დნმ-ის შეკეთება

Ზოგადი ინფორმაცია

დნმ-ის დამაზიანებელი აგენტები

რადიაცია

1. მაიონებელი გამოსხივება (გამა სხივები, რენტგენი)

2. ულტრაიისფერი გამოსხივება (განსაკუთრებით ~260 ნმ, სწორედ ამ რეგიონში ხდება დნმ-ის მაქსიმალური შთანთქმა)

რეაქტიული ჟანგბადის რადიკალები, რომლებიც წარმოიქმნება ნორმალური უჯრედული სუნთქვის დროს, სხვადასხვა ბიოქიმიურ გზაზე.
ეკოლოგიური ქიმიკატები.

ბევრი ნახშირწყალბადი.

ქიმიკატები, რომლებიც გამოიყენება კიბოს საწინააღმდეგო ქიმიოთერაპიაში.

დნმ-ის დაზიანების სახეები

1. დნმ-ის ოთხივე ფუძე (A, T, C, G) შეიძლება კოვალენტურად მოდიფიცირებული იყოს სხვადასხვა პოზიციებზე.
ყველაზე ხშირია ამინო ჯგუფის დაკარგვა (დეამინაცია) – ამ შემთხვევაში C გადაიქცევა U-ში.
ბაზის არასწორი ინკორპორაცია ხდება რეპლიკაციის დროს დნმ პოლიმერაზების მუშაობაში შეცდომების გამო.
ყველაზე ხშირად, ურაცილი შედის თიმინის ნაცვლად.
სტრუქტურის დარღვევები.
შესვენებები შეიძლება მოხდეს დნმ-ში. წყვეტები შეიძლება იყოს ერთჯაჭვიანი, ან დნმ-ის ორივე ჯაჭვი შეიძლება გატყდეს.

მაიონებელი გამოსხივება შეიძლება იყოს ასეთი რღვევების საერთო მიზეზი.
კოვალენტური ბმა შეიძლება ჩამოყალიბდეს მეზობელ ფუძეებს შორის და ბმა შეიძლება ჩამოყალიბდეს იმავე ჯაჭვის მიმდებარე ფუძეებს შორის ან დნმ-ის ორ ჯაჭვს შორის.
დნმ-ის დაზიანების სახეები
ერთი ბაზის შეცვლა
აპურინიზაცია
შეცვლა s-დან y-ზე
A-ს ჩანაცვლება ჰიპოქსანტინით
ბაზის ალკილაცია
ნუკლეოტიდის შეყვანა ან წაშლა
მსგავსი ბაზის ჩასმა
ორი ბაზის შეცვლა
თიმინის დიმერის წარმოქმნა
ჯვარედინი კავშირი ორფუნქციურ ალკილატორ აგენტთან
ჯაჭვის გაწყვეტა
მაიონებელი გამოსხივება
ძირითადი ელემენტების რადიოაქტიური განადგურება
ჯვარედინი ბმულები
ერთი ძაფის ან ორი პარალელური ძაფის ფუძეს შორის
დნმ-სა და ცილის მოლეკულებს შორის, როგორიცაა ჰისტონები

დაზიანებული ბაზების შეკეთება

დაზიანებული ბაზები შეიძლება დაფიქსირდეს სხვადასხვა გზით:
პირდაპირი ქიმიური დაზიანების აღდგენა.

ამოკვეთის რემონტი (ER), რომლის დროსაც ხდება დაზიანებული ფუძის მოცილება და ჩანაცვლება ახლით. არსებობს ამოკვეთის აღდგენის სამი მოდელი, თითოეული იყენებს ფერმენტების საკუთარ კომპლექტს.
ბაზის ამოკვეთის შეკეთება (BER).
ნუკლეოტიდის ამოკვეთის შეკეთება (NER).
შეუსაბამობის რეპარაცია (MMR).

დაზიანების პირდაპირი შეკეთება.

წერტილოვანი მუტაციების ყველაზე გავრცელებული მიზეზი ადამიანებში არის მეთილის ჯგუფის სპონტანური დამატება, ალკილირების ერთ-ერთი სახეობა. ასეთ მოდიფიკაციას ასწორებენ ფერმენტები გლიკოზილაზები, რომლებიც ასწორებენ შეცდომას დნმ-ის ჯაჭვის განადგურების გარეშე.

ქიმიოთერაპიაში გამოყენებული ზოგიერთი პრეპარატი ასევე აზიანებს დნმ-ს ალკილაციით.
შეკეთების პრობლემა ის არის, რომ ფერმენტების და მექანიზმების შეზღუდული ნაკრებით, უჯრედმა უნდა გაუმკლავდეს მრავალ ზიანს, რომელიც გამოწვეულია სხვადასხვა ქიმიური და ფიზიკური აგენტებით.

ბაზის ამოკვეთის შეკეთება (BER)

ძირითადი საკვანძო მოვლენები:

1. დაზიანებული ფუძის მოცილება (დღეში ~20000-ჯერ ხდება ადამიანის სხეულის ყველა უჯრედში) დნმ გლიკოზილამინის. ადამიანებს აქვთ მინიმუმ 8 გენი, რომლებიც აკოდირებენ სხვადასხვა დნმ გლიკოზილაზებს, რომელთაგან თითოეული აღიარებს ბაზის დაზიანების განსხვავებულ კომპლექტს.
2. დეზოქსირიბოფოსფატის მოცილება იწვევს დნმ-ში სიცარიელის წარმოქმნას.
3. ჩანაცვლება სწორი ნუკლეოტიდით. ამ ფუნქციას ადამიანებში ასრულებს ბეტა დნმ პოლიმერაზა.
4. ჯაჭვის გაწყვეტის ლიგირება. არსებობს ორი ფერმენტი, ორივე მოითხოვს ATP.

ნუკლეოტიდის ამოკვეთის შეკეთება (NER)

NER განსხვავდება BER-ისგან რამდენიმე მხრივ.
სხვადასხვა ფერმენტული სისტემების გამოყენება.
მაშინაც კი, თუ შეცდომა ერთ ნუკლეოტიდშია, მრავალი ნუკლეოტიდი ერთდროულად ამოღებულია დაზიანების ზონაში.

NER-ის ძირითადი ძირითადი მოვლენები:
1. დაზიანება აღიარებულია ერთი ან რამდენიმე ფაქტორით, რომლებიც დაკავშირებულია დაზიანების ადგილზე.
2. დნმ იხსნება დაზიანების ადგილზე. ეს პროცესი მოიცავს
სხვადასხვა ტრანსკრიფციის ფაქტორები IIH, TFIIH, (რომლებიც ასევე მუშაობს ნორმალურ ტრანსკრიფციაში).
3. დნმ-ის ამოჭრა ხდება დაზიანების 3" და 5" ბოლოებიდან, რის შედეგადაც იხსნება დაზიანებული ნუკლეოტიდის შემცველი დნმ-ის ფრაგმენტი.
4. დნმ-ის ახალი ჯაჭვი სრულდება ხელუხლებელი დნმ-ის ჯაჭვის შაბლონის მიხედვით დელტა ან ეპსილონის პოლიმერაზებით.
5. ლიგაზები ჯაჭვის ახლად სინთეზირებულ ბოლოს ჯვარედინად აკავშირებენ.

პიგმენტური ქსეროდერმია (XP)
XP არის იშვიათი მემკვიდრეობითი დაავადება, რომელიც იწვევს კანის დაზიანებას სინათლის ზემოქმედების დროს, რაც საბოლოოდ იწვევს კანის კიბოს განვითარებას და პაციენტის სიკვდილს.
დაავადება ჩნდება NER-ის შეკეთებაში ჩართული გენების მუტაციების გამო. Მაგალითად:
XPA აკოდირებს ცილას, რომელიც აკავშირებს ტრავმის ადგილს და ხელს უწყობს სარემონტო კომპლექსის აწყობას.
XPB და XPD, რომლებიც ტრანსკრიფციის ფაქტორის TFIIH ნაწილია. XPB-სა და XPD-ის ზოგიერთი მუტაცია შესაძლოა ასევე იყოს პასუხისმგებელი ნაადრევ დაბერებაზე.
XPF წყვეტს დნმ-ის ჯაჭვს დაზიანების 5" ბოლოში.

XPG წყვეტს ჯაჭვს 3" ბოლოზე.

შეუსაბამობის რეპარაცია (MMR)

შეუსაბამობის შეკეთება ასწორებს შეცდომით ჩაშენებულ ხელუხლებელ ბაზებს, რომლებიც არ ქმნიან ნორმალურ უოტსონ-კრიკის დაწყვილებას (A T, C G). ასეთი შეცდომები ხდება რეპლიკაციის დროს დნმ პოლიმერაზას მოქმედების დროს.
შეუსაბამობის შეკეთება მოიცავს ფერმენტებს, რომლებიც მონაწილეობენ როგორც BER, ასევე NER-ის შეკეთებაში, ასევე სპეციალიზებულ ფერმენტებს.
დნმ-ის სინთეზი შეუსაბამობის აღდგენის დროს ხორციელდება დნმ-პოლიმერაზების დელტას ან ეპსილონის მიერ.
შეუსაბამობის აღდგენის სისტემა მონაწილეობს მეიოზის დროს რეკომბინაციის სიზუსტის გაზრდაში.

დნმ შესვენების შეკეთება

მაიონებელი გამოსხივება და ზოგიერთ ქიმიურ ნივთიერებას შეუძლია დაარღვიოს დნმ-ის ერთი ან ორი ჯაჭვი.
ერთჯერადი ძაფების შესვენება (SSB)
დნმ-ის ერთ-ერთი ჯაჭვის რღვევები ხშირად აღდგენილია ფერმენტებით, რომლებიც მონაწილეობენ BER-ის შეკეთებაში.
ორმაგი ძაფების შეწყვეტა (DSB)
არსებობს ორი მექანიზმი, რომელსაც შეუძლია აღმოფხვრას დნმ-ის ორჯაჭვიანი რღვევები:
გატეხილი ბოლოების პირდაპირი კავშირი. ეს პროცესი განსაკუთრებულს მოითხოვს
ფერმენტები, რომლებიც ცნობენ და აკავშირებენ გატეხილ ბოლოებს მათი შემდგომი ნაკერით. თუ გატეხილ დნმ-ს აქვს ბლაგვი ბოლოები და დნმ-ის ორი ფრაგმენტის შეერთება შემთხვევით ხდება, მაშინ ასეთ შეკეთებას ეწოდება NHEJ. Ku ცილა აუცილებელია NHEJ-სთვის. Ku არის ჰეტეროდიმერული ქვედანაყოფი, რომელიც შედგება ორი ცილისგან Ku70 და Ku80.
შეცდომები, რომლებიც წარმოიქმნება პირდაპირი მიმაგრების დროს, შეიძლება იყოს გადაადგილების მიზეზი.
პოლინუკლეოტიდური ლიგაზა- აღდგენილია. ერთი ჯაჭვი დნმ იშლება

ჰომოლოგიური რეკომბინაცია

ჰომოლოგიურ რეკომბინაციას შეუძლია ქრომოსომების გატეხილი ბოლოების შეკეთება დნმ-ის გამოყენებით ხელუხლებელი დის ქრომატიდიდან, რომელიც ხელმისაწვდომია ქრომოსომის დუბლირების შემდეგ.
ჰომოლოგიური რეკომბინაციისთვის საჭირო გენები არის BRCA-1 და BRCA-2.

