24.11.202227.05.2017

თუმცა, ანტიოქსიდანტების, როგორც ქიმიური ნაერთების განმარტება არ იძლევა სრულ სურათს შესწავლილი ობიექტის დამცავი თვისებების შესახებ: ისინი განისაზღვრება არა მხოლოდ კონკრეტული ანტიოქსიდანტის რაოდენობით, არამედ თითოეული მათგანის აქტივობით. ანტიოქსიდანტური აქტივობა, ან ანტიოქსიდანტური აქტივობა, AOA, არის ანტიოქსიდანტის რეაქციის სიჩქარის მუდმივი თავისუფალ რადიკალთან (kInH). ქიმილუმინესცენციის (CL) მეთოდი საშუალებას გაძლევთ განსაზღვროთ რადიკალების მთლიანი რაოდენობა, რომლებიც აკავშირებენ ანტიოქსიდანტებს ნიმუშში (ტოტალური ანტიოქსიდანტური სიმძლავრე, TAU) და CL კინეტიკის მათემატიკური მოდელირების მეთოდის გამოყენებისას, ასევე რადიკალების ფორმირებისა და რეაქციის სიჩქარე. ანტიოქსიდანტებით, ანუ AOA [, ,].

ქიმილუმინესცენციის მეთოდის ყველაზე გავრცელებული მოდიფიკაცია მთლიანი ანტიოქსიდანტური სიმძლავრის დასადგენად ემყარება ლუმინოლის, როგორც ქიმილუმინესცენციის აქტივატორის გამოყენებას [, , ,]. ნიმუში მოთავსებულია ქიმილუმინომეტრულ კუვეტაში ლუმინოლის, წყალბადის ზეჟანგის და ნაერთის დამატებით, რომელსაც შეუძლია რადიკალების წარმოქმნა სპონტანური დაშლის (თერმოლიზის) შედეგად, მაგალითად 2,2'-აზობის-(2-ამიდინოპროპან) დიჰიდროქლორიდი (ABAP). ): ABAP → 2R. მოლეკულური ჟანგბადის თანდასწრებით, ალკილის რადიკალი R აყალიბებს პეროქსილის რადიკალს ROO: R + O 2 → ROO. შემდეგი, პეროქსილის რადიკალი აჟანგებს ქიმილუმინესცენტურ ზონდს ლუმინოლს (LH 2) და წარმოიქმნება ლუმინოლის რადიკალი (LH): ROO + LH 2 → ROOH + LH. LH-დან, შუალედური ნივთიერებების (ლუმინოლის ჰიდროპეროქსიდი და ლუმინოლის ენდოპეროქსიდი) წარმოქმნის გზით, ელექტრონულად აღგზნებულ მდგომარეობაში წარმოიქმნება ლუმინოლის დაჟანგვის საბოლოო პროდუქტის მოლეკულა, ამინოფტალის მჟავა, რომელიც გამოყოფს ფოტონს და შედეგად შეინიშნება ქიმილუმინესცენცია. . CL ინტენსივობა პროპორციულია ფოტონის წარმოქმნის სიჩქარისა და ის, თავის მხრივ, პროპორციულია სისტემაში LH-ის სტაციონარული კონცენტრაციისა. რადიკალებთან ურთიერთქმედებით ანტიოქსიდანტები წყვეტენ გარდაქმნების აღწერილ ჯაჭვს და ხელს უშლიან ფოტონის წარმოქმნას.

თერმოლიზისადმი მგრძნობიარე ნაერთები არ არის რადიკალების ერთადერთი შესაძლო წყარო ნიმუშის ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების გაანალიზებისას ქიმილუმინესცენტური მეთოდის გამოყენებით. ალტერნატივებია სისტემები ცხენის პეროქსიდაზა–წყალბადის ზეჟანგი [, ], ჰემინ–წყალბადის ზეჟანგი, ციტოქრომი თან–კარდიოლიპინი–წყალბადის ზეჟანგი და ა.შ. პეროქსიდაზებით ლუმინოლის დაჟანგვის რეაქციის სქემა განხილულია Cormier et al-ის ნაშრომში. .

ამ სისტემებისთვის CL კინეტიკური მრუდები ასახავს რეაქციის ორ ეტაპს: CL ინტენსივობის გაზრდის სტადიას და პლატოს სტადიას ან ლუმინესცენციის თანდათანობით დაქვეითებას, როდესაც CL ინტენსივობა ან მუდმივია ან ნელა მცირდება. ნაშრომი აღწერს ორ მიდგომას მთლიანი ანტიოქსიდანტური სიმძლავრის გასაზომად, რომელიც ითვალისწინებს მრუდების ამ მახასიათებელს. TRAP (ტოტალური რეაქტიული ანტიოქსიდანტური პოტენციალი) მეთოდი ეფუძნება CL-ის ლატენტური პერიოდის გაზომვას. τ და შეიძლება გამოყენებულ იქნას ანტიოქსიდანტების დასადგენად, როგორიცაა ტროლოქსი ან ასკორბინის მჟავა: მათ ახასიათებთ მაღალი რეაქციის სიჩქარის მუდმივი რადიკალები და ამ მიზეზით შეიძლება ეწოდოს ძლიერი ანტიოქსიდანტები. ლატენტურ პერიოდში ხდება მათი სრული დაჟანგვა. TAR (ტოტალური ანტიოქსიდანტური რეაქტიულობა) მეთოდი ზომავს ქიმილუმინესცენციის ჩაქრობის ხარისხს ქქიმილუმინესცენციის მრუდის პლატოზე ან მაქსიმუმზე: ფორმულა, სადაც I არის ქიმილუმინესცენციის ინტენსივობა ანტიოქსიდანტის გარეშე და I 1 არის CL ინტენსივობა ანტიოქსიდანტის თანდასწრებით. ეს მეთოდი გამოიყენება, თუ სისტემა შეიცავს უპირატესად სუსტ ანტიოქსიდანტებს რადიკალებთან ურთიერთქმედების დაბალი სიჩქარის მუდმივებით - გაცილებით დაბალია ლუმინოლის მუდმივთან შედარებით.

ანტიოქსიდანტების მოქმედება ხასიათდება არა მხოლოდ მაჩვენებლებით τ და ქ. როგორც ჩანს ნაშრომებიდან [,], ანტიოქსიდანტების მოქმედება, როგორიცაა შარდმჟავა ჰემინ–H2O2–ლუმინოლ სისტემაში ან ტოკოფეროლი, რუტინი და კვერცეტინი ციტოქრომულ სისტემაში. თან-კარდიოლიპინი-H2O2-ლუმინოლი, რომელიც ხასიათდება CL-ის ზრდის მაქსიმალური სიჩქარის ცვლილებით ( v მაქს). როგორც კინეტიკის მათემატიკური მოდელირების შედეგები აჩვენებს, ამ ანტიოქსიდანტების რადიკალებთან ურთიერთქმედების სიჩქარის მუდმივების მნიშვნელობები ახლოსაა ლუმინოლის მუდმივთან, ამიტომ ასეთ ანტიოქსიდანტებს შეიძლება ეწოდოს საშუალო სიძლიერის ანტიოქსიდანტები.

თუ შესასწავლი მასალა, კერძოდ მცენარეული ნედლეული შეიცავდა მხოლოდ ერთ ტიპის ანტიოქსიდანტებს, მაშინ მათი შემცველობა შეიძლება დახასიათდეს ზემოთ ჩამოთვლილი სამი ინდიკატორიდან ერთ-ერთით ( τ , ქან v მაქს). მაგრამ მცენარეული მასალები შეიცავს სხვადასხვა სიძლიერის ანტიოქსიდანტების ნარევს. ამ პრობლემის გადასაჭრელად, ზოგიერთმა ავტორმა [ , , , ] გამოიყენა ცვლილება ქიმილუმინესცენციის მსუბუქი ჯამის გარკვეულ დროში ∆S, გამოთვლილი ფორმულით , სადაც ∆ S 0და ∆ ს ს- CL სინათლის ჯამები მოცემულ დროს ტსაკონტროლო და საგამოცდო ნიმუშებში, შესაბამისად. დრო საკმარისი უნდა იყოს სისტემის ყველა ანტიოქსიდანტის დაჟანგვისთვის, ანუ იმისთვის, რომ ტესტის ნიმუშის CL მრუდი მიაღწიოს საკონტროლო ნიმუშის CL მრუდის დონეს. ეს უკანასკნელი ვარაუდობს, რომ მკვლევარებმა არა მხოლოდ უნდა ჩაიწერონ სინათლის ჯამი, არამედ ჩაწერონ CL კინეტიკური მრუდი საკმარისად დიდი ხნის განმავლობაში, რაც ყოველთვის არ კეთდება.

ვინაიდან ყველა გაზომილი ინდიკატორი დამოკიდებულია მოწყობილობასა და გაზომვის პირობებზე, შესწავლილ სისტემაში ნივთიერების ანტიოქსიდანტური ეფექტი ჩვეულებრივ შედარებულია სტანდარტად აღებული ანტიოქსიდანტის ეფექტთან, მაგალითად, Trolox [,].

მწვანილის პეროქსიდაზა-წყალბადის პეროქსიდის სისტემა გამოიყენებოდა მრავალი ავტორის მიერ მცენარეული მასალების მთლიანი ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების გასაანალიზებლად. სამუშაოებში [ , ] გამოყენებული იქნა CL-ის ლატენტური პერიოდი (TRAP მეთოდი) ნიმუშებში ანტიოქსიდანტების რაოდენობის შესაფასებლად, ხოლო სამუშაოებში [ , , ] - ფართობი CL განვითარების მრუდის ქვეშ. ამასთან, ჩამოთვლილი სამუშაოები არ იძლევა ნათელ დასაბუთებას OAU-ს შეფასების ამა თუ იმ პარამეტრის არჩევისთვის.

კვლევის მიზანი იყო იმის დადგენა, თუ როგორ მოქმედებს სხვადასხვა ტიპის ანტიოქსიდანტების თანაფარდობა TOA-ზე და შეცვლილიყო ქიმილუმინესცენციის მეთოდი ისე, რომ შეძლებოდა უფრო ზუსტად განსაზღვროს TOA მცენარეულ მასალებში. ამისათვის ჩვენ საკუთარ თავს რამდენიმე დავალება დავსახეთ. პირველ რიგში, შეადარეთ შესწავლილი ობიექტების CL კინეტიკა სამი ტიპის (ძლიერი, საშუალო და სუსტი) სტანდარტული ანტიოქსიდანტების კინეტიკას, რათა გავიგოთ, რომელი ტიპის ანტიოქსიდანტები შეაქვთ ძირითადი წვლილი შესწავლილი ობიექტების OAU-ში. მეორეც, გამოთვალეთ შესწავლილი ობიექტების OAE ამ ობიექტების გავლენის ქვეშ CL სინათლის ჯამის შემცირების გაზომვით ანტიოქსიდანტის ეფექტთან შედარებით, რომელიც უდიდეს წვლილს იძლევა OAE-ში.

ᲛᲐᲡᲐᲚᲐ ᲓᲐ ᲛᲔᲗᲝᲓᲔᲑᲘ

კვლევის ობიექტებს წარმოადგენდა სს Krasnogorskleksredstva-ს (რუსეთი) მიერ წარმოებული კუნელის, თაფლის და ვარდის თეძოს სამრეწველო ნიმუშები, ასევე ჟოლოს ხილი, რომლებიც ავტორებმა შეაგროვეს მოსკოვის რეგიონში ბუნებრივი ზრდის პირობებში და გამხმარი 60-80 ° ტემპერატურაზე. C სანამ არ შეწყვეტენ წვენის გამოყოფას და დეფორმაციას დაჭერისას.

ქიმილუმინესცენტური მეთოდით ანტიოქსიდანტური სიმძლავრის ანალიზის რეაგენტები იყო: KH 2 PO 4, 20 მმ ბუფერული ხსნარი (pH 7.4); პეროქსიდაზა ცხენის ფესვებიდან (აქტივობა 112 ერთეული/მგ, M = 44173,9), 1 მმ წყალხსნარი; ლუმინოლი (5-ამინო-1,2,3,4-ტეტრაჰიდრო-1,4-ფთალაზინედიონი, 3-ამინოფტალის მჟავას ჰიდრაზიდი, M = 177,11), 1 მმ წყალხსნარი; წყალბადის ზეჟანგი (H 2 O 2, M = 34.01), 1 მმ წყალხსნარი; ანტიოქსიდანტების ხსნარები (ასკორბინის მჟავა, კვერცეტინი, ტოკოფეროლი). ყველა რეაგენტი დამზადებულია Sigma Aldrich-ის (აშშ) მიერ.

კუნელის, ქეჩისა და ვარდის ნაყოფის ნახარშები და ჟოლოს ნაყოფის ინფუზია მომზადდა სსრკ სახელმწიფო ფარმაკოპეის მეთოდების მიხედვით, რომელიც მოცემულია ზოგად ფარმაკოპეულ სტატიაში "ინფუზიები და დეკორქცია".

მთლიანი ანტიოქსიდანტური სიმძლავრის განსაზღვრა განხორციელდა ქიმილუმინესცენციის ჩაწერით Lum-100 ქიმილუმინომეტრზე (DISoft, რუსეთი) PowerGraph 3.3 პროგრამული უზრუნველყოფის გამოყენებით. მცენარეულ მასალებში OAE-ს დასადგენად, 40 μl ლუმინოლი 1 მმ კონცენტრაციით, 40 მკლ ცხენის პეროქსიდაზა 0.1 μM კონცენტრაციით, 10-დან 50 მკლ დეკორქცია ან ინფუზია (კონცენტრაციაზე დამოკიდებულია) და ფოსფატის ბუფერი საჭირო რაოდენობა მოთავსდა მოწყობილობის კუვეტაში, რათა ნიმუშის მთლიანი მოცულობა 1 მლ-მდე მიიყვანა. კუვეტა დამონტაჟდა მოწყობილობაში და ჩაიწერა CL, ფონური სიგნალის დაკვირვებით. ფონური სიგნალის ჩაწერიდან 48 წამის შემდეგ, 100 μl H2O2 1 მმ კონცენტრაციით დაემატა კუვეტას და CL ჩაწერა გაგრძელდა 10 წუთის განმავლობაში. მომზადდა ოთხი ნიმუში თითოეული მცენარეული ობიექტის სხვადასხვა კონცენტრაციით. CL ასევე დაფიქსირდა ასკორბინის მჟავის, კვერცეტინისა და ტოკოფეროლის ხსნარებისთვის ხუთი განსხვავებული კონცენტრაციით თითოეული ანტიოქსიდანტისთვის. შემდგომში, დეკორქციისა და ინფუზიების ნიმუშების OAU გადაითვალა კვერცეტინად.

ლუმინოლის, კურდღლის პეროქსიდაზას და წყალბადის ზეჟანგის კონცენტრაციები შეირჩა ისე, რომ განესაზღვრათ სამკურნალო მცენარეული მასალის წყლიანი ექსტრაქტების ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობები მისაღებ დროში (არაუმეტეს 10 წთ). ამ დროის განმავლობაში, ანტიოქსიდანტების ასკორბატისა და ფლავონოიდური კვერცეტინის (მცენარეული მასალების მთავარი ანტიოქსიდანტები) ქიმილუმინესცენციის მრუდები მიაღწია პლატოს, რაც მიუთითებს სისტემაში ანტიოქსიდანტების სრულ განადგურებაზე. შესწავლილი ნიმუშების განზავება და სტანდარტული ანტიოქსიდანტების ხსნარების კონცენტრაციები (მითითებულია ფიგურების ლეგენდებში) შეირჩა ისე, რომ CL-ის ყველა კინეტიკური მრუდი გაზომილი იყო მოწყობილობის ერთნაირი მგრძნობელობით.

ანტიოქსიდანტური სიმძლავრე გამოითვალა ფართობის ცვლილებით (∆ ს) ქიმილუმინესცენციის კინეტიკური მრუდის ქვეშ (მსუბუქი ჯამი) ანტიოქსიდანტის შემცველი ნივთიერების დამატებისას. ამ მიზნით ჩვენ გამოვთვალეთ S 0სისტემისთვის ანტიოქსიდანტის გარეშე და გამოაკლდა მას ფართობი ს სახასიათებს სისტემას, რომელსაც დაემატა ანტიოქსიდანტი. მნიშვნელობა ∆ სდამოკიდებულია ქიმილუმინომეტრის მგრძნობელობაზე და გაზომვის პირობებზე. თანაფარდობა ∆ ს/კ ვ(სად C- შესწავლილი ბიოლოგიური მასალის კონცენტრაცია კუვეტში, გ/ლ და ვ- კუვეტის მოცულობა, ლ) გამოხატავს შესასწავლი მასალის 1 გ ანტიოქსიდანტურ უნარს, ანუ მცენარეული ნედლეულის.

