MINISTRIA E SHËNDETËSISË E FEDERATES RUSE
ARTIKU I PËRGJITHSHËM FARMAKOPE
Vleresimi i metodave analitike OFS.1.1.0012.15
Prezantohet për herë të parë
Vërtetimi i një metode analitike është dëshmi eksperimentale që metoda është e përshtatshme për zgjidhjen e problemeve të synuara.
Kjo monografi e përgjithshme farmakopejale rregullon karakteristikat e metodave analitike të përcaktuara me qëllim të vërtetimit të tyre, dhe kriteret përkatëse për përshtatshmërinë e metodave të vërtetuara të destinuara për kontrollin e cilësisë së produkteve medicinale: substancave farmaceutike dhe produkteve medicinale.
Metodat për përcaktimin sasior i nënshtrohen vërtetimit, duke përfshirë metodat për përcaktimin e papastërtive dhe metodat për përcaktimin e kufirit të përmbajtjes. Metodat e vërtetimit vërtetohen kur është e nevojshme të konfirmohet specifika e tyre.
Gjatë vërtetimit, metoda analitike vlerësohet sipas karakteristikave të listuara më poshtë, të zgjedhura duke marrë parasysh rekomandimet standarde të dhëna në tabelë:
- specifika;
- kufiri i zbulimit;
- kufiri sasior;
- zona analitike (varg);
- lineariteti;
- korrektësi (vërtetësi);
- saktësi;
- qëndrueshmëri.
Tabela 1 - Karakteristikat e metodave të përcaktuara gjatë vërtetimit
|
Emri karakteristikat |
Llojet kryesore të teknikave | ||||
| Testi i autenticitetit | Çështje e huaj | sasia | |||
| Metodat sasiore | Kufiri i përmbajtjes | Përbërësi kryesor aktiv, përbërës të standardizuar | Përbërës aktiv në testin e "Shpërbërjes". | ||
| Specifikimi **) | po | po | po | po | po |
| Kufiri i zbulimit | Nr | Nr | po | Nr | Nr |
| Kufiri i sasisë | Nr | po | Nr | Nr | Nr |
| Zona analitike | Nr | po | Nr | po | po |
| Lineariteti | Nr | po | Nr | po | po |
| E drejta | Nr | po | * | po | po |
| Preciziteti :
- përsëritshmëria (konvergjenca) – e ndërmjetme saktësi (në laborator). |
|||||
| Qëndrueshmëria | Nr | * | * | * | * |
*) mund të përcaktohet nëse është e nevojshme;
**) mungesa e specifikës së një teknike analitike mund të kompensohet me përdorimin e një teknike tjetër analitike.
Rivalidimi (rivalidimi) i metodave kryhet kur ka një ndryshim:
- teknologjitë për marrjen e objektit të analizës;
- përbërja e produktit medicinal (objekt i analizës);
- Metoda e analizës e miratuar më parë.
Specifikimi
Specifikimi është aftësia e një teknike analitike për të vlerësuar pa mëdyshje analitin në prani të përbërësve shoqërues.
Vërtetimi i specifikës së një procedure të vërtetuar zakonisht bazohet në marrjen në konsideratë të të dhënave të marra duke përdorur atë nga analiza e përzierjeve modele me përbërje të njohur.
Specifikimi i metodës së vërtetuar mund të vërtetohet edhe me përpunimin e duhur statistikor të rezultateve të analizave të objekteve reale të kryera duke përdorur atë dhe, paralelisht, duke përdorur një metodë tjetër, dukshëm specifike (metodë, specifika e së cilës është vërtetuar).
1.1 Për metodat e testimit të autenticitetit
Metoda e vërtetuar (ose grupi i metodave) duhet të ofrojë informacion të besueshëm në lidhje me praninë e një lënde aktive të caktuar në një substancë ose formë dozimi nëse përmban përbërësit e specifikuar në recetë, e cila i nënshtrohet konfirmimit eksperimental.
Autenticiteti i substancës aktive në një substancë farmaceutike ose produkt medicinal përcaktohet nga krahasimi me një kampion standard ose nga vetitë fiziko-kimike ose kimike që nuk janë karakteristike për përbërësit e tjerë.
1.2 Për procedurat e testimit të sasisë dhe papastërtive
Metoda e testimit të sasisë dhe papastërtisë që vërtetohet i nënshtrohet të njëjtës qasje: specifika e saj për analitin duhet të vlerësohet, d.m.th., duhet të verifikohet eksperimentalisht që prania e përbërësve shoqërues nuk ndikon në mënyrë të padrejtë në rezultatin analitik.
Është e mundur të vlerësohet specifika e metodës së vërtetuar si duke analizuar përzierjet modele të përbërjes së njohur që përmbajnë analitin, ashtu edhe duke krahasuar rezultatet e analizave të objekteve reale të marra njëkohësisht duke përdorur metodën e vërtetuar dhe një metodë tjetër, dukshëm specifike. Rezultatet e eksperimenteve përkatëse duhet të përpunohen statistikisht.
Mungesa e specifikës së testit mund të kompensohet nga teste të tjera shtesë.
Kur metodat e vërtetimit, nëse është e përshtatshme, mund të përdoren mostra të barnave që janë ekspozuar ndaj kushteve ekstreme (drita, temperatura, lagështia) ose modifikuar kimikisht nga ndonjë metodë e përshtatshme për të grumbulluar papastërti.
Për teknikat kromatografike, tregohet rezolucioni ndërmjet dy substancave që eluojnë më afër në përqendrime të përshtatshme.
KUFITI I ZBULIMIN
Kufiri i zbulimit është sasia (përqendrimi) më i vogël i lëndës analitike në një kampion që mund të zbulohet (ose përafrohet) duke përdorur metodën që vërtetohet.
Kufiri i zbulimit në rastet e treguara në tabelë zakonisht shprehet si përqendrimi i analitit (në përqindje relative ose pjesë për milion - ppm).
Në varësi të llojit të teknikës (vizuale ose instrumentale), përdoren metoda të ndryshme për të përcaktuar kufirin e zbulimit.
2.1 Për metodat me vlerësimin vizual të rezultatit të analizës
Provoni mostrat me sasi (përqendrime) të ndryshme të njohura të analitit dhe vendosni vlerën minimale në të cilën rezultati i analizës mund të vlerësohet vizualisht. Kjo vlerë është një vlerësim i kufirit të zbulimit.
2.2 Për metodat me vlerësim instrumental të rezultatit të analizës
2.2.1 Sipas raportit sinjal-zhurmë
Kjo qasje është e zbatueshme për metodat për të cilat vërehet zhurma bazë. Krahasohen madhësitë e sinjaleve të marra për eksperimentin e kontrollit dhe për mostrat me përqendrime të ulëta të analitit. Vendosni sasinë minimale (përqendrimin) e lëndës analitike në mostër në të cilën raporti i sinjalit analitik me nivelin e zhurmës është 3.
Vlera e gjetur është një vlerësim i kufirit të zbulimit.
2.2.2 Sipas vlerës së devijimit standard të sinjalit dhe pjerrësisë së grafikut të kalibrimit
Kufiri i zbulimit (DL) gjendet duke përdorur ekuacionin:
PO = 3,3 · S/b,
Ku S
b– koeficienti i ndjeshmërisë, që është raporti i sinjalit analitik me vlerën që përcaktohet (pjerrësia e lakores së kalibrimit).
S Dhe b
S S a term i lirë i ekuacionit të këtij grafiku. Vlera e fituar e kufirit të zbulimit, nëse është e nevojshme, mund të konfirmohet me eksperiment të drejtpërdrejtë në sasi (përqendrime) të analitit që janë afër vlerës së gjetur të kufirit të zbulimit.
Në përgjithësi, nëse ka prova që një procedurë është e përshtatshme për zbulimin e besueshëm të një substance në përqendrime mbi dhe nën kufijtë e specifikimeve të saj, nuk është e nevojshme të përcaktohet kufiri aktual i zbulimit për atë procedurë.
KUFIZIMI I KUANTIFIKIMIT
Kufiri i sasisë është sasia (përqendrimi) më i vogël i një substance në një kampion që mund të matet duke përdorur një procedurë të vërtetuar me saktësinë e kërkuar dhe saktësinë brenda laboratorit (të ndërmjetëm).
Kufiri i sasisë është një karakteristikë e nevojshme e vërtetimit të metodave të përdorura për të vlerësuar sasitë (përqendrimet) e vogla të substancave në një kampion dhe, në veçanti, për të vlerësuar përmbajtjen e papastërtive.
