وزارت بهداشت فدراسیون روسیه
مجوز عمومی داروسازی
اعتبار سنجی رویه های تحلیلی OFS.1.1.0012.15
برای اولین بار معرفی شد
اعتبارسنجی یک تکنیک تحلیلی، اثبات تجربی است که این تکنیک برای حل مسائل مورد نظر مناسب است.
این مونوگراف فارمکوپه عمومی ویژگی های روش های تحلیلی تعیین شده برای اعتبار سنجی آنها و معیارهای مربوطه را برای مناسب بودن روش های معتبر در نظر گرفته شده برای کنترل کیفیت محصولات دارویی تنظیم می کند: مواد دارویی و فرآورده های دارویی.
روشهای تعیین کمی، از جمله روشهای تعیین ناخالصی‌ها و روشهای تعیین حد محتوا، مشمول اعتبار هستند. روش های احراز هویت در صورت لزوم برای تأیید ویژگی آنها تأیید می شوند.
در طول اعتبارسنجی، روش تحلیلی با توجه به ویژگی های ذکر شده در زیر ارزیابی می شود که با در نظر گرفتن توصیه های معمول ارائه شده در جدول انتخاب شده است:
- اختصاصی؛
- حد تشخیص؛
- حد تعیین کمی (حد کمی);
- حوزه تحلیلی (محدوده)؛
- خطی بودن (خطی بودن);
- صحت (حقیقت)؛
- دقت (دقت)؛
- پایداری (استحکام).
جدول 1 - ویژگی های روش های تعیین شده در طول اعتبار سنجی
|
نام مشخصات |
انواع اصلی روش ها | ||||
| تست اصالت | ماده خارجی | کمی سازی | |||
| روش های کمی | محدودیت محتوا | ماده فعال اصلی، اجزای استاندارد | ماده فعال در آزمایش "انحلال". | ||
| اختصاصی **) | آره | آره | آره | آره | آره |
| حد تشخیص | خیر | خیر | آره | خیر | خیر |
| حد کمیت | خیر | آره | خیر | خیر | خیر |
| حوزه تحلیلی | خیر | آره | خیر | آره | آره |
| خطی بودن | خیر | آره | خیر | آره | آره |
| درست | خیر | آره | * | آره | آره |
| دقت، درستی :
- تکرارپذیری (همگرایی) - حد واسط دقت (داخل آزمایشگاهی). |
|||||
| پایداری | خیر | * | * | * | * |
*) را می توان در صورت لزوم تعیین کرد.
**) عدم اختصاصیت یک روش تحلیلی را می توان با استفاده از روش تحلیلی دیگر جبران کرد.
اعتبار سنجی مجدد (تأیید مجدد) روش ها زمانی انجام می شود که:
- فن آوری برای به دست آوردن هدف تجزیه و تحلیل؛
- ترکیب محصول دارویی (موضوع تجزیه و تحلیل)؛
- روش تجزیه و تحلیل قبلا تایید شده است.
اختصاصی
ویژگی توانایی یک روش تحلیلی برای ارزیابی بدون ابهام یک آنالیت در حضور اجزای همزمان است.
شواهدی از ویژگی یک تکنیک معتبر معمولاً بر اساس در نظر گرفتن داده های به دست آمده با استفاده از آن از تجزیه و تحلیل مخلوط های مدل از ترکیب شناخته شده است.
ویژگی یک تکنیک معتبر را نیز می توان با پردازش آماری مناسب نتایج تجزیه و تحلیل اشیاء واقعی که با استفاده از آن انجام می شود و به موازات آن با استفاده از تکنیک دیگری که مشخصاً خاص است (تکنیکی که ویژگی آن ثابت شده است) اثبات کرد.
1.1 برای روش های تست هویت
یک روش معتبر (یا مجموعه‌ای از روش‌ها) باید اطلاعات قابل اعتمادی در مورد وجود یک ماده فعال معین در یک ماده یا شکل دوز ارائه دهد، در صورتی که حاوی اجزای پیش‌بینی‌شده در فرمول باشد، که منوط به تأیید تجربی است.
اصالت ماده فعال در ماده دارویی یا فرآورده دارویی در مقایسه با نمونه استاندارد یا با خواص فیزیکی و شیمیایی یا شیمیایی که مشخصه سایر اجزا نیست، مشخص می شود.
1.2 برای روش های آزمایش کمی و ناخالصی
برای یک روش کمی تایید شده و آزمایش ناخالصی ها، از همان رویکردها استفاده می شود - ویژگی آن در رابطه با آنالیت باید ارزیابی شود، یعنی باید به طور تجربی تأیید شود که وجود اجزای همراه بر نتیجه آنالیز در یک ناخواسته تأثیر نمی گذارد. مسیر.
امکان ارزیابی ویژگی روش تایید شده هم از طریق تجزیه و تحلیل مخلوط های مدل از ترکیب شناخته شده حاوی آنالیت و هم با مقایسه نتایج تجزیه و تحلیل اشیاء واقعی به دست آمده به طور همزمان با استفاده از روش های معتبر و مشخصاً خاص دیگر مجاز است. نتایج آزمایش های مربوطه باید به صورت آماری پردازش شود.
فقدان ویژگی آزمون را می توان با آزمون(های) دیگر جبران کرد.
هنگام تأیید روش‌ها، در صورت لزوم، می‌توان از نمونه‌هایی از فرآورده‌های دارویی که در شرایط شدید (نور، دما، رطوبت) قرار گرفته‌اند یا از نظر شیمیایی به هر طریق مناسب اصلاح شده‌اند، برای تجمع ناخالصی‌ها در آنها استفاده کرد.
برای تکنیک‌های کروماتوگرافی، تفکیک پذیری بین دو ماده شسته‌شونده را در غلظت‌های مربوطه نشان دهید.
محدودیت تشخیص
حد تشخیص کمترین مقدار (غلظت) یک آنالیت در یک نمونه است که با استفاده از یک تکنیک معتبر قابل تشخیص (یا تقریب) است.
حد تشخیص در موارد نشان داده شده در جدول معمولاً به عنوان غلظت آنالیت (در درصد نسبی یا قسمت در میلیون - ppm) بیان می شود.
بسته به نوع تکنیک (بصری یا ابزاری)، روش های مختلفی برای تعیین حد تشخیص استفاده می شود.
2.1 برای روش هایی با ارزیابی بصری نتیجه تجزیه و تحلیل
نمونه ها را با مقادیر مختلف (غلظت) آنالیت آزمایش کنید و حداقل مقداری را تعیین کنید که در آن نتیجه آنالیز به صورت بصری ارزیابی شود. این مقدار تخمینی از حد تشخیص است.
2.2 برای روش هایی با ارزیابی ابزاری نتیجه تجزیه و تحلیل
2.2.1 بر اساس نسبت سیگنال به نویز
این رویکرد برای روش هایی که نویز پایه برای آنها مشاهده می شود، قابل اجرا است. مقادیر سیگنال به‌دست‌آمده برای آزمایش کنترل و نمونه‌هایی با غلظت کم آنالیت را مقایسه کنید. حداقل مقدار (غلظت) آنالیت را در نمونه تنظیم کنید که در آن نسبت سیگنال تحلیلی به سطح نویز برابر با 3 باشد.
مقدار یافت شده تخمینی از حد تشخیص است.
2.2.2 با مقدار انحراف استاندارد سیگنال و شیب منحنی کالیبراسیون
حد تشخیص (LO) با معادله پیدا می شود:
روشن = 3.3 اس/ب
جایی که اس
بضریب حساسیت است که نسبت سیگنال تحلیلی به مقدار تعیین شده (مماس شیب منحنی کالیبراسیون) است.
اسو ب
اس S aعبارت آزاد معادله این نمودار. مقدار به دست آمده از حد تشخیص، در صورت لزوم، می تواند با آزمایش مستقیم در مقادیر (غلظت) آنالیت نزدیک به مقدار یافت شده حد تشخیص تأیید شود.
به عنوان یک قاعده، اگر شواهدی دال بر مناسب بودن روشی برای تعیین قابل اعتماد یک ماده در غلظت های بالاتر و پایین تر از حد محتوای تعیین شده توسط مشخصات وجود داشته باشد، نیازی به تعیین حد واقعی تشخیص برای چنین روشی نیست. .
محدودیت کمیت
حد کمیت، کوچکترین مقدار (غلظت) یک ماده در یک نمونه است که می توان با استفاده از روش تایید شده با دقت مورد نیاز و دقت درون آزمایشگاهی (متوسط) کمی سازی کرد.