გენის კონვერტაცია
ახალი გენის დონორი შეიძლება იყოს:
ჰომოლოგიური ქრომოსომა (მეიოზის დროს)
დის ქრომატიდი (ასევე მეიოზის დროს)
დუბლირებული გენი იმავე ქრომოსომაზე (მიტოზის დროს)

რეპლიკაციის დროს პოლიმერაზას 3'-5' ეგზონუკლეაზური აქტივობით გამოწვეული შეცდომების გამოსწორება (მხოლოდ პროკარიოტებში) (E. coli mutD-mutator-change-DNA-pol.III ქვეგანყოფილება)
თიმინის დიმერები, ფოტოლიაზა ფერმენტის გენი-phr (ქვედა ევკარიოტებში)
მიმაგრებული ალკილის და მეთილის ჯგუფების მოცილება - O-6-მეთილგუანინის ტრანსფერაზა (ადა გენი) - შლის O-6-მეთილგუანინს
ექსციზიური რ. ბაზები [E.coli] [კაცი | ზიანის ამოცნობა. XPA ცილა RPA-თან ერთად | ჩართული f-r transkr. TFIIH (P52, P34, P44, P62, XPB-XPD-ჰელიკაზას აქტივობა) | ERCC1-XPF, XPG - ნუკლეაზები, ჭრიან დნმ-ს დაზიანების ორივე მხარეს. | დნმ პოლიმერაზა- და დამხმარე. პროტეინები RFC და PCNA ავსებენ ხარვეზს]
რ. აზოტოვანი საფუძვლები.-გლიკოზილაზა შლის ძირითადი.
AP საიტი (აპურინი, აპირიმიდინი) | AP-ენდონუკლეაზა ცნობს ხარვეზს, ჭრილობას. 5'-დნმ
პოსტრეპლიკაციული რ. (PRP)
SOS-r. ცილები კომპ. დნმ პოლიმერაზასთან, ქალიშვილი. დნმ იქმნება დაზიანების საწინააღმდეგოდ. დნმ

აბრევიატურები.
BER - ბაზის ამოკვეთის შეკეთება

NER - ნუკლეოტიდის ამოკვეთის შეკეთება
MMR - შეუსაბამობის შეკეთება
NHEJ - არაჰომოლოგიური დასასრული შეერთება

შეუსაბამობის რეპარაცია

რეპლიკაციის დროს, პოლიმერაზული შეცდომების შედეგად, შესაძლებელია არაკომპლიმენტური ნუკლეოტიდების ჩასმა, რამაც შეიძლება გამოიწვიოს მუტაციები ქალიშვილური დნმ-ის ჯაჭვში. დაუწყვილებელი ფუძეები აღიარებულია შეუსაბამობის აღდგენის ფერმენტებით და ახორციელებენ შეუსაბამო ნუკლეოტიდების ჩანაცვლებას.

ამ სისტემის ფერმენტები უზრუნველყოფენ ჰომოლოგიურ რეკომბინაციას, ასევე უჯრედული ციკლის შეფერხებას დნმ-ის დაზიანების საპასუხოდ.
E. coli შეუსაბამობის აღდგენის სისტემა, რომელიც იყენებს MutHLS პროტეინებს, ამოიცნობს და აღადგენს ყველა არაკომპლიმენტურ ბაზის წყვილს, გარდა C–C. გარდა ამისა, ეს სისტემა ასწორებს დნმ-ის ერთ-ერთ ჯაჭვში რეპლიკაციის შეცდომების შედეგად წარმოქმნილ მცირე ჩანართებს, რომელთა სიგრძე არ აღემატება ოთხ ნუკლეოტიდს.
ჩვეულებრივ E. coli დნმ მეთილირებულია დამ-მეთილაზასაიტების მიხედვით GATC. თუმცა, რეპლიკაციის დასრულების შემდეგ, დნმ-ის შვილობილი ჯაჭვი გარკვეული დროის განმავლობაში რჩება არამეთილირებული.
ამ სისტემის რეკონსტრუქცია შესაძლებელია in vitro გამოყენებით
დნმ ერთი მეთილირებული ჯაჭვით, როგორც სუბსტრატი, რომელსაც ემატება გაწმენდილი პროტეინები MutH, MutL, MutS, UvrD (ჰელიკაზა II), დნმ პოლიმერაზა III ჰოლოენზიმი, დნმ ლიგაზა, SSB ცილა და ერთ-ერთი ეგზონუკლეაზა: ExoI, ExoVII ან RecJ. . სარემონტო პროცესი იწყება არამეთილირებულ ჯაჭვში ნაწილობრივ მეთილირებული GATC უბნის მახლობლად ერთჯაჭვიანი რღვევის შემოღებით, რასაც მოჰყვება დნმ-ის ჯაჭვის ჰიდროლიზი და შედეგად მიღებული ერთჯაჭვიანი უფსკრული შევსებით. ამ შემთხვევაში, MutS ცილა უკავშირდება შეუსაბამო ნუკლეოტიდებს. MutL პროტეინს არ გააჩნია ფერმენტული აქტივობა, თუმცა ის ურთიერთქმედებს MutS-თან და აუცილებელია MutH-ის გააქტიურებისთვის, ენდონუკლეაზა, რომელიც ასრულებს ერთჯაჭვიანი დნმ-ის რღვევებს. ამრიგად, MutS-MutL კომპლექსი, რომელიც აწყობილია დნმ-ის ადგილზე შეუსაბამო ნუკლეოტიდით, ასტიმულირებს MutH-ის ენდონუკლეაზას (ნიკაზას) აქტივობას. უჯრედებისგან თავისუფალი სისტემა არ საჭიროებს MutH-ის არსებობას დნმ-ის სუბსტრატში ერთჯაჭვიანი რღვევის არსებობისას. MutHLS სარემონტო სისტემას შეუძლია
გამოიყენეთ ნაწილობრივ მეთილირებული GATC თანმიმდევრობები, რომლებიც მდებარეობს დაზიანებული დნმ-ის რეგიონის ზემოთ და ქვემოთ. ამავე დროს, ქ
შეცდომით ჩასმული ნუკლეოტიდის ამოკვეთა, ჰელიკაზა II-ის გარდა, მონაწილეობს ერთ-ერთი ეგზონუკლეაზა: ExoI (3'-exo), ExoVII (3'- და 5'-exo) ან RecJ (5'-exo), დამოკიდებულია GATC უბნის მდებარეობაზე კორექტირებულ ნუკლეოტიდთან მიმართებაში. ნუკლეოტიდის ამოკვეთის შემდეგ, წარმოქმნილი ერთჯაჭვიანი უფსკრული ივსება დნმ პოლიმერაზა III ჰოლოენზიმით SSB ცილის და დნმ ლიგაზას თანდასწრებით. ხაზგასმით უნდა აღინიშნოს, რომ MutH პროტეინის და Dam მეთილაზის გამოყენება რეპლიკაციური დნმ-ის შვილობილი ჯაჭვის ამოსაცნობად გრამუარყოფითი ბაქტერიების უნიკალური თვისებაა. გრამდადებითი ბაქტერიები არ ახდენენ დნმ-ის ძაფების მეთილაციას მარკირების მიზნით. თუ GATC ადგილები სრულად მეთილირებულია, E. coli MutHLS სარემონტო სისტემა ცვლის შეუსაბამო ნუკლეოტიდებს დნმ-ის ორივე ჯაჭვში თანაბარი ეფექტურობით.
E. coli-ს აქვს მინიმუმ ორი უფრო სპეციფიკური
შეუსაბამო ნუკლეოტიდის აღდგენის გზები. VSP (ძალიან მოკლე შეკეთების გზა) სისტემა ასწორებს არაკომპლექტურ G–T წყვილებს, ანაცვლებს მათ G–C-ით. ითვლება, რომ ასეთი წყვილები წარმოიქმნება 5-მეთილციტოზინის დეამინაციის შედეგად იმ ადგილებში, სადაც C ნარჩენები მეთილირებულია Dcm-მეთილაზათ. დაბალი ეფექტურობით, იგივე სისტემა ცვლის G-U წყვილებს G-C-ით. სხვა MutY-ზე დამოკიდებული სარემონტო სისტემა კონკრეტულად აბრუნებს გუანინის ჟანგვითი დაზიანების ეფექტს. თუ dGTP იჟანგება 8-oxo-dGTP-ს წარმოქმნით, MutT ცილა წყვეტს ამ უკანასკნელს, რაც ხელს უშლის მის დნმ-ში შეყვანას. თუ ის მაინც ჩართავს საპირისპირო ნარჩენ C-ს, მაშინ Fpg გლიკოზილაზა (MutM) შლის ამ შეცვლილ ბაზას. იმ შემთხვევაში, როდესაც 8-oxo-G რჩება დნმ-ში, ის წყვილდება A-სთან რეპლიკაციის მომდევნო რაუნდში და შედეგად შეიძლება მოხდეს G–C>T–A ტრანსვერსია. ამ შემთხვევაში, MutY ცილა მოქმედებს როგორც დნმ გლიკოზილაზა, შლის A ნარჩენს არასწორი წყვილიდან და როგორც AP ლიაზა, შემოაქვს ერთჯაჭვიანი.
შესვენება AP საიტის მიმდებარედ. ქვემოთ მოცემულია ზემოთ უკვე განხილული პროცესები BER სარემონტო სისტემის ფუნქციონირებასთან დაკავშირებით. MutY-სთან დაკავშირებული რეაქციების თანმიმდევრობა ასევე ასწორებს არაკომპლიმენტურ A-G და A-C წყვილებს, რათა შექმნან C-G და G-C წყვილები, შესაბამისად. ევკარიოტებში ბაზის შეუსაბამო შეკეთება ხდება მაშინ, როდესაც
ბაქტერიების MutHLS სისტემის მსგავსი ცილების კომპლექსის მონაწილეობა. ადამიანის GTBP ცილა არის ბაქტერიული MutS პროტეინის ჰომოლოგი, ხოლო საფუარში Msh6 ცილა ასრულებს შესაბამის როლს. ადამიანებში შეუსაბამო ნუკლეოტიდების ამოცნობა ხორციელდება MSH2-GTBP ჰეტეროდიმერის მიერ. MutL ჰომოლოგები S. cerevisiae უჯრედებში არის MLH1 და PMS2 პროტეინები, რომლებიც ასევე არსებობს ჰეტეროდიმერული კომპლექსების სახით. ადამიანებში ამ ცილების მაკოდირებელი გენების მუტაციას თან ახლავს მუტაციური ფენოტიპის ფორმირება და მსხვილი ნაწლავის მემკვიდრეობითი არაპოლიპოზური კიბოს განვითარება (HNPCC სინდრომი).

პირდაპირი რეპარაცია

ალკილის ბაზების შეკეთების ორი ძირითადი გზა არსებობს: ბაზის ამოკვეთის შეკეთება (BER) და დაზიანებული ბაზების პირდაპირი შეკეთება. BER-ის დროს დნმ გლიკოზილაზები არღვევენ ციტოტოქსიურ ალკილირებულ ფუძეებს დნმ-ში პირველ საფეხურზე AP უბნის ფორმირებით და მისი შემდგომი დამუშავებით.პირდაპირი შეკეთების შემთხვევაში დანერგილია ორი მეთოდი: შეკეთება ალკილის ტრანსფერაზებით ან ალკილის ჯგუფის დაჟანგვა. ორივე შემთხვევაში ხდება ხელუხლებელი ფუძეების რეგენერაცია. თუ შეკეთება ხდება ალკილტრანსფერაზებით (ძუძუმწოვრებში ამ გზაზე აღდგენილია მხოლოდ O6-ალკილგუანინი), მაშინ O6-ალკილგუანინის ტრანსფერაზა (AGT) გადააქვს მეთილის ან ეთილის ჯგუფს O6-ალკილგუანინიდან საკუთარ ცისტეინის ნარჩენებზე. . საკუთარი აქტივობის შედეგად ალკილირებული ცილა ინაქტივირებულია, მაგრამ შეიძლება გახდეს საკუთარი გენის და რამდენიმე სხვა აქტივობის რეგულატორი. სუიციდური O6-მეთილგუანინ ტრანსფერაზებისგან განსხვავებით, რომლებიც ახდენენ ძლიერ მუტაგენურ და ტოქსიკურ დემეთილაციას.
O6-მეთილგუანინის, AlkB-ის დაზიანება E. coli-დან და მისი ადამიანის ანალოგებიდან hABH2 და hABH3 აჟანგავს 1-მეთილადენინის (1-meA) და 3-მეთილციტოზინის (3-meC) მეთილის ჯგუფებს დნმ-ში, რათა აღადგინოს უცვლელი ადენინის და ციტოზინის ბაზები.

O 6 -ალკილგუანინის ტრანსფერაზა

O6-ალკილგუანინ ტრანსფერაზას აქტივობა გვხვდება უმეტეს ორგანიზმებში და ხელს უშლის O6-ალკილგუანინის მუტაგენურ მოქმედებას. AGT გარდაქმნის O6-ალკილგუანინს გუანინად ალკილის ჯგუფის დნმ-დან რეაქტიულ ცისტეინის ნარჩენზე ცილაში შეუქცევადი რეაქციის გადატანით.

ალკილის ჯგუფის ეს კოვალენტური მიმაგრება ცისტეინის ნარჩენთან ააქტიურებს ფერმენტს. ამიტომ, AGT არის სუიციდური ფერმენტი, რომელიც განიცდის პროტეოლიზურ დეგრადაციას ერთის შემდეგ
ტრანსალკილირების რეაქციები. სტრუქტურული კვლევები ცხადყოფს, რომ AGT აქტიური ადგილი მდებარეობს ფერმენტის მოცულობაში დნმ-ის დამაკავშირებელი ადგილიდან გარკვეულ მანძილზე. ვარაუდობენ, რომ ფერმენტი "მუშაობს" "ნუკლეოტიდის გადაბრუნების" მექანიზმით, რათა სუბსტრატის ბაზა მიუახლოვდეს AGT-ის ნუკლეოფილურ აქტიურ ადგილს.