Në varësi të llojit të teknikës, metodat e mëposhtme përdoren për të gjetur kufirin e sasisë.
3.1 Për metodat me vlerësimin vizual të rezultatit të analizës
Provoni mostrat me sasi (përqendrime) të ndryshme të njohura të analitit dhe vendosni vlerën minimale në të cilën rezultati i analizës mund të merret vizualisht me saktësinë e kërkuar dhe saktësinë brenda laboratorit (të ndërmjetëm).
3.2 Për metodat me vlerësim instrumental të rezultatit të analizës
3.2.1 Sipas raportit sinjal-zhurmë
Vendosni përqendrimin minimal të lëndës analitike në mostër në të cilën raporti i sinjalit analitik me nivelin e zhurmës është rreth 10:1.
3.2.2 Bazuar në devijimin standard të sinjalit dhe pjerrësinë e grafikut të kalibrimit
Kufiri i sasisë (LOQ) llogaritet duke përdorur ekuacionin:
PKO = 10 · S/b,
Ku S– devijimi standard i sinjalit analitik;
b– koeficienti i ndjeshmërisë, i cili është raporti i sinjalit analitik me vlerën e përcaktuar.
Në prani të të dhënave eksperimentale në një gamë të gjerë sasish të matura S Dhe b mund të vlerësohet duke përdorur metodën e katrorëve më të vegjël.
Për një grafik kalibrimi linear, vlera S merret e barabartë me devijimin standard S a term i lirë i ekuacionit të këtij grafiku. Vlera e përftuar e kufirit të sasisë, nëse është e nevojshme, mund të vërtetohet me eksperiment të drejtpërdrejtë në sasi (përqendrime) të substancës që përcaktohen që janë afër vlerës së gjetur të kufirit të sasisë.
Nëse ka të dhëna për aftësinë e një teknike për të përcaktuar me besueshmëri analitin në përqendrime mbi dhe nën normën e përmbajtjes së tij të përcaktuar në specifikim, përcaktimi i vlerës reale të kufirit të sasisë për një teknikë të tillë, si rregull, nuk është kërkohet.
FUSHA ANALITIKE E METODOLOGJISË
Zona analitike e teknikës është intervali midis vlerave të sipërme dhe të poshtme të karakteristikave analitike të përbërësit që përcaktohet në objektin e analizës (sasia, përqendrimi, aktiviteti i tij, etj.). Brenda këtij intervali, rezultatet e marra duke përdorur metodën që vërtetohet duhet të kenë një nivel të pranueshëm saktësie dhe saktësie brenda laboratorit (të ndërmjetëm).
Kërkesat e mëposhtme zbatohen për madhësinë e zonës analitike të metodave:
– Metodat e përcaktimit sasior duhet të zbatohen në rangun nga 80 deri në 120% të vlerës nominale të karakteristikës analitike që përcaktohet;
- metodat për vlerësimin e uniformitetit të dozës duhet të zbatohen në rangun nga 70 deri në 130% të dozës nominale;
– Metodat sasiore të përdorura në testin e tretjes duhet të jenë përgjithësisht të zbatueshme brenda intervalit nga 50 deri në 120% të përqendrimit të pritshëm të substancës aktive në mjedisin e tretjes;
– Metodat e provës së pastërtisë duhet të jenë të zbatueshme në rangun nga “Limiti i sasisë” ose “Limiti i zbulimit” deri në 120% të përmbajtjes së lejuar të papastërtisë që përcaktohet.
Shtrirja analitike e teknikës mund të përcaktohet nga gama e të dhënave eksperimentale që plotësojnë modelin linear.
LINEARITETI
Lineariteti i një teknike është prania e një varësie lineare të sinjalit analitik nga përqendrimi ose sasia e analitit në kampionin e analizuar brenda gamës analitike të teknikës.
Kur vërtetohet një metodë, lineariteti i saj në fushën analitike kontrollohet eksperimentalisht duke matur sinjalet analitike për të paktën 5 mostra me sasi ose përqendrime të ndryshme të analitit. Të dhënat eksperimentale përpunohen me metodën e katrorëve më të vegjël duke përdorur një model linear:
y = b · x + a,
X- sasia ose përqendrimi i substancës që përcaktohet;
y– madhësia e përgjigjes;
b– koeficienti këndor;
a– anëtar i lirë (OFS “Përpunimi statistikor i rezultateve të eksperimentit kimik”).
Vlerat duhet të llogariten dhe të paraqiten b, a dhe koeficienti i korrelacionit r. Në shumicën e rasteve, përdoren varësi lineare që plotësojnë kushtin 0.99, dhe vetëm kur analizohen sasitë e gjurmës janë varësi lineare për të cilat merren parasysh 0.9.
Në disa raste, mundësia e përafrimit linear të të dhënave eksperimentale sigurohet vetëm pas transformimit të tyre matematikor (për shembull, logaritmi).
Për disa metoda analitike, të cilat në parim nuk mund të bazohen në një marrëdhënie lineare midis të dhënave eksperimentale, përqendrimi ose sasia e një substance përcaktohet duke përdorur grafikët e kalibrimit jolinear. Në këtë rast, varësia e sinjalit analitik nga sasia ose përqendrimi i analitit mund të përafrohet me një funksion të përshtatshëm jolinear duke përdorur metodën e katrorëve më të vegjël, e cila është e realizueshme me softuerin e duhur të vërtetuar.
E DREJTË
Korrektësia e një teknike karakterizohet nga devijimi i rezultatit mesatar të përcaktimeve të bëra duke e përdorur atë nga vlera e pranuar si e vërtetë.
Metoda e vërtetuar konsiderohet e saktë nëse vlerat e pranuara si të vërteta qëndrojnë brenda intervaleve të besimit të rezultateve mesatare përkatëse të testit të marra eksperimentalisht duke përdorur këtë metodë.
Për të vlerësuar korrektësinë e metodave sasiore, janë të zbatueshme qasjet e mëposhtme:
a) analiza duke përdorur një metodologji të vërtetuar të mostrave standarde ose përzierjeve model me një përmbajtje (përqendrim) të njohur të substancës që përcaktohet;
b) krahasimi i rezultateve të marra duke përdorur metodën e vërtetuar dhe metodën e referencës, korrektësia e së cilës është vërtetuar më parë;
c) shqyrtimi i rezultateve të studimit të linearitetit të metodës së vërtetuar: nëse termi i lirë në ekuacionin e dhënë në seksionin 5 nuk është statistikisht i ndryshëm nga zero, atëherë përdorimi i një metode të tillë jep rezultate pa gabime sistematike.
Për qasjet "a" dhe "b", është e mundur të paraqiten të dhënat e marra në formën e një ekuacioni të varësisë lineare (regresionit) midis vlerave të gjetura eksperimentalisht dhe vlerave të vërteta. Për këtë ekuacion testohen hipotezat për barazinë e tangjentes së këndit të prirjes ndaj unitetit. b dhe rreth barazisë me zero të termit të lirë a. Si rregull, nëse këto hipoteza njihen si të vërteta me një shkallë besueshmërie të barabartë me 0.05, atëherë përdorimi i metodologjisë së vërtetuar jep rezultate të sakta, d.m.th., pa gabime sistematike.
SAKTËSIA
Saktësia e një teknike karakterizohet nga shpërndarja e rezultateve të marra me përdorimin e saj në raport me vlerën e rezultatit mesatar. Një masë e një shpërndarjeje të tillë është vlera e devijimit standard të rezultatit të një përcaktimi individual, të marrë për një mostër me një madhësi mjaft të madhe.
Saktësia vlerësohet për çdo metodë të përcaktimit sasior bazuar në rezultatet e të paktën tre përcaktimeve për secilin nga tre nivelet e vlerave të përcaktuara (të ulëta, të mesme dhe të sipërme) që shtrihen brenda fushës analitike të metodës. Përsëritshmëria mund të vlerësohet gjithashtu për çdo procedurë sasiore bazuar në rezultatet e të paktën gjashtë përcaktimeve për mostrat me përmbajtje afërsisht nominale të analitit. Në shumë raste, saktësia mund të vlerësohet bazuar në rezultatet e përpunimit të të dhënave eksperimentale duke përdorur metodën e katrorëve më të vegjël, siç tregohet në Monografinë e Farmakopesë së Përgjithshme "Përpunimi statistikor i rezultateve të eksperimentit kimik".