ანტიოქსიდანტური სიმძლავრე Δ გამოითვალა ანალოგიურად ს ასტანდარტული ანტიოქსიდანტის ხსნარი, მაგალითად კვერცეტინი, მოთავსებული სარეაქციო ნარევის იმავე მოცულობაში. თანაფარდობა ∆ S A/C A V(სად C A- კუვეტაში ანტიოქსიდანტის წონითი კონცენტრაცია, გ/ლ) გამოხატავს 1 გ ანტიოქსიდანტის ანტიოქსიდანტურ შესაძლებლობებს.

თითოეული სტანდარტული ანტიოქსიდანტისთვის ჩაწერილი იყო სიგნალი რამდენიმე კონცენტრაციის ხსნარებიდან, რათა უზრუნველყოფილიყო, რომ გამოთვლები იყო წრფივი ურთიერთობის ფარგლებში და მიღებული შედეგები იყო რეპროდუცირებადი. მართლაც, მიღებული იყო წრფივი დამოკიდებულება (∆ ს ა = k A C A) სიგნალი კონცენტრაციიდან, საიდანაც გამოითვალა სტოქიომეტრიული კოეფიციენტი კ ა. ფიშერის კრიტერიუმის მიხედვით, სტანდარტული ანტიოქსიდანტების მიღებული მნიშვნელობები კ ასტატისტიკურად მნიშვნელოვანი 0,975 ალბათობით. შემდეგ, ოთხი კონცენტრაციიდან სიგნალი ჩაიწერა მცენარის ოთხი ნიმუშიდან თითოეულზე და ყველა ნიმუშისთვის მიღებულ იქნა სიგნალის ხაზოვანი დამოკიდებულება კონცენტრაციაზე (∆ ს = k·C), საიდანაც გამოითვალა სტოქიომეტრიული კოეფიციენტი კ. 0,975 ალბათობით (ფიშერის ტესტი), მცენარეთა ნიმუშებისთვის მიღებული k მნიშვნელობები სტატისტიკურად მნიშვნელოვანია. მცენარეული მასალის მთლიანი ანტიოქსიდანტური სიმძლავრე სტანდარტული ანტიოქსიდანტის მასის მიხედვით (მგ%) აღმოჩნდა ფორმულის გამოყენებით.

მნიშვნელობები წარმოდგენილი იყო როგორც საშუალო არითმეტიკული ± სტანდარტული გადახრა (M ± δ) p

კვლევის შედეგები

ქიმილუმინესცენციის კინეტიკის შესწავლა ნატრიუმის ასკორბატის თანდასწრებით (ნახ. 1. ნატრიუმის ასკორბატის ეფექტი ქიმილუმინესცენციის კინეტიკაზე" data-note="სისტემის კომპონენტების კონცენტრაცია: ლუმინოლი - 40 μM, რძის პეროქსიდაზა - 4 ნმ, წყალბადის ზეჟანგი - 100 μM. მრუდები: 1 - საკონტროლო ნიმუში; 2 - 0.05 μM; 3 - 0.10 μM; 4 - 0.15 μM; 5 - 0.2 μM; 6 - 0.25 μM ნატრიუმის ასკორბატი."> ნახ. 1) აჩვენა, რომ ამ ანტიოქსიდანტი არის ახასიათებს ლატენტური პერიოდი, როდესაც CL თითქმის მთლიანად ჩახშობილია. მისი ხანგრძლივობა სისტემაში ანტიოქსიდანტის რაოდენობის პროპორციულია. ამავდროულად, არც CL მრუდების დახრილობა და არც CL ინტენსივობა პლატოზე არ იცვლება. ეს აიხსნება. იმით, რომ ასკორბინის მჟავა არის ძლიერი ანტიოქსიდანტი, რომელიც წყვეტს სისტემაში წარმოქმნილ ყველა რადიკალს, მათ შორის ლუმინოლის რადიკალებს, და CL არ ვითარდება მანამ, სანამ მთელი ასკორბატი არ დაიჟანგება.

სხვა მკვლევარებმა ასევე აჩვენეს, რომ ქიმიური ანალიზის შედეგები და ქიმილუმინესცენტური მეთოდით განსაზღვრული TAU სიდიდე ხშირად არ ემთხვევა ერთმანეთს. ნაშრომში პეროქსიდაზა-ლუმინოლ-წყალბადის ზეჟანგის სისტემაში განსაზღვრული მთლიანი ანტიოქსიდანტური ტევადობა კორელაციაშია ტრიტერპენის ნაერთების შემცველობასთან. ამასთან, იმავე ავტორების ნაშრომში, რომელშიც შესწავლის ობიექტი იყო სხვა მცენარე, მათ არ დააფიქსირეს OAE-ს კორელაცია ნებისმიერი ჯგუფის ნივთიერებების, მათ შორის ფლავონოიდების შემცველობასთან.

ასეთი შეუსაბამობები დაკავშირებულია მინიმუმ სამ ფაქტორთან. პირველ რიგში, მნიშვნელოვანია ანტიოქსიდანტების აქტივობა, ანუ რადიკალებთან მათი ურთიერთქმედების სიჩქარე, რომელიც განსხვავებულია მცენარეთა ნიმუშში შემავალი სხვადასხვა ანტიოქსიდანტებისთვის. იზმაილოვის თქმით, მექსიდოლის, ტოკოფეროლისა და კვერცეტინის შესაბამისი რეაქციების სიჩქარის მუდმივები კორელაციაშია 0.04: 2: 60. მეორეც, ყოველი ანტიოქსიდანტის მოლეკულა, რომელიც შედის ქიმიურ რეაქციაში, შეუძლია სხვადასხვა რაოდენობის რადიკალების ჩაჭრა. ნაშრომის მიხედვით, კვერცეტინმა, შარდმა და ასკორბინის მჟავებმა ამოიღეს 3,6 ± 0,1, 1,4 ± 0,1 და 0,5 ± 0,2 რადიკალები რეაქტიულ ანტიოქსიდანტურ მოლეკულაზე, შესაბამისად (გამოყენებული იყო ჰემინ–H 2 O 2 სისტემა - ლუმინოლი). მესამე, კვლევის შედეგებზე შეიძლება გავლენა იქონიოს პეროქსიდაზას აქტივობის არსებობამ თავად მცენარის ნიმუშებში, როგორც სამუშაოში, ასევე ნიმუშებში კალციუმის არსებობამ, რომელიც, როგორც ნაშრომშია ნაჩვენები, შეუძლია გაზარდოს. რძის პეროქსიდაზას აქტივობა გარკვეულ პირობებში. ეს ჩვეულებრივ იწვევს პლატოზე უფრო მაღალ CL ინტენსივობას, ვიდრე საკონტროლო მოსახვევებზე, რასაც ჩვენ, თუმცა, არ ვაკვირდებოდით.

პირველი ფაქტორი მკვეთრად ზღუდავს ისეთი პარამეტრის გამოყენებას, როგორიცაა სინათლის ჯამის ცვლილება, რადგან ქიმილუმინესცენციის გაზომვის დრო უნდა იყოს უფრო გრძელი ვიდრე ტესტის ნიმუშში ყველა ანტიოქსიდანტის მოხმარების დრო. ამ მომენტის წარმოშობის შესახებ შეიძლება ვიმსჯელოთ მხოლოდ ქიმილუმინესცენციის კინეტიკის გაზომვით. გარდა ამისა, სუსტი ანტიოქსიდანტების წვლილი TAU-ში მკვეთრად არ არის შეფასებული, რადგან მათი სრული დაჟანგვის დრო მრავალჯერ აღემატება გაზომვის დასაშვებ ხანგრძლივობას (10-20 წთ).

კიდევ უფრო მნიშვნელოვანია ანტიოქსიდანტის სტოქიომეტრიული კოეფიციენტი. რადიკალების რაოდენობა ნმის მიერ ჩაჭრილი უდრის , სადაც ρ არის სტექიომეტრიული კოეფიციენტი და ∆ მ- ანტიოქსიდანტის კონცენტრაციის ცვლილება გაზომვის დროს, ჩვენს შემთხვევაში - ტესტის ნივთიერების საწყისი კონცენტრაცია ტესტის ნიმუშში.

განსხვავება ლუმინესცენციის სინათლის ჯამში ანტიოქსიდანტის არარსებობისა და მისი თანდასწრებით პროპორციულია ნ. ჩაჭრილი რადიკალების საერთო რაოდენობა არის , სადაც ρ iარის კონკრეტული ანტიოქსიდანტის სტოქიომეტრიული კოეფიციენტი და მ ი- მისი კონცენტრაცია გაზომვისას. მოხვედრილი რადიკალების საერთო რაოდენობა აშკარად არ არის ანტიოქსიდანტების მთლიანი რაოდენობის ტოლი, რადგან კოეფიციენტები ρ iარა მხოლოდ არ უდრის ერთიანობას, არამედ მნიშვნელოვნად განსხვავდება სხვადასხვა ანტიოქსიდანტებისთვის.

მაგნიტუდა ნპროპორციულია სინათლის ჯამების სხვაობისა, რომელიც იზომება გარკვეული დროის განმავლობაში ანტიოქსიდანტის შემცველ ნიმუშსა და ანტიოქსიდანტების არ შემცველ საკონტროლო ნიმუშს შორის: ს = k n, სად კ- კოეფიციენტი, მუდმივი იმავე გაზომვის პირობებში.

სტატიაში განხილული მეთოდი საშუალებას გვაძლევს განვსაზღვროთ მთლიანი ანტიოქსიდანტური მოცულობა, ხოლო ქიმიური ანალიზი საშუალებას გვაძლევს განვსაზღვროთ პროდუქტში ანტიოქსიდანტების საერთო შემცველობა. აქედან გამომდინარე, ქიმილუმინესცენციის მეთოდი უფრო ინფორმაციულია, ვიდრე ქიმიური ანალიზი.

პირობები, რომლებიც შევარჩიეთ მცენარეული ნედლეულის მთლიანი ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების შესაფასებლად, ქიმილუმინესცენციის კინეტიკის ჩაწერით სისტემაში, რომელიც შედგება ცხენის პეროქსიდაზას, წყალბადის ზეჟანგისა და ლუმინოლისგან (კომპონენტის კონცენტრაცია - 4 ნმ, 100 μM და 40 μM, შესაბამისად; 20 მმ ფოსფატი. ბუფერი, pH 7.4), უზრუნველყო ძლიერი ანტიოქსიდანტების (ასკორბინის მჟავა) და საშუალო სიძლიერის ანტიოქსიდანტების (კერცეტინი) დაჟანგვა 10 წუთში. გაზომვის ეს ხანგრძლივობა მოსახერხებელია და უზრუნველყოფს გაზომვის საჭირო ხარისხს.

ქიმილუმინესცენციის კინეტიკის ანალიზმა აჩვენა, რომ შესწავლილ ობიექტებში (ყველის ნაყოფის, ვარდის თეძოს, კუნელის და ჟოლოს ნაყოფის ნაყენი) ძირითადი ანტიოქსიდანტებია საშუალო სიძლიერის ანტიოქსიდანტები, მათ შორის ფლავონოიდები და სუსტი სიძლიერის (ტოკოფეროლი და ა.შ.). ქიმილუმინესცენტური სინათლის ჯამის შემცირების საფუძველზე გამოითვალა მთლიანი ანტიოქსიდანტური სიმძლავრე შესწავლილი ობიექტებისთვის. მიღებული TAU მნიშვნელობების შედარებამ ქიმიური ანალიზის შედეგებთან აჩვენა, რომ პროდუქტები, რომლებიც შეიცავს იგივე რაოდენობის ანტიოქსიდანტებს სხვადასხვა თანაფარდობით, შეიძლება განსხვავდებოდეს მათი უნარით ეფექტურად დაიცვას სხეული თავისუფალი რადიკალების მავნე ზემოქმედებისგან. აღწერილი ტექნიკა პერსპექტიულია მცენარეული ობიექტების შესასწავლად, რომლებიც შეიცავს სხვადასხვა ანტიოქსიდანტების ნარევს. ამავე დროს, იგი ხასიათდება კვლევის სიმარტივით და დაბალი ღირებულებით. ქიმილუმინესცენციის კინეტიკის გაზომვის კომბინაცია რეაქციების მათემატიკური მოდელირებით არა მხოლოდ ავტომატიზირებს TAU-ს განსაზღვრის პროცესს, არამედ განსაზღვრავს ანტიოქსიდანტების ცალკეული ჯგუფების წვლილს ინდიკატორში.

საკვანძო სიტყვები

თავისუფალი რადიკალი/ანტიოქსიდანტი/ ანტიოქსიდანტური აქტივობა / მთლიანი ანტიოქსიდანტური უნარი / ქიმილუმინესცენცია/ ლუმინოლი / თავისუფალი რადიკალი / ანტიოქსიდანტური / ანტიოქსიდანტური აქტივობა / მთლიანი ანტიოქსიდანტური მოცულობა / ქიმილუმინესცენცია / ლუმინოლი

ანოტაცია სამეცნიერო სტატია ქიმიურ მეცნიერებებზე, სამეცნიერო ნაშრომის ავტორი - გეორგი კონსტანტინოვიჩ ვლადიმეროვი, ე.ვ.სერგუნოვა, დ.იუ.იზმაილოვი, იუ.ა.ვლადიმიროვი

სამკურნალო მცენარეული მასალები ადამიანის ორგანიზმისთვის ანტიოქსიდანტების ერთ-ერთი წყაროა. მცენარეულ ობიექტებში ანტიოქსიდანტების შემცველობის განსაზღვრის მეთოდებს შორის გავრცელებულია ქიმილუმინესცენციის ანალიზის მეთოდი. ამ ნაშრომში იგი გამოიყენებოდა შესაფასებლად მთლიანი ანტიოქსიდანტური უნარი(OAE) მარცვლეულის ხილის, ვარდის თეძოსა და კუნელის დეკორქცია და ჟოლოს ნაყოფის ინფუზია. კინეტიკა დაფიქსირდა ექსპერიმენტში ქიმილუმინესცენციასისტემაში, რომელიც შედგება რძის პეროქსიდაზას, წყალბადის ზეჟანგისა და ლუმინოლისგან. ნიმუშში სისტემის კომპონენტების კონცენტრაცია და მოცულობა ისე იყო შერჩეული, რომ გაზომვის დროს (10 წთ) მთლიანად დაჟანგულიყო ძლიერი ანტიოქსიდანტები (ასკორბინის მჟავა) და ზომიერი ანტიოქსიდანტები (კვერცეტინი). შემოთავაზებულია და დასაბუთებულია OAE-ის გამოთვლის მეთოდი მსუბუქი ჯამის ცვლილებების საფუძველზე ქიმილუმინესცენციამცენარეთა ნიმუშების თანდასწრებით. კინეტიკური ანალიზი ქიმილუმინესცენციააჩვენა, რომ შესწავლილ ობიექტებში დომინირებს საშუალო სიძლიერის ანტიოქსიდანტები, მათ შორის ფლავონოიდები და სუსტი ანტიოქსიდანტები (ტოკოფეროლი და სხვ.). შესწავლილი ობიექტებისთვის გამოთვლილი OAE მნიშვნელობების შედარებამ და მათი ქიმიური ანალიზის მონაცემებმა აჩვენა, რომ პროდუქტები, რომლებიც შეიცავს იგივე რაოდენობის ანტიოქსიდანტებს სხვადასხვა თანაფარდობით ტიპის მიხედვით, შეიძლება განსხვავდებოდეს ორგანიზმის დასაცავად თავისუფალი რადიკალების მავნე ზემოქმედებისგან. . აღწერილი ტექნიკა პერსპექტიულია მცენარეული ობიექტების შესასწავლად, რომლებიც შეიცავს სხვადასხვა ტიპის ანტიოქსიდანტების ნარევს.