AGT-ის მნიშვნელობა ძუძუმწოვრების დაცვაში ალკილატორული აგენტების ტოქსიკური და მუტაგენური ეფექტებისგან დადასტურებულია თაგვებში. ტრანსგენური თაგვები, რომლებიც ჭარბად გამოხატავენ AGT-ს, აჩვენებენ სიმსივნის წარმოქმნის მნიშვნელოვნად დაბალ სიჩქარეს მეთილატორული აგენტის, N-მეთილ-N-ნიტროზოურეას მოქმედების საპასუხოდ, ხოლო AGT-დეფიციტური თაგვები ბევრად უფრო მგრძნობიარენი იყვნენ სიმსივნის დაწყებასა და ამ აგენტის ტოქსიკურ ეფექტებზე. ველური თაგვებისთვის. AGT არის მნიშვნელოვანი ფერმენტი სიმსივნის საწინააღმდეგო თერაპიაში, რადგან ის აფერხებს ქლოროეთილნიტროზოურეას (CENU) კლასის სიმსივნის საწინააღმდეგო აგენტების ციტოტოქსიურ ეფექტებს, მაგ.
BCNU (N,N-bis(2-ქლოროეთილ)N-ნიტროზოურეა) ან ტემოზოლომიდი. ნაჩვენებია, რომ რაოდენობა, რომელშიც AGT იმყოფება სიმსივნეებში, ძირითადად განსაზღვრავს რამდენად ხელსაყრელი იქნება ანტისიმსივნური თერაპიის შედეგს CENU-ს გამოყენებით. CENU თავდაპირველად რეაგირებს გუანინის O 6 კარბონილის ჯგუფთან ნაერთის წარმოქმნით 4 , რომელიც შემდგომში გარდაიქმნება N 1, O 6 -ეთანოგუანად 5 . ნაერთი 5 რამდენიმე საათში გადაჯგუფდება ფიზიოლოგიურად აქტიურ ICL-ში 6 . AGT ერევა განათლებაში 6 ურთიერთობისას 4 ან 5 გუანინის განახლება ან დნმ-პროტეინის დანამატის ფორმირება 8 . ადუქტის ფორმირების ექსპერიმენტული დადასტურება 8 , მაგრამ ის იზოლირებული იყო ძალიან მცირე რაოდენობით მისი დეტალური აღწერისთვის. ამ პრობლემის ბიოქიმიური შესწავლისას შემოღებულ იქნა N 1, O 6 -ეთანოქსანტინი
9 როგორც სტაბილური ანალოგი 5 დნმ-ში. ეთანოქსანტინი 9 რეაგირებს AGT-თან და ქმნის სტაბილური დნმ-პროტეინის დანამატს 7 . ამ მიდგომამ საშუალება მისცა კოვალენტურად შეკრული AGT-დნმ დანამატის ფორმირება 10 დიდი რაოდენობით, რომელიც შეიძლება გამოყენებულ იქნას დნმ-თან დაკავშირებული AGT-ის სტრუქტურის დასადგენად. AGT-ისა და ალკილაციური თერაპიის ურთიერთქმედებამ გამოიწვია AGT ინჰიბიტორების ძიება, რომლებიც შეიძლება გამოყენებულ იქნას კიბოს თერაპიაში ალკილაციურ აგენტებთან ერთად. დღეისათვის შეიქმნა ინჰიბიტორები, ძირითადად გუანინის წარმოებულები შემცვლელებით O 6 პოზიციაზე. O6 -ბენზილგუანინი 2 აღმოჩნდა, რომ იყო ტიპიური AGT ინჰიბიტორი, რომლის წინააღმდეგაც ხდება ახალი მოლეკულების შედარება. O 6 -BzG-ის ეფექტურობა CENU ციტოტოქსიურობის გაძლიერებაში ნაჩვენებია ცხოველურ მოდელებში. ამ თერაპიული მიდგომის შემზღუდველი ფაქტორი არის ტოქსიკურობა ჯანსაღი ორგანოებისთვის, ნაწილობრივ ძვლის ტვინისთვის. Ზოგიერთი
მეცნიერთა ჯგუფი მიზნად ისახავს ამ პრობლემის თავიდან აცილებას ATG ვარიანტის გამომუშავებით, რომელიც მდგრადია O 6-BzG ინჰიბიციის მიმართ, რომელიც შეიძლება გამოყენებულ იქნას ძვლის ტვინის დასაცავად გენის გადაცემის გზით.

AlkB, hABH2 და hABH3 ოქსიდორედუქტაზები

ალკილის ფუძეების პირდაპირი შეკეთების კიდევ ერთი გზაა ალკილის ჯგუფის დაჟანგვა ხელუხლებელი აზოტოვანი ფუძის რეგენერაციით. Escherichia coli-ის AlkB ფერმენტი და ადამიანის ორი ანალოგი, hABH2 და hABH3, მიზნობრივად დემეთილატებენ 1-მეთილადენინს და 3-მეთილციტოზინს დნმ-ში. მაგრამ AGT-სგან განსხვავებით, ამ ფერმენტებს აქვთ სუბსტრატის სპეციფიკა მიმართული G:C და A:T ბაზის წყვილების ზედაპირზე. 1-ალკილადენინის დაზიანება
და 3-მეთილციტოზინი წარმოიქმნება, როდესაც ადენინი და ციტოზინი არიან ერთჯაჭვიან სტრუქტურაში (რეპლიკაციის ან ტრანსკრიფციის დროს) და წარმოადგენენ სუბსტრატებს AlkB, hABH2 და hABH3-სთვის. ისინი აჟანგებენ 1-მეთილადენინის (1-meA) და 3-მეთილციტოზინის (3-meC) მეთილის ჯგუფებს დნმ-ში, რათა აღადგინონ ადენინისა და ციტოზინის აზოტოვანი ფუძეები. ასევე ნაჩვენებია, რომ AlkB იცავს ტოქსიკური დაზიანებისგან - დანამატი ეთილის ჯგუფთან და გარდაქმნის 1-ეთილადენინს ადენინად დნმ-ში, რომელიც წარმოქმნის აცეტალდეჰიდს რეაქციის შედეგად. ამ გზით აღდგება ცნობილი მუტაგენისა და კანცეროგენის ეთილენის ოქსიდის დაზიანება, რომელიც ენდოგენურად წარმოიქმნება ეთილენის ცვლის დროს და ასევე ფართოდ გამოიყენება სტერილიზაციისთვის ფუმიგანტად. ეთილენის ოქსიდის მიერ წარმოქმნილი ჰიდროქსიეთილის დანამატები გვხვდება უჯრედის დნმ-ში. სხვა მცირე ალკილაციური ეპოქსიდები ასევე დიდი რაოდენობით გამოიყენება ქიმიურ მრეწველობაში. ნაჩვენებია, რომ AlkB ამცირებს დნმ-ის დამაზიანებელი აგენტების ტოქსიკურ ეფექტებს, რომლებიც წარმოქმნიან ჰიდროქსიეთილს,
პროპილის და ჰიდროქსიპროპილის დანამატები. AlkB აღადგენს ალკილირებულ 1-me-dATP ტრიფოსფატებს აქტიურად, მაგრამ არაეფექტურად. ითვლებოდა, რომ ამ უნარმა შეიძლება შეამციროს ალკილის ტრიფოსფატების ინკორპორაციის დონე დნმ-ის სინთეზის დროს; გარდა ამისა, დნმ პოლიმერაზა I-ის Klenow ფრაგმენტს E. coli-ში შეუძლია გამოიყენოს 1-me-dATP, როგორც წინამორბედი დნმ in vitro სინთეზისთვის. ადამიანის ფერმენტები hABH2 და hABH3 ასევე დემეთილირებდნენ 1-მეთილადენინის ნარჩენებს პოლი(dA)-ში და არაეფექტური იყო მოკლე სუბსტრატებზე. ამრიგად, hABH3-ს ჰქონდა ძალიან დაბალი აქტივობა d(Tp1-meApT) ტრიმერზე, ხოლო hABH2-ზე აქტივობა არ იყო ნაპოვნი.

AlkB და მისი ადამიანური ანალოგები არის დიოქსიგენაზების α-კეტოგლუტარატ/Fe(II) დამოკიდებული სუპეროჯახის ნაწილი და აღდგენის პროცესში, β-კეტოგლუტარატის დეკარბოქსილაცია და დაზიანებული ფუძის ოქსიდაციური დემეთილაცია ხდება ერთად. 1-meA და 3-meC დაზიანებები წარმოიქმნება ძირითადად ერთჯაჭვიანი დნმ-ში და სავარაუდოდ
ხდება რეპლიკაციის ჩანგალში და აქტიურად ტრანსკრიბირებულ გენებში, სადაც მათ შეუძლიათ დაბლოკონ დნმ და რნმ პოლიმერაზები. მართლაც, AlkB, hABH2 და hABH3 აღადგენს ამ დაზიანებებს ერთჯაჭვიანი დნმ-ში, მაგრამ ოლიგონუკლეოტიდები, რომლებიც ალკილაციის შემდეგ შეერთებულ იქნა დამატებით ჯაჭვში, ასევე აღადგენს. AlkB 1-მეთილადენინის აღდგენის ეფექტურობა არ არის დამოკიდებული პოლინუკლეოტიდის სტრუქტურაზე, მაგრამ საჭიროა ნუკლეოტიდ-5'-ფოსფატის ჯგუფის არსებობა. ასევე, ადამიანის ფერმენტები hABH2 და hABH3 დემეთილირებენ 1-მეთილადენინის ნარჩენებს პოლი(dA-მდე). არაეფექტურია მოკლე სუბსტრატებზე გარდა ამისა, დადებითად დამუხტული დაზიანებები (რიბონუკლეოზიდები 1-meA და 3-meC, შესაბამისად, pKa = 9.3 და 9.6) უკეთესად აღდგენილი იყო, ვიდრე დაუმუხტი ბაზები (1-meG და 3-meT). ხარისხი 3-meT). გარემონტდა AlkB-ის მიერ, მაშინ ბაზის ფორმალური დადებითი მუხტი არ არის AlkB-ის ფუნქციონირების აუცილებელი პირობა.
ჯერ არ არის ნათელი, ეს შედეგი დამოკიდებულია თუ არა დადებითად დამუხტული ფუძეების უკეთ აღიარებაზე AlkB-თან ელექტროსტატიკური ურთიერთქმედების გზით, თუ დადებითად დამუხტული ბაზები უბრალოდ აქცევს დნმ-ს უკეთეს ჯგუფს მეთილის ჯგუფის ჰიდროქსილაციის შემდეგ.