حد کمیت یک مشخصه اعتبار سنجی ضروری برای روش هایی است که برای ارزیابی مقادیر کم (غلظت) مواد در یک نمونه و به ویژه برای ارزیابی محتوای ناخالصی ها استفاده می شود.
بسته به نوع تکنیک، از روش های زیر برای یافتن حد کمی استفاده می شود.
3.1 برای روش هایی با ارزیابی بصری نتیجه تجزیه و تحلیل
نمونه ها را با مقادیر مختلف (غلظت) آنالیت آزمایش کنید و حداقل مقداری را تعیین کنید که در آن می توان نتیجه آنالیز را به صورت بصری با دقت لازم و دقت درون آزمایشگاهی (متوسط) به دست آورد.
3.2 برای روش هایی با ارزیابی ابزاری نتیجه تجزیه و تحلیل
3.2.1 نسبت سیگنال به نویز
حداقل غلظت آنالیت را در نمونه تنظیم کنید که در آن نسبت سیگنال تحلیلی به سطح نویز حدود 10:1 باشد.
3.2.2 با مقدار انحراف استاندارد سیگنال و شیب منحنی کالیبراسیون
حد کمیت (LOQ) با استفاده از معادله محاسبه می شود:
FSP = 10 اس/ب
جایی که اسانحراف استاندارد سیگنال تحلیلی است.
بضریب حساسیت است که نسبت سیگنال تحلیلی به مقدار تعیین شده است.
در حضور داده های تجربی در طیف وسیعی از مقادیر اندازه گیری شده اسو بمی توان با روش حداقل مربعات تخمین زد.
برای نمودار کالیبراسیون خطی، مقدار اسبرابر با انحراف معیار گرفته می شود S aعبارت آزاد معادله این نمودار. مقدار بدست آمده از حد تعیین کمی را در صورت لزوم می توان با آزمایش مستقیم در مقادیر (غلظت) آنالیت نزدیک به مقدار یافت شده حد تعیین کمی تأیید کرد.
اگر شواهدی دال بر توانایی روشی برای شناسایی قابل اعتماد آنالیت در غلظت های بالاتر و کمتر از حد مشخصات آن وجود داشته باشد، معمولاً تعیین مقدار واقعی حد کمی برای چنین روشی ضروری نیست.
زمینه تحلیلی روش
ناحیه تحلیلی تکنیک فاصله بین مقادیر بالایی و پایینی ویژگی های تحلیلی جزء تعیین شده در موضوع تجزیه و تحلیل (کمیت، غلظت، فعالیت و غیره) است. در این محدوده، نتایج به‌دست‌آمده با استفاده از روشی که اعتبارسنجی می‌شود باید سطح قابل قبولی از دقت و دقت درون آزمایشگاهی (متوسط) داشته باشد.
الزامات زیر بر روی اندازه منطقه تحلیلی روش ها اعمال می شود:
- روش های تعیین کمی باید در محدوده 80 تا 120٪ از مقدار اسمی مشخصه تحلیلی تعیین شده قابل استفاده باشد.
- روشهای ارزیابی یکنواختی دوز باید در محدوده 70 تا 130٪ از دوز اسمی قابل استفاده باشد.
- روش های کمی سازی مورد استفاده در آزمایش انحلال عموماً باید در محدوده 50 تا 120 درصد غلظت مورد انتظار ماده فعال در محیط انحلال قابل استفاده باشد.
- روش های آزمایش خلوص باید در محدوده "محدودیت کمی" یا "محدودیت تشخیص" تا 120 درصد محتوای مجاز ناخالصی تعیین شده قابل اجرا باشد.
دامنه تحلیلی تکنیک را می توان با دامنه داده های تجربی که مدل خطی را برآورده می کند، تنظیم کرد.
خطی بودن
خطی بودن تکنیک وجود یک وابستگی خطی سیگنال تحلیلی به غلظت یا مقدار آنالیت در نمونه آنالیز شده در ناحیه تحلیلی تکنیک است.
هنگام اعتبارسنجی یک روش، خطی بودن آن در ناحیه تحلیلی با اندازه‌گیری سیگنال‌های تحلیلی برای حداقل 5 نمونه با مقادیر یا غلظت‌های مختلف آنالیت به صورت تجربی تأیید می‌شود. داده های تجربی با استفاده از مدل خطی به روش حداقل مربعات پردازش می شوند:
y = ب · ایکس + آ,
ایکس- مقدار یا غلظت آنالیت؛
yبزرگی پاسخ است.
ب- ضریب زاویه ای؛
آ- اصطلاح آزاد (OFS "پردازش آماری نتایج یک آزمایش شیمیایی").
ارزش ها باید محاسبه و ارائه شوند. ب, آو ضریب همبستگی r. در بیشتر موارد از وابستگی های خطی استفاده می شود که شرط 0.99 را دارند و فقط هنگام تجزیه و تحلیل مقادیر ردیابی، وابستگی های خطی در نظر گرفته می شود که برای آنها 0.9 است.
در برخی موارد، امکان تقریب خطی داده های تجربی تنها پس از تبدیل ریاضی آنها (مثلاً با گرفتن لگاریتم) فراهم می شود.
برای برخی از روش های تجزیه و تحلیل، که در اصل نمی توان بر اساس یک رابطه خطی بین داده های تجربی استوار باشد، تعیین غلظت یا مقدار یک ماده با استفاده از نمودارهای کالیبراسیون غیر خطی انجام می شود. در این حالت نمودار وابستگی سیگنال تحلیلی به مقدار یا غلظت آنالیت را می توان با یک تابع غیر خطی مناسب با استفاده از روش حداقل مربعات تقریب زد که با نرم افزار معتبر معتبر مناسب امکان پذیر است.
درست
صحت این تکنیک با انحراف میانگین نتیجه تعیین‌های انجام شده با استفاده از آن از مقدار واقعی در نظر گرفته شده مشخص می‌شود.
یک تکنیک معتبر در صورتی صحیح تشخیص داده می شود که مقادیر واقعی در فواصل اطمینان حاصل از میانگین نتایج تجزیه و تحلیل های به دست آمده به طور تجربی با استفاده از این تکنیک باشد.
روشهای زیر برای ارزیابی اعتبار روشهای کمی قابل استفاده هستند:
الف) تجزیه و تحلیل با استفاده از روش معتبر نمونه‌های استاندارد یا مخلوط‌های مدل با محتوای (غلظت) مشخص آنالیت؛
ب) مقایسه نتایج به دست آمده با استفاده از روش معتبر و روش نمونه که صحت آن قبلاً ثابت شده است.
ج) در نظر گرفتن نتایج حاصل از مطالعه خطی بودن روش تایید شده: اگر عبارت آزاد در معادله ارائه شده در بخش 5 تفاوت آماری معنی داری با صفر نداشته باشد، استفاده از چنین روش شناسی نتایجی عاری از خطای سیستماتیک به دست می دهد.
برای رویکردهای "a" و "b" می توان داده های به دست آمده را در قالب یک معادله وابستگی خطی (رگرسیون) بین مقادیر تجربی و واقعی ارائه کرد. برای این معادله، فرضیه های مربوط به برابری مماس زاویه شیب بر وحدت بررسی می شود. بو بر تساوی صفر جمله آزاد آ. به عنوان یک قاعده، اگر این فرضیه ها با درجه ای از قابلیت اطمینان برابر با 0.05 درست تشخیص داده شوند، آنگاه استفاده از یک روش تایید شده نتایج صحیح، یعنی عاری از خطای سیستماتیک را به دست می دهد.
دقت، درستی
دقت یک تکنیک با پراکندگی نتایج به دست آمده با استفاده از آن نسبت به مقدار میانگین نتیجه مشخص می شود. اندازه گیری چنین پراکندگی مقدار انحراف استاندارد نتیجه یک تعیین واحد است که برای نمونه ای با اندازه کافی بزرگ به دست می آید.
دقت برای هر روش کمی با حداقل سه تعیین برای هر یک از سه سطح آنالیت (کم، متوسط و زیاد) که در محدوده تحلیلی روش قرار دارند، ارزیابی می‌شود. همچنین می‌توان تکرارپذیری را برای هر روش سنجش از حداقل شش تعیین برای نمونه‌هایی با محتوای آنالیت تقریباً اسمی ارزیابی کرد. در بسیاری از موارد، ارزیابی دقت را می توان بر اساس نتایج پردازش داده های تجربی با استفاده از روش حداقل مربعات انجام داد، همانطور که در GPM "پردازش آماری نتایج یک آزمایش شیمیایی" نشان داده شده است.