დაკავშირებული თემები სამეცნიერო შრომები ქიმიურ მეცნიერებებში, სამეცნიერო ნაშრომის ავტორი - გეორგი კონსტანტინოვიჩ ვლადიმიროვი, ე.ვ.სერგუნოვა, დ.იუ.იზმაილოვი, იუ.ა.ვლადიმიროვი

2016 / Georgiy Vladimirov, Sergunova E.V., Izmaylov D.Yu., Vladimirov Yu.A.
ანტიოქსიდანტების განსაზღვრა გააქტიურებული ქიმილუმინესცენციით 2,2"-აზო-ბის(2-ამიდინოპროპანის) გამოყენებით
2012 / ალექსეევი A.V., Proskurnina E.V., Vladimirov Yu.A.
დიჰიდროკერცეტინისა და რუტინის ანტიოქსიდანტური მოქმედება პეროქსიდაზას რეაქციებში, რომლებიც კატალიზებულია ციტოქრომ c-ით
2008 / Demin E.M., Proskurnina E.V., Vladimirov Yu.A.
ბიოლოგიური სუბსტრატების ოქსიდაციური და ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების შეფასება ფენტონის რეაქციით გამოწვეული ქიმილუმინესცენციით
2016 / პისკარევი იგორ მიხაილოვიჩი, ი.პ. ივანოვა
შრატის ლიპოპროტეინებში ლიპოჰიდროპეროქსიდების შემცველობის განსაზღვრა მიკროპეროქსიდაზა-ლუმინოლის სისტემის გამოყენებით
2011 / ტესელკინი იური ოლეგოვიჩი, ბაბენკოვა ირინა ვლადიმეროვნა
ანტიოქსიდანტური კვლევის მეთოდები
2004 / Khasanov V.V., Ryzhova G.L., Maltseva E.V.
ტუვას ეთნომედიცინაში გამოყენებული მცენარეების ანტიოქსიდანტური მოქმედება
2012 / Chekhani N.R., Teselkin Yu.O., Pavlova L.A., Kozin S.V., Lyubitsky O.B.
ფოსპრენილის ანტიოქსიდანტური თვისებების შესწავლა სხვადასხვა ბიოლოგიურ საცდელ სისტემაში
2017 / A. V. Sanin, A. N. Narovlyansky, A. V. Pronin, T. N. Kozhevnikova, V. Yu. Sanina, A. D. Agafonova
პოლიქლორირებული ბიფენილის სხვადასხვა დოზების გავლენა მთლიანი სისხლის სპონტანურ და იმუნოგლობულინით გამოწვეული ლუმინოლზე დამოკიდებული ქიმილუმინესცენციის მდგომარეობაზე
2016 / გაბდულხაკოვა ი.რ., კაიუმოვა ა.ფ., სამოხოდოვა ო.ვ.
ანტიოქსიდანტური დაცვის ლიპიდური პეროქსიდაციის სისტემის შეფასება ესენციური არტერიული ჰიპერტენზიის მქონე ბავშვებში სპექტროფოტომეტრიისა და ქიმილუმინესცენციის მეთოდების გამოყენებით
2014 / ნათიაგანოვა ლარისა ვიქტოროვნა, გავრილოვა ოქსანა ალექსანდროვნა, კოლესნიკოვა ლარისა რომანოვნა

მთლიანი ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების ქიმილუმინესცენტური განსაზღვრა სამკურნალო მცენარეულ მასალაში

სამკურნალო მცენარეული მასალა ადამიანის ორგანიზმისთვის ანტიოქსიდანტების ერთ-ერთი წყაროა. ქიმილუმინესცენტური ანალიზი მცენარეულ მასალებში ანტიოქსიდანტების შემცველობის განსაზღვრის ერთ-ერთი გავრცელებული მეთოდია. ჩვენს ნაშრომში გამოიყენეს ქიმილუმინესცენციის ანალიზი მთის ნაცრის, ვარდის და კუნელის ხილის დეკორქციის მთლიანი ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების (TAC) დასადგენად, ასევე ჟოლოს ნაყოფის ინფუზია. ექსპერიმენტებმა დაადგინა სისტემის ქიმილუმინესცენციის კინეტიკა, რომელიც შედგება ცხენის პეროქსიდაზას, წყალბადის ზეჟანგისა და ლუმინოლისგან. სისტემის კომპონენტების კონცენტრაციები და მოცულობა შეირჩა ისე, რომ ძლიერი ანტიოქსიდანტები (ასკორბინის მჟავა) და საშუალო ძალის ანტიოქსიდანტები (კვერცეტინი) მთლიანად იჟანგება გაზომვისას (10 წუთი). შემოთავაზებული და დასაბუთებული იყო TAC-ის გაანგარიშების მეთოდი, რომელიც დაფუძნებულია ქიმილუმინესცენციის სინათლის ჯამის ცვლილებაზე მცენარეთა ნიმუშების თანდასწრებით. ქიმილუმინესცენციის კინეტიკის ანალიზმა აჩვენა, რომ შესწავლილ ობიექტებში დომინირებს საშუალო ძალის ანტიოქსიდანტები, მათ შორის ფლავონოიდები და სუსტი ანტიოქსიდანტები (ტოკოფეროლი და სხვა). შესწავლილი ობიექტებისთვის გამოთვლილი TAC მნიშვნელობების შედარებამ და მათი ქიმიური ანალიზის მონაცემებმა აჩვენა, რომ პროდუქტები, რომლებიც შეიცავს იგივე რაოდენობის ანტიოქსიდანტებს ანტიოქსიდანტების სხვადასხვა თანაფარდობით ტიპების მიხედვით, შეიძლება განსხვავდებოდეს მათი უნარში დაიცვან სხეული თავისუფალი რადიკალების მავნე ზემოქმედებისგან. . აღწერილი ტექნიკა პერსპექტიულია მცენარეული ობიექტების შესასწავლად, რომლებიც შეიცავს სხვადასხვა ტიპის ანტიოქსიდანტების ნარევს.

სამეცნიერო ნაშრომის ტექსტი თემაზე „ქიმილუმინესცენტური მეთოდი სამკურნალო მცენარეულ მასალებში მთლიანი ანტიოქსიდანტური სიმძლავრის დასადგენად“

ქიმილუმინესცენტური მეთოდი სამკურნალო მცენარეულ მასალებში მთლიანი ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების დასადგენად

G. K. Vladimirov1^, E. V. Sergunova2, D. Yu. Izmailov1, Yu. A. Vladimirov1

1 სამედიცინო ბიოფიზიკის განყოფილება, ფუნდამენტური მედიცინის ფაკულტეტი, M.V. ლომონოსოვის სახელობის მოსკოვის სახელმწიფო უნივერსიტეტი, მოსკოვი

2 ფარმაკოგნოზიის დეპარტამენტი, ფარმაცევტული ფაკულტეტი,

სეჩენოვის პირველი მოსკოვის სახელმწიფო სამედიცინო უნივერსიტეტი, მოსკოვი

სამკურნალო მცენარეული მასალები ადამიანის ორგანიზმისთვის ანტიოქსიდანტების ერთ-ერთი წყაროა. მცენარეულ ობიექტებში ანტიოქსიდანტების შემცველობის განსაზღვრის მეთოდებს შორის გავრცელებულია ქიმილუმინესცენციის ანალიზის მეთოდი. ამ ნამუშევარში ის გამოიყენებოდა როის, ვარდის და კუნელის ნაყოფების დეკორქციის მთლიანი ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების (TAC) შესაფასებლად და ჟოლოს ნაყოფის ინფუზიისთვის. ექსპერიმენტში ქიმილუმინესცენციის კინეტიკა დაფიქსირდა სისტემაში, რომელიც შედგებოდა ცხენის პეროქსიდაზას, წყალბადის ზეჟანგისა და ლუმინოლისგან. ნიმუშში სისტემის კომპონენტების კონცენტრაცია და მოცულობა ისე იყო შერჩეული, რომ გაზომვის დროს (10 წთ) მთლიანად დაჟანგულიყო ძლიერი ანტიოქსიდანტები (ასკორბინის მჟავა) და ზომიერი ანტიოქსიდანტები (კვერცეტინი). შემოთავაზებული და დასაბუთებულია OAE-ის გამოთვლის მეთოდი, რომელიც დაფუძნებულია ქიმილუმინესცენციის მსუბუქი ჯამის ცვლილებაზე მცენარეთა ნიმუშების თანდასწრებით. ქიმილუმინესცენციის კინეტიკის ანალიზმა აჩვენა, რომ შესწავლილ ობიექტებში ჭარბობს საშუალო სიძლიერის ანტიოქსიდანტები, მათ შორის ფლავონოიდები და სუსტი ანტიოქსიდანტები (ტოკოფეროლი და სხვ.). შესწავლილი ობიექტებისთვის გამოთვლილი OAE მნიშვნელობების შედარებამ და მათი ქიმიური ანალიზის მონაცემებმა აჩვენა, რომ პროდუქტები, რომლებიც შეიცავს იგივე რაოდენობის ანტიოქსიდანტებს სხვადასხვა თანაფარდობით ტიპის მიხედვით, შეიძლება განსხვავდებოდეს ორგანიზმის დასაცავად თავისუფალი რადიკალების მავნე ზემოქმედებისგან. . აღწერილი ტექნიკა პერსპექტიულია მცენარეული ობიექტების შესასწავლად, რომლებიც შეიცავს სხვადასხვა ტიპის ანტიოქსიდანტების ნარევს.

საკვანძო სიტყვები: თავისუფალი რადიკალი, ანტიოქსიდანტი, ანტიოქსიდანტური აქტივობა, მთლიანი ანტიოქსიდანტური უნარი, ქიმილუმინესცენცია, ლუმინოლი

დაფინანსება: სამუშაოს მხარდაჭერით განხორციელდა რუსეთის სამეცნიერო ფონდი გრანტი No14-15-00375.

Ex3 მიმოწერისთვის: გეორგი კონსტანტინოვიჩ ვლადიმროვი

119192, მოსკოვი, ლომონოსოვსკის პრ-ტ, 31, კორპუსი 5; [ელფოსტა დაცულია]

სტატია მიღებულია: 10.03.2016 სტატია მიღებულია გამოსაქვეყნებლად: 18.03.2016

ქიმილუმინესცენტური მთლიანი ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების განსაზღვრა სამკურნალო მცენარეულ მასალაში

ლომონოსოვის სახელობის მოსკოვის სახელმწიფო უნივერსიტეტის ფუნდამენტური მედიცინის ფაკულტეტის სამედიცინო ბიოფიზიკის განყოფილება, მოსკოვი, რუსეთი

2 ფარმაკოგნოზიის დეპარტამენტი, ფარმაცევტული ფაკულტეტი,

პირველი სეჩენოვის სახელობის მოსკოვის სახელმწიფო სამედიცინო უნივერსიტეტი, მოსკოვი, რუსეთი

საკვანძო სიტყვები: თავისუფალი რადიკალი, ანტიოქსიდანტური, ანტიოქსიდანტური აქტივობა, მთლიანი ანტიოქსიდანტური უნარი, ქიმილუმინესცენცია, ლუმინოლი

დაფინანსება: ეს ნაშრომი მხარდაჭერილია რუსეთის სამეცნიერო ფონდის მიერ, გრანტი No. 14-15-00375.

მადლიერება: ავტორები მადლობას უხდიან ანდრეი ალექსეევს ლომონოსოვის სახელობის მოსკოვის სახელმწიფო უნივერსიტეტიდან ექსპერიმენტის ჩატარებაში გაწეული დახმარებისთვის. მიმოწერა უნდა მიემართოს: გეორგი ვლადიმეროვი

ლომონოსოვსკის პროსპექტი, დ. 31, კ. 5, მოსკოვი, რუსეთი, 119192; ურ [ელფოსტა დაცულია]მიღება: 10.03.2016 მიღებული: 18.03.2016

ორგანიზმში წარმოქმნილი თავისუფალი რადიკალები არღვევს უჯრედის მემბრანების სტრუქტურას, რაც, თავის მხრივ, იწვევს სხვადასხვა პათოლოგიური მდგომარეობის განვითარებას. რადიკალების დესტრუქციულ ოქსიდაციურ ეფექტს ხელს უშლის ორგანიზმის ანტიოქსიდანტური თავდაცვის სისტემა, რომელშიც მნიშვნელოვან როლს ასრულებენ დაბალი მოლეკულური წონის ნაერთები - რადიკალების ჩამჭრელები (ხაფანგები). ანტიოქსიდანტების ერთ-ერთი წყაროა სამკურნალო მცენარეული მასალები, ასევე მათზე დაფუძნებული პრეპარატები, რომელთა ანტიოქსიდანტური პოტენციალის შესწავლა ხელს უწყობს მათი პროფილაქტიკური და თერაპიული ეფექტის გაზრდას.

ნაშრომებში განხილულია ანტიოქსიდანტების განსაზღვრის ძირითადი მეთოდები, თუმცა ანტიოქსიდანტების, როგორც ქიმიური ნაერთების განმარტება არ იძლევა სრულ სურათს შესასწავლი ობიექტის დამცავი თვისებების შესახებ: ისინი განისაზღვრება არა მხოლოდ კონკრეტული ანტიოქსიდანტის რაოდენობით, არამედ თითოეული მათგანის აქტიურობით. ანტიოქსიდანტური აქტივობა, ან ანტიოქსიდანტური აქტივობა, AOA, არის ანტიოქსიდანტის რეაქციის სიჩქარის მუდმივი თავისუფალ რადიკალთან (kInH). ქიმილუმინესცენციის (CL) მეთოდი შესაძლებელს ხდის განისაზღვროს რადიკალების ჯამური რაოდენობა, რომლებიც აკავშირებენ ანტიოქსიდანტებს ნიმუშში (ტოტალური ანტიოქსიდანტური სიმძლავრე, TCA) და CL კინეტიკის მათემატიკური მოდელირების მეთოდის გამოყენებისას ასევე ფორმირებისა და რეაქციის სიჩქარე. რადიკალები ანტიოქსიდანტებით, ანუ AOA.

ქიმილუმინესცენციის მეთოდის ყველაზე გავრცელებული მოდიფიკაცია მთლიანი ანტიოქსიდანტური სიმძლავრის დასადგენად ემყარება ლუმინოლის, როგორც ქიმილუმინესცენციის აქტივატორის გამოყენებას. ნიმუში ლუმინოლის, წყალბადის ზეჟანგის და ნაერთის დამატებით, რომელსაც შეუძლია რადიკალების წარმოქმნა სპონტანური დაშლის (თერმოლიზის) შედეგად, მაგალითად 2,2"-აზობის-(2-ამიდინოპროპანი) დიჰიდროქლორიდი (ABAP):

მოლეკულური ჟანგბადის თანდასწრებით, ალკილის რადიკალი R^ ქმნის პეროქსილის რადიკალს ROO^:

ROO^ + LH2 ^ ROOH + LHv LH-დან, შუალედური ნივთიერებების (ლუმინოლის ჰიდროპეროქსიდი და ლუმინოლის ენდოპეროქსიდი) წარმოქმნის გზით, ელექტრონულად აღგზნებულ მდგომარეობაში წარმოიქმნება ლუმინოლის დაჟანგვის საბოლოო პროდუქტის მოლეკულა, ამინოფტალის მჟავა, რომელიც გამოყოფს ფოტონს. , და შედეგად შეინიშნება ქიმილუმინესცენცია . CL ინტენსივობა პროპორციულია ფოტონის წარმოქმნის სიჩქარისა და ის, თავის მხრივ, პროპორციულია სისტემაში LH-ის სტაციონარული კონცენტრაციისა. რადიკალებთან ურთიერთქმედებით ანტიოქსიდანტები წყვეტენ გარდაქმნების აღწერილ ჯაჭვს და ხელს უშლიან ფოტონის წარმოქმნას.

თერმოლიზისადმი მგრძნობიარე ნაერთები არ არის რადიკალების ერთადერთი შესაძლო წყარო ნიმუშის ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების გაანალიზებისას ქიმილუმინესცენტური მეთოდის გამოყენებით. ალტერნატივებია ცხენის პეროქსიდაზა-წყალბადის ზეჟანგი, ჰემინ-წყალბადის ზეჟანგი, ციტოქრომ c-კარდიოლიპინი-წყალბადის ზეჟანგი და ა.შ. პეროქსიდაზებით ლუმინოლის დაჟანგვის რეაქციის სქემა განხილულია Cormier et al-ის ნაშრომში. .