აბრევიატურები:

• AGT - ალკილგუანინის ტრანსფერაზა
• BER - ბაზის ამოკვეთის შეკეთება
• დნმ - დეზოქსირიბონუკლეინის მჟავა
• რნმ - რიბონუკლეინის მჟავა
• BCNU - N,N-ბის(2-ქლოროეთილ)N-ნიტროზოურეა
• CENU - ქლოროეთილნიტროზოურეა
• O 6 -BzG - O 6 -ბენზილგუანინი
• 1-meA - 1-მეთილადენინი
• 1-მეგ - 1-მეთილგუანინი
• 3-meC - 3-მეთილციტოზინი
• 3-meT - 3-მეთილთიმინი

ლიტერატურა:

» Orlando D. Scharer (2003) Angew. ქიმ. ინტ. რედ. 42, 2946-2974 წწ
» James C. Delaney და John M. Essigmann 1-მეთილადენინის, 3-ალკილციტოზინების, 1-მეთილგუანინის და 3-მეთილთიმინის მუტაგენეზი, გენოტოქსიკურობა და შეკეთება alkB Escherichia coli-ში
» Pertti Koivisto, Tod Duncan, Tomas Lindahl და Barbara Sedgwick Escherichia coli AlkB პროტეინის მინიმალური მეთილირებული სუბსტრატი და გაფართოებული სუბსტრატის დიაპაზონი, 1-მეთილადენინ-დნმ დიოქსიგენაზა*
» Duncan, T., Trewick, S. C., Koivisto, P., Bates, P. A., Lindahl, T. & Sedgwick, B. (2002) Proc. ნატლ. აკად. მეცნიერება. აშშ 99, 16660-16665 წწ. 5. Aas, P. A., Otterlei, M., Falnes, P. O., Vagbo, C. B., Skorpen, F., Akbari, M., Sundheim, O., Bjoras, M., Slupphaug, G., Seeberg, E., და ალ. (2003) Nature 421, 859-863.
» Hollis, T., Lau, A., and Ellenberger, T. (2000) Mutat. რეზ. 460, 201-210 წწ
» Daniels, D. S., and Tainer, J. A. (2000) Mutat. რეზ. 460, 151-163 წწ
» Trewick, S. C., Henshaw, T. F., Hausinger, R. P., Lindahl, T., and Sedgwick, B. (2002) Nature 419, 174-178
» Falnes, P. O., Johansen, R. F., and Seeberg, E. (2002) Nature 419, 178-181
» Duncan, T., Trewick, S. C., Koivisto, P., Bates, P. A., Lindahl, T., and Sedgwick, B. (2002) Proc. ნატლ. აკად. მეცნიერება. U. S. A. 99, 16660-16665
» Aas, P. A., Otterlei, M., Falnes, P. O., Vagbo, C. B., Skorpen, F., Akbari, M., Sundheim, O., Bjoras, M., Slupphaug, G., Seeberg, E., და Krokan , H. E. (2003) Nature 421, 859-863
» Aravind, L., and Koonin, E. V. (2001) Genome Biology 2, 0007.1-0007.8
» Bodell, W. J., and Singer, B. (1979) Biochemistry 18, 2860-2863
» Boiteux, S., and Laval, J. (1982) Biochimie (Paris) 64, 637-641
» Larson, K., Sahm, J., Shenkar, R., and Strauss, B. (1985) Mutat. რეზ. 150, 77-84 წწ
» Dinglay, S., Trewick, S. C., Lindahl, T., and Sedgwick, B. (2000) Genes Dev. 14, 2097-2105 წწ

დნმ შესვენების შეკეთება

ფოტორეაქტივაცია

დნმ-ის მოლეკულების მიერ ულტრაიისფერი გამოსხივების ენერგიის შთანთქმა იწვევს სხვადასხვა სახის დაზიანების წარმოქმნას. მიუხედავად იმისა, რომ შეიძლება მოხდეს ერთჯერადი და ორჯაჭვიანი რღვევები, ისევე როგორც დნმ-პროტეინის ჯვარედინი კავშირები, ულტრაიისფერი გამოსხივებით გამოწვეული ზიანის უმეტესობა გამოწვეულია აზოტოვანი ფუძეების მოდიფიკაციით, ციკლობუტანის პირიმიდინის დიმერების (CPD) და პირიმიდინ-პირიმიდონის წარმოქმნით. ფოტოპროდუქტები (6-4PP), როგორც ფოტოდაზიანების ყველაზე გავრცელებული სახეები.

პირიმიდინის დიმერები არიან როგორც რეპლიკაციის, ასევე ტრანსკრიფციის ინჰიბიტორები, რაც ანელებს ზრდას და იწვევს მუტაგენეზს დნმ-ის რეპლიკაციის დროს, თუ ასეთი დაზიანება გამოუსწორებელი რჩება.

ფერმენტები, რომლებიც სპეციალურად უკავშირდებიან CPD-ს (CPD photolyase) ან 6-4PP (6-4PP photolyase) და აღადგენს ამ დაზიანებებს, გამოიყენება მრავალი ორგანიზმის შუქით გამოწვეული დნმ-ის დაზიანების აღსადგენად. CPD ფოტოლიზები აღმოჩენილია ბაქტერიებში, სოკოებში, მცენარეებში, უხერხემლოებში და ბევრ ხერხემლიანში, 6-4PP ფოტოლიზები ჯერჯერობით მხოლოდ დროზოფილაში, აბრეშუმის ჭიაში, Xenopus laevis-სა და ჭყლეტაშია ნაპოვნი, მაგრამ არა Escherichia coli-ში ან საფუარში. ფოტოლიზა ადამიანებში არ არის ნაპოვნი. ფოტოლიზები შეიცავს FAD-ს, როგორც კატალიზურ კოფაქტორს და დამატებით ქრომოფორს, როგორც სინათლის მოსავლის ანტენას.

დამატებითი ქრომოფორებია 5,10-მეთენილტეტრაჰიდროფოლატი (MTHF) ან 8-ჰიდროქსი-5-დეაზორიბოფლავინი (8-HDF), შთანთქმის მაქსიმალური 380 და 440 ნმ, შესაბამისად. E. coli და Anacystis nidulans CPD ფოტოლიზების კრისტალური სტრუქტურები ადასტურებენ, რომ ფერმენტები აბრუნებენ პირიმიდინის დიმერს დუპლექსიდან ჭაბურღილში, რომელიც შეიცავს კატალიზურ კოფაქტორს, რათა დაუკავშირდეს დნმ-ს. შემდეგ ციკლობუტანის რგოლი იშლება ელექტრონის სინათლის მიერ გამოწვეული გადაცემით. CPD ფოტოლიზები შერჩევით ცნობენ CPD-ს, დნმ-ის დამაკავშირებელი ცილების მსგავსი. თეთრი შუქი ან UV-B გამოსხივება იწვევს CPD ფოტოლიზების გამოხატვას. CPD ფოტოლიზებისგან განსხვავებით, 6-4PP ფოტოლიზაზა სტაბილურად არის გამოხატული და არ რეგულირდება არც თეთრი შუქით და არც UV-B გამოსხივებით.

ფოტორეაქტივაციის სქემატური წარმოდგენა ქრომატინში. გიტონის ოქტამერები ლურჯია, დნმ შავი. ფოტოლიზა აკავშირებს ციკლობუტან-პირიმიდინის დიმერებს (CPD), აბრუნებს პირიმიდინის დიმერს და აღადგენს ბუნებრივ პირიმიდინებს სინათლის დამოკიდებულ რეაქციაში. ფოტოლიზაზა უპირატესად აღადგენს CPD-ს ბმულის დნმ-ში. ნუკლეოსომებში შეკეთება შენელებულია და, სავარაუდოდ, ხელს უწყობს ნუკლეოსომების დინამიურ თვისებებს, რომლებიც დნმ-ის დაზიანებას აკავშირებენ დნმ-ის მაკავშირებელ რეგიონში.

CDP-სპეციფიკური ფოტოლიზების კლასი მიკროორგანიზმებიდან, განსაზღვრული, როგორც I კლასის ფოტოლიაზები, იყო ფოტოლიზების ოჯახის პირველი წევრი, რომელიც დახასიათდა. ახლახან აღმოაჩინეს 6-4-ფოტოპროდუქტებისთვის სპეციფიკური ფოტოლიზების მჭიდროდ დაკავშირებული კლასი, ამ ოჯახის წევრები აღმოაჩინეს Drosophila melanogaster-ში, Xenopus laevis-სა და Arabidopsis thaliana-ში. კრიპტოქრომები, რომლებიც წარმოადგენს მცენარეებსა და სხვა ორგანიზმებში ნაპოვნი სინათლის სპექტრის იისფერი ნაწილის ფოტორეცეპტორებს, ასევე მჭიდრო კავშირშია I კლასის ფოტოლიაზებთან.

CPD ფოტოლიაზების უფრო შორს დაკავშირებული ოჯახი, რომელსაც ეწოდება II კლასის ფოტოლიზები, გამოვლენილია რიგ სახეობებში, მათ შორის ცხოველებში, Archaebacterium, Eubacterium და უფრო მაღალ მცენარეებში. ნაჩვენებია, რომ ყველა დამახასიათებელი ფოტოლიზა შეიცავს შემცირებულ FAD-ს და უმეტესობა შეიცავს მეორად ქრომოფორებს, სახეობების მიხედვით, MTHF ან 8-HDF. მსგავსი რეაქციის მექანიზმი შემოთავაზებულია CPD ფოტოლიზების ორივე კლასისთვის. MTHF ან 8-HDF ქრომოფორი ჰგავს ანტენას, რომელიც შთანთქავს იისფერ შუქს და იყენებს შთანთქმის ენერგიას FADH-ის რეგენერაციისთვის.

მცენარეული ფოტოლიზაზას კოფაქტორის შემადგენლობა ბოლომდე არ არის გასაგები, თუმცა ახლახან აჩვენეს, რომ CPD ფოტოლიზას არაბიდოპსისიდან, რომელიც შეიცავს მხოლოდ FADH-ს, ჰქონდა ფერმენტული აქტივობა.

ლიტერატურა:

» ფრიც თომა, სინათლე და ბნელი ქრომატინის შეკეთებაში: ულტრაიისფერი სხივებით გამოწვეული დნმ-ის დაზიანებების შეკეთება ფოტოლიაზასა და ნუკლეოტიდის ამოკვეთის შეკეთებით, Institut fur Zellbiologie, ETH-Zurich, Honggerberg, CH-8093 Zurich, შვეიცარია
» Arabidopsis photolyase ფერმენტების დახასიათება და მათი როლის ანალიზი ულტრაიისფერი-B გამოსხივებისგან დაცვაში, Wanda M. Waterworth 1, Qing Jiang, Christopher E. West, M. Nikaido და Clifford M. Bray

აღმოჩენის ისტორია

ერთჯაჭვიანი და ორჯაჭვიანი დნმ-ის დაზიანება

შეკეთების შესწავლა დაიწყო ა. კელნერის (აშშ) ნაშრომით, რომელმაც აღმოაჩინა ფოტორეაქტივაციის (PR) ფენომენი - ულტრაიისფერი (UV) სხივებით გამოწვეული ბიოლოგიური ობიექტების დაზიანების შემცირება, შემდგომი ზემოქმედებით კაშკაშა ხილული შუქით ( მსუბუქი შეკეთება).

ამოკვეთის შეკეთება

უჯრედებში აღმოჩენილია პოსტ-რეპლიკაციური რემონტი ე.კოლიარ შეუძლია თიმინის დიმერების დაშლა. ეს არის ერთადერთი ტიპის შეკეთება, რომელსაც არ აქვს ზიანის ამოცნობის ნაბიჯი.

შენიშვნები

ფონდი ვიკიმედია. 2010 წ.

ნახეთ, რა არის "დნმ-ის შეკეთება" სხვა ლექსიკონებში:

მუტაციის ან რეკომბინაციის შედეგად გამოწვეული დნმ-ის დეფექტების გამოსწორება. იგი ხორციელდება რეპარაციული ფერმენტების სისტემით, რომელთაგან ზოგი ადგენს დაზიანების ადგილს, ზოგი „აჭრის მას“, ზოგი ასინთეზებს დაზიანებულ უბნებს, მეოთხე ... ... მიკრობიოლოგიის ლექსიკონი

დნმ შეკეთება- - დნმ-ის პირველად სტრუქტურაში "შეცდომების" კორექტირება სპეციალური რეპარაციული ფერმენტების მოქმედების შედეგად ... ბიოქიმიური ტერმინების მოკლე ლექსიკონი

დნმ-ის შეკეთება- — ბიოტექნოლოგიის თემები EN დნმ-ის შეკეთება… ტექნიკური მთარგმნელის სახელმძღვანელო

დნმ-ის შეკეთება- DNR reparacija statusas T sritis augalininkystė apibrėžtis DNR struktūros atsikūrimas po pažeidimo. ატიტიკმენის: ინგლ. დნმ-ის შეკეთება დნმ-ის შეკეთება... Žemės ūkio augalų selekcijos ir sėklininkystės terminų žodynas

დნმ-ის შეკეთება- დნმ-ის მოლეკულაში თავდაპირველი სტრუქტურის აღდგენა, ე.ი. ნუკლეოტიდების სწორი თანმიმდევრობა... ტერმინები და განმარტებები, რომლებიც გამოიყენება მეურნეობის ცხოველების მოშენების, გენეტიკასა და რეპროდუქციაში

დნმ-ის შეკეთება- * დნმ-ის შეკეთება * დნმ-ის შეკეთება ფერმენტული შეცდომის კორექცია დნმ-ის მოლეკულის ნუკლეოტიდურ თანმიმდევრობაში. დნმ-ის მექანიზმები რ. დაიცვას სხეულის გენეტიკური ინფორმაცია გარემოს მუტაგენებით გამოწვეული ზიანისგან (მაგ. ულტრაიისფერი შუქი, ... ...