دقت باید بر روی نمونه های همگن آزمایش شود و به سه روش قابل ارزیابی است:
- به عنوان تکرارپذیری (همگرایی)؛
- به عنوان دقت داخل آزمایشگاهی (متوسط)؛
- به عنوان دقت بین آزمایشگاهی (تکرارپذیری).
نتایج ارزیابی روش تجزیه و تحلیل برای هر یک از گزینه ها برای دقت معمولاً با مقدار متناظر انحراف استاندارد نتیجه یک تعیین جداگانه مشخص می شود.
معمولاً هنگام توسعه یک تکنیک اصلی، تکرارپذیری (همگرایی) نتایج به دست آمده با استفاده از آن تعیین می شود. در صورت لزوم گنجاندن روش توسعه یافته در اسناد نظارتی، دقت درون آزمایشگاهی (متوسط) آن نیز تعیین می شود. دقت بین آزمایشگاهی (تکرارپذیری) یک روش زمانی ارزیابی می شود که قرار باشد در پیش نویس تک نگاری عمومی داروسازی، تک نگاری فارمکوپه، یا در اسناد نظارتی برای مواد مرجع داروسازی گنجانده شود.
7.1 تکرارپذیری (همگرایی)
تکرارپذیری یک روش تحلیلی با نتایج مستقلی که تحت شرایط تنظیم شده یکسان در همان آزمایشگاه (همان مجری، همان تجهیزات، همان مجموعه معرف‌ها) در مدت زمان کوتاهی به دست می‌آیند، ارزیابی می‌شود.
7.2 دقت داخل آزمایشگاهی (متوسط)
دقت درون آزمایشگاهی (متوسط) روش در حال تایید در شرایط آزمایشگاهی یکسان (روزهای مختلف، اجراکنندگان مختلف، تجهیزات مختلف و غیره) ارزیابی می‌شود.
7.3 دقت بین آزمایشگاهی (تکرارپذیری)
دقت بین آزمایشگاهی (تکرارپذیری) یک روش معتبر هنگام آزمایش در آزمایشگاه های مختلف ارزیابی می شود.
ثبات
پایداری یک تکنیک معتبر، توانایی حفظ ویژگی های یافت شده برای آن در شرایط بهینه (اسمی) ارائه شده در جدول، با انحرافات کوچک احتمالی از این شرایط تحلیل است.
استحکام روش نباید در رابطه با شرایط سنجش به راحتی کنترل شود. این امر نیاز به مطالعه پایداری ویژه را به شدت کاهش می دهد.
پایداری تنها در صورتی باید مورد مطالعه قرار گیرد که روش تایید شده مبتنی بر استفاده از روشهای حساس به محیط زیست آنالیز باشد، مانند انواع مختلف کروماتوگرافی و آنالیز عملکردی. در صورت لزوم، ارزیابی پایداری روش در مرحله توسعه آن انجام می شود. اگر پایداری کم تکنیک محتمل باشد، مناسب بودن آن بدون شکست مستقیماً در فرآیند استفاده عملی بررسی می شود.
اعتبار سنجی سیستم تحلیلی
اعتبارسنجی تناسب یک سیستم تحلیلی تأییدی بر تحقق الزامات اساسی آن است. سیستمی که مناسب بودن آن در حال آزمایش است، مجموعه ای از ابزار خاص، معرف ها، استانداردها و نمونه های تحت آنالیز است. الزامات چنین سیستمی معمولاً در تک نگاری عمومی برای روش تحلیلی مربوطه مشخص می شود. بنابراین، آزمایش تناسب سیستم تحلیلی به روشی تبدیل می‌شود که در روش تأیید اعتبار گنجانده شده است.
ارائه نتایج اعتبار سنجی
پروتکل اعتبارسنجی برای روش تحلیلی باید شامل موارد زیر باشد:
- شرح کامل آن، برای بازتولید کافی و منعکس کننده تمام شرایط لازم برای انجام تجزیه و تحلیل؛
- ویژگی های ارزیابی شده؛
- تمام نتایج اولیه که در پردازش داده های آماری گنجانده شده است.
- نتایج پردازش آماری داده‌های به‌دست‌آمده به‌طور تجربی در طول توسعه یا تأیید روش‌شناسی معتبر؛
- مواد گویا، مانند کپی‌هایی از کروماتوگرام‌های به‌دست‌آمده از کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا یا کروماتوگرافی گازی؛ الکتروفورگرام، طیف الکترونیکی و مادون قرمز؛ عکس‌ها یا نقشه‌های کروماتوگرام‌های به‌دست‌آمده از کروماتوگرافی لایه نازک یا کاغذی؛ نقشه های منحنی تیتراسیون، نمودارهای کالیبراسیون؛
- نتیجه گیری در مورد مناسب بودن روشی که برای گنجاندن در سند نظارتی تأیید شده است.
مواد اعتبار سنجی برای روش های تحلیلی فردی باید در قالب یک گزارش اعتبار سنجی ترکیبی ارائه شود.
هر روش ابزاری با سطح مشخصی از نویز مرتبط با ویژگی های فرآیند اندازه گیری مشخص می شود. بنابراین، همیشه یک حد فراوانی وجود دارد که زیر آن به هیچ وجه نمی توان یک ماده را به طور قابل اعتماد تشخیص داد.
حد تشخیص Cmin , P - کمترین محتوایی که وجود یک جزء با احتمال اطمینان معین را می توان با استفاده از این روش تشخیص داد.
حد تشخیص را می توان با حداقل سیگنال تحلیلی y min نیز تنظیم کرد که می تواند با اطمینان از سیگنال پس زمینه آزمایش کنترل - y متمایز شود.
روش های آماری با استفاده از نابرابری چبیشف ثابت کرد که حد تشخیص را می توان به صورت کمی با استفاده از عبارت تعیین کرد.
جایی که پس زمینه انحراف استاندارد سیگنال تحلیلی پس زمینه است. S ضریب حساسیت است (گاهی اوقات به سادگی "حساسیت" نامیده می شود)، پاسخ سیگنال تحلیلی به محتوای جزء را مشخص می کند. ضریب حساسیت مقدار اولین مشتق تابع کالیبراسیون برای تعیین غلظت معین است. برای نمودارهای کالیبراسیون مستطیلی، این مماس زاویه شیب است:
(توجه: گیج نشو فاکتور حساسیتاسشرکت انحراف معیارس!)
روش های دیگری برای محاسبه حد تشخیص وجود دارد، اما این معادله رایج ترین مورد استفاده است.
در تجزیه و تحلیل شیمیایی کمی، معمولاً محدوده ای از محتویات یا غلظت های قابل تشخیص داده می شود. این به معنای محدوده مقادیر محتویات تعیین شده (غلظت) است که توسط این روش ارائه می شود و با محدودیت های پایین و بالایی غلظت های تعیین شده محدود می شود.
تجزیه و تحلیل ها اغلب به حد پایین تر غلظت های تعیین شده علاقه مند هستند با nیا محتوا متر nجزء تعیین شده توسط این روش. فراتر از حد پایین محتویات تعیین شدهمعمولاً حداقل مقدار یا غلظتی را که می توان با یک انحراف استاندارد نسبی تعیین کرد، مصرف می کند
. .
مثال
غلظت جرمی آهن در محلول با روش اسپکتروفتومتری با اندازه‌گیری چگالی نوری محلول‌های رنگ‌شده در نتیجه برهمکنش یون Fe 3+ با اسید سولفوسالیسیلیک تعیین شد. برای ایجاد یک وابستگی کالیبراسیون، چگالی نوری محلول‌ها با افزایش غلظت آهن (داده‌شده) تیمار شده با اسید سولفوسالیسیلیک اندازه‌گیری شد.
چگالی نوری محلول مرجع (آزمایش کنترل برای معرف ها، یعنی بدون افزودن آهن، (پس زمینه) 0.002؛ 0.000؛ 0.008؛ 0.006؛ 0.003 بود.
محاسبهحد تشخیص آهن
راه حل
1) در نتیجه محاسبات با روش حداقل مربعات (به مثال برای کار کنترلی شماره 5 مراجعه کنید)، مقادیر برای ساخت یک نمودار کالیبراسیون به دست آمد.
مقادیر محاسبه شده برای ساخت یک نمودار کالیبراسیون
2) ما ضریب حساسیت، یعنی ضریب زاویه ای وابستگی کالیبراسیون (S) را مطابق جدول محاسبه می کنیم.