Saktësia duhet të studiohet në mostrat homogjene dhe mund të vlerësohet në tre mënyra:
– si përsëritshmëri (konvergjenca);
– si precizion intralaboratorik (i ndërmjetëm);
– si saktësi ndërlaboratorike (riprodhueshmëri).
Rezultatet e vlerësimit të teknikës analitike për secilën prej opsioneve të saktësisë zakonisht karakterizohen nga vlera përkatëse e devijimit standard të rezultatit të një përcaktimi të veçantë.
Zakonisht, kur zhvillohet një metodë origjinale, përcaktohet përsëritshmëria (konvergjenca) e rezultateve të marra duke përdorur atë. Nëse është e nevojshme të përfshihet metoda e zhvilluar në dokumentacionin rregullator, saktësia e saj brenda laboratorit (të ndërmjetme) përcaktohet shtesë. Saktësia (riprodhueshmëria) ndërlaboratorike e një metode vlerësohet me përfshirjen e saj të synuar në një draft monografi të përgjithshme farmakopeale, një monografi farmakopeale ose në dokumentacionin rregullator për materialet referuese farmakopeike.
7.1 Përsëritshmëria (konvergjenca)
Përsëritshmëria e një teknike analitike vlerësohet nga rezultatet e pavarura të marra në të njëjtat kushte të rregulluara në të njëjtin laborator (i njëjti performues, e njëjta pajisje, i njëjti grup reagentësh) brenda një periudhe të shkurtër kohore.
7.2 Preciziteti intralaborator (i ndërmjetëm).
Preciziteti intralaborator (i ndërmjetëm) i metodës së vërtetuar vlerësohet në kushtet e funksionimit të një laboratori (ditë të ndryshme, performues të ndryshëm, pajisje të ndryshme, etj.).
7.3 Saktësia ndërlaboratorike (riprodhueshmëria)
Saktësia ndërlaboratorike (riprodhueshmëria) e metodës së vërtetuar vlerësohet kur testimi kryhet në laboratorë të ndryshëm.
QËNDRUESHMËRIA
Stabiliteti i një metode të vërtetuar është aftësia për të ruajtur karakteristikat e gjetura për të në kushte optimale (nominale), të dhëna në tabelë, me devijime të vogla të mundshme nga këto kushte analize.
Fortësia e një procedure nuk duhet të përcaktohet në lidhje me kushtet analitike të kontrolluara lehtësisht. Kjo redukton në mënyrë dramatike nevojën për studime të dedikuara për qëndrueshmërinë.
Stabiliteti duhet të studiohet vetëm kur procedura që vërtetohet bazohet në përdorimin e metodave analitike veçanërisht të ndjeshme, të tilla si lloje të ndryshme kromatografie dhe analiza funksionale. Nëse është e nevojshme, qëndrueshmëria e metodologjisë vlerësohet në fazën e zhvillimit të saj. Nëse stabiliteti i një metode ka të ngjarë të jetë i ulët, përshtatshmëria e saj duhet të kontrollohet drejtpërdrejt gjatë përdorimit praktik.
Testimi i përshtatshmërisë së sistemit analitik
Vërtetimi i përshtatshmërisë së një sistemi analitik është një kontroll i përmbushjes së kërkesave bazë për të. Sistemi përshtatshmëria e të cilit po testohet është një koleksion instrumentesh, reagentësh, standardesh dhe mostrash specifike që do të analizohen. Kërkesat për një sistem të tillë zakonisht specifikohen në monografinë e përgjithshme farmakopeale për metodën përkatëse analitike. Kështu, testimi i përshtatshmërisë së sistemit analitik bëhet një procedurë e përfshirë në procedurën që vërtetohet.
Prezantimi i rezultateve të vlefshmërisë
Protokolli i vlefshmërisë së procedurës analitike duhet të përmbajë:
– përshkrimin e plotë të tij, të mjaftueshëm për riprodhim dhe duke pasqyruar të gjitha kushtet e nevojshme për kryerjen e analizës;
– karakteristikat që vlerësohen;
– të gjitha rezultatet parësore që janë përfshirë në përpunimin e të dhënave statistikore;
– rezultatet e përpunimit statistikor të të dhënave të marra eksperimentalisht gjatë zhvillimit ose testimit të metodës së vërtetuar;
– materiale ilustruese, të tilla si kopjet e kromatogrameve të marra nga kromatografia e lëngshme me performancë të lartë ose kromatografia me gaz; elektroferograme, spektra elektronike dhe infra të kuqe; fotografi ose vizatime të kromatogrameve të marra me anë të metodave të kromatografisë me shtresë të hollë ose letre; vizatimet e kurbave të titrimit, grafikët e kalibrimit;
– konkluzioni mbi përshtatshmërinë e metodës së vërtetuar për përfshirje në dokumentin rregullator.
Është e këshillueshme që të dokumentohen materialet e vlefshmërisë për metoda individuale analitike në formën e një raporti të kombinuar të vlefshmërisë.
Çdo metodë instrumentale karakterizohet nga një nivel i caktuar zhurme i lidhur me specifikat e procesit të matjes. Prandaj, ekziston gjithmonë një kufi i përmbajtjes nën të cilin një substancë nuk mund të zbulohet fare me besueshmëri.
Kufiri i zbulimit C min, P - përmbajtja më e ulët në të cilën kjo metodë mund të zbulojë praninë e një komponenti me një probabilitet të caktuar besimi.
Kufiri i zbulimit mund të vendoset gjithashtu nga sinjali analitik minimal y min, i cili mund të dallohet me siguri nga sinjali i eksperimentit të kontrollit - y sfond.
Metodat statistikore duke përdorur pabarazinë e Chebyshev kanë vërtetuar se kufiri i zbulimit mund të përcaktohet në mënyrë sasiore duke përdorur shprehjen
Ku sfondi është devijimi standard i sinjalit të sfondit analitik; S - koeficienti i ndjeshmërisë (ndonjëherë i quajtur thjesht "ndjeshmëri"), ai karakterizon përgjigjen e sinjalit analitik ndaj përmbajtjes së komponentit. Koeficienti i ndjeshmërisë është vlera e derivatit të parë të funksionit të kalibrimit për një përcaktim të caktuar të përqendrimit. Për grafikët e kalibrimit me vijë të drejtë, kjo është tangjentja e këndit të prirjes:
(vëmendje: mos u ngaterroni faktori i ndjeshmërisëS me devijimi standards!)
Ka mënyra të tjera për të llogaritur kufirin e zbulimit, por ky ekuacion është ai që përdoret më shpesh.
Në analizën sasiore kimike, zakonisht jepet një sërë përmbajtjesh ose përqendrimesh të përcaktuara. Do të thotë gamën e vlerave të përmbajtjes (përqendrimeve) të përcaktuara të parashikuara nga kjo teknikë dhe të kufizuara nga kufijtë e poshtëm dhe të sipërm të përqendrimeve të përcaktuara.
Analisti shpesh është i interesuar për kufirin e poshtëm të përqendrimeve të përcaktuara Me n ose përmbajtjes m n komponent i përcaktuar duke përdorur këtë metodë. Përtej kufirit të poshtëm të përmbajtjes së përcaktuar zakonisht marrin sasinë ose përqendrimin minimal që mund të përcaktohet me një devijim standard relativ
. .
Shembull
Përqendrimi në masë i hekurit në tretësirë u përcaktua me metodën spektrofotometrike, duke matur dendësinë optike të tretësirave të ngjyrosura si rezultat i ndërveprimit të jonit Fe 3+ me acidin sulfosalicilik. Për të ndërtuar varësinë e kalibrimit, u matën dendësia optike e tretësirave me përqendrime në rritje (të specifikuara) të hekurit të trajtuara me acid sulfosalicilik.
Dendësia optike e tretësirës referente (eksperiment kontrolli për reagentët, d.m.th. pa shtimin e hekurit, (sfondi) ishin 0,002; 0,000; 0,008; 0,006; 0,003.
Llogaritni kufiri i zbulimit të hekurit.
Zgjidhje
1) Si rezultat i llogaritjeve duke përdorur metodën e katrorëve më të vegjël (shih shembullin për detyrën e provës nr. 5), u morën vlerat për ndërtimin e një grafiku kalibrimi.
Vlerat e llogaritura për ndërtimin e grafikut të kalibrimit
2) Ne llogarisim koeficientin e ndjeshmërisë, pra koeficientin këndor të varësisë së kalibrimit (S) sipas të dhënave të tabelës.
3) Llogaritni devijimi standard i sinjalit të sfondit, cfare eshte 0,0032 njësitë e densitetit optik.