დნმ-დამოკიდებული დნმ პოლიმერაზა დნმ პოლიმერაზა- დნმ დამოკიდებული დნმ პოლიმერაზა, დნმ პოლიმერაზა * დნმ დამოკიდებული დნმ პოლიმერაზა, დნმ პოლიმერაზა * დნმ დამოკიდებული დნმ პოლიმერაზა ან დნმ პოლიმერაზა ფერმენტი, რომელიც კატალიზებს დეოქსირიბონუკლეოზიდის ტრიფოსფატების პოლიმერიზაციას (იხ.) პოლიმერად ... ... გენეტიკა. ენციკლოპედიური ლექსიკონი

- (გვიანდელი ლათინური reparatio რესტავრაციიდან), ცოცხალი ორგანიზმის ყველა უჯრედისთვის დამახასიათებელი, დნმ-ის თავდაპირველი (მშობლიური) სტრუქტურის აღდგენა მისი დარღვევის შემთხვევაში. დნმ-ის სტრუქტურის დაზიანებამ შეიძლება გამოიწვიოს დნმ-ის რეპლიკაციის დაბლოკვა (ლეტალური ... ... ქიმიური ენციკლოპედია

შეკეთება: დნმ-ის შეკეთება არის უჯრედების უნარი შეაკეთონ ქიმიური დაზიანება და დნმ-ის მოლეკულების რღვევები. რეპარაციები არის საერთაშორისო სამართლის სუბიექტის მატერიალური პასუხისმგებლობის ფორმა მის მიერ ჩადენილი საერთაშორისო მოქმედების შედეგად მიყენებული ზიანისთვის ... ... ვიკიპედია

ნუკლეოტიდების ჩაშენებების, ხარვეზებისა და შეუსაბამობების აღმოსაჩენი და აღდგენის სისტემა, რომლებიც წარმოიქმნება დნმ-ის რეპლიკაციისა და რეკომბინაციის დროს, აგრეთვე დნმ-ის გარკვეული ტიპის დაზიანების შედეგად. შეუსაბამობის ფაქტი არ იძლევა საშუალებას ... ... ვიკიპედია

წიგნები

• დნმ-ის მეთილაცია მცენარეებში. მექანიზმები და ბიოლოგიური როლი, BF Vanyushin. ერთ-ერთი პიონერის და ცნობილი მსოფლიო ლიდერის ეს კითხვა სხვადასხვა ორგანიზმში დნმ-ის მეთილაციის შესწავლაში დეტალურადაა აღწერილი ზოგადი ბიოლოგიური პრობლემის ამჟამინდელ მდგომარეობაზე, ...

დაზიანებულია უჯრედში ნორმალური დნმ-ის ბიოსინთეზის დროს ან ფიზიკური ან ქიმიური რეაგენტების ზემოქმედების შედეგად. იგი ხორციელდება უჯრედის სპეციალური ფერმენტული სისტემებით. რიგი მემკვიდრეობითი დაავადებები (მაგ., ქსეროდერმა პიგმენტოზი) დაკავშირებულია აღდგენის სისტემების დარღვევასთან.

აღმოჩენის ისტორია

შეკეთების შესწავლის დასაწყისი ჩაეყარა ალბერტ კელნერის (აშშ) ნაშრომს, რომელმაც 1948 წელს აღმოაჩინა ფოტორეაქტივაციის ფენომენი - ულტრაიისფერი (UV) სხივებით გამოწვეული ბიოლოგიური ობიექტების დაზიანების შემცირება, შემდგომი ზემოქმედებით კაშკაშა ხილული შუქით. ( მსუბუქი შეკეთება).

რ. სეტლოუმ, კ. რუპერტმა (აშშ) და სხვებმა მალევე დაადგინეს, რომ ფოტორეაქტივაცია არის ფოტოქიმიური პროცესი, რომელიც ხდება სპეციალური ფერმენტის მონაწილეობით და იწვევს დნმ-ში წარმოქმნილი თიმინის დიმერების გახლეჩას ულტრაიისფერი კვანტური შთანთქმის დროს.

მოგვიანებით, ულტრაიისფერი სინათლისა და მაიონებელი გამოსხივების მიმართ ბაქტერიული მგრძნობელობის გენეტიკური კონტროლის შესწავლისას, აღმოაჩინეს. ბნელი შეკეთება- უჯრედების თვისება აღმოფხვრას დაზიანება დნმ-ში ხილული სინათლის მონაწილეობის გარეშე. UV შუქით დასხივებული ბაქტერიული უჯრედების ბნელი აღდგენის მექანიზმი იწინასწარმეტყველა A.P. Howard-Flanders-მა და ექსპერიმენტულად დაადასტურა 1964 წელს F. Hanawalt-მა და D. Petitjohn-მა (აშშ). ნაჩვენებია, რომ ბაქტერიებში დასხივების შემდეგ, დაზიანებული დნმ-ის სექციები შეცვლილი ნუკლეოტიდებით ამოიჭრება და დნმ ხელახლა სინთეზირდება წარმოქმნილ ხარვეზებში.

აღდგენითი სისტემები არსებობს არა მხოლოდ მიკროორგანიზმებში, არამედ ცხოველთა და ადამიანის უჯრედებშიც, რომლებშიც მათ სწავლობენ ქსოვილის კულტურებში. ცნობილია ადამიანის მემკვიდრეობითი დაავადება - ქსეროდერმა პიგმენტოზა, რომლის დროსაც რემონტი ირღვევა.

დნმ-ის დაზიანების წყაროები

დნმ-ის დაზიანების ძირითადი ტიპები

რეპარაციის სისტემის მოწყობილობა

თითოეული რეპარაციის სისტემა მოიცავს შემდეგ კომპონენტებს:

• დნმ ჰელიკაზა - ფერმენტი, რომელიც „ამოიცნობს“ ჯაჭვში ქიმიურად შეცვლილ მონაკვეთებს და არღვევს ჯაჭვს დაზიანების მახლობლად;
• DNase (დეოქსირიბონუკლეაზა) - ფერმენტი, რომელიც "ჭრის" 1 დნმ ჯაჭვს (ნუკლეოტიდების თანმიმდევრობას) ფოსფოდიესტერული ბმის გასწვრივ და შლის დაზიანებულ უბანს: ეგზონუკლეაზა მუშაობს ტერმინალურ ნუკლეოტიდებზე 3` ან 5`, ენდონუკლეაზა მუშაობს ტერმინალური ნუკლეოტიდებზე, გარდა ტერმინალისა;
• დნმ პოლიმერაზა - ფერმენტი, რომელიც ასინთეზებს დნმ-ის ჯაჭვის შესაბამის მონაკვეთს წაშლილის ჩანაცვლების მიზნით;
• დნმ ლიგაზა არის ფერმენტი, რომელიც ხურავს ბოლო ბმას პოლიმერულ ჯაჭვში და ამით აღადგენს მის უწყვეტობას.

რეპარაციის სახეები

პირდაპირი რეპარაცია

პირდაპირი შეკეთება არის უმარტივესი გზა დნმ-ში დაზიანების აღმოსაფხვრელად, რომელიც ჩვეულებრივ მოიცავს სპეციფიკურ ფერმენტებს, რომლებსაც შეუძლიათ სწრაფად (ჩვეულებრივ ერთ ეტაპზე) აღმოფხვრას შესაბამისი დაზიანება და აღადგინონ ორიგინალური ნუკლეოტიდური სტრუქტურა. ასე მოქმედებს, მაგალითად, O6-მეთილგუანინ-დნმ მეთილტრანსფერაზა, რომელიც შლის მეთილის ჯგუფს აზოტოვანი ფუძიდან ერთ-ერთ საკუთარ ცისტეინის ნარჩენებამდე.

ამოკვეთის შეკეთება

ამოკვეთა (ინგლისური ამოკვეთა - ჭრა) მოიცავს დაზიანებული აზოტოვანი ფუძეების ამოღებას დნმ-დან და შემდგომში მოლეკულის ნორმალური სტრუქტურის აღდგენას დამატებითი ჯაჭვის გასწვრივ. ფერმენტული სისტემა შლის ორჯაჭვიანი დნმ-ის მოკლე ერთჯაჭვიან თანმიმდევრობას, რომელიც შეიცავს შეუსაბამო ან დაზიანებულ ბაზებს და ანაცვლებს მათ მიმდევრობის სინთეზით, რომელიც ავსებს დარჩენილი ჯაჭვის.

ამოკვეთის შეკეთება არის ყველაზე გავრცელებული მეთოდი მოდიფიცირებული დნმ-ის ბაზების აღდგენისთვის. იგი ემყარება მოდიფიცირებული ბაზის ამოცნობას სხვადასხვა გლიკოზილაზებით, რომლებიც წყვეტენ ამ ბაზის N-გლიკოზიდურ კავშირს დნმ-ის მოლეკულის შაქარ-ფოსფატის ხერხემალთან. ამავდროულად, არსებობს გლიკოზილაზები, რომლებიც კონკრეტულად ცნობენ დნმ-ში გარკვეული მოდიფიცირებული ფუძეების არსებობას (ოქსიმეთილურაცილი, ჰიპოქსანტინი, 5-მეთილურაცილი, 3-მეთილადენინი, 7-მეთილგუანინი და ა.შ.). მრავალი გლიკოზილაზასთვის დღემდე აღწერილია პოლიმორფიზმი, რომელიც დაკავშირებულია გენის კოდირების თანმიმდევრობაში ერთ-ერთი ნუკლეოტიდის ჩანაცვლებასთან. ამ ფერმენტების რიგი იზოფორმებისთვის დადგენილია კავშირი ონკოლოგიური დაავადებების გაზრდილ რისკთან [Cen, 2003].

დნმ-ის მაღალი სტაბილურობა უზრუნველყოფილია არა მხოლოდ მისი სტრუქტურის კონსერვატიულობით და რეპლიკაციის მაღალი სიზუსტით, არამედ ყველა ცოცხალი ორგანიზმის უჯრედებში სპეციალური სისტემების არსებობით. რეპარაციებირომელიც შლის დნმ-ს დაზიანებას.

სხვადასხვა ქიმიკატების, მაიონებელი გამოსხივებისა და ულტრაიისფერი გამოსხივების მოქმედებამ შეიძლება გამოიწვიოს დნმ-ის სტრუქტურის შემდეგი დაზიანება:

ცალკეული ფუძეების დაზიანება (დეამინაცია, რომელიც იწვევს ციტოზინის ურაცილად გარდაქმნას, ადენინის ჰიპოქსანტინად; ბაზის ალკილაცია; ბაზის ანალოგების ჩართვა, ნუკლეოტიდების ჩასმა და დელეცია);

ბაზის წყვილის დაზიანება (თიმინის დიმერების წარმოქმნა);

ჯაჭვის წყვეტა (ერთჯერადი და ორმაგი);

ბაზებს შორის ჯვარედინი კავშირების ფორმირება, ასევე დნმ-პროტეინის ჯვარედინი კავშირები.

ზოგიერთი დარღვევა შესაძლოა სპონტანურადაც მოხდეს, ე.ი. ყოველგვარი მავნე ფაქტორების ჩარევის გარეშე.

ნებისმიერი სახის დაზიანება იწვევს დნმ-ის მეორადი სტრუქტურის დარღვევას, რაც არის რეპლიკაციის ნაწილობრივი ან სრული ბლოკირების მიზეზი. ასეთი კონფორმაციული დარღვევები ემსახურება სარემონტო სისტემების სამიზნეს. დნმ-ის სტრუქტურის აღდგენის პროცესი ეფუძნება იმ ფაქტს, რომ გენეტიკური ინფორმაცია დნმ-ში წარმოდგენილია ორი ასლით - თითო ორმაგი სპირალის ჯაჭვებში. ამის გამო, ერთ-ერთ ჯაჭვში დაზიანება შეიძლება აღმოიფხვრას სარემონტო ფერმენტის მიერ და ჯაჭვის ეს მონაკვეთი ნორმალურ ფორმაში ხელახლა სინთეზირდება დაუზიანებელ ჯაჭვში არსებული ინფორმაციის გამო.

ამჟამად გამოვლენილია დნმ-ის შეკეთების სამი ძირითადი მექანიზმი: ფოტორეაქტივაცია, ამოკვეთა და რეპლიკაციის შემდგომი შეკეთება. ბოლო ორ ტიპს ასევე უწოდებენ ბნელ რეპარაციას.

ფოტორეაქტივაციაიშლება ფერმენტის მიერ ფოტოლიზაზახილული შუქით გააქტიურებული თიმინის დიმერები, რომლებიც დნმ-ში ჩნდება ულტრაიისფერი გამოსხივების ზემოქმედებით.