ამ სისტემებისთვის CL კინეტიკური მრუდები ასახავს რეაქციის ორ ეტაპს: CL ინტენსივობის გაზრდის სტადიას და პლატოს სტადიას ან ლუმინესცენციის თანდათანობით დაქვეითებას, როდესაც

CL ინტენსივობა ან მუდმივია ან ნელა მცირდება. ნაშრომი აღწერს ორ მიდგომას მთლიანი ანტიოქსიდანტური სიმძლავრის გასაზომად, რომელიც ითვალისწინებს მრუდების ამ მახასიათებელს. TRAP (მთლიანი რეაქტიული ანტიოქსიდანტური პოტენციალი) მეთოდი ეფუძნება CL t-ის ლატენტური პერიოდის გაზომვას და შეიძლება გამოყენებულ იქნას ანტიოქსიდანტების დასადგენად, როგორიცაა Trolox ან ასკორბინის მჟავა: ისინი ხასიათდებიან მაღალი რეაქციის სიჩქარის მუდმივით რადიკალების მიმართ და ამ მიზეზით შეიძლება იყოს ძლიერ ანტიოქსიდანტებს უწოდებენ. ლატენტურ პერიოდში ხდება მათი სრული დაჟანგვა. TAR (მთლიანი ანტიოქსიდანტური რეაქტიულობა) მეთოდი გამოიყენება ქიმილუმინესცენციის ჩაქრობის q ხარისხის გასაზომად ქიმილუმინესცენციის მრუდის პლატოზე ან მაქსიმუმზე:

სადაც I არის ქიმილუმინესცენციის ინტენსივობა ანტიოქსიდანტის გარეშე და 11 არის CL ინტენსივობა ანტიოქსიდანტის თანდასწრებით. ეს მეთოდი გამოიყენება, თუ სისტემა შეიცავს უპირატესად სუსტ ანტიოქსიდანტებს რადიკალებთან ურთიერთქმედების დაბალი სიჩქარის მუდმივებით - გაცილებით დაბალია ლუმინოლის მუდმივთან შედარებით.

ანტიოქსიდანტების მოქმედება ხასიათდება არა მხოლოდ t და c მაჩვენებლებით. როგორც ნაშრომებიდან ჩანს, ანტიოქსიდანტების მოქმედება, როგორიცაა შარდმჟავა ჰემინ-H2O2-ლუმინოლ სისტემაში ან ტოკოფეროლი, რუტინი და კვერცეტინი ციტოქრომ c-კარდიოლიპინი-H2O2-ლუმინოლის სისტემაში ხასიათდება მაქსიმალური სიჩქარის ცვლილებით. ზრდის CL (utx). როგორც კინეტიკის მათემატიკური მოდელირების შედეგები აჩვენებს, ამ ანტიოქსიდანტების რადიკალებთან ურთიერთქმედების სიჩქარის მუდმივების მნიშვნელობები ახლოსაა ლუმინოლის მუდმივთან, ამიტომ ასეთ ანტიოქსიდანტებს შეიძლება ეწოდოს საშუალო სიძლიერის ანტიოქსიდანტები.

თუ შესასწავლი მასალა, კერძოდ მცენარეული ნედლეული შეიცავდა მხოლოდ ერთი ტიპის ანტიოქსიდანტს, მაშინ მათი შემცველობა შეიძლება დახასიათდეს ზემოთ ჩამოთვლილი სამი ინდიკატორიდან ერთ-ერთით (t, c ან V). მაგრამ მცენარეული მასალები შეიცავს სხვადასხვა სიძლიერის ანტიოქსიდანტების ნარევს. ამ პრობლემის გადასაჭრელად, ზოგიერთმა ავტორმა გამოიყენა ქიმილუმინესცენციის მსუბუქი ჯამის ცვლილება DE გარკვეული დროით, გამოთვლილი ფორმულით

DE = DE0 - DE,

სადაც DE0 და DE5 არის CL სინათლის ჯამები მოცემული დროისთვის? საკონტროლო და საგამოცდო ნიმუშებში, შესაბამისად. დრო საკმარისი უნდა იყოს სისტემის ყველა ანტიოქსიდანტის დაჟანგვისთვის, ანუ იმისთვის, რომ ტესტის ნიმუშის CL მრუდი მიაღწიოს საკონტროლო ნიმუშის CL მრუდის დონეს. ეს უკანასკნელი ვარაუდობს, რომ მკვლევარებმა არა მხოლოდ უნდა ჩაიწერონ სინათლის ჯამი, არამედ ჩაწერონ CL კინეტიკური მრუდი საკმარისად დიდი ხნის განმავლობაში, რაც ყოველთვის არ კეთდება.

ვინაიდან ყველა გაზომილი პარამეტრი დამოკიდებულია მოწყობილობასა და გაზომვის პირობებზე, შესწავლილ სისტემაში ნივთიერების ანტიოქსიდანტური მოქმედება ჩვეულებრივ შედარებულია სტანდარტული ანტიოქსიდანტის, მაგალითად, ტროლოქსის ეფექტთან.

მწვანილის პეროქსიდაზა-წყალბადის ზეჟანგი სისტემა გამოიყენებოდა მრავალი ავტორის მიერ მცენარეული მასალების მთლიანი ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების გასაანალიზებლად. ნიმუშებში ანტიოქსიდანტების რაოდენობის შესაფასებლად გამოყენებული იქნა CL-ის ლატენტური პერიოდი (TRAP მეთოდი) და სამუშაოებში გამოყენებული იქნა CL განვითარების მრუდის ქვეშ არსებული ფართობი. თუმცა, ჩამოთვლილი სამუშაოები არ იძლევა ნათელ დასაბუთებას

ამა თუ იმ პარამეტრის არჩევანი OAU-ს შესაფასებლად.

ᲛᲐᲡᲐᲚᲐ ᲓᲐ ᲛᲔᲗᲝᲓᲔᲑᲘ

კვლევის ობიექტებს წარმოადგენდა სს Krasnogorskleksredstva (რუსეთი) მიერ წარმოებული კუნელის, თაფლის და ვარდის თეძოს სამრეწველო ნიმუშები, ასევე ჟოლოს ხილი, რომლებიც ავტორებმა შეაგროვეს მოსკოვის რეგიონში ბუნებრივი ზრდის პირობებში და გამხმარი 60-80 ° ტემპერატურაზე. C სანამ არ შეწყვეტენ წვენის გამოყოფას და დეფორმაციას დაჭერისას.

ქიმილუმინესცენტური მეთოდით ანტიოქსიდანტური სიმძლავრის ანალიზის რეაგენტები იყო: KH2PO4, 20 მმ ბუფერული ხსნარი (pH 7.4); პეროქსიდაზა ცხენის ფესვებიდან (აქტივობა 112 ერთეული/მგ, M = 44173,9), 1 მმ წყალხსნარი; ლუმინოლი (5-ამინო-1,2,3,4-ტეტრაჰიდრო-1,4-ფთალაზინედიონი, 3-ამინოფტალის მჟავას ჰიდრაზიდი, M = 177,11), 1 მმ წყალხსნარი; წყალბადის ზეჟანგი (H2O2, M = 34,01), 1 მმ წყალხსნარი; ანტიოქსიდანტების ხსნარები (ასკორბინის მჟავა, კვერცეტინი, ტოკოფეროლი). ყველა რეაგენტი დამზადებულია Sigma Aldrich-ის (აშშ) მიერ.

მიაღწია პლატოს, რაც მიუთითებს სისტემაში ანტიოქსიდანტების სრულ განადგურებაზე. შესწავლილი ნიმუშების განზავება და სტანდარტული ანტიოქსიდანტების ხსნარების კონცენტრაციები (მითითებულია ფიგურების წარწერებში) შეირჩა ისე, რომ CL-ის ყველა კინეტიკური მრუდი გაზომილი იყო მოწყობილობის ერთნაირი მგრძნობელობით.

ანტიოქსიდანტური სიმძლავრე გამოითვლებოდა ფართობის (AS) ცვლილების მიხედვით ქიმილუმინესცენციის კინეტიკური მრუდის ქვეშ (მსუბუქი ჯამი) ანტიოქსიდანტის შემცველი ნივთიერების დამატებისას. ამისათვის ჩვენ გამოვთვალეთ S0 სისტემისთვის ანტიოქსიდანტის გარეშე და გამოვაკლეთ SS ფართობი, რომელიც ახასიათებს სისტემას, რომელსაც დაემატა ანტიოქსიდანტი. AS-ის მნიშვნელობა დამოკიდებულია ქიმილუმინომეტრის მგრძნობელობაზე და გაზომვის პირობებზე. თანაფარდობა AS/C ■ V (სადაც C არის შესწავლილი ბიოლოგიური მასალის კონცენტრაცია კუვეტში, გ/ლ და V არის კუვეტის მოცულობა, l) გამოხატავს შესწავლილი მასალის 1 გ ანტიოქსიდანტურ შესაძლებლობებს, ანუ მცენარეული ნედლეული.

ანალოგიურად, ჩვენ გამოვთვალეთ ანტიოქსიდანტური სიმძლავრე ASa სტანდარტული ანტიოქსიდანტის, მაგალითად, კვერცეტინის ხსნარის, რომელიც მოთავსებულია სარეაქციო ნარევის იმავე მოცულობაში. თანაფარდობა AS/CÄ ■ V (სადაც CA არის ანტიოქსიდანტის წონის კონცენტრაცია კუვეტში, გ/ლ) გამოხატავს 1 გ ანტიოქსიდანტის ანტიოქსიდანტურ შესაძლებლობებს.

თითოეული სტანდარტული ანტიოქსიდანტისთვის ჩაწერილი იყო სიგნალი რამდენიმე კონცენტრაციის ხსნარებიდან, რათა უზრუნველყოფილიყო, რომ გამოთვლები იყო წრფივი ურთიერთობის ფარგლებში და მიღებული შედეგები იყო რეპროდუცირებადი. მართლაც, მიღებული იქნა სიგნალის წრფივი დამოკიდებულება (ASa = kA ■ CA) კონცენტრაციაზე, საიდანაც გამოითვალა stoichiometric კოეფიციენტი kA. ფიშერის კრიტერიუმის მიხედვით, სტანდარტული ანტიოქსიდანტებისთვის მიღებული kA მნიშვნელობები სტატისტიკურად მნიშვნელოვანია 0,975 ალბათობით. შემდეგ, ოთხი კონცენტრაციიდან სიგნალი ჩაიწერა მცენარის ოთხი ნიმუშიდან თითოეულზე და ყველა ნიმუშისთვის მიღებულ იქნა სიგნალის ხაზოვანი დამოკიდებულება კონცენტრაციაზე (AS = k ■ C), საიდანაც გამოითვალა სტოქიომეტრიული კოეფიციენტი k. 0,975 ალბათობით (ფიშერის ტესტი), მცენარეთა ნიმუშებისთვის მიღებული k მნიშვნელობები სტატისტიკურად მნიშვნელოვანია. მცენარეული მასალის მთლიანი ანტიოქსიდანტური სიმძლავრე სტანდარტული ანტიოქსიდანტის მასის მიხედვით (მგ%) აღმოჩნდა ფორმულის გამოყენებით

OAE = k ■ 105. კ

მნიშვნელობები წარმოდგენილი იყო როგორც საშუალო არითმეტიკული ± სტანდარტული გადახრა (M ± 5) p-ზე<0,05.

კვლევის შედეგები

ქიმილუმინესცენციის კინეტიკის შესწავლამ ნატრიუმის ასკორბატის თანდასწრებით (ნახ. 1) აჩვენა, რომ ამ ანტიოქსიდანტს ახასიათებს ლატენტური პერიოდი, როდესაც CL თითქმის მთლიანად დათრგუნულია. მისი ხანგრძლივობა სისტემაში ანტიოქსიდანტის რაოდენობის პროპორციულია. ამ შემთხვევაში, არც CL მოსახვევების დახრილობა და არც CL ინტენსივობა პლატოზე არ იცვლება. ეს აიხსნება იმით, რომ ასკორბინის მჟავა არის ძლიერი ანტიოქსიდანტი, რომელიც წყვეტს სისტემაში წარმოქმნილ ყველა რადიკალს, მათ შორის ლუმინოლის რადიკალებს, და CL არ ვითარდება მანამ, სანამ მთელი ასკორბატი არ დაჟანგდება.

ტოკოფეროლის ეფექტი (ნახ. 2) გამოიხატებოდა პლატოზე CL ინტენსივობის შემცირებით, რაც დამახასიათებელია სუსტი ანტიოქსიდანტებისთვის, თუმცა ტოკოფეროლი ითვლება ერთ-ერთ ყველაზე მეტად.

ძლიერი ანტიოქსიდანტები. შესაძლოა, ეს შეუსაბამობა გამოწვეულია იმით, რომ ჩვენს ექსპერიმენტში თავისუფალი რადიკალები იყო წყალხსნარში, მაშინ როდესაც ტოკოფეროლის ეფექტი ჩვეულებრივ შესწავლილია არაპოლარულ მედიაში. კვლევაში, სადაც რადიკალების წყარო იყო ციტოქრომის c კომპლექსი კარდიოლიპინთან და რეაქცია ლუმინოლთან ამ კომპლექსში მიმდინარეობდა, ტოკოფეროლს ჰქონდა საშუალო სიძლიერის ანტიოქსიდანტის თვისებები.

ჩვენს სისტემაზე კვერცეტინის სხვადასხვა კონცენტრაციის ზემოქმედების შესწავლის შემდეგ (ნახ. 3) და მისი და ნატრიუმის ასკორბატისა და ტოკოფეროლის კინეტიკური მრუდების შედარების შემდეგ, შეიძლება აღინიშნოს, რომ კვერცეტინის ძირითადი ეფექტი გამოიხატება ფერდობის ცვლილებაში. მრუდები, ანუ CL-ის განვითარების ტემპი, რომელიც დამახასიათებელია საშუალო სიძლიერის ანტიოქსიდანტებისთვის.

CL მრუდები ყველა შესწავლილი დეკორქციისთვის (ნახ. 4) წააგავს კვერცეტინის მრუდებს CL ინტენსივობის უმნიშვნელო შემცირებით ბოლოს, ე.ი.

დრო, მინ

ბრინჯი. 1. ნატრიუმის ასკორბატის ეფექტი ქიმილუმინესცენციის კინეტიკაზე

სისტემის კომპონენტების კონცენტრაციები: ლუმინოლი - 40 μM, რძის პეროქსიდაზა - 4 ნმ, წყალბადის ზეჟანგი - 100 μM. მოსახვევები: 1 - საკონტროლო ნიმუში; 2 - 0.05 მკმ; 3 - 0.10 მკმ; 4 - 0,15 მკმ; 5 - 0.2 მკმ; 6 - 0,25 μM ნატრიუმის ასკორბატი.

პლატო. როგორც ნაშრომშია ნაჩვენები, ეს ქცევა დამახასიათებელია საშუალო სიძლიერის ანტიოქსიდანტებისთვის, რომლებიც ჩვენს შემთხვევაში მოიცავს პოლიფენოლებს - ფლავონოიდებს და ტანინებს. ჟოლოს ნაყოფის ინფუზიისთვის (ნახ. 4, D) შესამჩნევია ქიმილუმინესცენციის დაქვეითება პლატოზე, რაც დამახასიათებელია სუსტი ანტიოქსიდანტებისთვის, როგორიცაა ტოკოფეროლი ამ შემთხვევაში. კვერცეტინისა და ტოკოფეროლის თვალსაზრისით, ჟოლოს ინფუზია შეიცავს 4,7 ± 0,9 მკმოლ/გ კვერცეტინს და 11,9 ± 0,8 მკმოლ/გ ტოკოფეროლს.

მცენარეული მასალის ოთხი შესწავლილი წყლის ექსტრაქტის სხვადასხვა კონცენტრაციისთვის მიღებული ქიმილუმინესცენციის მრუდების შედარებისას ნაჩვენები იყო, რომ საშუალო და სუსტი ანტიოქსიდანტების წვლილი ნიმუშების მთლიან ანტიოქსიდანტურ შესაძლებლობებში შემცირდა შემდეგ სერიაში: ჟოლოს ნაყოფის ინფუზია (ნახ. 4. , დ), ვარდის თეძოს დეკორქცია (სურ. 4, B), ქერქის ნაყოფის დეკორქცია (ნახ. 4, ა), კუნელის ნაყოფის დეკორქცია (ნახ. 4, ბ). AS-ის მნიშვნელობები კუვეტაში შესწავლილი ნივთიერების C კონცენტრაციაზე და კვერცეტინის მთლიანი ანტიოქსიდანტური ტევადობის მნიშვნელობები ნაჩვენებია ცხრილში.