3) محاسبه کنید انحراف استاندارد سیگنال پس زمینه، چیست 0,0032 واحدهای چگالی نوری
4) حد تشخیص mg/cm 3 خواهد بود
کنترل کار شماره 6
حد تشخیص آهن در آب را تعیین کنید.
اطلاعات اولیه : مقادیر چگالی نوری پس زمینه (راه حل مرجع) هنگام ساخت نمودار کالیبراسیون برای تعیین آهن به 0.003 رسید. 0.001; 0.007; 0.005; 0.006; 0.003; 0.001; 0.005. مقادیر چگالی نوری مربوط به غلظت آهن در محلول در جدول کنترل شماره 5 ارائه شده است.
حد تشخیص آهن را بر حسب mg/cm 3 با توجه به ضرایب حساسیت S محاسبه شده بر اساس داده های به دست آمده برای ساخت نمودار کالیبراسیون با استفاده از روش حداقل مربعات در هنگام انجام کار کنترلی شماره 5 محاسبه کنید.
حد کمیت
«... حد کمیت (LOQ) (در تعاریف تحلیلی): کمترین غلظت یا یک آنالیت در یک آنالیت که می تواند با سطح قابل قبولی از دقت و اطمینان اندازه گیری شود، همانطور که می توان با آزمایش های آزمایشگاهی مشترک یا سایر موارد مناسب نشان داد. اعتبار سنجی روش..."
منبع:
"محصولات غذایی. روش های تجزیه و تحلیل برای تشخیص ارگانیسم های اصلاح شده ژنتیکی و محصولات مشتق شده از آنها. الزامات و تعاریف کلی. GOST R 53214-20086)"
(مصوب به دستور Rostekhregulirovanie مورخ 25 دسامبر 2008 N 708-st)
اصطلاحات رسمی. Akademik.ru. 2012 .
ببینید «محدودیت کمیت» در فرهنگ‌های دیگر چیست:
حد کمیت- 3.7 حد کمیت [LOQ] تخمین ده برابری انحراف معیار جرم یک نمونه توجه: مقدار LOQ به عنوان مقدار آستانه ای استفاده می شود که در بالای آن جرم ... ...
محدودیت تکرارپذیری- محدودیت تکرارپذیری 3.7 فرهنگ لغت - کتاب مرجع شرایط اسناد هنجاری و فنی
محدودیت تکرارپذیری- مقدار حدی تکرارپذیری 2.9 که کمتر از آن، با احتمال 95 درصد، قدر مطلق تفاوت بین دو نتیجه آزمایش به دست آمده در شرایط تکرارپذیری قرار دارد. منبع… فرهنگ لغت - کتاب مرجع شرایط اسناد هنجاری و فنی
محدودیت تکرارپذیری (همگرایی) 3.11 مقدار حد تکرارپذیری که با سطح اطمینان 95 درصد از قدر مطلق تفاوت بین نتایج دو اندازه گیری (یا آزمایش) به دست آمده در شرایط تکرارپذیری فراتر نمی رود. فرهنگ لغت - کتاب مرجع شرایط اسناد هنجاری و فنی
محدودیت دقت داخل آزمایشگاهی- 3.11 حد دقت درون آزمایشگاهی: اختلاف مطلق احتمال فرضی P را بین دو نتیجه تحلیلی به دست آمده در شرایط دقت درون آزمایشگاهی مجاز می کند. منبع… فرهنگ لغت - کتاب مرجع شرایط اسناد هنجاری و فنی
حد تکرارپذیری R- 2.19.2 حد تکرارپذیری R 2.19.1، 2.19.2 (ویرایش تغییر یافته، عنوان = تغییر شماره 1، IUS 12 2002). ... ... فرهنگ لغت - کتاب مرجع شرایط اسناد هنجاری و فنی
MI 2881-2004: توصیه. GSI. روشهای تجزیه و تحلیل کمی شیمیایی. رویه هایی برای بررسی قابل قبول بودن نتایج تجزیه و تحلیل- Terminology MI 2881 2004: Recommendation. GSI. روشهای تجزیه و تحلیل کمی شیمیایی. رویه های بررسی مقبولیت نتایج تجزیه و تحلیل: 3.17 تفاوت بحرانی: اختلاف مطلق برای احتمال پذیرفته شده 95 درصد بین ... ... فرهنگ لغت - کتاب مرجع شرایط اسناد هنجاری و فنی
GOST R 50779.11-2000: روش های آماری. کنترل کیفیت آماری اصطلاحات و تعاریف- اصطلاحات GOST R 50779.11 2000: روش های آماری. کنترل کیفیت آماری شرایط و تعاریف سند اصلی: 3.4.3 (بالا و پایین) حدود مقررات محدودیت در نمودار کنترل، که بالاتر از آن حد بالایی، ... ... فرهنگ لغت - کتاب مرجع شرایط اسناد هنجاری و فنی
GOST R 50779.10-2000: روش های آماری. احتمال و مبنای آمار. اصطلاحات و تعاریف- اصطلاحات GOST R 50779.10 2000: روش های آماری. احتمالات و مبانی آمار. اصطلاحات و تعاریف سند اصلی: 2.3. مجموعه (عمومی) مجموعه ای از تمام واحدهای در نظر گرفته شده. توجه برای یک متغیر تصادفی ... ... فرهنگ لغت - کتاب مرجع شرایط اسناد هنجاری و فنی
RMG 61-2003: سیستم دولتی برای اطمینان از یکنواختی اندازه گیری ها. شاخص های دقت، صحت، دقت روش های تجزیه و تحلیل کمی شیمیایی. روشهای ارزیابی- اصطلاحات RMG 61 2003: سیستم دولتی برای اطمینان از یکنواختی اندازه گیری ها. شاخص های دقت، صحت، دقت روش های تجزیه و تحلیل کمی شیمیایی. روش های ارزیابی: 3.12 دقت درون آزمایشگاهی: دقت … فرهنگ لغت - کتاب مرجع شرایط اسناد هنجاری و فنی
هیئت مدیره
راه حل
بر اساس ماده 30 معاهده اتحادیه اقتصادی اوراسیا مورخ 29 می 2014 و بند 2 ماده 3 موافقتنامه اصول و قواعد مشترک گردش دارو در اتحادیه اقتصادی اوراسیا مورخ 23 دسامبر 2014، هیئت مدیره کمیسیون اقتصادی اوراسیا
تصمیم گرفت:
1. رهنمودهای پیوست شده برای اعتبارسنجی روش های تحلیلی برای آزمایش فرآورده های دارویی را تأیید کنید.
2. این تصمیم پس از 6 ماه از تاریخ انتشار رسمی لازم الاجرا می باشد.
رئیس هیئت مدیره
کمیسیون اقتصادی اوراسیا
تی. سرکیسیان
راهنمای اعتبار سنجی روش های تحلیلی برای آزمایش فرآورده های دارویی
تایید شده
تصمیم هیئت مدیره
کمیسیون اقتصادی اوراسیا
مورخ 17 جولای 2018 N 113
I. مقررات عمومی
1. این راهنما قوانینی را برای اعتبار سنجی روش های تحلیلی برای آزمایش فرآورده های دارویی و همچنین فهرستی از ویژگی هایی که در طول اعتبار سنجی این روش ها ارزیابی می شوند و در پرونده های ثبتی ارائه شده به نهادهای مجاز کشورهای عضو درج می شود، تعریف می کند. اتحادیه اقتصادی اوراسیا (از این پس، به ترتیب، کشورهای عضو، اتحادیه).
2. هدف از اعتبارسنجی یک روش تحلیلی برای آزمایش فرآورده های دارویی، مستندسازی مناسب بودن آن برای هدف مورد نظر است.
II. تعاریف
3. برای اهداف این راهنما، از اصطلاحاتی استفاده می شود که به معنای زیر است:
"رویه تحلیلی" (رویه تحلیلی) - روشی برای آزمایش فرآورده های دارویی، که شامل شرح مفصلی از توالی اقدامات لازم برای انجام یک آزمایش تحلیلی (شامل شرح آماده سازی نمونه های آزمایش، مواد مرجع، معرف ها، استفاده از تجهیزات، ساخت منحنی کالیبراسیون، فرمول های محاسبه استفاده شده و غیره)؛
"تکرار پذیری" - ویژگی مشخص کننده دقت در تست های بین آزمایشگاهی.
"محدوده کاربرد (منطقه تحلیلی)" (محدوده) - فاصله بین بالاترین و کمترین غلظت (مقدار) آنالیت در نمونه (از جمله این غلظت ها) که روش تحلیلی نشان داده شده است که سطح دقت قابل قبولی دارد. ، دقت و خطی بودن;
"خطی بودن" (خطی) - وابستگی مستقیم سیگنال تحلیلی به غلظت (مقدار) آنالیت در نمونه در محدوده کاربرد (منطقه تحلیلی) تکنیک.