ამოკვეთილიშეკეთება მოიცავს დნმ-ის დაზიანების ამოცნობას, დაზიანებული უბნის ამოკვეთას, დნმ-ის ხელახალი სინთეზს ხელუხლებელი ჯაჭვის შაბლონის მიხედვით დნმ-ის ჯაჭვის უწყვეტობის აღდგენით. ამ მეთოდს ასევე უწოდებენ რეპარაციას გაყოფის - ჩანაცვლების, ან უფრო გადატანითი მნიშვნელობით, "cut - patch" მექანიზმის მიხედვით. ამოკვეთის შეკეთება მრავალსაფეხურიანი პროცესია და შედგება:

1) ზიანის „აღიარება“;

2) დნმ-ის ერთი ჯაჭვის გაჭრა დაზიანების მახლობლად (ჭრილობა);

3) დაზიანებული უბნის მოცილება (ამოკვეთა);

4) დნმ-ის რესინთეზი ამოღებული ადგილის ადგილზე;

5) აღდგენილი ჯაჭვის უწყვეტობის აღდგენა ნუკლეოტიდებს შორის ფოსფოდიესტერული ბმების წარმოქმნის გამო
(სურათი 6.2)

ბრინჯი. 6.2 ამოკვეთის სარემონტო სქემა

რეპარაცია იწყება შეერთებით დნმ-N-გლიკოზილაზადაზიანებულ ბაზამდე. არსებობს მრავალი დნმ-N-გლიკოზილაზა, რომელიც სპეციფიკურია სხვადასხვა მოდიფიცირებული ბაზებისთვის. ფერმენტები ჰიდროლიზურად წყვეტენ N-გლიკოზიდურ კავშირს შეცვლილ ფუძესა და დეზოქსირიბოზას შორის, რაც იწვევს დნმ-ის ჯაჭვში AP (აპურინულ-აპირიმიდინის) ადგილის წარმოქმნას (პირველი ნაბიჯი). AP საიტის შეკეთება შეიძლება მოხდეს მხოლოდ მონაწილეობით დნმ ინსერტაზები, რომელიც ამატებს ფუძეს დეზოქსირიბოზას კომპლემენტარობის წესის შესაბამისად. ამ შემთხვევაში, არ არის საჭირო დნმ-ის ჯაჭვის მოჭრა, არასწორი ნუკლეოტიდის ამოჭრა და რღვევის აღდგენა. დნმ-ის სტრუქტურის უფრო რთული დაზიანების შემთხვევაში აუცილებელია შეკეთებაში ჩართული ფერმენტების მთელი კომპლექსის მონაწილეობა (ნახ. 6.2.): AP-ენდონუკლეაზაამოიცნობს AP ადგილს და წყვეტს მის მახლობლად დნმ-ის ჯაჭვს (II სტადია). როგორც კი წრეში შესვენება მოხდება, სამუშაო ამოქმედდება AP ეგზონუკლეაზა, რომელიც შლის დნმ-ის ფრაგმენტს, რომელიც შეიცავს შეცდომას (III ეტაპი). დნმ პოლიმერაზა ბაყალიბებს უფსკრული, რომელიც წარმოიშვა კომპლემენტარობის პრინციპის მიხედვით (IV ეტაპი). დნმ ლიგაზააკავშირებს ახლად სინთეზირებული ფრაგმენტის 3¢ ბოლოს ძირითად ჯაჭვთან და ასრულებს დაზიანების შეკეთებას (V ეტაპი).

პოსტრეპლიკაციულირემონტი ჩართულია იმ შემთხვევებში, როდესაც ამოკვეთი ვერ უმკლავდება დნმ-ის ყველა დაზიანების აღმოფხვრას მის რეპლიკაციამდე. ამ შემთხვევაში, დაზიანებული მოლეკულების რეპროდუქცია იწვევს დნმ-ის წარმოქმნას ერთჯაჭვიანი ხარვეზებით და რეკომბინაციის დროს აღდგება მშობლიური სტრუქტურა.

სარემონტო სისტემის თანდაყოლილი დეფექტები არის ისეთი მემკვიდრეობითი დაავადებების მიზეზი, როგორიცაა ქსეროდერმა პიგმენტოზი, ატაქსია-ტელანგიექტაზია, ტრიქოთიოდისტროფია და პროგერია.

დნმ-ის შეკეთება

რეპარაციის სისტემები

2 ამოკვეთის შეკეთება. მაგალითები და ტიპები

3 დნმ-ის რეპლიკაციის შეცდომების შეკეთება

4 რეკომბინანტული (პოსტ-რეპლიკაციური) შეკეთება ბაქტერიებში

5 SOS რეპარაცია

დნმ-ის აღდგენის სისტემები საკმაოდ კონსერვატიულია ევოლუციაში ბაქტერიებიდან ადამიანამდე და საუკეთესოდ არის შესწავლილი E. coli-ში.

რეპარაციის ორი ტიპი არსებობს:სწორი და ამოკვეთილი

პირდაპირი რეპარაცია

პირდაპირი შეკეთება არის უმარტივესი გზა დნმ-ში დაზიანების აღმოსაფხვრელად, რომელიც ჩვეულებრივ მოიცავს სპეციფიკურ ფერმენტებს, რომლებსაც შეუძლიათ სწრაფად (ჩვეულებრივ ერთ ეტაპზე) აღმოფხვრას შესაბამისი დაზიანება, აღადგინონ ნუკლეოტიდების თავდაპირველი სტრუქტურა.

1. ეს მუშაობს, მაგალითად,O6-მეთილგუანინ-დნმ-მეთილტრანსფერაზა

(სუიციდური ფერმენტი), რომელიც შლის მეთილის ჯგუფს აზოტოვანი ფუძიდან საკუთარ ცისტეინის ნარჩენებამდე

E. coli-ში ამ ცილის 100-მდე მოლეკულა შეიძლება 1 წუთში სინთეზირდეს. უმაღლესი ევკარიოტების ცილა, მსგავსი ფუნქციით, აშკარად მნიშვნელოვან როლს თამაშობს კიბოსგან დაცვაში, რომელიც გამოწვეულია შიდა და გარე ალკილაციური ფაქტორებით.

დნმ ინსერტაზა

2. დნმ ინსერტაზები

ფოტოლიზაზა

3. თიმინის დიმერები „მოქარგულია“ მიერ პირდაპირი რეპარაციამთავარ როლშიფოტოლიზაზა, რომლებიც ახორციელებენ შესაბამის ფოტოქიმიურ ტრანსფორმაციას. დნმ ფოტოლიზები არის სინათლის გააქტიურებული ფერმენტების ჯგუფი 300 - 600 ნმ ტალღის სიგრძით (ხილული რეგიონი), რისთვისაც მათ სტრუქტურაში აქვთ სპეციალური სინათლისადმი მგრძნობიარე ცენტრი.

ისინი ფართოდ არის გავრცელებული ბუნებაში და გვხვდება ბაქტერიებში, საფუარში, მწერებში, ქვეწარმავლებში, ამფიბიებში და ადამიანებში. ამ ფერმენტებს სჭირდებათ სხვადასხვა კოფაქტორები (FADH, ტეტრაჰიდროფოლის მჟავა და სხვ.), რომლებიც მონაწილეობენ ფერმენტის ფოტოქიმიურ აქტივაციაში. E. coli photolyase არის 35 kDa ცილა, რომელიც მჭიდროდ არის დაკავშირებული ოლიგორიბონუკლეოტიდი 10-15 ნუკლეოტიდის სიგრძითსაჭიროა ფერმენტის აქტივობისთვის.

პირდაპირი რეპარაციის მაგალითები

1. მეთილირებული ბაზა O 6-მგ დიმეთილირებული ფერმენტ მეთილტრანსფერაზას მიერO6-მეთილგუანინ-დნმ-მეთილტრანსფერაზა (სუიციდური ფერმენტი), რომელიც გადააქვს მეთილის ჯგუფს მის ერთ-ერთ ნარჩენზე

ცისტეინი

2. AP ადგილების გამოსწორება შესაძლებელია პურინების პირდაპირი ჩასმით ფერმენტების დახმარებით, რომელსაც ე.წდნმ ინსერტაზები(ინგლისური ჩანართიდან- ჩასმა).

დნმ-ში დაზიანების პირდაპირი აღდგენის მაგალითი - მეთილირებული ბაზა ო6- მგდემეთილირდება ფერმენტ მეთილტრანსფერაზას მიერ, რომელიც გადააქვს მეთილის ჯგუფს მის ერთ-ერთ ცისტეინის ამინომჟავის ნარჩენში.

3. ფოტოლიზაზა მიმაგრებულია თიმინის დიმერზე და ამ კომპლექსის ხილული სინათლით (300-600 ნმ) დასხივების შემდეგ დიმერი ფართოვდება.

დნმ-ის დაზიანების პირდაპირი აღდგენის მაგალითი - ფოტოლიზაზა

ემაგრება თიმინის დიმერს და ხილული შუქით დასხივების შემდეგ ეს დიმერი ფართოვდება

ამოკვეთის შეკეთება

(ინგლისურიდან excision - cutting).

განმარტება

ამოკვეთის შეკეთება მოიცავს მოხსნადნმ-დან დაზიანებული აზოტოვანი ფუძეები და შემდგომი აღდგენანორმალური მოლეკულური სტრუქტურა.

მექანიზმი

ამოკვეთის შეკეთებაში, როგორც წესი, ჩართულია რამდენიმე ფერმენტი და თავად პროცესი გავლენას ახდენს

არა მარტო დაზიანებული ,

არამედ მიმდებარე ნუკლეოტიდები .

პირობები

ამოკვეთის აღდგენისთვის საჭიროა დნმ-ის მეორე (დამატებითი) ჯაჭვი. ამოკვეთის შეკეთების ზოგადი გამარტივებული სქემა ნაჩვენებია ნახ. 171.

ეტაპები

ამოკვეთის შეკეთების პირველი ნაბიჯი არის პათოლოგიური აზოტოვანი ფუძეების ამოკვეთა. ის კატალიზებულია ჯგუფის მიერდნმ-ნ-გლიკოზილაზა- ფერმენტები, რომლებიც წყვეტენ გლიკოზიდურ კავშირს დეზოქსირიბოზასა და აზოტოვან ფუძეს შორის.

ᲛᲜᲘᲨᲕᲜᲔᲚᲝᲕᲐᲜᲘ ᲩᲐᲜᲐᲬᲔᲠᲘ:

ზეადამიანისდნმ-ნ-გლიკოზილაზააქვთ მაღალი სუბსტრატის სპეციფიკა: ამ ოჯახის სხვადასხვა ფერმენტები ამოიცნობენ და აჭრიან სხვადასხვა ანომალიური ფუძე(8-ოქსოგუანინი, ურაცილი, მეთილპურინები და სხვ.).

ზებაქტერიებიდნმ-ნ-გლიკოზილაზაარ აქვს სუბსტრატის ასეთი სპეციფიკა.

ზოგადი ამოკვეთის აღმდგენი ფერმენტები

NAME	ფუნქცია	მექანიზმი
დნმ-ნ-გლიკოზილაზა	არანორმალური აზოტოვანი ფუძეების ამოკვეთა	წყვეტს გლიკოზიდურ კავშირს დეზოქსირიბოზას შორის და აზოტოვანი ბაზა
AP ენდონუკლეაზა	ქმნის პირობებს შემდეგი ფერმენტის მუშაობისთვის - ეგზონუკლეაზები	არღვევს დნმ-ის მოლეკულის შაქარ-ფოსფატის ხერხემალს AP-ის ადგილზე
ეგზონუკლეაზა	წყვეტს რამდენიმე ნუკლეოტიდს	თანმიმდევრულად წყვეტს რამდენიმე ნუკლეოტიდს დნმ-ის ერთი ჯაჭვის დაზიანებული მონაკვეთიდან

ამ მექანიზმის სპეციფიური თანმიმდევრული ნაბიჯები:

მოქმედების შედეგად დნმ- ნ-გლიკოზილაზაიქმნება AP საიტი, რომელიც თავს ესხმის ფერმენტს AR-ენდონუკლეაზა. ის არღვევს დნმ-ის მოლეკულის შაქარ-ფოსფატის ხერხემალს AP-ის ადგილზე და ამით ქმნის პირობებს შემდეგი ფერმენტის მუშაობისთვის - ეგზონუკლეაზები, რომელიც თანმიმდევრულად წყვეტს რამდენიმე ნუკლეოტიდს დნმ-ის ერთი ჯაჭვის დაზიანებული მონაკვეთიდან.

ბაქტერიულ უჯრედებში გამოთავისუფლებული სივრცე ივსება შესაბამისი ნუკლეოტიდებით მონაწილეობით დნმ პოლიმერაზა Iორიენტირებულია დნმ-ის მეორე (დამატებით) ჯაჭვზე.

იმის გამო, რომ დნმ პოლიმერაზა I-ს შეუძლია გააფართოვოს ერთ-ერთი ჯაჭვის 3' ბოლო ორჯაჭვიანი დნმ-ის შეწყვეტისას და ამოიღოს ნუკლეოტიდები იმავე წყვეტის 5' ბოლოდან,

იმათ. გააცნობიეროს "ნიკ-მაუწყებლობა" , ეს ფერმენტი მნიშვნელოვან როლს ასრულებს დნმ-ის შეკეთებაში. მიმდინარეობს გარემონტებული უბნების საბოლოო შეკერვა დნმ ლიგაზა.