შედეგების განხილვა

ექსპერიმენტების დროს მიღებული მონაცემები და მათ საფუძველზე გამოთვლილი შესწავლილი ობიექტების OAE მნიშვნელობები შედარებულია მათში არსებული ძირითადი ანტიოქსიდანტების შემცველობასთან, რომელიც განისაზღვრება ანალიზის ქიმიური მეთოდების გამოყენებით. იმისდა მიუხედავად, რომ დადებითი კორელაცია სხვადასხვა ობიექტებში ანტიოქსიდანტების საერთო რაოდენობასა და TAU-ს შორის უდაოა, ამ მაჩვენებლებს შორის მაინც არის შესამჩნევი განსხვავებები. მაგალითად, თუ ავიღებთ ფლავონოიდების, მთრიმლავი ნივთიერებების და ასკორბინის მჟავას შემცველობის ჯამს, გამოდის, რომ იგი აღემატება გამოთვლილ TAU-ს ყველა შესწავლილი ობიექტისთვის, გარდა კუნელის ნაყოფის დეკორქციისა (ცხრილი).

სხვა მკვლევარებმა ასევე აჩვენეს, რომ ქიმიური ანალიზის შედეგები და ქიმილუმინესცენტური მეთოდით განსაზღვრული TAU სიდიდე ხშირად არ ემთხვევა ერთმანეთს. ექსპლუატაციის დროს განისაზღვრება მთლიანი ანტიოქსიდანტური მოცულობა

46 დრო, წთ

მე" "ჰ ჩი----.

ბრინჯი. 2. ტოკოფეროლის ეფექტი ქიმილუმინესცენციის კინეტიკაზე

სისტემის კომპონენტების კონცენტრაციები: ლუმინოლი - 40 μM, რძის პეროქსიდაზა - 4 ნმ, წყალბადის ზეჟანგი - 100 μM. მოსახვევები: 1 - საკონტროლო ნიმუში; 2 - 0.01 მკმ; 3 - 0,025 მკმ; 4 - 0,06 მკმ; 5 - 0.1 მკმ; 6 - 0,2 მკმ ტოკოფეროლი.

46 დრო, წთ

ბრინჯი. 3. კვერცეტინის მოქმედება ქიმილუმინესცენციის კინეტიკაზე. სისტემის კომპონენტების კონცენტრაცია: ლუმინოლი - 40 μM, რძის პეროქსიდაზა - 4 ნმ, წყალბადის ზეჟანგი - 100 μM. მოსახვევები: 1 - საკონტროლო ნიმუში; 2 - 0.02 მკმ; 3 - 0.03 მკმ; 4 - 0.04 მკმ; 5 - 0.05 მკმ; 6 - 0,06 მკმ კვერცეტინი.

დრო, მინ

46 დრო, წთ

120 მე 100 80\60 40 20

46 დრო, წთ

ბრინჯი. 4. ქერქის ნაყოფის (A), კუნელის (B), ვარდის თეძოს (C) და ჟოლოს ნაყოფის ინფუზიის (D) ეფექტი ქიმილუმინესცენციის კინეტიკაზე.სისტემის კომპონენტების კონცენტრაცია: ლუმინოლი - 40 μM, რძის პეროქსიდაზა - 4 nM, წყალბადის ზეჟანგი - 100 μM. (A) მრუდები: 1 - საკონტროლო ნიმუში; 2 - 0,002 გ/ლ; 3 - 0,004 გ/ლ; 4 - 0,006 გ/ლ; 5 - 0,008 გ/ლ ქერქის ნაყოფის ნახარში. (B) მრუდები: 1 - საკონტროლო ნიმუში; 2 - 0,005 გ/ლ; 3 - 0,0075 გ/ლ; 4 - 0,01 გ/ლ; კუნელის ნაყოფის 5 - 0,0125 გ/ლ დეკორქცია. (B) მრუდები: 1 - საკონტროლო ნიმუში; 2 - 0,001 გ/ლ; 3 - 0,0015 გ/ლ; 4 - 0,002 გ/ლ; 5 - 0,0025 გ/ლ ვარდის დეკორქცია. (D) მრუდები: 1 - საკონტროლო ნიმუში; 2 - 0,001 გ/ლ; 3 - 0,003 გ/ლ; 4 - 0,004 გ/ლ; ჟოლოს ნაყოფის 5 - 0,005 გ/ლ ინფუზია.

პეროქსიდაზა-ლუმინოლ-წყალბადის ზეჟანგის სისტემაში კორელირებულია ტრიტერპენის ნაერთების შემცველობასთან. ამასთან, იმავე ავტორების ნაშრომში, რომელშიც შესწავლის ობიექტი იყო სხვა მცენარე, მათ არ დააფიქსირეს OAE-ს კორელაცია ნებისმიერი ჯგუფის ნივთიერებების, მათ შორის ფლავონოიდების შემცველობასთან.

ასეთი შეუსაბამობები დაკავშირებულია მინიმუმ სამ ფაქტორთან. პირველ რიგში, მნიშვნელოვანია ანტიოქსიდანტების აქტივობა, ანუ რადიკალებთან მათი ურთიერთქმედების სიჩქარე, რომელიც განსხვავებულია მცენარეთა ნიმუშში შემავალი სხვადასხვა ანტიოქსიდანტებისთვის. იზმაილოვის თქმით, მექსიდოლის, ტოკოფეროლისა და კვერცეტინის შესაბამისი რეაქციების სიჩქარის მუდმივები კორელაციაშია 0.04: 2: 60. მეორეც, ყოველი ანტიოქსიდანტის მოლეკულა, რომელიც შედის ქიმიურ რეაქციაში, შეუძლია სხვადასხვა რაოდენობის რადიკალების ჩაჭრა. ნაშრომის მიხედვით, კვერცეტინმა, შარდმა და ასკორბინის მჟავებმა შეაჩერეს 3,6 ± 0,1, 1,4 ± 0,1 და 0,5 ± 0,2 რადიკალები რეაქტიულ ანტიოქსიდანტურ მოლეკულაზე, შესაბამისად (გამოყენებული იყო ჰემინ-H2O2-ლუმინოლის სისტემა). მესამე, კვლევის შედეგებზე შეიძლება გავლენა იქონიოს პეროქსიდაზას აქტივობის არსებობამ თავად მცენარის ნიმუშებში, როგორც სამუშაოში, ასევე ნიმუშებში კალციუმის არსებობამ, რომელიც, როგორც ნაშრომშია ნაჩვენები, შეუძლია გაზარდოს. რძის პეროქსიდაზას აქტივობა გარკვეულ პირობებში. ეს ჩვეულებრივ იწვევს უფრო მეტს

უფრო მაღალი CL ინტენსივობა პლატოზე, ვიდრე საკონტროლო მოსახვევებზე, რასაც ჩვენ, თუმცა, არ დავაკვირდით.

პირველი ფაქტორი მკვეთრად ზღუდავს ისეთი პარამეტრის გამოყენებას, როგორიცაა სინათლის ჯამის ცვლილება, რადგან ქიმილუმინესცენციის გაზომვის დრო უნდა იყოს უფრო გრძელი ვიდრე ტესტის ნიმუშში ყველა ანტიოქსიდანტის მოხმარების დრო. ამ მომენტის წარმოშობის შესახებ შეიძლება ვიმსჯელოთ მხოლოდ ქიმილუმინესცენციის კინეტიკის გაზომვით. გარდა ამისა, სუსტი ანტიოქსიდანტების წვლილი OAU-ში მკვეთრად არ არის შეფასებული, რადგან მათი სრული დაჟანგვის დრო მრავალჯერ აღემატება მისაღები გაზომვის ხანგრძლივობას (10-20 წთ).

კიდევ უფრო მნიშვნელოვანია ანტიოქსიდანტის სტოქიომეტრიული კოეფიციენტი. მის მიერ ჩაჭრილი n რადიკალების რაოდენობა უდრის

სადაც p არის სტექიომეტრიული კოეფიციენტი, ხოლო Am არის ანტიოქსიდანტის კონცენტრაციის ცვლილება გაზომვის დროს, ჩვენს შემთხვევაში, ტესტის ნივთიერების საწყისი კონცენტრაცია ტესტის ნიმუშში.

ლუმინესცენციის სინათლის ჯამის სხვაობა ანტიოქსიდანტის არარსებობის და მისი არსებობის შემთხვევაში პროპორციულია n-ის. ჩაჭრილი რადიკალების საერთო რაოდენობა უდრის n = Y.p. მ,

სადაც არის კონკრეტული ანტიოქსიდანტის სტოქიომეტრიული კოეფიციენტი და m არის მისი კონცენტრაცია გაზომვისას

კვლევის ობიექტი ფლავონოიდები, მგ%* ტანინები, მგ%* ასკორბინის მჟავა, მგ%* AS/C ■ 10-8, არბ. ერთეულები TAU, მგ% კვერცეტინი

ქედის ხილის დეკორქცია 8,87 ± 0,01 210,00 ± 10,00 0,67 ± 0,02 7,13 ± 0,96 56,53 ± 7,61

ვარდის დეკორქცია 4,66 ± 0,04 850,00 ± 20,00 3,70 ± 0,12 16,60 ± 3,40 131,63 ± 27,26

კუნელის ნაყოფის დეკორქცია 3,01 ± 0,06 12,00 ± 3,00 0,23 ± 0,002 3,18 ± 0,29 25,20 ± 2,32

ჟოლოს ხმელი ნაყოფის ინფუზია 90,00 ± 4,00 40,00 ± 20,00 3,91 ± 0,08 6,65 ± 1,21 52,69 ± 9,56

შენიშვნა: * - ლიტერატურის მონაცემები, . AS - ნიმუშის მსუბუქი ჯამის ცვლილება, რელ. ერთეული, C - ნიმუშის კონცენტრაცია კუვეტში, გ/ლ. გამოთვლილი მნიშვნელობები საიმედოა გვ<0,05. Число измерений для каждого образца - четыре.

რენია. ჩაჭრილი რადიკალების საერთო რაოდენობა, რა თქმა უნდა, არ არის ანტიოქსიდანტების მთლიანი რაოდენობის ტოლი, რადგან pt კოეფიციენტები არა მხოლოდ არ არის ტოლი ერთიანობის, არამედ მნიშვნელოვნად განსხვავდება სხვადასხვა ანტიოქსიდანტებისთვის.

n-ის მნიშვნელობა პროპორციულია სინათლის ჯამების სხვაობისა, რომელიც იზომება გარკვეული დროის განმავლობაში ანტიოქსიდანტის შემცველ ნიმუშსა და ანტიოქსიდანტების არ შემცველ საკონტროლო ნიმუშს შორის:

სადაც k არის კოეფიციენტი, რომელიც მუდმივია იმავე გაზომვის პირობებში.

ჩვენ შევარჩიეთ პირობები მცენარეული ნედლეულის მთლიანი ანტიოქსიდანტური სიმძლავრის შესაფასებლად ქიმილუმინესცენციის კინეტიკის ჩაწერით სისტემაში, რომელიც შედგება ცხენის პეროქსიდაზას, წყალბადის ზეჟანგისა და ლუმინოლისგან (კომპონენტის კონცენტრაცია - 4 ნმ, 100 μM და 40 μM, შესაბამისად; 20 მმ ფოსფატი. ბუფერი, pH 7.4),

უზრუნველყო ძლიერი ანტიოქსიდანტების (ასკორბინის მჟავა) და საშუალო სიძლიერის ანტიოქსიდანტების (კერცეტინი) დაჟანგვა 10 წუთში. გაზომვის ეს ხანგრძლივობა მოსახერხებელია და უზრუნველყოფს გაზომვის საჭირო ხარისხს.

ლიტერატურა

1. Proskurnina E. V., Vladimirov Yu. A. თავისუფალი რადიკალები, როგორც მონაწილეები მარეგულირებელ და პათოლოგიურ პროცესებში. In: Grigoriev A.I., Vladimirov Yu.A., რედაქტორები. ძირითადი მეცნიერებები - მედიცინა. ბიოფისი. თაფლი. ტექნიკა. M.: MAX Press; 2015. ტ.1. გვ. 38-71.

3. Khasanov V.V., Ryzhova G.L., Maltseva E.V. ანტიოქსიდანტების შესწავლის მეთოდები. ქიმ. რას. ნედლეული. 2004 წელი; (3): 63-75.

4. Vasiliev R. F., Kancheva V. D., Fedorova G. F., Butovska D. I., Trofimov A. V. ქალკონების ანტიოქსიდანტური აქტივობა. რეაქტიულობის ქიმილუმინესცენტური განსაზღვრა და რეაგენტებისა და შუალედური ნივთიერებების ენერგიებისა და სტრუქტურების კვანტური ქიმიური გამოთვლა. კინეტიკა და კატალიზი. 2010 წელი; 51 (4): 533-41.

6. Fedorova GF, Trofimov AV, Vasil"ev RF, Veprintsev TL. პეროქსი-

რადიკალური შუამავლობით ქიმილუმინესცენცია: მექანიკური მრავალფეროვნება და საფუძვლები ანტიოქსიდანტური ანალიზისთვის. არკივოკი. 2007 წელი; 8: 163-215.

8. Bastos EL, Romoff P, Eckert CR, Baader WJ. ანტირადიკალური შესაძლებლობების შეფასება H2O2-ჰემინით გამოწვეული ლუმინოლის ქიმილუმინესცენციით. J Agric Food Chem. 2003 3 დეკემბერი; 51 (25): 7481-8.

9. Vladimirov Yu. A., Proskurnina E. V. თავისუფალი რადიკალები და უჯრედული ქიმილუმინესცენცია. უსპეხის ბიოლ. ქიმ. 2009 წელი; 49: 341-88.

10. Vladimirov Yu. A., Proskurnina E. V., Izmailov D. Yu. კინეტიკური ქიმილუმინესცენცია, როგორც თავისუფალი რადიკალების რეაქციების შესწავლის მეთოდი. ბიოფიზიკა. 2011 წელი; 56 (6): 1081-90 წწ.

11. Izmailov D. Yu., Demin E. M., Vladimirov Yu. A. ანტიოქსიდანტური აქტივობის განსაზღვრა ქიმილუმინესცენციის კინეტიკის გაზომვით. ფოტობიოლოგია და ფოტომედიცინა. 2011 წელი; 7 (2): 70-6.

12. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. ლუმინოლის ლუმინესცენცია გამოწვეული 2.2"-აზო-ბის(2-ამიდინოპროპანი) თერმოლიზით. უფასო

Radic Res Commun. 1992 წელი; 17 (5): 299-311.

13. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. ლუმინოლის ლუმინესცენციის ჩაქრობის გამოყენების შესახებ SOD აქტივობის შესაფასებლად. თავისუფალი რადიკის ბიოლ მედ. 1994 ივნისი; 16 (6): 833-7.

15. Lissi EA, Salim-Hanna M, Pascual C, Del Castillo MD. მთლიანი ანტიოქსიდანტური პოტენციალის (TRAP) და მთლიანი ანტიოქსიდანტური რეაქტიულობის შეფასება ლუმინოლ-გაძლიერებული ქიმილუმინესცენციის გაზომვებიდან. თავისუფალი რადიკის ბიოლ მედ. 1995 თებერვალი; 18 (2): 153-8.

17. Cormier MJ, Prichard PM. ლუმინოლის ლუმინესცენტური პეროქსიდაციის მექანიზმის გამოკვლევა შეჩერებული ნაკადის ტექნიკით. ჯ ბიოლ ქიმ. 1968 წელი 25 სექტემბერი; 243 (18): 4706-14.

21. ალექსეევი A.V., Proskurnina E.V., Vladimirov Yu.A. ანტიოქსიდანტების განსაზღვრა გააქტიურებული ქიმილუმინესცენციით 2,2"-აზო-ბის(2-ამიდინოპროპანის) გამოყენებით. Vestn. MGU. Ser. 2. Chem 2012;53(3): 187-93 წწ.

24. სსრკ სახელმწიფო ფარმაკოპეის ჯანდაცვის სამინისტრო XI ედ. ტ. 2 „ანალიზის ზოგადი მეთოდები. სამკურნალო მცენარეული ნედლეული“. მ.: მედიცინა; 1987. გვ. 147-8.