4) Kufiri i zbulimit do të jetë, mg/cm 3
Detyra testuese nr.6
Përcaktoni kufirin e zbulimit të hekurit në ujë.
Të dhënat fillestare : vlerat e densitetit optik të sfondit (zgjidhja e referencës) gjatë ndërtimit të grafikut të kalibrimit për përcaktimin e hekurit ishin 0,003; 0,001; 0,007; 0,005; 0,006; 0,003; 0,001; 0,005. Vlerat e densiteteve optike që korrespondojnë me përqendrimet e hekurit në tretësirë janë paraqitur në tabelën e detyrës së kontrollit nr. 5.
Llogaritni kufirin e zbulimit të hekurit në mg/cm 3 duke përdorur koeficientët e ndjeshmërisë S të llogaritur në bazë të të dhënave të marra për të ndërtuar një grafik kalibrimi duke përdorur metodën e katrorëve më të vegjël gjatë kryerjes së detyrës së kontrollit nr. 5;
Kufiri i sasisë
"...Limiti i kuantitimit (LOQ) (në përkufizimet analitike): përqendrimi më i ulët ose analit në një kampion analit që mund të matet me një nivel të pranueshëm saktësie dhe saktësie, siç tregohet nga testimi bashkëpunues laboratorik ose vlefshmëria e një metode tjetër të përshtatshme. .."
Burimi:
" PRODUKTET USHQIMORE. METODAT E ANALIZËS PËR ZBULIMIN E ORGANIZMAVE TË MODIFIKUARA GJENETIKISHT DHE PRODUKTEVE TË PËRFITURA NGA TYRE. KËRKESAT DHE PËRKUFIZIMET E PËRGJITHSHME. GOST R 53214-202087IS"
(miratuar me Urdhrin e Rostekhregulirovaniya datë 25 dhjetor 2008 N 708-st)
Terminologjia zyrtare. Akademik.ru. 2012.
Shihni se çfarë është "Limiti i Kuantifikimit" në fjalorë të tjerë:
kufiri i sasisë- 3.7 kufiri i kuantifikimit (LOQ): Një rritje dhjetëfish në devijimin standard të masës së mostrës. Shënim Vlera LOQ përdoret si një vlerë pragu, mbi të cilin masa... ...
kufiri i përsëritshmërisë- 3.7 Kufiri i përsëritshmërisë: Diferenca absolute midis rezultateve të vlerave maksimale dhe minimale nga numri i specifikuar i matjeve të kryera në kushte përsëritshmërie sipas GOST R ISO 5725 1. Burimi ... Fjalor-libër referues i termave të dokumentacionit normativ dhe teknik
kufiri i riprodhueshmërisë- 2.9 Kufiri i riprodhueshmërisë: Vlera nën të cilën, me një probabilitet prej 95%, qëndron vlera absolute e diferencës midis dy rezultateve të testimit të marra në kushte riprodhueshmërie. Burimi… Fjalor-libër referues i termave të dokumentacionit normativ dhe teknik
kufiri i përsëritshmërisë (konvergjenca)- 3.11 Kufiri i përsëritshmërisë: Një vlerë që, me një probabilitet besimi prej 95%, nuk tejkalohet nga vlera absolute e diferencës midis rezultateve të dy matjeve (ose testeve) të marra në kushtet e përsëritshmërisë... Fjalor-libër referues i termave të dokumentacionit normativ dhe teknik
Kufiri i saktësisë brenda laboratorit- 3.11 Kufiri i saktësisë brenda laboratorit: Mospërputhja absolute lejoi probabilitetin e pranuar P midis dy rezultateve analitike të marra në kushtet e saktësisë brenda laboratorit. Burimi… Fjalor-libër referues i termave të dokumentacionit normativ dhe teknik
kufiri i riprodhueshmërisë R- 2.19.2 Kufiri i riprodhueshmërisë R: Vlera absolute e diferencës midis dy rezultateve të provës në kushtet e riprodhueshmërisë (shih 2.19.1) me një nivel besimi prej 95%. 2.19.1, 2.19.2 (Edicioni i ndryshuar, titulli= Ndryshimi nr. 1, IUS 12 2002).… … Fjalor-libër referues i termave të dokumentacionit normativ dhe teknik
MI 2881-2004: Rekomandim. GSI. Metodat e analizës kimike sasiore. Procedurat për kontrollimin e pranueshmërisë së rezultateve analitike- Terminologjia MI 2881 2004: Rekomandim. GSI. Metodat e analizës kimike sasiore. Procedurat për kontrollimin e pranueshmërisë së rezultateve të analizës: 3.17 Diferenca kritike: Diferenca absolute lejoi një probabilitet të pranuar prej 95% midis ... ... Fjalor-libër referues i termave të dokumentacionit normativ dhe teknik
GOST R 50779.11-2000: Metodat statistikore. Menaxhimi i cilësisë statistikore. Termat dhe Përkufizimet- Terminologjia GOST R 50779.11 2000: Metodat statistikore. Menaxhimi i cilësisë statistikore. Termat dhe përkufizimet dokumenti origjinal: 3.4.3 (i sipërm dhe i poshtëm) kufijtë e kontrollit Kufiri në tabelën e kontrollit, mbi të cilin kufiri i sipërm, ... ... Fjalor-libër referues i termave të dokumentacionit normativ dhe teknik
GOST R 50779.10-2000: Metodat statistikore. Probabiliteti dhe statistikat bazë. Termat dhe Përkufizimet- Terminologjia GOST R 50779.10 2000: Metodat statistikore. Probabiliteti dhe statistikat bazë. Termat dhe përkufizimet dokumenti origjinal: 2.3. popullsia (e pergjithshme) Kompleti i te gjitha njesive te marra ne konsiderate. Shënim Për një ndryshore të rastësishme... ... Fjalor-libër referues i termave të dokumentacionit normativ dhe teknik
RMG 61-2003: Sistemi shtetëror për sigurimin e uniformitetit të matjeve. Treguesit e saktësisë, korrektësisë, saktësisë së metodave të analizës kimike sasiore. Metodat e vlerësimit- Terminologjia RMG 61 2003: Sistemi shtetëror për sigurimin e uniformitetit të matjeve. Treguesit e saktësisë, korrektësisë, saktësisë së metodave të analizës kimike sasiore. Metodat e vlerësimit: 3.12 saktësi brenda laboratorit: Precision ... Fjalor-libër referues i termave të dokumentacionit normativ dhe teknik
KOLEGJI
ZGJIDHJE
Në përputhje me nenin 30 të Traktatit për Bashkimin Ekonomik Euroaziatik të 29 majit 2014 dhe paragrafin 2 të nenit 3 të Marrëveshjes mbi parimet dhe rregullat e përbashkëta për qarkullimin e barnave brenda kuadrit të Unionit Ekonomik Euroaziatik të 23 dhjetorit 2014 , Bordi i Komisionit Ekonomik Euroaziatik
vendosi:
1. Miraton Udhëzimet e bashkangjitura për vlefshmërinë e metodave analitike për testimin e produkteve medicinale.
2. Ky vendim hyn në fuqi 6 muaj nga data e publikimit zyrtar.
Kryetar i Bordit
Komisioni Ekonomik Euroaziatik
T. Sargian
Udhëzues mbi Validimin e Metodave Analitike për Testimin e Barnave
MIRATUAR
Me vendim të Bordit
Komisioni Ekonomik Euroaziatik
datë 17 korrik 2018 N 113
I. Dispozitat e përgjithshme
1. Ky udhëzues përcakton rregullat për vlefshmërinë e metodave analitike për testimin e produkteve medicinale, si dhe një listë të karakteristikave që duhen vlerësuar gjatë vërtetimit të këtyre metodave dhe të përfshira në dosjet e regjistrimit të dorëzuara pranë organeve të autorizuara të shteteve anëtare të Bashkimi Ekonomik Euroaziatik (në tekstin e mëtejmë: shtetet anëtare, përkatësisht).
2. Qëllimi i vërtetimit të një procedure analitike për testimin e produkteve medicinale është konfirmimi i dokumentuar i përshtatshmërisë së tij për qëllimin e synuar.