"کشف (بازیابی)" (بازیابی) - نسبت بین مقادیر میانگین بدست آمده و واقعی (مرجع) با در نظر گرفتن فواصل اطمینان مناسب.
"تکرارپذیری (دقت درون سنجش)" - دقت روشی که آزمایش‌های مکرر تحت شرایط عملیاتی یکسان انجام می‌شود (مثلاً توسط همان تحلیلگر یا گروهی از تحلیلگران، روی تجهیزات مشابه، با معرف‌های یکسان و یکسان. و غیره) برای مدت کوتاهی؛
"صحت" (دقت، صحت) - نزدیکی بین مقدار واقعی (مرجع) پذیرفته شده و مقدار دریافتی، که با مقدار باز بودن بیان می شود.
"حد تعیین کمی" (حد کمی) - کوچکترین مقدار یک ماده در یک نمونه که می تواند به طور کمی با دقت و دقت مناسب تعیین شود.
"حد تشخیص" - کوچکترین مقدار آنالیت در یک نمونه که می تواند تشخیص داده شود، اما لزوماً به طور دقیق تعیین نمی شود.
"دقت" (دقت) - بیان نزدیکی (درجه انتشار) نتایج (مقادیر) بین مجموعه ای از اندازه گیری های انجام شده بر روی تعداد زیادی از نمونه های گرفته شده از یک نمونه همگن، تحت شرایط تعیین شده توسط روش.
"دقت متوسط (درون آزمایشگاهی)" (دقت متوسط) - تأثیر تغییرات در آزمایشگاه (روزهای مختلف، تحلیلگران مختلف، تجهیزات مختلف، سری های مختلف (بچ) معرف ها و غیره) بر روی نتایج آزمایش نمونه های یکسان گرفته شده از آزمایشگاه همان سریال؛
"ویژگی" (ویژگی) - توانایی یک روش تحلیلی برای ارزیابی بدون ابهام ماده تعیین شده، صرف نظر از سایر مواد (ناخالصی ها، محصولات تخریب، مواد کمکی، ماتریس (متوسط) و غیره) موجود در نمونه آزمایش.
"پایداری (استقامت)" (استقامت) - توانایی یک روش تحلیلی برای مقاومت در برابر تأثیر تغییرات کوچک مشخص شده در شرایط آزمایش، که نشان دهنده قابلیت اطمینان آن در استفاده معمولی (استاندارد) است.
III. انواع روش های تحلیلی که باید اعتبار سنجی شوند
4. این راهنما رویکردهای اعتبار سنجی 4 نوع متداول روش های تحلیلی را پوشش می دهد:
الف) تست های شناسایی (اصالت)؛
ب) آزمایش هایی برای تعیین محتوای کمی ناخالصی ها (آزمایش های کمی برای محتوای ناخالصی).
ج) آزمایش‌هایی برای تعیین حد ناخالصی‌ها در نمونه (آزمایش‌های حدی برای ناخالصی‌های شاهد).
د) آزمایش های کمی (برای محتوا یا فعالیت) (تست های کمی قسمت فعال) برای تعیین قسمت فعال مولکول ماده فعال در نمونه آزمایشی.
5. کلیه روش های تحلیلی مورد استفاده برای کنترل کیفیت فرآورده های دارویی باید دارای اعتبار باشند. این راهنما اعتبار روشهای تحلیلی برای انواع آزمایش‌هایی را که در بند 4 این راهنما گنجانده نشده‌اند (به عنوان مثال، آزمایش‌های انحلال یا تعیین اندازه ذرات (پراکندگی) یک ماده دارویی و غیره را پوشش نمی‌دهد.
6. آزمایش های شناسایی (اصالت) معمولاً شامل مقایسه خواص (مثلاً ویژگی های طیفی، رفتار کروماتوگرافی، واکنش پذیری و غیره) نمونه های آزمایش و مرجع است.
7. آزمایش های تعیین مقدار کمی ناخالصی ها و آزمایش های تعیین حد محتوای ناخالصی ها در نمونه با هدف توصیف صحیح ویژگی های خلوص نمونه انجام می شود. الزامات اعتبارسنجی روش‌ها برای تعیین کمی ناخالصی‌ها با الزامات اعتبارسنجی روشهای تعیین محتوای محدود کننده ناخالصی‌ها در یک نمونه متفاوت است.
8. روش های آزمایش کمی با هدف اندازه گیری محتوای آنالیت در نمونه آزمایشی انجام می شود. در این دستورالعمل ها، کمی سازی به اندازه گیری کمی اجزای اصلی یک ماده دارویی اشاره دارد. پارامترهای اعتبارسنجی مشابهی برای سنجش ماده فعال یا سایر اجزای محصول دارویی اعمال می شود. پارامترهای کمی اعتبارسنجی ممکن است در سایر روش های تحلیلی (مانند آزمایش انحلال) استفاده شود.
هدف روشهای تحلیلی باید به وضوح تعریف شود، زیرا این انتخاب ویژگی‌های اعتبارسنجی را که باید در طول اعتبارسنجی ارزیابی شوند، تعیین می‌کند.
9. ویژگی‌های اعتبارسنجی معمول زیر یک روش تحلیلی در معرض ارزیابی هستند:
الف) صحت (دقت (صحت))؛
ب) دقت (دقت):
تکرارپذیری؛
intermediate (intralaboratory) precision (intermediate precision);
ج) ویژگی؛
د) حد تشخیص؛
ه) محدودیت کمی؛
و) خطی بودن.
ز) محدوده کاربرد (منطقه تحلیلی) (محدوده).
10. مهمترین ویژگی های اعتبارسنجی برای اعتبارسنجی انواع روش های تحلیلی در جدول خلاصه شده است.
جدول. ویژگی های اعتبارسنجی برای اعتبارسنجی انواع مختلف روش های تحلیلی
اعتبار سنجی | نوع تکنیک تحلیلی |
||||
مشخصه | آزمایشات برای | تست های ناخالصی | تست های کمی |
||
(اعتبار) | کمی | محدود کردن محتوا | انحلال (فقط اندازه گیری)، محتوا (فعالیت) |
||
درست | |||||
دقت، درستی | |||||
تکرارپذیری | |||||
دقت متوسط | |||||
اختصاصی** | |||||
حد تشخیص | |||||
حد کمیت | |||||
خطی بودن | |||||
محدوده کاربردی | |||||
________________
* در صورت تعیین تکرارپذیری، تعیین دقت متوسط لازم نیست.
** اختصاصیت ناکافی یک روش تحلیلی را می توان با استفاده از یک یا چند روش تحلیلی اضافی جبران کرد.
*** ممکن است در برخی موارد مورد نیاز باشد (مثلاً زمانی که حد تشخیص و حد نرمال شده محتوای ناخالصی تعیین شده نزدیک است).
توجه داشته باشید. "-" - مشخصه ارزیابی نمی شود، "+" - مشخصه ارزیابی می شود.
هنگام اعتبارسنجی روش های تحلیلی، فهرست مشخص شده باید به عنوان معمولی در نظر گرفته شود. ممکن است استثنائاتی وجود داشته باشد که نیاز به توجیه جداگانه توسط سازنده فرآورده دارویی داشته باشد. چنین ویژگی روش تحلیلی به عنوان پایداری (استحکام) در جدول ذکر نشده است، اما باید در مرحله مناسب در توسعه روش تحلیلی در نظر گرفته شود.
اعتبار سنجی مجدد (تأیید مجدد) ممکن است در موارد زیر ضروری باشد (اما نه محدود به):
تغییر در طرح سنتز ماده دارویی؛
تغییر در ترکیب محصول دارویی؛
تغییر در روش شناسی تحلیلی
در صورتی که سازنده توجیه مناسبی ارائه دهد، اعتبار سنجی مجدد انجام نمی شود. میزان اعتبار مجدد به ماهیت تغییرات ایجاد شده بستگی دارد.
IV. روش شناسی اعتبار روش های تحلیلی
1. الزامات عمومی برای روش شناسی اعتبار سنجی روش های تحلیلی
11. این بخش ویژگی هایی را که باید در اعتبارسنجی روش های تحلیلی در نظر گرفته شود، تشریح می کند و رویکردها و توصیه هایی را برای تعیین ویژگی های اعتبار سنجی مختلف هر روش تحلیلی ارائه می دهد.