25. Sergunova E. V., Sorokina A. A., Kornyushina M. A. ვარდის მოპოვების პრეპარატების შესწავლა. აფთიაქი. 2012 წელი; (2): 14-6.

26. Sergunova E. V., Sorokina A. A., Avrach A. S. კუნელის ნაყოფის შესწავლა კონსერვაციისა და წყლის მოპოვების სხვადასხვა მეთოდების გამოყენებით. აფთიაქი. 2010 წელი; (5): 16-8.

27. Avrach A. S., Sergunova E. V., Kuksova Ya. V. ხილის ბიოლოგიურად აქტიური ნივთიერებები და ჩვეულებრივი ჟოლოს წყლიანი ექსტრაქტები. აფთიაქი. 2014 წელი; (1): 8-10.

28. Avrach A. S., Samylina I. A., Sergunova E. V. კუნელის ნაყოფის ბიოლოგიურად აქტიური ნივთიერებების შესწავლა - ნედლეული ჰომეოპათიური მატრიცის ნაყენების მოსამზადებლად. შატ. სამეცნიერო ტრ. XXIV მოსკოვის მასალებზე დაყრდნობით. საერთაშორისო ჰომეოპათი. კონფ. „თანამედროვე მედიცინაში ჰომეოპათიური მეთოდის შემუშავება“; 2014 წლის 24-25 იანვარი; მოსკოვი. მ. 2014. გვ. 146-7.

29. Sergunova E. V., Sorokina A. A. ბიოლოგიურად აქტიური ნივთიერებების შემადგენლობის შესწავლა სამკურნალო მცენარეების ნედლეულში, კონსერვაციის სხვადასხვა მეთოდით. შატ. თეზისები დაფუძნებულია XX როსის მასალებზე. ეროვნული კონგრ. "ადამიანი და მედიცინა"; 2013 წლის 15-19 აპრილი; მოსკოვი. მ.: ეკოონის; 2013. გვ. 184-90 წწ.

30. ალექსანდროვა ე.იუ., ორლოვა მ.ა., ნეიმან პ. ვესტნ. მოსკოვის სახელმწიფო უნივერსიტეტი. სერ. 2. ქიმ. 2006 წელი; 47 (5): 350-2.

1. პროსკურნინა ე.ვ., ვლადიმიროვი იუა. Svobodnye radikaly kak uchastniki regulyatornykh i patologicheskikh protsessov. In: Grigor"ev AI, Vladimirov YuA, რედაქტორები. Fundamental"nye nauki - medicitsine. ბიოფიზიჩესკი მედიცინის ტექნოლოგიით. მოსკოვი: MAKS Press; 2015 წ.ვ. 1. გვ. 38-71. რუსული.

2. Chanda S, Dave R. In vitro მოდელები ანტიოქსიდანტური აქტივობის შეფასებისთვის და ზოგიერთი სამკურნალო მცენარე, რომელსაც გააჩნია ანტიოქსიდანტური თვისებები: მიმოხილვა. Afr J Microbiol Res. 2009 დეკ; 3 (13): 981-96.

3. Khasanov VV, Ryzhova GL, Mal"tseva EV. Metody issledovaniya antioksidantov. Khimija Rastitel"nogo Syr"ja. 2004; (3): 63-75. რუსული.

4. Vasil"ev RF, K""ncheva VD, Fedorova GF, B""tovska DI, Trofimov AV. Antioksidantnaya aktivnost" khalkonov. Khemilyuminestsentnoe opredelenie reaktsionnoi sposobnosti i kvantovo-khimicheskii raschet energii i stroeniya reagentov i intermediatov. კინეტიკა და კატალიზი. 2010 წელი; 51 (4): 533-41. რუსული.

5. Slavova-Kazakova AK, Angelova SE, Veprintsev TL, Denev P, Fabbri D, Dettori MA, et al. კურკუმინთან დაკავშირებული ნაერთების ანტიოქსიდანტური პოტენციალი, შესწავლილი ქიმილუმინესცენციის კინეტიკის, ჯაჭვის გაწყვეტის ეფექტურობის, დაცლის აქტივობის (ORAC) და DFT გამოთვლებით. Beilstein J Org Chem. 2015 წელი 11 აგვისტო; 11: 1398-411 წწ.

6. Fedorova GF, Trofimov AV, Vasil"ev RF, Veprintsev TL. პეროქსი-რადიკალების შუამავლობით ქიმილუმინესცენცია: მექანიკური მრავალფეროვნება და საფუძვლები ანტიოქსიდანტური ანალიზისთვის. Arkivoc. 2007; 8: 163-215.

7. Fedorova GF, Menshov VA, Trofimov AV, Vasil"ev RF. მარტივი ქიმილუმინესცენციის ანალიზი მცენარეული ლიპიდების ანტიოქსიდანტური თვისებებისთვის: საფუძვლები და საილუსტრაციო მაგალითები. ანალიტიკოსი 2009 ოქტ.; 134 (10): 2128-34.

8. Bastos EL, Romoff P, Eckert CR, Baader WJ. ანტირადიკალური შესაძლებლობების შეფასება H2O2-ჰემინით გამოწვეული ლუმინოლით

9. ვლადიმიროვი იუა, პროსკურნინა ე.ვ. სვობოდნიე რადიკალი და კლეტოჩნაია ხემილუმინესცენცია. უსპ ბიოლ ხიმ. 2009 წელი; 49: 341-88. რუსული.

10. ვლადიმიროვი იუ.ა., პროსკურნინა ე.ვ., იზმაილოვი დიუ. Kineticheskaya khemilyuminestsentsiya kak metod izucheniya reaktsii svobodnykh radikalov. ბიოფიზიკა. 2011 წელი; 56 (6): 1081-90 წწ. რუსული.

11. Izmailov DYu, Demin EM, Vladimirov YuA. Opredelenie aktivnosti antioksidantov metodom izmereniya kinetiki khemilyuminestsen-tsii. ფოტობიოლოგია და ფოტომედიცინა. 2011 წელი; 7 (2): 70-6. რუსული.

12. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. ლუმინოლის ლუმინესცენცია გამოწვეული 2,2"-აზო-ბის(2-ამიდინოპროპანი) თერმოლიზით. Free Radic Res Commun. 1992; 17 (5): 299-311.

14. Lissi EA, Escobar J, Pascual C, Del Castillo MD, Schmitt TH, Di Mascio P. ხილული ქიმილუმინესცენცია, რომელიც დაკავშირებულია მეტემოგლობინს ან ოქსიჰემოგლობინს შორის წყალბადის ზეჟანგთან რეაქციასთან. Photochem Photobiol. 1994 ნოემბერი; 60 (5): 405-11.

16. Landi-Librandi AP, de Oliveira CA, Azzolini AE, Kabeya LM, Del Ciampo JO, Bentley MV, et al. ლიპოსომური ფლავონოლების ანტიოქსიდანტური აქტივობის ინ ვიტრო შეფასება HRP-H2O2-ლუმინოლის სისტემის მიერ. J მიკროკაფსულა. 2011 წელი; 28 (4): 258-67.

17. Cormier MJ, Prichard PM. მექანიზმის გამოკვლევა

ლუმინოლის ლუმინესცენტური პეროქსიდაციის შეჩერებული ნაკადის ტექნიკით. ჯ ბიოლ ქიმ. 1968 წელი 25 სექტემბერი; 243 (18): 4706-14.

18. Chang CL, Lin CS, Lai GH. ფიტოქიმიური მახასიათებლები, თავისუფალი რადიკალების დასუფთავების აქტივობა და ხუთი სამკურნალო მცენარეების ექსტრაქტის ნეიროდაცვა. Evid Based Complement Alternat Med. 2012 წელი; 2012: 984295. დოი: 10.1155/2012/984295. Epub 2011 10 აგვისტო.

19. Chang CL, Lin CS. Terminalia chebula Retzius-ის ექსტრაქტების ფიტოქიმიური შემადგენლობა, ანტიოქსიდანტური აქტივობა და ნეიროპროტექტორული ეფექტი. Evid Based Complement Alternat Med. 2012 წელი; 2012: 125247. დოი: 10.1155/2012/125247. Epub 2011 5 ივლისი.

20. Georgetti SR, Casagrande R, Di Mambro VM, Azzolini AE, Fonseca MJ. სხვადასხვა ფლავონოიდების ანტიოქსიდანტური აქტივობის შეფასება ქიმილუმინესცენციის მეთოდით. AAPS PharmSci. 2003 წელი; 5 (2): 111-5.

21. ალექსეევი AV, Proskurnina EV, Vladimirov YuA. Opredelenie antioksidantov metodom aktivirovannoi khemilyuminestsentsii s ispol"zovaniem 2,2"-azo-bis(2-amidinopropana). მოსკოვის უნივერსიტეტის ქიმიის ბიულეტენი. 2012 წელი; 53 (3): 187-93. რუსული.

22. Pogacnik L, Ulrih NP. ოპტიმიზირებული ქიმილუმინესცენციის ანალიზის გამოყენება მცენარეული ექსტრაქტების ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების დასადგენად. ლუმინესცენცია. 2012 ნოე-დეკ; 27 (6): 505-10.

23. Saleh L, Plieth C. მთლიანი დაბალმოლეკულური წონის ანტიოქსიდანტები, როგორც შემაჯამებელი პარამეტრი, რაოდენობრივად განსაზღვრულია ბიოლოგიურ ნიმუშებში ქიმილუმინესცენციის დათრგუნვის ანალიზით. ნატ პროტოკ. 2010 სექ; 5 (10): 1627-34 წწ.

24. Ministrystvo zdravookhraneniya SSSR. Gosudarsvennaya farmakopeya სსრ. მე-11 გამოცემა. ისს. 2. „ობშჩიე მეთოდური ანალიზი“.

Lekarstvennoe rastitel "noe syr"e". მოსკოვი: Medltsina; 1987. გვ. 147-8. რუსული.

25. სერგუნოვა ე.ვ., სოროკინა AA, კორნიუშინა MA. იზუჩენიე ექსტრაქციონიხ პრეპარატოვ შიპოვნიკა. აფთიაქი. 2012 წელი; (2): 14-6. რუსული.

26. სერგუნოვა EV, სოროკინა AA, Avrach AS. იზუჩენიე პლოდოვ ბოიარიშნიკა რაზლიჩნიხ სპოსობოვ კონსერვაციი და ვოდნიხ იზვლეჩენი. ფარმაცია. 2010 წელი; (5): 16-8. რუსული.

27. Avrach AS, Sergunova EV, Kuksova YaV. Biologicheski aktivnye veshchestva plodov i vodnykh izvlechenii maliny obyknovennoi. ფარმაცია. 2014 წელი; (1): 8-10. რუსული.

28. Avrach AS, Samylina IA, Sergunova EV. Izuchenie biologicheski aktivnykh veshchestv plodov boyaryshnika - syr"ya dlya prigotovleniya nastoek gomeopaticheskikh matrichnykh. მოსკოვის მე-14 საერთაშორისო ჰომეოპათიური კონფერენციის მასალები "Razvitie gomeopaticheskogo methoda v sovremennoi p.2014";2.2014. 146- 7. რუსული.

29. სერგუნოვა ე.ვ., სოროკინა ა.ა. Izuchenie sostava biologicalheski aktivnykh veshchestv v lekarstvennom rastitel "nom syr"e razlichnykh sposobov konservatsii. რუსეთის მე-20 ეროვნული კონგრესის „ჩელოვეკ და ლეკარსტვო“ შრომები; 2013 აპრილი 1519; მოსკოვი. მოსკოვი: ეკოონისი; 2013. გვ. 184-90 წწ. რუსული.

30. ალექსანდროვა EYu, Orlova MA, Neiman PL. Izuchenie peroksidaznoi aktivnosti v ekstraktakh iz kornevishcha i kornei khrena i ee stabil"nosti k razlichnym vozdeistviyam. მოსკოვის უნივერსიტეტის ქიმიური ბიულეტენი. 2006; 47 (5): 350-2. რუსული.

1 ბოლშაკოვა ლ.ს. 1მილენტიევი ვ.ნ. 2სანიკოვი დ.პ. 3Kazmin V.M. 2

1 უმაღლესი პროფესიული განათლების ფედერალური სახელმწიფო საბიუჯეტო საგანმანათლებლო დაწესებულება „ორიოლის სახელმწიფო ეკონომიკისა და ვაჭრობის ინსტიტუტი“

2 ფედერალური სახელმწიფო საბიუჯეტო დაწესებულება „ქიმიკალიზაციისა და სოფლის მეურნეობის რადიოლოგიის ცენტრი „ორლოვსკი“

3 უმაღლესი პროფესიული განათლების ფედერალური სახელმწიფო საბიუჯეტო საგანმანათლებლო დაწესებულება „სახელმწიფო უნივერსიტეტი - საგანმანათლებლო, კვლევითი და საწარმოო კომპლექსი“

გამოკვლეული იყო ქიმილუმინესცენციის გამოყენების შესაძლებლობა ნუტრიენტების ანტიოქსიდანტური აქტივობის შესაფასებლად. შემოთავაზებული მეთოდი ეფუძნება ლუმინოლის ქიმილუმინესცენციას ტუტე გარემოში, რომლის ინტენსივობა დამოკიდებულია პეროქსიდების რაოდენობაზე ქიმილუმინესცენტურ ნიმუშში. ქიმილუმინესცენცია დაფიქსირდა განვითარებული ინსტალაციის გამოყენებით, რომელიც შეიცავს დოზირების ტუმბოს, შუქგაუმტარ კამერას, მინის ვაკუუმის ფოტოგამრავლებას და კომპიუტერულ სისტემას. ქიმილუმინესცენციის გასაძლიერებლად, ლუმინოლს დაემატა კალიუმის რკინის სულფიდის ხსნარი. ქიმილუმინესცენციის ინტენსივობის ცვლილებები დაფიქსირდა გაანალიზებული ნიმუშის ლუმინოლის ხსნარში შეყვანის მომენტში. საანალიზო ნიმუშად გამოყენებული იყო დანდელის ექსტრაქტი, რომელიც მიღებული იყო მშრალი დაბალი ტემპერატურის დისტილაციით. იგი შეიცავს ფენოლურ ნაერთებს, რომლებიც ცნობილია მათი მაღალი ანტიოქსიდანტური აქტივობით. დადგენილია, რომ ქიმილუმინესცენციის მეთოდის გამოყენება შესაძლებელია სხვადასხვა საკვები ნაერთების ანტიოქსიდანტური თვისებების დასადგენად.

ბიბლიოგრაფიული ბმული

პანიჩკინი A.V., Bolshakova L.S., Milentyev V.N., Sannikov D.P., Kazmin V.M. ქიმილუმინესცენტის გამოყენება საკვები ნივთიერებების ანტიოქსიდანტური თვისებების შესაფასებლად // რაციონალური კვება, საკვები დანამატები და ბიოსტიმულატორები. – 2014. – No6. – გვ 36-37;
URL: http://journal-nutrition.ru/ru/article/view?id=283 (წვდომის თარიღი: 12/17/2019). თქვენს ყურადღებას ვაქცევთ გამომცემლობა "საბუნებისმეტყველო მეცნიერებათა აკადემიის" მიერ გამოცემულ ჟურნალებს.

სამაგისტრო სამუშაო

1.4 ანტიოქსიდანტური კვლევის მეთოდები

ანტიოქსიდანტური აქტივობა კლასიფიცირდება: გამოვლენილი AOA-ს აღრიცხვის მეთოდების მიხედვით (მოცულობითი, ფოტომეტრიული, ქიმილუმინესცენტური, ფლუორესცენტური, ელექტროქიმიური); ჟანგვის წყაროს ტიპის მიხედვით; ნაერთის ტიპის მიხედვით, რომელიც იჟანგება; დაჟანგული ნაერთის გაზომვის მეთოდით.

თუმცა, ანტიოქსიდანტური აქტივობის განსაზღვრის ყველაზე ცნობილი მეთოდებია:

1 TEAC (ტროლოქსის ეკვივალენტური ანტიოქსიდანტური სიმძლავრე): მეთოდი ეფუძნება შემდეგ რეაქციას:

მეტმიოგლობინი + H 2 O 2 > Ferrylglobin + ABTS > ABTS * + AO.