ევკარიოტულ (ძუძუმწოვრების) უჯრედებში

ძუძუმწოვრების უჯრედებში დნმ-ის ამოკვეთის შეკეთება თან ახლავს სხვა ფერმენტის აქტივობის მკვეთრ მატებას,პოლი ადP-რიბოზა პოლიმერაზა . ამავე დროს, ხდება ქრომატინის ცილების ADP-რიბოზილირება(ჰისტონები და არაჰისტონის ცილები), რაც იწვევს მათი კავშირის შესუსტებას დნმ-თან და ხსნის წვდომას აღმდგენი ფერმენტებზე.

დონორი ADP-რიბოზაამ რეაქციებშიNAD+რენტგენის დასხივებით გამოწვეული ზიანის ამოკვეთის დროს, რომლის რეზერვები მნიშვნელოვნად მცირდება:

უარყოფითად დამუხტული ნარჩენები ADP-რიბოზამოლეკულის შიდა შემადგენლობიდან NAD+შეუერთდი რადიკალსგლუტამინიმჟავები ან ფოსფოსერინიქრომატინის ცილებს, რაც იწვევს ამ ცილების დადებითი მუხტების განეიტრალებას და დნმ-თან მათი კონტაქტის შესუსტებას.

რა არის ფერმენტების ჯგუფი

დნმ - გლიკოზილაზები

წყვეტს გლიკოზიდურ კავშირს დეზოქსირიბოზასა და აზოტოვან ფუძეს შორის

რაც იწვევს პათოლოგიური აზოტოვანი ფუძეების ამოკვეთას

დნმ - გლიკოზილაზები მონაწილეობს უჯრედებში დნმ-ის ჟანგვითი დაზიანების აღმოფხვრაში პროკარიოტები და ევკარიოტები, ძალიან მრავალფეროვანია და განსხვავდებიან სუბსტრატის სპეციფიკურობით, სივრცითი სტრუქტურით და დნმ-თან ურთიერთქმედების რეჟიმებით.

ყველაზე შესწავლილი დნმ გლიკოზილაზები მოიცავს:

ენდონუკლეაზა III(EndoIII),

ქმნის ამიდოპირიმიდინ-დნმ-გლიკოზილაზას (fpg)

Mut Tდა

Mut Ycoli.

ენდონუკლეაზა IIIE. coli ცნობს და კონკრეტულად იშლება დნმ-ს დაჟანგული პირმიდინის ფუძეები.

ეს ფერმენტი არის მონომერული გლობულური ცილა, რომელიც შედგება 211 ამინომჟავანარჩენები (მოლ. წონა 23,4 კდა). Endo III-ის მაკოდირებელი გენი დახარისხებულია და დადგენილია მისი ნუკლეოტიდური თანმიმდევრობა. ენდო III არის რკინა-გოგირდის ცილა [(4 Fe-4S )2+-ცილა], რომელსაც აქვს ელემენტი ზემეორადი სტრუქტურააკრიფეთ "ბერძნული გასაღები" (სპირალი - თმის სამაგრი - სპირალი), ემსახურება დნმ-თან დაკავშირებას. ასევე იზოლირებულია ფერმენტები სუბსტრატის მსგავსი სპეციფიკურობით და მსგავსი ამინომჟავების თანმიმდევრობით მსხვილფეხა რქოსანი და ადამიანის უჯრედები.

ამიდოპირიდინ-დნმ-გლიკოზილაზას ფორმირება E. coli „ამოიცნობს“ და წყვეტს დაჟანგულ ჰეტეროციკლურს პურინების სერიის საფუძვლები .

ამოკვეთის შეკეთების სქემა ეტაპი 1

დნმნ

EXCISION სარემონტო სქემა

1 დნმნგლიკოზიდაზა შლის დაზიანებულ ფუძეს

AR ენდონუკლეაზა არღვევს დნმ-ს

2 ეგზონუკლეაზა შლის რიგ ნუკლეოტიდებს

3 დნმ პოლიმერაზა ავსებს ვაკანტურ ადგილს დამატებითი ნივთიერებებით

მონონუკლეოტიდები

დნმ ლიგაზა ჯვარედინად აკავშირებს შეკეთებულ დნმ-ის ჯაჭვს

Mut T- მცირე ცილა მოლეკულური მასით 15 kDa, რომელსაც აქვს ნუკლეოზიდური ტრიფოსფატაზას აქტივობა, რომელიც უპირატესად ჰიდროლიზებს dGTP-ს dGMP-მდე და პიროფოსფატამდე.

Mut T-ის ბიოლოგიური როლი არის რეპლიკაციის დროს არაკანონიკური წყვილების წარმოქმნის პრევენციაა: გდა A: 8-oxo-G.

ასეთი წყვილი შეიძლება გამოჩნდეს როცა დაჟანგული ფორმა

dGTP (8-oxo-dGTP)ხდება სუბსტრატიდნმ პოლიმერაზა.

Mut Tჰიდროლიზებს 8-oxo-dGTP10-ჯერ უფრო სწრაფი ვიდრე dGTP.

ამას აკეთებს 8-oxo-dGTPყველაზე სასურველი სუბსტრატიმუტთდა განმარტავს მის ფუნქციურ როლს.

Mut Yარის სპეციფიკური ადენინ-დნმ გლიკოზილაზა, რომელიც წყვეტს N-გლიკოზიდურ კავშირს ადენინსა და დეზოქსირიბოზას შორის. ადენოზინი,გუანინით არაკანონიკური წყვილის ფორმირება.

ამ ფერმენტის ფუნქციური როლი არის მუტაციის თავიდან აცილება

T:A - G:A მიერ ხელუხლებელი ნარჩენების დაშლა ადენინიფუძის წყვილიდან A: 8-oxo-G.

ნუკლეოტიდის ამოკვეთის შეკეთება

(ATP-დამოკიდებული დნმ-ის დაზიანების მოცილების მექანიზმი)

ბოლო დროს, ამოკვეთის შეკეთებისას განსაკუთრებული ყურადღება დაეთმო დნმ-დან დაზიანების მოცილების ATP-დამოკიდებულ მექანიზმს. ამ ტიპის ამოკვეთის შეკეთებას ეწოდება ნუკლეოტიდის ამოკვეთის შეკეთება (NER).

იგი მოიცავს ორ ეტაპს :

1. მოცილება დნმ-დანოლიგონუკლეოტიდის ფრაგმენტები ზიანის შემცველი და

ექსცინუკლეაზა

2. დნმ-ის ჯაჭვის შემდგომი რეკონსტრუქცია ფერმენტების კომპლექსის მონაწილეობით (ნუკლეაზები, დნმ პოლიმერაზები, დნმ ლიგაზები და სხვ.).

ხდება დნმ-ის ფრაგმენტის მოცილება დაზიანებული ორივე მხარესნუკლეოტიდი. ამოღებული ოლიგონუკლეოტიდის ფრაგმენტების სიგრძე განსხვავდება პროკარიოტებსა და ევკარიოტებს შორის.

პროკარიოტების დნმ-ის ფრაგმენტის მოცილება

ასე რომ, E. coli-ში, B. subtilus, Micrococcus luteus, სიგრძის ფრაგმენტი 12-13 ნუკლეოტიდები

დნმ-ის ფრაგმენტის მოცილება ევკარიოტებიდან

ხოლო საფუარში, ამფიბიებში და ადამიანებში, ფრაგმენტი, რომელიც შედგება 24-32 ნუკლეოტიდები.

ექსცინუკლეაზა- ფერმენტი, რომელიც შლის დნმ-ის ფრაგმენტებს

დნმ-ის ფრაგმენტი იჭრება ფერმენტის მიერექსცინუკლეაზა(ექსცინუკლეაზა). E. coli-ში ეს ფერმენტი შედგება 3 განსხვავებული პროტომერისგან -

უვრა

uvr B

uvr C

რომელთაგან თითოეული ასრულებს კონკრეტულ ფუნქციას დნმ-ის ფრაგმენტის ამოკვეთისას. ამ ცილების სახელი მოცემულია სიტყვების პირველი ასოებით"ულტრაიისფერი შეკეთება".

პროტომერ უვრ ააქვს ატფ-აზას აქტივობა, უერთდება დნმ-ს დიმერის სახით, ახორციელებს

პირველადი ზიანის ამოცნობა და

სავალდებულოuvr B

პროტომერი uvr Bაქვს:

1 . ლატენტური ATPase და ლატენტური ჰელიკაზას აქტივობა, რომელიც აუცილებელია კონფორმაციების შესაცვლელად და დნმ-ის ორმაგი სპირალის გასახსნელად;

2. ენდონუკლეაზა აქტივობა, გვერდიდან ინტერნუკლეოტიდური (ფოსფოდიესტერი) ბმის გაწყვეტაZ" - დასასრულიგატეხილი ფრაგმენტი.

პროტომერი uvr Cმოქმედებს ისე, როგორც ენდონუკლეაზა, შემოღებულია შესვენება გარემონტებული დნმ-ის ჯაჭვში5" - დასასრულიმოჭრილი ფრაგმენტი.

ასე რომ, პროტომერებიuvr A, uvr B, uvr Cურთიერთქმედება დნმ-თან გარკვეული თანმიმდევრობით, ახორციელებს ATP-დამოკიდებულ რეაქციასოლიგონუკლეოტიდის ფრაგმენტის დაშლა აღდგენილი დნმ-ის ჯაჭვიდან.

დნმ-ის მოლეკულაში წარმოქმნილი უფსკრული აღდგენილია დნმ პოლიმერაზა I-ისა და დნმ ლიგაზას მონაწილეობით. ზემოაღნიშნული ფერმენტების მონაწილეობით ექსციზური შეკეთების მოდელი ნაჩვენებია ნახ. 172.

ამოკვეთის შეკეთება ადამიანებში

ადამიანის ამოკვეთის შეკეთება ასევე დამოკიდებულია ATP-ზე და მოიცავსსამი ძირითადი ნაბიჯი :

ზიანის ამოცნობა,

დნმ-ის ჯაჭვის ორმაგი ჭრა,

რედუქციური სინთეზი და

გარემონტებული ძაფის ლიგირება.

თუმცა, ადამიანის დნმ-ის ამოკვეთის შეკეთება მოიცავს

25 სხვადასხვა პოლიპეპტიდი ,

16 რომელთაგან მონაწილეობენ ოლიგონუკლეოტიდის ფრაგმენტის გახლეჩაში, არიან პროტომერებიექსცინუკლეაზები,

და დანარჩენი 9 განახორციელოს მოლეკულის შეკეთებული ნაწილის სინთეზი.

ადამიანებში დნმ-ის აღდგენის სისტემაში ძალიან მნიშვნელოვან როლს თამაშობს ტრანსკრიპციული ცილები -

რნმ პოლიმერაზა II და

TF ორშტრანსკრიფციის ექვსი ძირითადი ფაქტორიდან ერთ-ერთი ევკარიოტი.

უნდა აღინიშნოს, რომ ამოკვეთის შეკეთება პროკარიოტებში, ისევე როგორც ევკარიოტებში, დამოკიდებულია დნმ-ის ფუნქციურ მდგომარეობაზე:

გადაწერილი დნმ უფრო სწრაფად აღდგება

ვიდრე ტრანსკრიპციულად უმოქმედო.

ეს ფენომენი აიხსნება შემდეგი ფაქტორებით:

ქრომატინის სტრუქტურა,

ტრანსკრიბირებული დნმ-ის რეგიონების ჯაჭვების ჰომოლოგია,

ჯაჭვის დაზიანების ეფექტი და მისი გავლენა რნმ პოლიმერაზაზე.

ᲛᲜᲘᲨᲕᲜᲔᲚᲝᲕᲐᲜᲘ ᲩᲐᲜᲐᲬᲔᲠᲘ:

კოდირების ჯაჭვი დნმ (ინფორმაციის შენახვის ჯაჭვი)

დნმ-ის მატრიქსის ჯაჭვი (ინფორმაცია ჩამოწერილია მისგან)

ცნობილია, რომ ისეთი დიდი ზარალი, როგორიც თიმინის დიმერის წარმოქმნა, დაბლოკოს ტრანსკრიფცია როგორც ბაქტერიებში, ასევე ადამიანებში, თუ ისინი მოხდება მატრიცული წრედნმ (დაზიანება კოდირებაჯაჭვები არ იმოქმედოსტრანსკრიფციის კომპლექსამდე). რნმ პოლიმერაზა ჩერდება დნმ-ის დაზიანების ადგილზე და ბლოკავს ტრანსკრიფციის კომპლექსის მუშაობას.