12. در برخی موارد (مثلاً هنگام اثبات ویژگی) می توان از ترکیب چند روش تحلیلی برای اطمینان از کیفیت یک ماده دارویی یا فرآورده دارویی استفاده کرد.
13. تمام داده های مرتبط جمع آوری شده در طول اعتبارسنجی و فرمول های مورد استفاده برای محاسبه عملکرد اعتبارسنجی باید ارائه و تجزیه و تحلیل شوند.
14. روش هایی غیر از مواردی که در این راهنما بیان شده است، ممکن است استفاده شود. انتخاب روش و پروتکل اعتبار سنجی به عهده متقاضی است. در این مورد، هدف اصلی از اعتبارسنجی یک روش تحلیلی، تأیید مناسب بودن روش برای هدف مورد نظر است. به دلیل پیچیدگی، رویکردها به روش های تحلیلی برای محصولات بیولوژیکی و بیوتکنولوژیکی ممکن است با روش های توصیف شده در این راهنما متفاوت باشد.
15. در طول مطالعه عملکرد اعتبارسنجی، باید از مواد مرجع با ویژگی های شناخته شده و مستند استفاده شود. درجه خلوص مورد نیاز مواد مرجع به کاربرد مورد نظر بستگی دارد.
16. ویژگی های اعتبار سنجی مختلف در بخش های فرعی جداگانه این بخش مورد بحث قرار گرفته است. ساختار این بخش منعکس کننده روند توسعه و ارزیابی یک روش تحلیلی است.
17. کار آزمایشی باید به گونه ای برنامه ریزی شود که ویژگی های اعتبار سنجی مربوطه به طور همزمان مورد مطالعه قرار گیرد و داده های قابل اعتماد در مورد قابلیت های روش تحلیلی ارائه شود (به عنوان مثال، ویژگی، خطی بودن، دامنه کاربرد، صحت و دقت).
2. خاص بودن
18. مطالعات اختصاصی باید در طول اعتبار سنجی آزمایشات برای شناسایی، ناخالصی ها و کمیت انجام شود. روش های اعتبار سنجی ویژگی به استفاده مورد نظر از روش تحلیلی بستگی دارد.
19. چگونگی تایید ویژگی بستگی به اهدافی دارد که روش تحلیلی برای آنها در نظر گرفته شده است. در همه موارد نمی توان تأیید کرد که روش تحلیلی برای این آنالیت خاص است (انتخاب پذیری کامل). در این مورد توصیه می شود از ترکیب 2 یا چند روش تحلیلی استفاده شود.
عدم اختصاصیت یک روش تحلیلی را می توان با استفاده از یک یا چند روش تحلیلی اضافی جبران کرد.
20. اختصاصی بودن برای انواع مختلف آزمون به معنای موارد زیر است:
الف) هنگام آزمایش برای شناسایی - تأیید اینکه این روش به شما امکان می دهد دقیقاً ماده مورد نظر را شناسایی کنید.
ب) هنگام آزمایش ناخالصی ها، تأیید اینکه روش به درستی ناخالصی ها را در نمونه شناسایی می کند (به عنوان مثال، آزمایش ترکیبات مرتبط، فلزات سنگین، حلال های باقیمانده و غیره).
ج) در آزمایشات کمی - تأیید اینکه این روش به شما امکان می دهد محتوای یا فعالیت ماده تعیین شده در نمونه را تعیین کنید.
شناسایی
21. آزمایش های شناسایی رضایت بخش باید بتوانند بین ترکیبات ساختاری نزدیک به هم که ممکن است در نمونه وجود داشته باشند تمایز قائل شوند. انتخابی بودن یک روش تحلیلی را می توان با به دست آوردن نتایج مثبت (شاید با مقایسه با یک استاندارد شناخته شده) برای نمونه های حاوی آنالیت و نتایج منفی برای نمونه های فاقد آن تایید کرد.
22. برای تأیید عدم وجود نتایج مثبت کاذب، ممکن است یک آزمایش شناسایی برای مواد با ساختار مشابه یا مواد مرتبط با آنالیت انجام شود.
23. انتخاب مواد بالقوه تداخل باید توجیه شود.
کمی سازی و آزمایش ناخالصی ها
24. هنگام تأیید ویژگی برای یک روش تحلیلی با استفاده از روش جداسازی کروماتوگرافی، کروماتوگرام های معرف باید با شناسایی مناسب اجزای جداگانه ارائه شوند. رویکردهای مشابهی باید برای سایر تکنیک‌های مبتنی بر جداسازی استفاده شود.
25. جداسازی بحرانی در کروماتوگرافی باید در سطح مناسب مورد مطالعه قرار گیرد. در مورد جداسازی بحرانی، مقدار تفکیک 2 جزء نزدیک به شستشو باید تنظیم شود.
26. هنگام استفاده از روش کمی سازی غیر اختصاصی، باید از روش های تحلیلی اضافی استفاده شود و ویژگی کل مجموعه روش ها تأیید شود. به عنوان مثال، اگر تعیین کمی با روش تیترومتری در حین رهاسازی ماده دارویی انجام شود، می توان آن را با آزمایش مناسب برای ناخالصی ها تکمیل کرد.
27. روش برای تعیین کمیت و آزمایش ناخالصی ها مشابه است.
وجود نمونه های ناخالصی
28. در صورت وجود نمونه های ناخالصی، تعیین ویژگی روش تحلیلی به شرح زیر است:
الف) هنگام تعیین کمیت، لازم است انتخابی بودن تعیین یک ماده در حضور ناخالصی ها و (یا) سایر اجزای نمونه تأیید شود. در عمل، این کار با افزودن ناخالصی ها و (یا) مواد جانبی به نمونه (ماده دارویی یا فرآورده دارویی) به مقدار مناسب و در صورت وجود شواهدی مبنی بر عدم تأثیر آنها بر نتیجه تعیین کمی ماده فعال انجام می شود. ;
ب) هنگام آزمایش ناخالصی ها، می توان با افزودن مقادیر معینی از ناخالصی ها به ماده دارویی یا فرآورده دارویی و در صورت وجود شواهدی مبنی بر جدا شدن این ناخالصی ها از یکدیگر و (یا) از سایر اجزای نمونه، ویژگی را تعیین کرد.
بدون نمونه ناخالصی
29. اگر مواد مرجع برای ناخالصی ها یا محصولات تجزیه در دسترس نباشد، ویژگی را می توان با مقایسه نتایج آزمایش نمونه های حاوی ناخالصی ها یا محصولات تجزیه با نتایج یک روش معتبر دیگر (به عنوان مثال، یک داروسازی یا دیگر تجزیه و تحلیل معتبر (مستقل) تایید کرد. روش). در صورت لزوم، استانداردهای مرجع ناخالصی باید شامل نمونه هایی باشد که در شرایط تنش مشخص (نور، گرما، رطوبت، هیدرولیز اسید (باز) و اکسیداسیون ذخیره می شوند.
30. در مورد تعیین کمی، 2 نتیجه باید با هم مقایسه شوند.
31. در مورد آزمایشات ناخالصی باید نیمرخ ناخالصی ها را با هم مقایسه کرد.
32. برای اثبات اینکه پیک آنالیت تنها با یک جزء مطابقت دارد، توصیه می شود مطالعاتی در مورد خلوص پیک ها انجام شود (به عنوان مثال، استفاده از تشخیص آرایه دیود، طیف سنجی جرمی).
3. خطی بودن
33. یک رابطه خطی باید در دامنه کامل کاربرد تکنیک تحلیلی ارزیابی شود. می توان آن را مستقیماً روی ماده دارویی (با رقیق کردن محلول استاندارد اصلی) و (یا) در نمونه های جداگانه مخلوط مصنوعی (مدل) اجزای دارو با استفاده از روش پیشنهادی تأیید کرد. جنبه اخیر را می توان در مسیر تعیین دامنه کاربرد (حوزه تحلیلی) روش بررسی کرد.
34. خطی بودن به صورت بصری با رسم سیگنال تحلیلی به عنوان تابعی از غلظت یا مقدار آنالیت ارزیابی می شود. در صورت وجود رابطه خطی واضح، نتایج به دست آمده باید با روش های آماری مناسب (مثلاً با محاسبه خط رگرسیون با استفاده از روش حداقل مربعات) پردازش شوند. تبدیل ریاضی نتایج آزمون ممکن است برای به دست آوردن خطی بودن بین نتایج کمی و غلظت نمونه قبل از تجزیه و تحلیل رگرسیون مورد نیاز باشد. نتایج تجزیه و تحلیل خط رگرسیون را می توان برای ارزیابی ریاضی درجه خطی بودن استفاده کرد.