II. Përkufizimet
3. Për qëllimet e këtij udhëzuesi, përdoren koncepte që nënkuptojnë sa vijon:
"procedurë analitike" - një metodologji për testimin e produkteve medicinale, e cila përfshin një përshkrim të detajuar të sekuencës së veprimeve të nevojshme për të kryer një test analitik (përfshirë një përshkrim të përgatitjes së mostrave të provës, mostrave standarde, reagentëve, përdorimit të pajisjeve, ndërtimit të një kurbë kalibrimi, formulat e llogaritjes së përdorur, etj.);
"Riprodhueshmëria" është një veti që karakterizon saktësinë në testet ndërlaboratorike;
"gama e aplikimit (zona analitike)" (varg) - intervali midis përqendrimeve (sasisë) më të lartë dhe më të ulët të analitit në një kampion (duke përfshirë këto përqendrime), për të cilin procedura analitike tregohet se ka një nivel të pranueshëm saktësie. , saktësia dhe lineariteti;
"lineariteti" është një varësi drejtpërdrejt proporcionale e sinjalit analitik nga përqendrimi (sasia) e analitit në kampion brenda intervalit të aplikimit (zonës analitike) të teknikës;
"rikuperim" (rikuperim) - raporti midis mesatares së përftuar dhe vlerave të vërteta (referencë), duke marrë parasysh intervalet përkatëse të besimit;
"përsëritshmëria (preciziteti brenda analizës)" - saktësia e një metode kur testet e përsëritura kryhen në të njëjtat kushte funksionimi (për shembull, nga i njëjti analist ose grup analistësh, në të njëjtën pajisje, me të njëjtat reagentë, etj.) për një periudhë të shkurtër kohe;
"korrektësia" (saktësia, vërtetësia) - afërsia midis vlerës së pranuar të vërtetë (referencës) dhe vlerës që rezulton, e cila shprehet me vlerën e hapjes;
“Kufi i sasisë” - sasia më e vogël e një lënde në një kampion që mund të matet me saktësinë dhe saktësinë e duhur;
"kufiri i zbulimit" - sasia më e vogël e analitit në një kampion që mund të zbulohet, por jo domosdoshmërisht të përcaktohet me saktësi sasiore;
"precision" (precision) - një shprehje e afërsisë (shkallës së shpërndarjes) e rezultateve (vlerave) midis një sërë matjeve të kryera në mostra të shumta të marra nga e njëjta mostër homogjene, në kushtet e përcaktuara nga metoda;
"precision i ndërmjetëm (intralaboratorik)" (precizion i ndërmjetëm) - ndikimi i variacioneve brenda laboratorit (ditë të ndryshme, analistë të ndryshëm, pajisje të ndryshme, seri (slota) të ndryshme reagentësh, etj.) në rezultatet e testimit të mostrave identike të marra nga e njëjta seri;
"Specifikiteti" - aftësia e një teknike analitike për të vlerësuar në mënyrë të qartë substancën që përcaktohet, pavarësisht nga substancat e tjera (papastërtitë, produktet e degradimit, eksipientët, matrica (mesatare), etj.) të pranishme në kampionin e provës;
"Rrutësia" është aftësia e një teknike analitike për të qenë rezistente ndaj ndikimit të ndryshimeve të vogla të specifikuara në kushtet e provës, gjë që tregon besueshmërinë e saj në përdorim normal (standard).
III. Llojet e metodave analitike që do të vërtetohen
4. Ky udhëzues diskuton qasjet për vërtetimin e 4 llojeve më të zakonshme të metodave analitike:
a) testet për identifikimin (autenticitetin);
b) testet për përcaktimin e përmbajtjes sasiore të papastërtive (testet sasiore për përmbajtjen e papastërtive);
c) testet për përcaktimin e përmbajtjes maksimale të papastërtive në kampion (testet kufitare për papastërtitë e kontrollit);
d) testet sasiore (për përmbajtjen ose aktivitetin) për të përcaktuar pjesën aktive të molekulës së substancës aktive në kampionin e provës.
5. Të gjitha metodat analitike të përdorura për të kontrolluar cilësinë e produkteve medicinale duhet të vërtetohen. Ky udhëzues nuk mbulon vërtetimin e metodave analitike për llojet e testeve që nuk përfshihen në paragrafin 4 të këtij Udhëzuesi (për shembull, testet e shpërbërjes ose përcaktimi i madhësisë së grimcave (dispersitetit) të një substance farmaceutike, etj.).
6. Testet e identifikimit (autenticitetit) zakonisht konsistojnë në krahasimin e vetive (për shembull, karakteristikat spektrale, sjelljen kromatografike, aktivitetin kimik, etj.) të mostrës së provës dhe kampionit standard.
7. Testet për të përcaktuar përmbajtjen sasiore të papastërtive dhe testet për të përcaktuar përmbajtjen kufizuese të papastërtive në një kampion synojnë të përshkruajnë saktë pastërtinë e kampionit. Kërkesat për vërtetimin e metodave për përcaktimin sasior të papastërtive ndryshojnë nga kërkesat për vërtetimin e metodave për përcaktimin e përmbajtjes kufizuese të papastërtive në një kampion.
8. Metodat sasiore të provës kanë për qëllim matjen e përmbajtjes së analitit në kampionin e provës. Në këto udhëzime, sasia i referohet matjes sasiore të përbërësve kryesorë të një substance farmaceutike. Parametra të ngjashëm vlefshmërie zbatohen për përcaktimin sasior të substancës aktive ose përbërësve të tjerë të produktit medicinal. Parametrat e vlefshmërisë sasiore mund të përdoren në procedura të tjera analitike (p.sh., testimi i shpërbërjes).
Qëllimi i procedurave analitike duhet të përcaktohet qartë, pasi kjo përcakton zgjedhjen e karakteristikave të vlefshmërisë që duhet të vlerësohen gjatë vërtetimit.
9. Karakteristikat e mëposhtme tipike të vërtetimit të një procedure analitike i nënshtrohen vlerësimit:
a) saktësia (vërtetësia);
b) saktësi:
përsëritshmëria;
saktësi e ndërmjetme (intralaboratorike);
c) specifikat;
d) kufiri i zbulimit;
e) kufiri sasior;
f) lineariteti;
g) diapazoni i aplikimit (fusha analitike).
10. Karakteristikat më të rëndësishme të vlefshmërisë për vërtetimin e llojeve të ndryshme të metodave analitike janë dhënë në tabelë.
Tabela. Karakteristikat e vërtetimit për vërtetimin e llojeve të ndryshme të metodave analitike
Vleresimi | Lloji i procedurës analitike |
||||
karakteristike | teste për | testet e papastërtive | testet sasiore |
||
(autenticiteti) | sasiore | kufizoni përmbajtjen | shpërbërja (vetëm matja), përmbajtja (aktiviteti) |
||
E drejta | |||||
Preciziteti | |||||
përsëritshmëria | |||||
saktësi e ndërmjetme | |||||
Specifikimi** | |||||
Kufiri i zbulimit | |||||
Kufiri i sasisë | |||||
Lineariteti | |||||
Gama e aplikimit | |||||
________________
*Nëse përcaktohet riprodhueshmëria, nuk kërkohet përcaktimi i saktësisë së ndërmjetme.
** Mungesa e specifikës së një teknike analitike mund të kompensohet me përdorimin e një ose më shumë teknikave analitike shtesë.
*** Mund të kërkohet në disa raste (për shembull, kur kufiri i zbulimit dhe kufiri i normalizuar për përmbajtjen e papastërtisë që përcaktohet janë afër).
Shënim. "-" - karakteristika nuk vlerësohet, "+" - karakteristika vlerësohet.
Lista e specifikuar duhet të konsiderohet si standarde kur vërtetohen metodat analitike. Mund të ketë përjashtime që kërkojnë arsyetim të veçantë nga prodhuesi i produktit medicinal. Një karakteristikë e tillë e një teknike analitike si stabiliteti (rezistenca) nuk është paraqitur në tabelë, por duhet të merret parasysh në fazën e duhur të zhvillimit të një teknike analitike.
Rivlefshmëria (rivlefshmëria) mund të jetë e nevojshme në rastet e mëposhtme (por pa u kufizuar në):
ndryshimi i skemës së sintezës së një substance farmaceutike;
ndryshimi në përbërjen e produktit medicinal;
ndryshim në metodologjinë analitike.
Rivlefshmëria nuk kryhet nëse prodhuesi jep arsyetimin e duhur. Shtrirja e rivlerësimit varet nga natyra e ndryshimeve të bëra.
IV. Metodologjia e vërtetimit të metodave analitike
1. Kërkesat e përgjithshme për metodologjinë e vërtetimit të metodave analitike
11. Ky seksion përshkruan karakteristikat e konsideruara në vlerësimin e metodave analitike dhe ofron disa qasje dhe rekomandime për përcaktimin e karakteristikave të ndryshme të vërtetimit të secilës metodë analitike.