Trolox-ის ეკვივალენტების მეთოდი (TEAC) ეფუძნება ანტიოქსიდანტების უნარს, შეამცირონ 2,2-აზინობის რადიკალების კატიონები (ABTS) და ამით დათრგუნონ შთანთქმა სპექტრის გრძელ ტალღის სიგრძის რეგიონში (600 ნმ). მეთოდის მნიშვნელოვანი მინუსი არის ორეტაპიანი რეაქცია რადიკალის წარმოებისთვის. ეს ახანგრძლივებს ანალიზის დროს და შეუძლია გაზარდოს შედეგების გაფანტვა, მიუხედავად იმისა, რომ ანალიზისთვის გამოიყენება რეაგენტების სტანდარტიზებული ნაკრები.

2 FRAP (ფერის აღმდგენი ანტიოქსიდანტური ძალა): მეთოდი ეფუძნება შემდეგ რეაქციას:

Fe(III)-ტრიპირიდიტრიაზინი+AO>Fe(II)-ტრიპირიდილტრიაზინი.

რკინის შემამცირებელი/ანტიოქსიდანტური უნარი (FRAP). აქ გამოყენებული რეაქცია არის Fe(III)-ტრიპირიდილტრიაზინის Fe(II)-ტრიპირიდილტრიაზინის რედუქცია. თუმცა, ამ მეთოდს არ შეუძლია განსაზღვროს ზოგიერთი ანტიოქსიდანტის, როგორიცაა გლუტათიონის განსაზღვრა. ეს მეთოდი იძლევა დაბალმოლეკულური წონის ანტიოქსიდანტების პირდაპირ განსაზღვრას. დაბალი pH-ის დროს Fe(III)-ტრიპირიდილტრიაზინის კომპლექსის Fe(II) კომპლექსამდე შემცირებას თან ახლავს ინტენსიური ლურჯი ფერის გამოჩენა. გაზომვები ეფუძნება ანტიოქსიდანტების უნარს, ჩაახშოს რეაქციის სახეობების ჟანგვითი ეფექტი, რომლებიც წარმოიქმნება რეაქციის ნარევში. ეს მეთოდი არის მარტივი, სწრაფი და იაფად განსახორციელებელი.

3 ORAC (ჟანგბადის რადიკალების შთანთქმის უნარი): მეთოდი ეფუძნება შემდეგ რეაქციას:

Fe(II)+H2O2 >Fe(III) + OH*+AO>OH* + Luminol.

ჟანგბადის რადიკალების შთანთქმის უნარის განსაზღვრა (ORAC). ამ მეთოდით აღირიცხება სუბსტრატის (ფიკოერიტრინი ან ფლუორესცეინი) ფლუორესცენცია, რომელიც წარმოიქმნება ROS-თან მისი ურთიერთქმედების შედეგად. თუ ტესტის ნიმუში შეიცავს ანტიოქსიდანტებს, მაშინ საკონტროლო ნიმუშთან შედარებით შეინიშნება ფლუორესცენციის შემცირება. ეს მეთოდი თავდაპირველად შეიმუშავა დოქტორმა გუოჰუა კაომ დაბერების ეროვნულ ინსტიტუტში 1992 წელს. 1996 წელს დოქტორ კაომ გაერთიანდა დოქტორ რონალდ პრაიერთან ერთობლივ ჯგუფში USDA სიბერის კვლევის ცენტრში, სადაც ნახევრად ავტომატიზირებული მეთოდი იყო. შექმნილი.

4 TRAP (ტოტალური რადიკალების დაჭერის ანტიოქსიდანტური პარამეტრი): მეთოდი ეფუძნება შემდეგ რეაქციას:

AAPH+AO>AAPH* + PL (FE).

ეს მეთოდი იყენებს ანტიოქსიდანტების უნარს, ურთიერთქმედდეს პეროქსილის რადიკალ 2,2-აზობის(2-ამიდინოპროპანი) დიჰიდროქლორიდთან (AAPH). TRAP-ის ცვლილებები მოიცავს ანალიტიკური სიგნალის ჩაწერის მეთოდებს. ყველაზე ხშირად, ანალიზის ბოლო ეტაპზე, პეროქსი რადიკალი AAPH ურთიერთქმედებს ლუმინესცენტურ (ლუმინოლთან), ფლუორესცენტთან (დიქლორფლუორესცეინის დიაცეტატი, DCFH-DA) ან სხვა ოპტიკურად აქტიურ სუბსტრატთან.

წყალში ხსნადი ვიტამინის E წარმოებული Trolox (6-ჰიდროქსი-2,5,7,8-ტეტრამეთილქრომან-2-კარბოქსი მჟავა) გამოიყენება როგორც სტანდარტი TEAC, ORAC და TRAP მეთოდებისთვის.

ბოლო დროს გაიზარდა ინტერესი ელექტროქიმიური მეთოდების გამოყენების მიმართ ანტიოქსიდანტური აქტივობის შესაფასებლად. ამ მეთოდებს აქვთ მაღალი მგრძნობელობა და სწრაფი ანალიზი.

ზოგიერთი საკვები პროდუქტის ანტიოქსიდანტური აქტივობის შეფასება ხორციელდება პოტენციომეტრიის მეთოდით, ეფუძნება ანტიოქსიდანტური ნივთიერებების თვისების გამოყენებას რედოქს რეაქციებში მონაწილეობისთვის, ენოლის (-OH) და სულფჰიდრილის (-SH) ჯგუფების გამო.

ხსნარების ანტიოქსიდანტური თვისებების განსაზღვრა ეფუძნება ანტიოქსიდანტების ქიმიურ ურთიერთქმედებას მედიატორ სისტემასთან, რაც იწვევს მისი რედოქს პოტენციალის ცვლილებას. ელექტროქიმიური უჯრედი არის კონტეინერი, რომელიც შეიცავს K-Na-ფოსფატის ბუფერულ ხსნარს, Fe(III)/Fe(II) მედიატორ სისტემას და კომპლექსურ ელექტროდს რედოქს პოტენციალის გაზომვამდე. ანტიოქსიდანტური აქტივობა ფასდება გ-ეკვ/ლ-ში.

ანტიოქსიდანტური აქტივობის განსაზღვრის ამპერომეტრიული მეთოდი ემყარება ელექტრული დენის გაზომვას, რომელიც წარმოიქმნება საცდელი ნივთიერების დაჟანგვის დროს სამუშაო ელექტროდის ზედაპირზე, რომელიც არის გარკვეული პოტენციალის ქვეშ. ამპერომეტრიული მეთოდის მგრძნობელობა განისაზღვრება როგორც სამუშაო ელექტროდის ბუნებით, ასევე მასზე გამოყენებული პოტენციალით. პოლიფენოლებისა და ფლავონოიდების ამპერომეტრიული დეტექტორის გამოვლენის ზღვარი ნანო-პიკოგრამის დონეზეა; ასეთ დაბალ კონცენტრაციებში ნაკლებია სხვადასხვა ანტიოქსიდანტების ურთიერთ ზემოქმედების ალბათობა, როდესაც ისინი ერთად არიან, კერძოდ, სინერგიის ფენომენის გამოვლინება. . მეთოდის უარყოფითი მხარე მოიცავს მის სპეციფიკას: ამ პირობებში, ანტიოქსიდანტები, რომლებიც თავად იჟანგება ან მცირდება ჟანგბადის ელექტრორედუქციის პოტენციალის რეგიონში, არ შეიძლება გაანალიზდეს. მეთოდის უპირატესობებში შედის მისი სიჩქარე, პროსტატი და მგრძნობელობა.

გალვანოსტატიკური კულომეტრიის მეთოდი ელექტროგენერირებული ოქსიდანტების გამოყენებით - მეთოდი გამოიყენება ცხიმში ხსნადი ანტიოქსიდანტების ანალიზისთვის.

შემუშავებულია ასკორბინის მჟავის განსაზღვრის სხვადასხვა მეთოდი:

ამპერომეტრიული მეთოდი ალუმინის ელექტროდის გამოყენებით, მოდიფიცირებული ნიკელის (II) ჰექსაციანოფერატის ფირით ხსნარში მარტივი ჩაძირვით;

ასკორბინის მჟავას მყარი ფაზის სპექტროფოტომეტრიული და ვიზუალური ტესტის განსაზღვრის მეთოდი სილიციუმის მჟავას ქსეროგელის გამოყენებით, მოდიფიცირებული Wawele რეაგენტით და სპილენძით (II), როგორც ინდიკატორი ფხვნილი;

ასკორბინის მჟავას ქიმილუმინესცენტური განსაზღვრა შეიძლება განხორციელდეს ნაკადი-ინექციური მეთოდით როდამინ B-ს ქიმილუმინესცენტური რეაქციის გამოყენებით ცერიუმთან (IV) გოგირდმჟავას გარემოში.

ასკორბინის მჟავის განსაზღვრა 10 -8 -10 -3 გ/სმ 3 დიაპაზონში ანოდური ვოლტამეტრიით წყლიან და წყალ-ორგანულ გარემოში.

ყველაზე გავრცელებულია FRAP მეთოდი, რადგან ის არის სწრაფი და ძალიან მგრძნობიარე. ბოლო რამდენიმე ათწლეულის განმავლობაში შემუშავდა მრავალი სხვადასხვა მეთოდი ანტიოქსიდანტური აქტივობის დასადგენად FRAP მეთოდის გამოყენებით (ცხრილი 1).

ცხრილი 1 FRAP მეთოდის შემუშავება და მისი გამოყენება სხვადასხვა ობიექტების ანტიოქსიდანტური აქტივობის დასადგენად

	ანალიზის ობიექტები	შენიშვნები
	სისხლის პლაზმა	t=4წთ. შესწავლილი იყო რეაქციის სტექიომეტრია და ადიტიურობა.
	ჩაი, ღვინო	AOA-ს განსაზღვრა პოლიფენოლების გამო
		შედარებულია ჩაის სხვადასხვა ჯიშის AOA მნიშვნელობები
პულიდო, ბრავო, საურა-კალიქსტო	მოდელის გადაწყვეტილებები	t=30 წთ. გამოვლინდა არაწყლიანი გამხსნელის გავლენა
	მცენარეები
	სისხლი, ქსოვილი	PIA მეთოდი. შემოწმებულია უცხო ნივთიერებების ზემოქმედება.
ფირუზი, ლაკანა, პეტრუჩი ე.ა.	მოდელის გადაწყვეტილებები	შესწავლილი იყო სხვადასხვა AO-ების განსაზღვრის მგრძნობელობა მათი სტრუქტურისა და რედოქსული პოტენციალის მიხედვით.
კატალინიკი, მილოსი,	სხვადასხვა ღვინოები
ტემერდაშევი, ციუპკო და სხვები.	მოდელის ნარევები
ლოგინოვა, კონოვალოვა	Წამლები Წამლები	Ტესტირების მეთოდი
ტემერდაშევი, ციუპკო და სხვები.	მშრალი წითელი ღვინოები	AOA-ს კორელაცია ღვინის ხარისხის სხვა მაჩვენებლებთან
1 ცხრილის გაგრძელება
	მოდელის ნარევები	შესწავლილი იყო სხვადასხვა AO-ების განსაზღვრის მგრძნობელობა
ვერშინინი, ვლასოვა, ციუპკო	მოდელის ნარევები	აღმოჩნდა, რომ სიგნალი არ არის დანამატი, როდესაც იყო ჟანგვის აგენტის ნაკლებობა
ანისიმოვიჩი, დეინეკა და სხვები.	მოდელის გადაწყვეტილებები	შემოთავაზებულია კინეტიკური პარამეტრები AOA-ს შესაფასებლად.

შენიშვნები: ჩვეულებრივ მითითებულია: FIA-ნაკადის ინექციის ანალიზი, TPTZ-ტრიპირიდილტრიაზინი, DIP-2,2,-დიპირიდილი, PHEN-o-ფენანთროლინი, DPA-პირიდინედიკარბოქსილის მჟავა, FZ-ფეროზინი, AA-ასკორბინის მჟავა, CT-კატექოლი, t - ექსპოზიციის დრო, მინ.

ცილებსა და პოლიელექტროლიტებს შორის ურთიერთქმედება წყალხსნარებში

ცილოვან-პოლიელექტროლიტური კომპლექსების დასახასიათებლად გამოიყენება სხვადასხვა ანალიტიკური მეთოდი. ინსტრუმენტული მეთოდები გვაწვდის ინფორმაციას სტრუქტურულ და ოპტიკურ თვისებებზე, ასევე განსაზღვრავს საუბნო საარჩევნო კომისიის შეკვრის დინამიკასა და ბუნებას...

d-მეტალის ნაერთების ეფექტი ბიპოლარულ მემბრანაში წყლის მოლეკულის დისოციაციის სიჩქარეზე

ახალი BPM-ების სინთეზის პროცესში დიდი ყურადღება უნდა მიექცეს მიღებული ნიმუშების თვისებების შესწავლას სინთეზური პირობების შემდგომი შერჩევისთვის, რაც უზრუნველყოფს სინთეზირებული მემბრანების ელექტროქიმიური მახასიათებლების გაუმჯობესებას...

დიზაინერი ნარკოტიკები და სინთეზური კანაბინოიდები

მცენარეთა ნარევებში სინთეზური კანაბინოიდების გამოვლენა შეიძლება განხორციელდეს სხვადასხვა ფიზიკოქიმიური მეთოდით, როგორიცაა ქრომატოგრაფია-მასპექტრომეტრია, გაზის ქრომატოგრაფია, თხელი ფენის ქრომატოგრაფია და მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფი...

სამკურნალო მცენარეულ მასალებში ფლავონოიდების განსაზღვრის მეთოდის შემუშავება

ქინოლინონების სინთეზი და ფარმაკოლოგიური თვისებები -2

კვლევის ობიექტი: ქინოლინონი-2. კვლევის მეთოდი: კომპიუტერული პროგრამის "Marvin JS" გამოყენებით შეიქმნა ნივთიერების სტრუქტურა. შემდეგ იგი გაგზავნეს საიტზე "http://www.way2drug.com/PASSONline/predict.php" შემდგომი კვლევისთვის...

თერმული სპექტრული მეთოდი ეპოქსიდური პოლიმერული აორთქლების პროდუქტების შესასწავლად

კიბოსნაირ ჭურვიდან მაღალგანწმენდილი ქიტოზანის წარმოების ტექნოლოგია

ქიტოზანის მოლეკულური წონის განსაზღვრა ქიტოზანის მოლეკულური წონა განისაზღვრა ვისომეტრიულად სტანდარტული მეთოდის გამოყენებით. 0,05 და 0,5 გ/დლ კონცენტრაციის ხსნარები მომზადდა პოლიმერის ფხვნილის ნიმუშის აცეტატის ბუფერში გახსნით (0...

ბუნებრივი პარკის ტერიტორიის ფიზიოგრაფიული მახასიათებლები

1 მილენტიევი ვ.ნ. 2სანიკოვი დ.პ. 3Kazmin V.M. 2

ქიმილუმინესცენცია

ანტიოქსიდანტური აქტივობა

პეროქსიდები

ნუტრიენტები

1. ვასილიევი რ.ფ. ქიმიური ბზინვარება // ქიმია და ქიმიკოსები, 21.01.10. – URL: http://chemistry-chemists.com. (შესვლის თარიღი: 08/22/13).

2. ვლადიმიროვი იუ.ა. თავისუფალი რადიკალები და ანტიოქსიდანტები // ვესტნ. RAMS. – 1998. – No 7. – გვ 43–51.

3. კონდრაშოვა ე.ა. ქიმილუმინესცენცია, როგორც ფერმენტული იმუნოანალიზის ყველაზე მგრძნობიარე მეთოდი და მისი გამოყენება // კლინიკური ლაბორატორიული დიაგნოსტიკა. – 1999. – No 9. – გვ. 32.

4. ლიუბიმოვი, გ.იუ. ქიმილუმინესცენტური ანალიზი // იმუნოლოგია. – 1991. – No 1. – გვ 40–49.

5. მაიანსკი A.N., Nevmyatullin A.L., Chebotar I.V. რეაქტიული ქიმილუმინესცენცია ფაგოციტოზის სისტემაში // მიკრობიოლოგია. – 1987. – No 1. – გვ 109–115.

6. შერსტნევი მ.პ. კალციუმ-დამოკიდებული და კალციუმ-დამოუკიდებელი გზები უჯრედის ქიმილუმინესცენციის წარმოქმნისთვის // ქიმილუმინესცენციის კითხვები. – 1991. – No 2. – გვ 1–4.