35. اگر خطی وجود نداشته باشد، داده های آزمون باید قبل از تجزیه و تحلیل رگرسیون تحت یک تبدیل ریاضی قرار گیرند.
36. برای تایید خطی بودن باید ضریب همبستگی یا ضریب تعیین، جمله ثابت رگرسیون خطی، مماس شیب خط رگرسیون و مجموع باقیمانده مجذور انحرافات تعیین و ارائه شود و نموداری با تمام تجربیات ارائه شود. داده ها پیوست شده است.
37. اگر خطی بودن تحت هیچ نوع تبدیل ریاضی مشاهده نشود (مثلاً هنگام تأیید روشهای ایمونواسی)، سیگنال تحلیلی باید با استفاده از تابع مناسب غلظت (مقدار) آنالیت در نمونه توصیف شود.
V. محدوده کاربردی (منطقه تحلیلی)
39. دامنه کاربرد یک تکنیک تحلیلی به هدف آن بستگی دارد و در مطالعه خطی بودن تعیین می شود. در محدوده کاربرد، تکنیک باید خطی بودن، صحت و دقت مورد نیاز را ارائه دهد.
40. محدوده های کاربرد (حوزه های تحلیلی) روش های تحلیلی به عنوان حداقل مجاز در نظر گرفته شود:
الف) برای تعیین کمی ماده فعال در یک ماده دارویی یا محصول دارویی - از غلظت (محتوا) 80 درصد تا غلظت (محتوا) 120 درصد غلظت اسمی (محتوا).
ب) برای یکنواختی دوز - از غلظت (محتوا) 70 درصد تا غلظت (محتوا) 130 درصد، مگر اینکه محدوده وسیع تری برای فرآورده دارویی بسته به شکل دوز توجیه شود (به عنوان مثال، استنشاقی با دوز اندازه گیری شده).
ج) برای آزمایش انحلال، ± 20 درصد (مطلق) محدوده کاربرد رتبه بندی شده. به عنوان مثال، اگر مشخصات یک محصول نسخه اصلاح شده محدوده ای از 20 درصد در ساعت اول تا 90 درصد محتوای ادعا شده در 24 ساعت را پوشش دهد، محدوده استفاده تأیید شده باید 0 تا 110 درصد محتوای ادعا شده باشد.
د) برای تعیین ناخالصی ها - از حد تشخیص ناخالصی تا 120٪ مقدار مشخص شده در مشخصات.
ه) برای ناخالصی هایی که بسیار قوی هستند یا دارای اثر دارویی سمی یا غیرمنتظره هستند، حد تشخیص و حد کمیت باید متناسب با سطحی باشد که این ناخالصی ها باید کنترل شوند. به منظور اعتبارسنجی روشهای آزمایش ناخالصی مورد استفاده در طول توسعه، ممکن است لازم باشد که ناحیه تحلیلی نزدیک به حد مورد انتظار (ممکن) تنظیم شود.
ه) اگر کمیت و خلوص به طور همزمان با همان آزمایش مورد مطالعه قرار می گیرند و فقط از یک استاندارد 100% استفاده می شود، رابطه باید در کل محدوده کاربرد روش تحلیلی از آستانه گزارش ناخالصی خطی باشد (مطابق با قوانین مطالعه ناخالصی ها در فرآورده های دارویی و تعیین الزامات برای آنها در مشخصات مصوب کمیسیون اقتصادی اوراسیا) تا 120 درصد محتوای مشخص شده در مشخصات برای تعیین کمی.
VI. درست
41. صحت باید برای دامنه کامل کاربرد روش تحلیلی ایجاد شود.
1. تعیین کمی ماده دارویی فعال
ماده دارویی
42. چندین روش برای ارزیابی درستی می توان استفاده کرد:
استفاده از یک تکنیک تحلیلی برای یک ماده تجزیه شده با درجه خلوص مشخص (مثلاً برای یک ماده استاندارد).
مقایسه نتایج تجزیه و تحلیل به دست آمده با استفاده از روش تحلیلی معتبر و نتایج به دست آمده با استفاده از روشی که صحت آن مشخص است و (یا) روش مستقل.
نتیجه گیری در مورد صحت را می توان پس از تعیین دقت، خطی بودن و ویژگی انجام داد.
محصول دارویی
43. چندین روش برای ارزیابی درستی می توان استفاده کرد:
استفاده از یک روش تحلیلی برای مخلوط های مصنوعی (مدل) اجزای یک محصول دارویی که مقداری از آنالیت شناخته شده قبلی به آن اضافه شده است.
در غیاب نمونه هایی از تمام اجزای فرآورده دارویی، می توان مقدار شناخته شده قبلی از ماده دارویی را به محصول دارویی اضافه کرد یا نتایج به دست آمده را با استفاده از روش دیگری که صحت آن مشخص است مقایسه کرد و (یا) یک روش مستقل
نتیجه گیری در مورد صحت را می توان پس از تعیین دقت، خطی بودن و ویژگی انجام داد.
2. کمی سازی ناخالصی ها
44. دقت در نمونه هایی (ماده دارویی و فرآورده دارویی) که مقدار مشخصی ناخالصی به آنها اضافه شده است تعیین می شود.
45. در صورت عدم وجود نمونه هایی از ناخالصی های قابل تشخیص و (یا) محصولات تجزیه، مقایسه نتایج با نتایج به دست آمده با استفاده از روش مستقل قابل قبول است. استفاده از سیگنال تحلیلی ماده فعال مجاز است.
46. لازم است نحوه خاص بیان محتوای ناخالصی های منفرد یا مجموع آنها (مثلاً در درصد جرمی یا درصد نسبت به سطح پیک، اما در همه موارد نسبت به آنالیت اصلی) مشخص شود. .
47. دقت برای حداقل 9 تعیین در 3 غلظت مختلف که کل محدوده کاربرد را پوشش می دهد (یعنی 3 غلظت و 3 تکرار برای هر غلظت) ارزیابی می شود. تعاریف باید شامل تمام مراحل متدولوژی باشد.
48. دقت با مقدار باز بودن به عنوان درصد بر اساس نتایج تعیین کمی ماده اضافه شده به مقدار مشخص به نمونه تجزیه و تحلیل شده یا تفاوت بین مقادیر متوسط و واقعی (مرجع) بدست آمده با در نظر گرفتن بیان می شود. فواصل اطمینان مناسب
VII. دقت، درستی
49. اعتبارسنجی آزمایشات برای کمیت و ناخالصی ها شامل تعیین دقت است.
50. دقت در 3 سطح تنظیم شده است: تکرارپذیری، دقت متوسط و تکرارپذیری. دقت باید با استفاده از نمونه های یکنواخت و معتبر ایجاد شود. در صورت غیرممکن بودن به دست آوردن یک نمونه همگن، تعیین دقت با استفاده از نمونه های مصنوعی (مدل) یا محلول نمونه مجاز است. دقت یک روش تحلیلی معمولاً بر حسب واریانس، انحراف معیار یا ضریب تغییرات یک سری اندازه‌گیری بیان می‌شود.
هشتم. تکرارپذیری
51. تکرارپذیری با انجام حداقل 9 تعیین غلظت در محدوده کاربرد روش تحلیلی (3 غلظت و 3 تکرار برای هر غلظت)، یا حداقل 6 تعیین غلظت برای نمونه هایی با محتوای 100 درصد آنالیت تعیین می شود.
IX دقت متوسط (داخل آزمایشگاهی).
52. میزان دقت متوسط به شرایطی بستگی دارد که در آن روش تحلیلی مورد استفاده قرار می گیرد. متقاضی باید تأثیر عوامل تصادفی را بر دقت روش تحلیلی تعیین کند. معمولاً عوامل مورد بررسی (متغیر) روزهای مختلف، تحلیلگران، تجهیزات و غیره هستند. لزومی ندارد که این تأثیرات را جداگانه بررسی کنیم. هنگام مطالعه تأثیر عوامل مختلف، ترجیحاً از طرح آزمایش استفاده شود.
X. تکرارپذیری
53. تکرارپذیری دقت را در یک آزمایش بین آزمایشگاهی مشخص می کند. تکرارپذیری باید در مورد استانداردسازی یک روش تحلیلی تعیین شود (به عنوان مثال، زمانی که در فارماکوپه اتحادیه یا در دارونامه کشورهای عضو گنجانده شده است). درج داده های تکرارپذیری در پرونده ثبت الزامی نیست.
