումինեսցենտային ճառագայթման սպեկտրային շրջանը. 9 - բլոկ, որն ուժեղացնում է ֆոտոմուլտիպլիկատորի ազդանշանը

Դոզավորման պոմպ (1) անհրաժեշտ է վերլուծված նմուշը լյումինոլի քիմլյումինեսցենտ լուծույթ պարունակող կուվետ (4) ներմուծելու համար: Այս դիսպենսերը գործում է որպես խառնիչ ներարկված նմուշի համար քիմլյումինեսցենտ լուծույթով: Ռեակցիայի արագությունը և քիմլյումինեսցենտության ինտենսիվությունը բարձրացնելու համար լյումինոլին ավելացվել է կալիումի երկաթի սուլֆիդի լուծույթ: Խառնումն իրականացվում է օդային փուչիկներով, որոնք ստացվում են լուծույթի հեղուկով օդը մղելու միջոցով։ Հայելին (3), որը գտնվում է լուսակայուն խցիկում (2), ծառայում է լույսը պաշտպանող խցիկում տեղադրված ֆոտոբազմապատկիչի (6) ֆոտոկաթոդի վրա քիմլյումինեսցենտ ճառագայթման ավելի լավ հավաքագրման համար: Դիսպենսերը թույլ է տալիս Ձեզ անհրաժեշտ հեղուկ բաղադրիչները ներդնել կյուվետի մեջ՝ փորձերի ընթացքում չբացելով լուսամուր խցիկը (2): Այս դեպքում այդ հեղուկները մտնում են կուվետ (4) ապակե կամ պլաստմասե խողովակների միջոցով: Համակարգչային համակարգը հնարավորություն է տալիս արձանագրել շողերի I ինտենսիվության կախվածությունը t ժամանակից, այսինքն՝ քիմլյումինեսցենցիայի կինետիկան.

Համակարգչային համակարգը արտացոլում է I = f(t) ֆունկցիայի բարձրացման և անկման հաստատունները, որոնք կապված են քիմլյումինեսցենտություն առաջացնող ռեակցիաների արագության հաստատունների հետ, այսինքն՝ դրանց կինետիկայի հետ։ Քիմիալյումինեսցենտային խցիկում ներառված է սարք (8), որը հնարավորություն է տալիս որոշել քիմլյումինեսցենտային ճառագայթման սպեկտրային շրջանը, այսինքն՝ կախվածությունը.

I = f1 (λ). (տասնմեկ)

Այս բլոկը սկավառակի տեսքով ձայներիզ է, որի մեջ տեղադրվում են սահմանային զտիչներ: Զտիչների փոփոխությունն իրականացվում է սկավառակի ձայներիզը պտտելով ֆիլտրերի հարթության կենտրոնները և ֆոտոբազմապատկիչի ֆոտոկաթոդի հարթությունը միացնող հորիզոնական առանցքի նկատմամբ։

Չափման գործընթացն իրականացվում է հետևյալ կերպ.

1. Հաստատվում է ֆոտոբազմապատկիչի արձագանքը սնուցման լարման փոփոխություններին և նրա կաթոդի վրա ընկնող հղման լույսի աղբյուրի ինտենսիվության փոփոխություններին:

2. Կյուվետը լցվում է ալկալային միջավայրում լյումինոլի լուծույթով:

3. Դիսպենսերը լցված է վերլուծված նմուշով:

4. Արձանագրվում է քիմլյումինեսցենտության ինտենսիվության կախվածությունը t ժամանակից: Քիմլյումինեսցենցիայի դիտարկումները կատարվում են մինչև t1 ժամանակը, որի ժամանակ t ժամանակից I1-ի փոփոխությունը նվազագույն է՝ I1 = f1(t):

5. Վերլուծված լուծույթի մի մասը մատակարարվում է դիսպենսերի միջոցով:

6. Դիտարկվում է վերլուծված նմուշի քիմլյումինեսցենտություն, որի կինետիկան I = f(t) է։

Նկ. Նկար 3-ը ցույց է տալիս ֆունկցիաների (I1 = f1(t)) կախվածության գրաֆիկը, որը կապված է գրաֆիկի հետ (I = f(t)), վերլուծված լուծույթի ներդրումից հետո:

Ինչպես երևում է Նկ. 3, լյումինոլի քիմլյումինեսցենցիայի ինտենսիվությունը փոխվում է. վերլուծված նմուշը ավելացնելուց հետո կտրուկ բարձրացմանը հաջորդում է լյումինեսցենտության կտրուկ անկումը:

Քանի որ լյումինոլի օքսիդացման ընթացքում քիմիլյումինեսցենցիայի աճը կապված է պերօքսիդների առաջացման հետ, վերլուծված նմուշի ներմուծումից հետո քիմլյումինեսցենցիայի ինտենսիվության նվազումը ցույց է տալիս դրանց քանակի նվազում: Հետևաբար, կարելի է խոսել վերլուծված նմուշում ընդգրկված միացություններում հակաօքսիդանտ ակտիվության առկայության մասին։

Հարկ է նշել, որ վերլուծված նմուշը չոր ցածր ջերմաստիճանի թորման միջոցով ստացված խտուտիկի էքստրակտ էր, որը պարունակում է ֆենոլային միացություններ, որոնք հայտնի են իրենց բարձր հակաօքսիդանտ ակտիվությամբ։

Բրինձ. 3. Ֆունկցիայի կախվածության գրաֆիկ (I1 = f1(t)), զուգորդված գրաֆիկի հետ (I = f(t)), վերլուծված լուծույթի ներդրումից հետո

Բացի այդ, փորձը պարզեց, որ քիմլյումինեսցենցիայի միջոցով հնարավոր է որոշել պերօքսիդների քանակը ծայրահեղ նոսրացված համակարգերում, ինչը կարևոր է արտադրանքի օքսիդացման սկիզբը գնահատելու համար, օրինակ, պահեստավորման ընթացքում:

Այսպիսով, ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ արտադրանքներում պերօքսիդների որոշման մեթոդը, որը հիմնված է ալկալային միջավայրում լյումինոլի քիմլյումինեսցենցիայի վրա, հնարավորություն է տալիս գնահատել սննդային նյութերի հակաօքսիդանտ ակտիվությունը և կարող է օգտագործվել սննդի տարբեր միացությունների հակաօքսիդանտ հատկությունները հաստատելու համար։ .

Գրախոսներ.

Լիտվինովա Է.Վ., Տեխնիկական գիտությունների դոկտոր, «ՕրելԳԻԵՏ» բարձրագույն մասնագիտական կրթության դաշնային պետական բյուջետային ուսումնական հաստատության տեխնոլոգիայի, կազմակերպման և սննդի հիգիենայի ամբիոնի պրոֆեսոր, Օրել;

Կովալևա Օ.Ա., կենսաբանական գիտությունների դոկտոր, ինստիտուտի տնօրեն, բարձրագույն մասնագիտական \u200b\u200bկրթության դաշնային պետական բյուջետային ուսումնական հաստատություն «Օրյոլի պետական ագրարային համալսարան», Օրել.

Աշխատությունը խմբագրությունը ստացել է 2013 թվականի նոյեմբերի 8-ին։

Մատենագիտական հղում

Panichkin A.V., Bolshakova L.S., Milentyev V.N., Sannikov D.P., Kazmin V.M. ՔԻՄԻԼՈՒՄԻՆԵՍՑԵՆՑՈՒԹՅԱՆ ՕԳՏԱԳՈՐԾՈՒՄԸ ՍՆՆԴԻ ՆՅՈՒԹԵՐԻ ՀԱԿԱՔՍԻԴԱՆՏ ՀԱՏԿՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐԸ ԳՆԱՀԱՏԵԼՈՒ ՀԱՄԱՐ // Հիմնարար հետազոտություն. - 2013. - Թիվ 10-11. – S. 2436-2439;
URL՝ http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=32810 (մուտքի ամսաթիվ՝ 17.12.2019): Ձեր ուշադրությանն ենք ներկայացնում «Բնական գիտությունների ակադեմիա» հրատարակչության հրատարակած ամսագրերը.

Քիմիալյումինեսցենտային ընդհանուր հակաօքսիդանտային հզորության որոշում բուժիչ բույսերում

Գիտական ​​աշխատանքի տեքստ «Դեղաբույսերի նյութերում հակաօքսիդանտային ընդհանուր հզորության որոշման քիմիական լյումինեսցենտ մեթոդ» թեմայով

Մատենագիտական ​​հղում

1.4 Հակաօքսիդանտ հետազոտության մեթոդներ

Մատենագիտական ​​հղում

Բջջային օրգանելների գործառույթները

Հասարակագիտության մեջ շարադրություն գրելու ալգորիթմ

Չեռնոբիլը ականատեսների հուշերում Չեռնոբիլի սարսափելի պատմություններ

Գիտական աշխատանքի տեքստ «Դեղաբույսերի նյութերում հակաօքսիդանտային ընդհանուր հզորության որոշման քիմիական լյումինեսցենտ մեթոդ» թեմայով

Մատենագիտական հղում

Մատենագիտական հղում