ტრანსკრიფცია-აღდგენის კავშირის ფაქტორი (TRCF) .

E. coli-ში, ტრანსკრიპციული აღდგენის გაძლიერება ხდება ერთი სპეციალური პროტეინის საშუალებით -ტრანსკრიფცია-აღდგენის კავშირის ფაქტორი (TRCF) .

ეს ცილა ხელს უწყობს :

1. რნმ პოლიმერაზას გამოყოფა დნმ-დან

2. ერთდროულად ასტიმულირებს ცილის კომპლექსის წარმოქმნას,

დაზიანებული უბნის შეკეთების განხორციელება.

შეკეთების ბოლოს რნმ პოლიმერაზა თავის ადგილზე ხვდება და ტრანსკრიფცია გრძელდება (იხ. ნახ.).

ასე რომ, ექსციზიური რემონტის ზოგადი სქემა

1. დნმ-ნ -გლიკოზილაზა აშორებს დაზიანებულ ფუძეს

2. AR-ენდონუკლეაზა იწვევს დნმ-ის ჯაჭვის რღვევას

3. ეგზონუკლეაზა შლის რიგ ნუკლეოტიდებს

4. დნმ პოლიმერაზა ავსებს გათავისუფლებულ ადგილს

დამატებითი ნუკლეოტიდები

5. დნმ ლიგაზა ჯვარედინად აკავშირებს შეკეთებულ დნმ-ის ჯაჭვს

დნმ-ის რეპლიკაციის შეცდომების შეკეთება

მეთილაციით

დნმ-ის რეპლიკაციის დროს აზოტოვანი ფუძეების დაწყვილების შეცდომები საკმაოდ ხშირად გვხვდება (ბაქტერიებში 10 ათას ნუკლეოტიდზე ერთხელ), რის შედეგადაცშევიდა ქალიშვილური დნმ-ის ჯაჭვში შედის ნუკლეოტიდები, რომლებიც არ ავსებენ დედის ჯაჭვის ნუკლეოტიდებს -შეუსაბამობები(ინგლისური შეუსაბამობა n ე მატჩი).

მიუხედავად იმისადნმ პოლიმერაზა Iპროკარიოტს აქვს თვითგამოსწორების უნარი, მისი ძალისხმევა შეცდომით მიმაგრებული ნუკლეოტიდების აღმოსაფხვრელად. ზოგჯერ არ არის საკმარისიდა შემდეგ დნმ-ში რჩება რამდენიმე არასწორი (არაკომპლიმენტური) წყვილი.

ამ შემთხვევაში, რეპარაცია ხდება კონკრეტული სისტემის გამოყენებით, რომელიც დაკავშირებულიადნმ-ის მეთილაცია . ამ სარემონტო სისტემის მოქმედება ეფუძნება იმ ფაქტს, რომ რეპლიკაციის შემდეგ, გარკვეული დროის (რამდენიმე წუთის) შემდეგ, დნმ განიცდის მეთილაციას.

E. coli მეთილირებულიძირითადად ადენინი განათლებით

N6-მეთილ-ადენინი (N6-mA).

ამ დრომდე, ახლად სინთეზირებული(შვილობილი)ჯაჭვი რჩება არამეთილირებული.

თუ ასეთ ჯაჭვში არის დაუწყვილებელი ნუკლეოტიდები, მაშინ იგი ექვემდებარება შეკეთებას: ამრიგადმეთილაციის ნიშნები დნმ და

შეიცავს შეცდომის გამოსწორების სისტემას რეპლიკაცია.

ამ რეპარაციის სისტემაში აღიარებულია სპეციალური სტრუქტურები:

შემდგომი მიმდევრობაG-N6-mA-T-Cდა შემდეგიმის უკან დეფორმაცია

ორმაგ სპირალში კომპლემენტარობის ნაკლებობის ადგილზე (სურათი ქვემოთ).

დაუწყვილებელი ნუკლეოტიდების ელიმინაციაში ნახევრად მეთილირებულიაღდგენითი ფერმენტების საკმაოდ რთული კომპლექსი მონაწილეობს დნმ-ის მოლეკულაში, რომელიც სკანირებს დნმ-ის მოლეკულის ზედაპირს,ჭრის ბავშვის ჯაჭვის ნაწილს მიმართავს შეუსაბამობა, და შემდეგ ქმნის პირობებს მშენებლობისთვის

მისი სასურველი (შემავსებელი) ნუკლეოტიდები.

ამ კომპლექსის სხვადასხვა კომპონენტს განსხვავებული აქტივობა აქვს.ნუკლეაზა,

ჰელიკაზა,

ATPaznoy,

აუცილებელია დნმ-ში რღვევების შესატანად და ნუკლეოტიდების დაშლაში, დნმ-ის ორმაგი სპირალის გახსნისთვის და მოლეკულის აღდგენილი ნაწილის გასწვრივ კომპლექსის გადაადგილებისთვის ენერგიის უზრუნველსაყოფად.

აღდგენითი ფერმენტების კომპლექსი სტრუქტურითა და ფუნქციებით მსგავსი იყო ადამიანებშიც.

რეკომბინანტული (პოსტ-რეპლიკაციული) შეკეთება

იმ შემთხვევებში, როდესაც, ამა თუ იმ მიზეზით, დარღვეულია ზემოაღნიშნული სარემონტო სისტემები, დნმ-ის ჯაჭვებში შეიძლება წარმოიქმნას ხარვეზები (არასათანადო გარემონტებული ადგილები). ზოგჯერ საკმაოდ მნიშვნელოვანი, რომელიც სავსეა რეპლიკაციის სისტემის დარღვევით და შეიძლება გამოიწვიოს უჯრედების სიკვდილი.

ამ შემთხვევაში, უჯრედს შეუძლია გამოიყენოს ერთი დნმ-ის მოლეკულის აღსადგენად სხვა დნმ-ის მოლეკულა, რომელიც მიღებულია რეპლიკაციის შემდეგ, ანუ ამ მიზნით ჩართოს მექანიზმი.რეკომბინაცია.

ბაქტერიებში

ბაქტერიებში მონაწილეობს რეკომბინანტული შეკეთებაRec A ცილა. ის უერთდება ერთჯაჭვიან დნმ-ს და აერთიანებს მას რეკომბინაციაშისხვა დნმ-ის მოლეკულის ხელუხლებელი ჯაჭვების ჰომოლოგიური რეგიონები .

შედეგად, დნმ-ის მოლეკულის როგორც გატეხილი (შემცველი ხარვეზები) ისე ხელუხლებელი ჯაჭვები აღმოჩნდება. დაწყვილებულიხელუხლებელი დამატებითი დნმ რეგიონებით, რაც ხსნის ზემოაღწერილი სისტემებით შეკეთების შესაძლებლობას.

ამავე დროს, შეიძლება იყოს ჭრისკონკრეტული ფრაგმენტი და

შევსებამისი დახმარებით ხარვეზები დეფექტურ ჯაჭვში.

დნმ-ის ჯაჭვებში წარმოქმნილი ხარვეზები და წყვეტები ივსება მონაწილეობითდნმ პოლიმერაზა I და დნმ ლიგაზა .

SOS რეპარაცია

ამ სისტემის არსებობა პირველად მ. რადმანმა 1974 წელს გამოაცხადა. მან ასევე დაარქვა ამ მექანიზმს სახელწოდება მასში საერთაშორისო უბედურების სიგნალის "SOS" (გადავარჩინოთ ჩვენი სულები) ჩართვის გზით.

მართლაც, ეს სისტემა ჩაირთვება როდის დნმ-ის დაზიანება იმდენად დიდი ხდება, რომ საფრთხეს უქმნის უჯრედის სიცოცხლეს. ამ შემთხვევაში, დნმ-ის შეკეთებასთან დაკავშირებულ სხვადასხვა უჯრედულ პროცესებში ჩართული გენების მრავალფეროვანი ჯგუფის აქტივობა ინდუცირებულია.

გარკვეული გენების ჩართვა, რომელიც განისაზღვრება დნმ-ში დაზიანების რაოდენობით, იწვევს სხვადასხვა მნიშვნელობის უჯრედულ პასუხებს (სტანდარტით დაწყებული დაზიანებულის აღდგენანუკლეოტიდები და დასასრული ჩახშობაუჯრედების გაყოფა).

ყველაზე შესწავლილიSOS რეპარაციაE. coli-ში, რომლის ძირითადი მონაწილეები არიან კოდირებული ცილები გენები Rec Aდალექს ა.

პირველი არის მრავალფუნქციურიRec A ცილამონაწილეობს

ვ დნმ-ის რეკომბინაცია, და

ვ გენის ტრანსკრიფციის რეგულირება ფაგი ლამბდარომელიც აინფიცირებს E. coli-ს,

და მეორე (Lex A ცილა)არის რეპრესორიგენების დიდი ჯგუფის ტრანსკრიფცია, რომელიც განკუთვნილია დნმ-ის შეკეთებაბაქტერიები. როდესაც ის დათრგუნულია ან მოგვარებულია რემონტი გააქტიურებულია.

სავალდებულოა Rec A Lex A-სთან ერთადიწვევს ამ უკანასკნელის გაყოფამდედა შესაბამისად სარემონტო გენების გააქტიურება.

თავის მხრივ, ბაქტერიული SOS სისტემის ინდუქცია ემსახურებაფაგი ლამბდა საფრთხის სიგნალიდა იწვევს პროფაგის გადართვას პასიური აქტიური (ლიზური) გზაარსებობა, რითაც იწვევს მასპინძელი უჯრედის სიკვდილი.

SOS სარემონტო სისტემა აღმოაჩინეს არა მხოლოდ ბაქტერიებში, არამედ ცხოველებსა და ადამიანებშიც.

გენები ჩართული SOS დნმ-ის დაზიანების გამოსწორებაში

გენები	გენის აქტივაციის შედეგები
uvr A, B, C, D	დნმ-ის მეორადი სტრუქტურის დაზიანების აღდგენა
Rec A	რეპლიკაციის შემდგომი შეკეთება, SOS სისტემის ინდუქციები
lex A	SOS სისტემის გამორთვა
rec N, ruv	ორმაგი ძაფების შესვენების შეკეთება
	რეკომბინაციის შეკეთების უზრუნველყოფა
უმუ C, D	დნმ პოლიმერაზას თვისებების ცვლილებებით გამოწვეული მუტაგენეზი
სულ ა	უჯრედების გაყოფის ჩახშობა

დასკვნა

დნმ-ის დაზიანების გამოსწორება მჭიდრო კავშირშია სხვა ფუნდამენტურ მოლეკულურ გენეტიკურ პროცესებთან: რეპლიკაცია, ტრანსკრიფცია და რეკომბინაცია.ყველა ეს პროცესი არის ერთმანეთში გადახლართულიურთიერთქმედების საერთო სისტემაში, რომელსაც ემსახურება მრავალფეროვანი ცილების დიდი რაოდენობა, რომელთაგან ბევრი პოლიფუნქციური მოლეკულაა, რომელიც მონაწილეობს გენეტიკური ინფორმაციის დანერგვის კონტროლიპრო- და ევკარიოტულ უჯრედებში. ამავე დროს ცხადია, რომ ბუნება "ნუ დაზოგავ"საკონტროლო ელემენტებზე, დნმ-ში იმ დაზიანებების გამოსასწორებლად ყველაზე რთულ სისტემებზე, რომლებიც საშიშიაორგანიზმისთვის და განსაკუთრებით მისი შთამომავლობისთვის. მეორე მხრივ, იმ შემთხვევებში, როდესაც რეპარაციული შესაძლებლობები არ არის საკმარისი ორგანიზმის გენეტიკური სტატუსის შესანარჩუნებლად, საჭიროა უჯრედების დაპროგრამებული სიკვდილი -აპოპტოზი..

ნუკლეოტიდის ამოკვეთის შეკეთების სქემა IN ე. COLIEXINUCLEASE-ის მონაწილეობით

1. ტრანსკრიპციულად დამოუკიდებელი მექანიზმი

2. ტრანსკრიპციაზე დამოკიდებული მექანიზმი

3. რემონტის ზოგადი ეტაპი

სიმბოლოები

A - ცილაuvr ა

B - ცილაuvr IN

C - ცილაuvr თან

პატარა შავი სამკუთხედი - ნიშანი მიუთითებს დაზიანების ადგილმდებარეობაზე

შეკეთების სქემა ასოცირებული დნმ-ის მეთილაციასთან