XI. بازنمایی داده ها
54. برای هر نوع دقت باید انحراف معیار، انحراف استاندارد نسبی (ضریب تغییرات) و فاصله اطمینان گزارش شود.
XII. حد تشخیص
55. بسته به ابزاری یا غیر ابزاری بودن تکنیک، رویکردهای متفاوتی برای تعیین حد تشخیص ممکن است. ممکن است از روش های دیگری نیز استفاده شود.
سیزدهم. ارزیابی بصری
56. ارزیابی بصری هم برای روش های غیر ابزاری و هم برای روش های ابزاری قابل استفاده است. حد تشخیص با تجزیه و تحلیل نمونه هایی با غلظت های شناخته شده آنالیت و تعیین حداقل محتوای آن که در آن به طور قابل اعتماد شناسایی می شود، تعیین می شود.
چهاردهم ارزیابی حد تشخیص از نظر نسبت سیگنال به نویز
57. این رویکرد فقط برای رویه های تحلیلی که نویز پایه برای آنها مشاهده می شود قابل استفاده است.
58. تعیین نسبت سیگنال به نویز با مقایسه سیگنال‌های به‌دست‌آمده از نمونه‌هایی با غلظت‌های پایین شناخته شده با سیگنال‌های به‌دست‌آمده از نمونه‌های خالی و تعیین حداقل غلظتی که در آن می‌توان آنالیت را به‌طور قابل اعتماد تشخیص داد، انجام می‌شود. برای تخمین حد تشخیص، نسبت سیگنال به نویز 3:1 تا 2:1 قابل قبول در نظر گرفته می شود.
XV. تخمین حد تشخیص از انحراف استاندارد سیگنال تحلیلی و شیب منحنی کالیبراسیون
59. حد تشخیص (LO) را می توان به صورت زیر بیان کرد:
جایی که:
60. مقدار k از منحنی کالیبراسیون برای آنالیت محاسبه می شود. تخمین s را می توان به چند روش انجام داد:
ب) با توجه به منحنی کالیبراسیون. تجزیه و تحلیل منحنی کالیبراسیون حاصل، ساخته شده برای نمونه هایی با محتوای آنالیت نزدیک به حد تشخیص ضروری است. انحراف استاندارد باقیمانده خط رگرسیون یا انحراف معیار نقطه تقاطع با محور y (انحراف استاندارد عبارت آزاد رگرسیون خطی) را می توان به عنوان انحراف معیار استفاده کرد.
شانزدهم بازنمایی داده ها
61. لازم است حد تشخیص و نحوه تعیین آن مشخص شود. اگر تعیین حد تشخیص بر اساس ارزیابی بصری یا ارزیابی نسبت سیگنال به نویز باشد، ارائه کروماتوگرام های مربوطه برای توجیه آن کافی تلقی می شود.
62. اگر مقدار حد تشخیص با محاسبه یا برون یابی به دست آید، تخمین باید با آزمایش مستقل تعداد کافی نمونه با محتوای آنالیت مطابق با حد تشخیص یا نزدیک به آن تأیید شود.
XVII. حد کمیت
63. حد کمیت یک مشخصه اعتبار سنجی ضروری روش های مورد استفاده برای تعیین محتوای کم مواد در یک نمونه است، به ویژه برای تعیین ناخالصی ها و/یا محصولات تخریب.
64. بسته به ابزاری یا غیرابزاری بودن تکنیک، چندین رویکرد برای تعیین حد کمیت ممکن است. روش های دیگر مجاز است.
هجدهم ارزیابی بصری
65. ارزیابی بصری هم برای روش های غیر ابزاری و هم برای روش های ابزاری قابل استفاده است.
66. حد کمیت معمولاً با آنالیز نمونه هایی با غلظت های شناخته شده آنالیت و برآورد حداقل محتوایی که آنالیت در آن قابل اندازه گیری است با دقت و دقت قابل قبولی تعیین می شود.
نوزدهم ارزیابی حد کمیت بر اساس نسبت سیگنال به نویز
67. این رویکرد فقط برای روش های اندازه گیری که در آن نویز پایه مشاهده می شود قابل استفاده است.
68. تعیین نسبت سیگنال به نویز با مقایسه سیگنال‌های اندازه‌گیری شده از نمونه‌های با غلظت‌های پایین شناخته شده آنالیت، با سیگنال‌های به‌دست‌آمده از نمونه‌های خالی، و تعیین حداقل غلظتی که آنالیت می‌تواند در آن باشد، انجام می‌شود. به طور قابل اعتماد کمی سازی شده است. نسبت سیگنال به نویز معمولی 10:1 است.
XX. ارزیابی حد کمیت از انحراف معیار سیگنال و شیب منحنی کالیبراسیون
69. حد کمیت (LOQ) را می توان به صورت زیر بیان کرد:
جایی که:
s انحراف استاندارد سیگنال تحلیلی است.
k مماس شیب منحنی کالیبراسیون است.
70. مقدار k از منحنی کالیبراسیون برای آنالیت محاسبه می شود. تخمین s را می توان به چند روش انجام داد:
الف) با توجه به انحراف استاندارد یک نمونه خالی. بزرگی سیگنال تحلیلی برای تعداد کافی نمونه خالی اندازه گیری می شود و انحراف استاندارد مقادیر آنها محاسبه می شود.
ب) با توجه به منحنی کالیبراسیون. تجزیه و تحلیل منحنی کالیبراسیون حاصل، ساخته شده برای نمونه هایی با محتوای آنالیت نزدیک به حد تعیین کمی ضروری است. انحراف استاندارد باقیمانده خط رگرسیون یا انحراف معیار نقطه تقاطع با محور y (انحراف استاندارد عبارت آزاد رگرسیون خطی) را می توان به عنوان انحراف معیار استفاده کرد.
XXI. بازنمایی داده ها
71. لازم است حد کمیت و نحوه تعیین آن مشخص شود.
72. حد کمیت باید متعاقباً با تجزیه و تحلیل تعداد کافی نمونه حاوی آنالیت‌های مساوی یا نزدیک به حد کمی تأیید شود.
73. رویکردهای دیگری غیر از موارد ذکر شده در بالا ممکن است قابل قبول باشد.
XXII. پایداری (استحکام)
74. مطالعه پایداری (استقامت) باید در مرحله توسعه انجام شود، دامنه مطالعات به روش تحلیلی مورد بررسی بستگی دارد. لازم است قابلیت اطمینان تجزیه و تحلیل تحت تغییرات عمدی پارامترها (شرایط) روش نشان داده شود.
75. در صورتی که نتایج اندازه گیری ها به تغییرات در شرایط اعمال روش تحلیلی بستگی داشته باشد، لازم است رعایت این شرایط به شدت کنترل شود یا اقدامات احتیاطی در حین آزمایش قید شود.
76. به منظور حصول اطمینان از حفظ اعتبار یک روش تحلیلی در هنگام استفاده، یکی از پیامدهای مطالعه استحکام باید ایجاد یک سری پارامترهای مناسب بودن سیستم باشد (مثلاً آزمون وضوح).
77. تغییرات پارامترهای رایج عبارتند از:
پایداری محلول های مورد استفاده در روش های تحلیلی؛
زمان استخراج
پارامترهای تغییر کروماتوگرافی مایع عبارتند از:
تغییر pH فاز متحرک؛
تغییر در ترکیب فاز متحرک؛
ستون های مختلف (سری ها و تامین کنندگان مختلف)؛
درجه حرارت؛
سرعت فاز متحرک (سرعت جریان).
پارامترهای تغییر کروماتوگرافی گازی عبارتند از:
ستون های مختلف (سری ها و تامین کنندگان مختلف)؛
درجه حرارت؛
سرعت گاز حامل
XXIII. ارزیابی مناسب بودن سیستم
78. ارزیابی تناسب سیستم بخشی جدایی ناپذیر از بسیاری از روش های تحلیلی است. این آزمایش‌ها بر این مفهوم استوار است که تجهیزات، الکترونیک، عملیات تحلیلی و نمونه‌های تحت آنالیز یک سیستم کامل را تشکیل می‌دهند و باید به این ترتیب ارزیابی شوند. معیارهای تناسب سیستم باید برای یک روش خاص تعیین شود و به نوع روش تحلیلی مورد تایید بستگی دارد. اطلاعات بیشتر را می توان از داروسازی اتحادیه یا داروخانه های کشورهای عضو دریافت کرد.
متن الکترونیکی سند
تهیه شده توسط Kodeks JSC و تأیید شده در برابر:
سایت رسمی
اتحادیه اقتصادی اوراسیا
www.eaeunion.org، 2018/07/20