12. Në disa raste (për shembull, kur provohet specifika), mund të përdoret një kombinim i disa teknikave analitike për të siguruar cilësinë e një substance farmaceutike ose produktit medikamentoz.
13. Të gjitha të dhënat përkatëse të mbledhura gjatë validimit dhe formulat e përdorura për llogaritjen e karakteristikave të vërtetimit duhet të paraqiten dhe analizohen.
14. Lejohet përdorimi i qasjeve të ndryshme nga ato të përcaktuara në këto Udhëzime. Përzgjedhja e procedurës dhe protokollit të vlefshmërisë është përgjegjësi e aplikantit. Në këtë rast, qëllimi kryesor i vërtetimit të një metode analitike është të konfirmojë përshtatshmërinë e metodës për qëllimin e saj të synuar. Për shkak të kompleksitetit të tyre, qasjet ndaj metodave analitike për produktet biologjike dhe bioteknologjike mund të ndryshojnë nga ato të përshkruara në këtë udhëzues.
15. Gjatë gjithë studimit të vlefshmërisë, duhet të përdoren materiale referimi me karakteristika të njohura e të dokumentuara. Shkalla e kërkuar e pastërtisë së mostrave standarde varet nga qëllimi i synuar.
16. Karakteristika të ndryshme të vërtetimit diskutohen në nënseksione të veçanta të këtij seksioni. Struktura e këtij seksioni pasqyron ecurinë e procesit të zhvillimit dhe vlerësimit të metodologjisë analitike.
17. Puna eksperimentale duhet të projektohet në mënyrë që karakteristikat përkatëse të vërtetimit të studiohen njëkohësisht, duke marrë të dhëna të besueshme mbi aftësitë e procedurës analitike (p.sh., specifika, lineariteti, diapazoni i aplikimit, saktësia dhe saktësia).
2. Specifikimi
18. Studimet e specifikave duhet të kryhen gjatë vërtetimit të testeve të identifikimit, papastërtisë dhe sasisë. Procedurat për konfirmimin e specifikës varen nga qëllimi i synuar i procedurës analitike.
19. Metoda e vërtetimit të specifikës varet nga detyrat për të cilat synohet të zgjidhë teknika analitike. Nuk është gjithmonë e mundur të konfirmohet se një procedurë analitike është specifike për një analit të caktuar (selektiviteti i plotë). Në këtë rast, rekomandohet përdorimi i një kombinimi të 2 ose më shumë teknikave analitike.
Mungesa e specifikës së një teknike analitike mund të kompensohet me përdorimin e një ose më shumë teknikave analitike shtesë.
20. Specifikimi për lloje të ndryshme të testeve nënkupton sa vijon:
a) gjatë testimit për identifikim - konfirmimi se metoda lejon identifikimin e substancës që përcaktohet;
b) gjatë testimit për papastërti, konfirmimi se procedura mund të identifikojë saktë papastërtitë në kampion (për shembull, testimi për komponimet e lidhura, metalet e rënda, përmbajtjen e tretësit të mbetur, etj.);
c) në testet sasiore - konfirmimi se metoda lejon të përcaktohet përmbajtja ose aktiviteti i substancës që përcaktohet në mostër.
Identifikimi
21. Një test identifikimi i kënaqshëm duhet të jetë në gjendje të bëjë dallimin ndërmjet përbërjeve të lidhura ngushtë me strukturën që mund të jenë të pranishme në kampion. Selektiviteti i një procedure analitike mund të demonstrohet duke marrë rezultate pozitive (ndoshta duke krahasuar me një standard të njohur referimi) për mostrat që përmbajnë analitin dhe rezultatet negative për mostrat që nuk e përmbajnë atë.
22. Për të konfirmuar mungesën e rezultateve false pozitive, mund të kryhet një test identifikimi për substancat me strukturë të ngjashme ose substancat që shoqërojnë substancën që përcaktohet.
23. Zgjedhja e substancave potencialisht ndërhyrëse duhet të arsyetohet.
Kuantifikimi dhe testimi për papastërtitë
24. Kur demonstrohet specifika për një procedurë analitike duke përdorur një metodë të ndarjes kromatografike, duhet të sigurohen kromatograme përfaqësuese, me përbërës individualë të identifikuar siç duhet. Qasje të ngjashme duhet të merren me teknikat e tjera të bazuara në ndarje.
25. Ndarjet kritike në kromatografi duhet të studiohen në nivelin e duhur. Në rastin e ndarjeve kritike, duhet të vendoset vlera e rezolucionit të 2 komponentëve më të afërt elutës.
26. Kur përdoret një metodë sasiore jo specifike, duhet të përdoren teknika analitike shtesë dhe duhet të konfirmohet specifika e të gjithë grupit të teknikave. Për shembull, nëse përcaktimi sasior kryhet duke përdorur një metodë titrimetrike kur lirohet një substancë farmaceutike, ai mund të plotësohet me një test të përshtatshëm për papastërtitë.
27. Qasja është e ngjashme për testimin e sasisë dhe të papastërtisë.
Disponueshmëria e mostrave të papastërtive
28. Nëse mostrat e papastërtive janë të disponueshme, përcaktimi i specifikës së një procedure analitike është si më poshtë:
a) gjatë përcaktimit sasior, është e nevojshme të konfirmohet selektiviteti i përcaktimit të substancës në prani të papastërtive dhe (ose) përbërësve të tjerë të mostrës. Në praktikë, kjo bëhet duke shtuar papastërti dhe (ose) lëndë ndihmëse në një sasi të përshtatshme në kampion (substancë farmaceutike ose produkt medikamentoz) dhe nëse ka dëshmi se ato nuk ndikojnë në rezultatin e përcaktimit sasior të substancës aktive;
b) në testimin e papastërtive, specifika mund të përcaktohet duke shtuar papastërti në substancën farmaceutike ose produktin medikamentoz në sasi të caktuara dhe duke ofruar dëshmi të ndarjes së këtyre papastërtive nga njëra-tjetra dhe (ose) nga përbërës të tjerë të kampionit.
Nuk ka mostra të papastërtive
29. Nëse mostrat standarde të papastërtive ose produkteve të degradimit nuk janë të disponueshme, specifika mund të konfirmohet duke krahasuar rezultatet e testimit të mostrave që përmbajnë papastërti ose produkte degradimi me rezultatet e një procedure tjetër të vërtetuar (për shembull, një farmakopeial ose një analizë tjetër e vlefshme analitike (e pavarur) procedurë). Aty ku është e përshtatshme, standardet e referencës së papastërtive duhet të përfshijnë mostrat që i nënshtrohen ruajtjes në kushte stresi të specifikuara (dritë, nxehtësi, lagështi, hidrolizë acide (bazë) dhe oksidim).
30. Në rastin e përcaktimit sasior është i nevojshëm krahasimi i 2 rezultateve.
31. Në rastin e testimit të papastërtive, duhet të krahasohen profilet e papastërtive.
32. Për të vërtetuar se kulmi i analitit përcaktohet nga vetëm një komponent, këshillohet të kryhen studime për pastërtinë e majave (për shembull, përdorimi i zbulimit të grupit të diodës, spektrometria e masës).
3. Lineariteti
33. Lidhja lineare duhet të vlerësohet në të gjithë gamën e zbatimit të teknikës analitike. Mund të konfirmohet drejtpërdrejt në substancën farmaceutike (duke holluar tretësirën standarde kryesore) dhe (ose) në mostrat individuale të përzierjeve artificiale (modele) të përbërësve të ilaçit duke përdorur metodën e propozuar. Aspekti i fundit mund të studiohet gjatë përcaktimit të gamës së aplikimit (zonës analitike) të teknikës.
34. Lineariteti vlerësohet vizualisht duke vizatuar sinjalin analitik në funksion të përqendrimit ose sasisë së analitit. Nëse ekziston një marrëdhënie e qartë lineare, rezultatet e marra duhet të përpunohen duke përdorur metoda të përshtatshme statistikore (për shembull, duke llogaritur një vijë regresioni duke përdorur metodën e katrorëve më të vegjël). Për të marrë linearitetin midis rezultateve të analizës dhe përqendrimeve të mostrës, mund të kërkohen transformime matematikore të rezultateve të testit përpara analizës së regresionit. Rezultatet e analizës së linjës së regresionit mund të përdoren për të vlerësuar matematikisht shkallën e linearitetit.
35. Në mungesë të linearitetit, të dhënat e testit duhet t'i nënshtrohen transformimit matematik përpara kryerjes së analizës së regresionit.