დღეს ქიმილუმინესცენცია წარმოადგენს მეცნიერების დიდ არეალს, რომელიც მდებარეობს ქიმიის, ფიზიკისა და ბიოლოგიის ინტერფეისზე. ქიმილუმინესცენციის დროს ხდება ქიმიური ენერგიის პირდაპირი გარდაქმნა ელექტრომაგნიტური ვიბრაციების ენერგიად, ე.ი. სამყაროში ქიმილუმინესცენციის გამოყენებით შეგიძლიათ გაიგოთ, როგორ მიმდინარეობს რეაქცია, როგორია მისი მექანიზმი, რა არის საჭირო ტექნოლოგიური პროცესების ეფექტური და ეფექტური განხორციელებისთვის. თუ ქიმიური პროდუქტის წარმოების ტექნოლოგიურ პროცესს თან ახლავს ქიმილუმინესცენცია, მაშინ მისი ინტენსივობა შეიძლება გახდეს პროცესის სიჩქარის საზომი: რაც უფრო სწრაფია რეაქცია, მით უფრო ნათელია ბზინვარება. ქიმილუმინესცენციის რეაქციის დროს მიიღება ენერგიით მდიდარი პროდუქტები, რომლებიც შემდეგ გამოყოფენ ენერგიას სინათლის გამოსხივებით, ანუ ქიმიური ენერგია გარდაიქმნება ელექტრომაგნიტურ გამოსხივების ენერგიად.

კვლევის მიზანია გამოიკვლიოს ქიმილუმინესცენციის გამოყენების შესაძლებლობა ნუტრიენტების ანტიოქსიდანტური აქტივობის შესაფასებლად.

კვლევის შედეგები და დისკუსია

ძალზე აქტუალურია საკვები ნივთიერებების ანტიოქსიდანტური აქტივობის შეფასების პრობლემა. ტერმინის „ანტიოქსიდანტური აქტივობის“ გამოყენება კონკრეტული პროდუქტის სარგებლიანობის საჩვენებლად ხშირად ხდება ყოველგვარი ქიმიური ან ბიოქიმიური არგუმენტაციის გარეშე. როგორც წესი, ნებისმიერი ნივთიერების ანტიოქსიდანტური მოქმედება ნიშნავს პეროქსიდის ღირებულების შემცირების ეფექტურობას. პეროქსიდის მნიშვნელობის კონცეფცია ასევე სრულად არ ავლენს მის ქიმიურ არსს, რადგან ის სრულად არ შეესაბამება კონკრეტული საკვები პროდუქტის მეტაბოლიზმის ეტაპების კინეტიკასა და თერმოდინამიკას. გარდა ამისა, ეს მნიშვნელობა გამოიყენება ცხიმების სახით ლიპიდების დასახასიათებლად. ამასთან, ორგანიზმში ჟანგვის და პეროქსიდების წარმოქმნის პროცესები ხდება არა მხოლოდ ცხიმების, არამედ სხვა საკვების მოხმარებისას. სხვა სიტყვებით რომ ვთქვათ, პეროქსიდის შემცველობა კონკრეტულ პროდუქტში შეიძლება ითქვას, რომ არის „აწონილი“ ერთგვარ სასწორზე, სადაც „საცნობარო წონა“ არის კონცენტრაციის ერთეული მჟავე გარემოში პეროქსიდებით დაჟანგული იოდიდის იონის, როგორც რის შედეგადაც წარმოიქმნება მოლეკულური იოდი:

ი- - e → მე; (1)

I + I → I20. (2)

ნატრიუმის თიოსულფატის შემცველი ხსნარით მოლეკულური იოდის ტიტრირებისას დგინდება მისი კონცენტრაცია და, შესაბამისად, დგინდება ჟანგვის იოდიდის იონების რაოდენობა, ე.ი. პეროქსიდის ნაერთები, რომელსაც სინამდვილეში პეროქსიდის რიცხვი ეწოდება. პეროქსიდის რაოდენობის განსაზღვრა ამ ტიპის "აწონის" გამოყენებით ეფუძნება რეაქციას, რომელიც ნაჩვენებია ნახ. 1.

ბრინჯი. 1. პეროქსიდის ღირებულების განსაზღვრა ნატრიუმის თიოსულფატის გამოყენებით

ამრიგად, პეროქსიდების კონცენტრაცია განისაზღვრება განტოლებიდან

С(I2) = ϒ(C[-O-O-]), (3)

სადაც ϒ არის კორელაციის კოეფიციენტი მოლეკულური იოდის კონცენტრაციასა და პეროქსიდების კონცენტრაციას შორის.

მეთოდი, რომელსაც ჩვენ ვთავაზობთ პროდუქტებში პეროქსიდების დასადგენად, ეფუძნება ლუმინოლის ქიმილუმინესცენციას (C[lm]) ტუტე გარემოში, რომლის ინტენსივობა (Ichl) დამოკიდებულია პეროქსიდების (C[-O-O-]) კონცენტრაციაზე ქიმილუმინესცენტური ნიმუში:

IHL = Ϧхл ω, (4)

სადაც Ϧhl არის ქიმილუმინესცენციის კვანტური გამოსავალი; ω - პეროქსიდების შემცველი რეაქციის სიჩქარე:

khlC[-O-O-] C[lm] = ω, (5)

სადაც khl არის რეაქციის სიჩქარის მუდმივი ან:

C[lm] khl Ϧkhl = K, (6)

IHL = K C[ -O-O- ]. (7).

პეროქსიდების რაოდენობა (-O-O-) განისაზღვრება მსუბუქი ჯამით (S):

S-ის მნიშვნელობა დამოკიდებულია პეროქსიდის სრული მოხმარების ხარისხზე ქიმილუმინესცენტურ რეაქციაში.

K-ის მუდმივის დასადგენად აგებულია კალიბრაციის მრუდი S სინათლის ჯამის დამოკიდებულებისათვის პეროქსიდის კონცენტრაციაზე, რომელიც დგინდება ტიტრირებით:

S = f(C[-O-O-]). (9)

წყალბადის ზეჟანგი H2O2 გამოიყენება როგორც პეროქსიდი.

შემდეგ (3) და (9) განტოლებიდან მიღებული მონაცემები შედარებულია. ϒ და K-ის შედარების საფუძველზე კეთდება დასკვნა რეაქციის მექანიზმების შეთანხმების შესახებ, რომლებიც საფუძვლად უდევს პეროქსიდების განსაზღვრას ამ მეთოდებით. გაირკვა, რომ პეროქსიდის კონცენტრაციების ამ დიაპაზონში ϒ და K რეალურად ეთანხმებიან ერთმანეთს და, შესაბამისად, მათი გამოყენება შესაძლებელია პეროქსიდის რაოდენობის დასადგენად.

ქიმილუმინესცენცია დაფიქსირდა ტუტე გარემოში, რომელიც შეიცავს ლუმინოლს (5-ამინო-1,2,3,4-ტეტრაჰიდრო-1,4-ფტალაზინედიონი, 3-ამინოფთალის მჟავას ჰიდრაზიდი, H2L). ის დაფიქსირდა ქიმილუმინესცენტური ინსტალაციის გამოყენებით, შუშის ვაკუუმის ფოტომულტიპლიკატორის ჩათვლით. ფოტომულტიპლიკატორი იკვებება მაღალი ძაბვის რექტიფიკატორით (7), რომელიც დაკავშირებულია ბლოკთან (9), რომელიც აძლიერებს ფოტოგამრავლების სიგნალს, რომელიც ჩაწერილია კომპიუტერის მონიტორის ეკრანზე (5).

ბრინჯი. 2. გაანალიზებული პროდუქტის ქიმილუმინესცენციის რეგისტრაცია: 1 - დოზირების ტუმბო; 2 - მსუბუქი კამერა; 3 - სარკე; 4 - კუვეტი; 5 - კომპიუტერული სისტემა; 6 - ფოტომულტიპლიკატორი; 7 - მაღალი ძაბვის რექტიფიკატორი; 8 - მოწყობილობა, რომელიც საშუალებას გაძლევთ განსაზღვროთ ქიმილუმინესცენტური გამოსხივების სპექტრული რეგიონი; 9 - ბლოკი, რომელიც აძლიერებს ფოტოგამრავლების სიგნალს

დოზირების ტუმბო (1) აუცილებელია გაანალიზებული ნიმუშის შესატანად კუვეტაში (4), რომელიც შეიცავს ლუმინოლის ქიმილუმინესცენტურ ხსნარს. ეს დისპენსერი მოქმედებს როგორც მიქსერი შეყვანილი ნიმუშისთვის ქიმილუმინესცენტური ხსნარით. რეაქციის სიჩქარისა და ქიმილუმინესცენციის ინტენსივობის გასაძლიერებლად, ლუმინოლს დაემატა კალიუმის რკინის სულფიდის ხსნარი. შერევა ხორციელდება ჰაერის ბუშტებით, რომლებიც მიიღება ჰაერის გადატუმბვით ხსნარის სითხეში. სარკე (3), რომელიც მდებარეობს შუქგაუმტარ კამერაში (2), ემსახურება ქიმილუმინესცენტური გამოსხივების უკეთეს შეგროვებას შუქგაუმტარ კამერაში დამონტაჟებულ ფოტოგამრავლების ფოტოკათოდზე (6). დისპენსერი საშუალებას გაძლევთ შეიყვანოთ საჭირო თხევადი კომპონენტები კუვეტში ექსპერიმენტების დროს მსუბუქად მჭიდრო კამერის (2) გახსნის გარეშე. ამ შემთხვევაში, ეს სითხეები შედიან კუვეტში (4) მინის ან პლასტმასის მილების მეშვეობით. კომპიუტერული სისტემა შესაძლებელს ხდის ჩაწეროს ნათების ინტენსივობის I დამოკიდებულება დროზე t, ანუ ქიმილუმინესცენციის კინეტიკა:

კომპიუტერული სისტემა ასახავს აწევის და დაცემის მუდმივებს ფუნქციაში I = f(t), რომლებიც დაკავშირებულია ქიმილუმინესცენციის გამომწვევი რეაქციების სიჩქარის მუდმივებთან, ანუ მათ კინეტიკასთან. მოწყობილობა (8) შედის ქიმილუმინესცენტურ პალატაში, რაც შესაძლებელს ხდის განისაზღვროს ქიმილუმინესცენტური გამოსხივების სპექტრული რეგიონი, ანუ დამოკიდებულება:

I = f1 (λ). (თერთმეტი)

ეს ბლოკი არის დისკის ფორმის კასეტა, რომელშიც დამონტაჟებულია სასაზღვრო ფილტრები. ფილტრების შეცვლა ხორციელდება დისკის კასეტის ბრუნვით ჰორიზონტალურ ღერძთან, რომელიც აკავშირებს ფილტრების სიბრტყის ცენტრებს და ფოტოგამრავლების ფოტოკათოდის სიბრტყეს.

გაზომვის პროცესი ხორციელდება შემდეგნაირად:

1. დადგენილია ფოტომამრავლის რეაქცია მისი მიწოდების ძაბვის ცვლილებებზე და მის კათოდზე მოხვედრილი სინათლის წყაროს ინტენსივობის ცვლილებაზე.

2. კუვეტა ივსება ლუმინოლის ხსნარით ტუტე გარემოში.

3. დისპენსერი ივსება გაანალიზებული ნიმუშით.

4. ქიმილუმინესცენციის ინტენსივობის დამოკიდებულება t დროზე ფიქსირდება. ქიმილუმინესცენციაზე დაკვირვებები ტარდება t1 დრომდე, რომლის დროსაც I1 ცვლილება t დროიდან მინიმალურია: I1 = f1(t).

5. გაანალიზებული ხსნარის ნაწილი მიეწოდება დისპენსერის გამოყენებით.

6. შეინიშნება გაანალიზებული ნიმუშის ქიმილუმინესცენცია, რომლის კინეტიკა არის I = f(t).

ნახ. ნახაზი 3 გვიჩვენებს ფუნქციების დამოკიდებულების გრაფიკს (I1 = f1(t)), რომელიც დაკავშირებულია გრაფიკთან (I = f(t)), გაანალიზებული ამოხსნის დანერგვის შემდეგ.

როგორც ჩანს ნახ. 3, ლუმინოლის ქიმილუმინესცენციის ინტენსივობა იცვლება: მკვეთრ მატებას მოჰყვება ლუმინესცენციის მკვეთრი ვარდნა გაანალიზებული ნიმუშის დამატების შემდეგ.

ვინაიდან ლუმინოლის დაჟანგვის დროს ქიმილუმინესცენციის მატება დაკავშირებულია პეროქსიდების წარმოქმნასთან, გაანალიზებული ნიმუშის შეყვანის შემდეგ ქიმილუმინესცენციის ინტენსივობის დაქვეითება მიუთითებს მათი რაოდენობის შემცირებაზე. შესაბამისად, შეგვიძლია ვისაუბროთ ანტიოქსიდანტური აქტივობის არსებობაზე ანალიზურ ნიმუშში შემავალ ნაერთებში.

უნდა აღინიშნოს, რომ გაანალიზებული ნიმუში იყო დენდელიონის ექსტრაქტი, მიღებული მშრალი დაბალი ტემპერატურის დისტილაციით, რომელიც შეიცავს ფენოლურ ნაერთებს, რომლებიც ცნობილია მაღალი ანტიოქსიდანტური აქტივობით.

ბრინჯი. 3. ფუნქციის დამოკიდებულების გრაფიკი (I1 = f1(t)), დაწყვილებული გრაფიკთან (I = f(t)), გაანალიზებული ამონახსნის შემოღების შემდეგ

გარდა ამისა, ექსპერიმენტმა დაადგინა, რომ ქიმილუმინესცენციის გამოყენებით შესაძლებელია პეროქსიდების ოდენობის დადგენა ულტრაგანზავებულ სისტემებში, რაც მნიშვნელოვანია პროდუქტების დაჟანგვის დაწყების შესაფასებლად, მაგალითად, შენახვის დროს.

ამრიგად, კვლევებმა აჩვენა, რომ პროდუქტებში პეროქსიდების განსაზღვრის მეთოდი, რომელიც დაფუძნებულია ლუმინოლის ქიმილუმინესცენციაზე ტუტე გარემოში, შესაძლებელს ხდის საკვები ნივთიერებების ანტიოქსიდანტური აქტივობის შეფასებას და შეიძლება გამოყენებულ იქნას სხვადასხვა საკვები ნაერთების ანტიოქსიდანტური თვისებების დასადგენად. .

მიმომხილველები:

ლიტვინოვა ე.ვ., ტექნიკურ მეცნიერებათა დოქტორი, უმაღლესი პროფესიული განათლების ფედერალური სახელმწიფო საბიუჯეტო საგანმანათლებლო დაწესებულების „OrelGIET“ ტექნოლოგიის, ორგანიზაციისა და სურსათის ჰიგიენის დეპარტამენტის პროფესორი, ორელი;

კოვალევა ო.ა., ბიოლოგიურ მეცნიერებათა დოქტორი, ინსტიტუტის დირექტორი, უმაღლესი პროფესიული განათლების ფედერალური სახელმწიფო საბიუჯეტო საგანმანათლებლო დაწესებულება „ორიოლის სახელმწიფო აგრარული უნივერსიტეტი“, ორელ.

ნაშრომი რედაქტორმა მიიღო 2013 წლის 8 ნოემბერს.

ბიბლიოგრაფიული ბმული

პანიჩკინი A.V., Bolshakova L.S., Milentyev V.N., Sannikov D.P., Kazmin V.M. ქიმილუმინესცენციის გამოყენება საკვები ნივთიერებების ანტიოქსიდანტური თვისებების შესაფასებლად // ფუნდამენტური კვლევა. – 2013. – No10-11. – გვ 2436-2439;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=32810 (წვდომის თარიღი: 12/17/2019). თქვენს ყურადღებას ვაქცევთ გამომცემლობა "საბუნებისმეტყველო მეცნიერებათა აკადემიის" მიერ გამოცემულ ჟურნალებს.

მთლიანი ანტიოქსიდანტური შესაძლებლობების ქიმილუმინესცენტური განსაზღვრა სამკურნალო მცენარეულ მასალაში

ბიბლიოგრაფიული ბმული

1.4 ანტიოქსიდანტური კვლევის მეთოდები

ბიბლიოგრაფიული ბმული

უჯრედის ორგანელების ფუნქციები

ესეს დაწერის ალგორითმი სოციალურ კვლევებში

ჩერნობილი თვითმხილველთა მოგონებებში ჩერნობილის საშინელი ისტორიები