36. Për të konfirmuar linearitetin, duhet të përcaktohet dhe paraqitet koeficienti i korrelacionit ose koeficienti i përcaktimit, termi i ndërprerjes së regresionit linear, pjerrësia e vijës së regresionit dhe shuma e mbetur e devijimeve në katror, si dhe një grafik me të gjitha të dhënat eksperimentale. .
37. Nëse lineariteti nuk vërehet me asnjë lloj transformimi matematikor (për shembull, gjatë vërtetimit të metodave imuno-analitike), sinjali analitik duhet të përshkruhet duke përdorur një funksion të përshtatshëm të përqendrimit (sasisë) të analitit në mostër.
V. Gama e aplikimit (fusha analitike)
39. Gama e aplikimit të një teknike analitike varet nga qëllimi i saj dhe përcaktohet duke studiuar linearitetin. Brenda gamës së aplikimit, procedura duhet të sigurojë linearitetin, saktësinë dhe saktësinë e kërkuar.
40. Gamat e mëposhtme të aplikimit (fushat analitike) të metodave analitike duhet të konsiderohen si minimalisht të pranueshme:
a) për përcaktimin sasior të substancës aktive në një substancë farmaceutike ose produkt medicinal - nga një përqendrim (përmbajtje) prej 80 përqind në një përqendrim (përmbajtje) prej 120 përqind të përqendrimit (përmbajtjes) nominale;
b) për uniformitetin e dozës - nga një përqendrim (përmbajtja) prej 70 përqind në një përqendrim (përmbajtje) prej 130 përqind, përveç nëse një gamë më e gjerë justifikohet për produktin medicinal në varësi të formës së dozimit (për shembull, inhalatorët me dozë të matur);
c) për testimin e shpërbërjes - ±20 për qind (absolute) e gamës nominale të aplikimit. Për shembull, nëse specifikimet për një medikament me çlirim të modifikuar mbulojnë diapazonin nga 20 përqind në orën e parë deri në 90 përqind të përmbajtjes së deklaruar në 24 orë, diapazoni i verifikuar i aplikimit duhet të jetë nga 0 deri në 110 përqind të përmbajtjes së deklaruar;
d) për përcaktimin e papastërtive - nga kufiri i zbulimit të papastërtive në vlerën 120 për qind të specifikuar në specifikim;
(e) Për papastërtitë që janë jashtëzakonisht të fuqishme ose kanë një efekt farmakologjik toksik ose të papritur, kufiri i zbulimit dhe kufiri i sasisë duhet të jenë në përpjesëtim me nivelin në të cilin papastërtitë duhet të kontrollohen. Për të vërtetuar procedurat e testimit të papastërtive të përdorura gjatë zhvillimit, mund të jetë e nevojshme të vendoset fusha analitike pranë kufirit të pritur (të mundshëm);
f) Nëse analiza dhe pastërtia studiohen njëkohësisht në një test të vetëm dhe përdoret vetëm standardi 100%, marrëdhënia duhet të jetë lineare në të gjithë gamën e zbatimit të procedurës analitike nga pragu i raportimit për papastërtinë (në përputhje me rregullat për studimin e papastërtive në produktet medicinale dhe vendosjen e kërkesave ndaj tyre në specifikimet e miratuara nga Komisioni Ekonomik Euroaziatik) deri në 120 për qind përmbajtje të përcaktuar në specifikimin për përcaktimin sasior.
VI. E drejta
41. Saktësia duhet të përcaktohet për të gjithë gamën e zbatimit të procedurës analitike.
1. Përcaktimi sasior i substancës farmaceutike aktive
Substanca farmaceutike
42. Mund të përdoren disa metoda për vlerësimin e korrektësisë:
aplikimi i një procedure analitike për një analit me pastërti të njohur (për shembull, në një material standard);
krahasimi i rezultateve analitike të marra duke përdorur një procedurë analitike të vërtetuar dhe rezultateve të marra duke përdorur një procedurë të njohur dhe/ose një procedurë të pavarur.
Një përfundim në lidhje me saktësinë mund të bëhet pas vendosjes së saktësisë, linearitetit dhe specifikës.
Bar
43. Mund të përdoren disa metoda për vlerësimin e korrektësisë:
aplikimi i teknikave analitike në përzierjet artificiale (modele) të përbërësve të barit, të cilave u është shtuar një sasi e njohur më parë e analitit;
Në mungesë të mostrave të të gjithë përbërësve të produktit medicinal, është e mundur të shtohet një sasi e njohur më parë e substancës farmaceutike në produktin medicinal ose të krahasohen rezultatet e marra duke përdorur një metodë tjetër, saktësia e së cilës dihet, dhe (ose) një metodë e pavarur.
Një përfundim në lidhje me saktësinë mund të bëhet pas përcaktimit të saktësisë, linearitetit dhe specifikës.
2. Përcaktimi sasior i papastërtive
44. Saktësia përcaktohet duke përdorur mostra (të substancës farmaceutike dhe produktit medikamentoz) të cilave u është shtuar një sasi e njohur papastërtish.
45. Në mungesë të mostrave të papastërtive të identifikueshme dhe (ose) produkteve të degradimit, krahasimi i rezultateve me rezultatet e marra duke përdorur një teknikë të pavarur është i pranueshëm. Lejohet përdorimi i një sinjali analitik të substancës aktive.
46. Duhet të specifikohet një metodë specifike për të shprehur përmbajtjen e papastërtive individuale ose shumën e tyre (për shembull, si përqindje ndaj peshës ose si përqindje e sipërfaqes së pikut, por në të gjitha rastet në lidhje me analitin kryesor).
47. Saktësia vlerësohet për të paktën 9 përcaktime në 3 përqendrime të ndryshme që mbulojnë të gjithë gamën e aplikimit (d.m.th. 3 përqendrime dhe 3 përsëritje për çdo përqendrim). Përkufizimet duhet të përfshijnë të gjitha fazat e metodologjisë.
48. Saktësia shprehet me përqindjen e hapshmërisë bazuar në rezultatet e përcaktimit sasior të një lënde të shtuar në një sasi të njohur në kampionin e analizuar, ose diferenca midis mesatares së përftuar dhe vlerave të vërteta (referencës), duke marrë parasysh intervalet përkatëse të besimit.
VII. Preciziteti
49. Vërtetimi i testeve sasiore dhe papastërtive përfshin përcaktimin e saktësisë.
50. Saktësia vendoset në 3 nivele: përsëritshmëri, saktësi e ndërmjetme dhe riprodhueshmëri. Saktësia duhet të përcaktohet duke përdorur mostra homogjene, autentike. Nëse është e pamundur të merret një mostër homogjene, lejohet të përcaktohet saktësia duke përdorur mostra të përgatitura artificialisht (modele) ose një zgjidhje mostre. Saktësia e një teknike analitike zakonisht shprehet në termat e variancës, devijimit standard ose koeficientit të variacionit të një sërë matjesh.
VIII. Përsëritshmëria
51. Përsëritshmëria përcaktohet duke kryer të paktën 9 përcaktime përqendrimi brenda intervalit të aplikimit të procedurës analitike (3 përqendrime dhe 3 përsëritje për çdo përqendrim), ose të paktën 6 përcaktime të përqendrimit për mostrat me përmbajtje 100% të analitit.
IX. Saktësia e ndërmjetme (në laborator).
52. Shkalla në të cilën vendoset saktësia e ndërmjetme varet nga kushtet e përdorimit të teknikës analitike. Aplikanti duhet të vendosë ndikimin e faktorëve të rastësishëm në saktësinë e procedurës analitike. Faktorët tipikë të studiuar (variablat) janë ditë të ndryshme, analistët, pajisjet, etj. Nuk është e nevojshme të studiohen këto ndikime veçmas. Kur studioni ndikimin e faktorëve të ndryshëm, preferohet të përdoret modeli eksperimental.
X. Riprodhueshmëria
53. Riprodhueshmëria karakterizon saktësinë në një eksperiment ndërlaboratorik. Riprodhueshmëria duhet të përcaktohet në rast të standardizimit të procedurës analitike (për shembull, kur ajo përfshihet në Farmakopenë e Bashkimit ose në farmakopetë e Shteteve Anëtare). Përfshirja e të dhënave të riprodhueshmërisë në dosjen e regjistrimit nuk kërkohet.
XI. Prezantimi i të dhënave
54. Për çdo lloj saktësie, është e nevojshme të tregohet devijimi standard, devijimi standard relativ (koeficienti i variacionit) dhe intervali i besueshmërisë.
XII. Kufiri i zbulimit
55. Qasje të ndryshme për përcaktimin e kufirit të zbulimit janë të mundshme, në varësi të faktit nëse teknika është instrumentale apo jo instrumentale. Mund të përdoren edhe qasje të tjera.
XIII. Vlerësimi vizual
56. Vlerësimi vizual mund të përdoret si për teknikat jo instrumentale ashtu edhe për ato instrumentale. Kufiri i zbulimit përcaktohet duke analizuar mostrat me përqendrime të njohura të analitit dhe duke përcaktuar përmbajtjen minimale të tij në të cilën zbulohet në mënyrë të besueshme.
XIV. Vlerësimi i kufirit të zbulimit bazuar në raportin sinjal-zhurmë
57. Kjo qasje është e zbatueshme vetëm për teknikat analitike për të cilat vërehet zhurma bazë.
58. Përcaktimi i raportit sinjal-zhurmë kryhet duke krahasuar sinjalet e marra nga mostrat me përqendrime të njohura të ulëta me sinjalet e marra nga kampionet e zbrazëta, dhe duke vendosur përqendrimin minimal në të cilin mund të zbulohet në mënyrë të besueshme analiti. Për të vlerësuar kufirin e zbulimit, një raport sinjal-zhurmë prej 3:1 deri në 2:1 konsiderohet i pranueshëm.
XV. Vlerësimi i kufirit të zbulimit nga devijimi standard i sinjalit analitik dhe pjerrësia e kurbës së kalibrimit
59. Kufiri i zbulimit (LOD) mund të shprehet si më poshtë:
Ku:
60. Vlera k llogaritet nga kurba e kalibrimit për analitin. Vlerësimi i s mund të bëhet në disa mënyra:
b) sipas lakores së kalibrimit. Kurba e kalibrimit që rezulton, e ndërtuar për mostrat me një përmbajtje të analitit afër kufirit të zbulimit, duhet të analizohet. Devijimi standard i mbetur i vijës së regresionit ose devijimi standard i pikës së kryqëzimit me boshtin e ordinatave (devijimi standard i termit të lirë të regresionit linear) mund të përdoret si devijimi standard.
XVI. Prezantimi i të dhënave
61. Është e nevojshme të tregohet kufiri i zbulimit dhe mënyra për përcaktimin e tij. Nëse përcaktimi i kufirit të zbulimit bazohet në vlerësimin vizual ose në vlerësimin e raportit sinjal ndaj zhurmës, paraqitja e kromatogrameve përkatëse konsiderohet e mjaftueshme për ta justifikuar atë.
62. Nëse vlera kufi e zbulimit merret me llogaritje ose ekstrapolim, vlerësimi duhet të konfirmohet nga testimi i pavarur i një numri të mjaftueshëm mostrash që përmbajnë analitin në ose afër kufirit të zbulimit.
XVII. Kufiri i sasisë
63. Kufiri i sasisë është një karakteristikë e nevojshme e vërtetimit të metodave të përdorura për të përcaktuar nivelet e ulëta të substancave në një kampion, veçanërisht për përcaktimin e papastërtive dhe (ose) produkteve të degradimit.
64. Disa qasje për përcaktimin e kufirit të sasisë janë të mundshme, në varësi të faktit nëse teknika është instrumentale ose jo instrumentale. Mund të përdoren qasje të tjera.
XVIII. Vlerësimi vizual
65. Vlerësimi vizual mund të përdoret si për teknikat jo instrumentale ashtu edhe për ato instrumentale.
66. Kufiri i përcaktimit sasior zakonisht përcaktohet duke analizuar mostrat me përqendrime të njohura të analitit dhe duke vlerësuar përqendrimin minimal në të cilin mund të matet sasia e analizës me saktësi dhe saktësi të pranueshme.
XIX. Vlerësimi i kufirit të kuantifikimit nga raporti sinjal-zhurmë
67. Kjo qasje është e zbatueshme vetëm për metodat e matjes ku vërehet zhurma bazë.
68. Përcaktimi i raportit sinjal ndaj zhurmës kryhet duke krahasuar sinjalet e matura të marra nga mostrat me përqendrime të njohura të ulëta të analitit me sinjalet e marra nga kampionet e zbrazëta, dhe duke vendosur përqendrimin minimal në të cilin analiti mund të matet në mënyrë të besueshme. . Raporti tipik sinjal-zhurmë është 10:1.
XX. Vlerësimi i kufirit të sasisë nga devijimi standard i sinjalit dhe pjerrësia e kurbës së kalibrimit
69. Kufiri i sasisë (LOQ) mund të shprehet si më poshtë:
Ku:
s është devijimi standard i sinjalit analitik;
k është tangjentja e këndit të prirjes së lakores së kalibrimit.
70. Vlera k llogaritet nga kurba e kalibrimit për analitin. Vlerësimi i s mund të bëhet në disa mënyra:
a) sipas devijimit standard të kampionit bosh. Madhësia e sinjalit analitik për një numër të mjaftueshëm të mostrave bosh matet dhe llogaritet devijimi standard i vlerave të tyre;
b) sipas lakores së kalibrimit. Kurba e kalibrimit që rezulton, e ndërtuar për mostrat me një përmbajtje të analitit afër kufirit të sasisë, duhet të analizohet. Devijimi standard i mbetur i vijës së regresionit ose devijimi standard i pikës së kryqëzimit me boshtin e ordinatave (devijimi standard i termit të lirë të regresionit linear) mund të përdoret si devijimi standard.
XXI. Prezantimi i të dhënave
71. Është e nevojshme të tregohet kufiri i sasisë dhe mënyra e përcaktimit të tij.
72. Kufiri i përcaktimit sasior duhet të konfirmohet më pas duke analizuar një numër të mjaftueshëm kampionësh që përmbajnë analitin në ose afër kufirit të sasisë.
73. Qasje të tjera përveç atyre të listuara më sipër mund të jenë të pranueshme.
XXII. Stabiliteti (qëndrueshmëria)
74. Studimi i qëndrueshmërisë (qëndrueshmërisë) duhet të kryhet në fazën e zhvillimit; fushëveprimi i kërkimit varet nga teknika analitike në shqyrtim. Është e nevojshme të demonstrohet besueshmëria e analizës me ndryshime të qëllimshme në parametrat (kushtet) e metodës.
75. Nëse rezultatet e matjes varen nga ndryshimet në kushtet e përdorimit të procedurës analitike, është e nevojshme të kontrollohet rreptësisht respektimi i kushteve të tilla ose të përcaktohen masa paraprake gjatë testimit.
76. Për të siguruar që vlefshmëria e një procedure analitike të ruhet gjatë përdorimit të saj, një nga pasojat e studimeve të qëndrueshmërisë duhet të jetë vendosja e një sërë parametrash të përshtatshmërisë së sistemit (p.sh. një test rezolucioni).
77. Ndryshimet e zakonshme të parametrave janë:
qëndrueshmëria e zgjidhjeve të përdorura në teknikat analitike;
koha e nxjerrjes.
Parametrat e variacionit për kromatografinë e lëngshme janë:
ndryshimi në pH të fazës së lëvizshme;
ndryshimi në përbërjen e fazës së lëvizshme;
altoparlantë të ndryshëm (seri dhe furnitorë të ndryshëm);
temperatura;
shpejtësia e fazës së lëvizshme (shkalla e rrjedhjes).
Parametrat e variacionit për kromatografinë e gazit janë:
altoparlantë të ndryshëm (seri dhe furnitorë të ndryshëm);
temperatura;
shpejtësia e gazit bartës.
XXIII. Vlerësimi i Përshtatshmërisë së Sistemit
78. Vlerësimi i përshtatshmërisë së sistemit është pjesë përbërëse e shumë teknikave analitike. Këto teste bazohen në konceptin se pajisjet, elektronika, operacionet analitike dhe mostrat e analizuara përbëjnë një sistem të plotë dhe duhet të vlerësohen si të tilla. Kriteret e përshtatshmërisë së sistemit duhet të vendosen për një procedurë specifike dhe varen nga lloji i procedurës analitike që vërtetohet. Informacione të mëtejshme mund të merren nga Farmakopeja e Bashkimit ose nga Farmakopetë e Shteteve Anëtare.
Teksti i dokumentit elektronik
përgatitur nga Kodeks Sh.A dhe verifikuar kundër:
faqe zyrtare
Bashkimi Ekonomik Euroaziatik
www.eaeunion.org, 20.07.2018
