Περί έγκρισης των κατευθυντήριων γραμμών για την επικύρωση αναλυτικών μεθόδων δοκιμής φαρμάκων. Όριο ποσοτικοποίησης Επικύρωση μεθόδου ποσοτικού προσδιορισμού σε υδατικά διαλύματα

ΥΠΟΥΡΓΕΙΟ ΥΓΕΙΑΣ ΤΗΣ ΡΩΣΙΚΗΣ ΟΜΟΣΠΟΝΔΙΑΣ

ΓΕΝΙΚΗ ΦΑΡΜΑΚΟΠΕΙΑΚΗ ΕΞΟΥΣΙΟΔΟΤΗΣΗ

Επικύρωση αναλυτικών διαδικασιών ΟΦΣ.1.1.0012.15

Παρουσιάστηκε για πρώτη φορά

Η επικύρωση μιας αναλυτικής τεχνικής είναι η πειραματική απόδειξη ότι η τεχνική είναι κατάλληλη για την επίλυση των επιδιωκόμενων προβλημάτων.

Αυτή η Μονογραφία της Γενικής Φαρμακοποιίας ρυθμίζει τα χαρακτηριστικά των αναλυτικών μεθόδων που προσδιορίζονται για τους σκοπούς της επικύρωσής τους και τα αντίστοιχα κριτήρια για την καταλληλότητα των επικυρωμένων μεθόδων που προορίζονται για τον ποιοτικό έλεγχο των φαρμακευτικών προϊόντων: φαρμακευτικές ουσίες και φαρμακευτικά προϊόντα.

Οι μέθοδοι ποσοτικού προσδιορισμού, συμπεριλαμβανομένων των μεθόδων για τον προσδιορισμό των προσμείξεων και των μεθόδων για τον προσδιορισμό του ορίου περιεκτικότητας, υπόκεινται σε επικύρωση. Οι μέθοδοι ελέγχου ταυτότητας επικυρώνονται εάν είναι απαραίτητο για να επιβεβαιωθεί η ειδικότητά τους.

Κατά την επικύρωση, η αναλυτική μέθοδος αξιολογείται σύμφωνα με τα χαρακτηριστικά που αναφέρονται παρακάτω, επιλέγονται λαμβάνοντας υπόψη τις τυπικές συστάσεις που δίνονται στον πίνακα:

• ειδικότητα?
• όριο ανίχνευσης;
• όριο ποσοτικού προσδιορισμού (ποσοτικό όριο).
• αναλυτική περιοχή (εύρος)·
• γραμμικότητα (γραμμικότητα);
• ορθότητα (αλήθεια)?
• ακρίβεια (ακρίβεια);
• σταθερότητα (στιβαρότητα).

Πίνακας 1 — Χαρακτηριστικά των μεθόδων που προσδιορίστηκαν κατά την επικύρωση

Ονομα Χαρακτηριστικά	Κύριοι τύποι τεχνικών
	Δοκιμή γνησιότητας	Ξένο θέμα		ποσοτικοποίηση
		Ποσοτικές μέθοδοι	Όριο περιεχομένου	Η κύρια δραστική ουσία, τυποποιημένα συστατικά	Δραστικό συστατικό στο τεστ «Διάλυση».
Ιδιαιτερότητα **)	Ναί	Ναί	Ναί	Ναί	Ναί
Όριο ανίχνευσης	Δεν	Δεν	Ναί	Δεν	Δεν
Όριο Ποσοτικοποίησης	Δεν	Ναί	Δεν	Δεν	Δεν
Αναλυτική περιοχή	Δεν	Ναί	Δεν	Ναί	Ναί
Γραμμικότητα	Δεν	Ναί	Δεν	Ναί	Ναί
σωστά	Δεν	Ναί	*	Ναί	Ναί
ακρίβεια : – επαναληψιμότητα (σύγκλιση) – ενδιάμεσο (ενδοεργαστηριακή) ακρίβεια
Βιωσιμότητα	Δεν	*	*	*	*

*) μπορεί να προσδιοριστεί εάν είναι απαραίτητο.

**) η έλλειψη ειδικότητας μιας αναλυτικής μεθόδου μπορεί να αντισταθμιστεί με τη χρήση άλλης αναλυτικής μεθόδου.

Η επανεπικύρωση (επανεπικύρωση) των μεθόδων πραγματοποιείται όταν:

• τεχνολογίες για την απόκτηση του αντικειμένου ανάλυσης·
• σύνθεση του φαρμακευτικού προϊόντος (αντικείμενο ανάλυσης)·
• προηγουμένως εγκεκριμένη μεθοδολογία ανάλυσης.

1. Ιδιαιτερότητα

Η ειδικότητα είναι η ικανότητα μιας αναλυτικής διαδικασίας να αξιολογεί αναμφισβήτητα μια αναλυόμενη ουσία παρουσία συνοδών συστατικών.

Η απόδειξη της ειδικότητας μιας επικυρωμένης τεχνικής βασίζεται συνήθως στην εξέταση των δεδομένων που λαμβάνονται με τη χρήση της από την ανάλυση μοντέλων μειγμάτων γνωστής σύνθεσης.

Η ιδιαιτερότητα μιας επικυρωμένης τεχνικής μπορεί επίσης να αποδειχθεί με κατάλληλη στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτων των αναλύσεων πραγματικών αντικειμένων που εκτελούνται χρησιμοποιώντας αυτήν και, παράλληλα, με χρήση άλλης, προφανώς συγκεκριμένης, τεχνικής (τεχνική της οποίας η ειδικότητα έχει αποδειχθεί).

1.1 Για διαδικασίες ελέγχου ταυτότητας

Μια επικυρωμένη μέθοδος (ή ένα σύνολο μεθόδων) θα πρέπει να παρέχει αξιόπιστες πληροφορίες σχετικά με την παρουσία μιας δεδομένης δραστικής ουσίας σε μια ουσία ή μια δοσολογική μορφή, εάν περιέχει τα συστατικά που προβλέπονται στο σκεύασμα, το οποίο υπόκειται σε πειραματική επιβεβαίωση.

Η γνησιότητα της δραστικής ουσίας στη φαρμακευτική ουσία ή το φαρμακευτικό προϊόν διαπιστώνεται σε σύγκριση με ένα πρότυπο δείγμα ή από φυσικοχημικές ή χημικές ιδιότητες που δεν είναι χαρακτηριστικές άλλων συστατικών.

1.2 Για διαδικασίες ποσοτικοποίησης και δοκιμών ακαθαρσιών

Για μια επικυρωμένη μέθοδο ποσοτικού προσδιορισμού και δοκιμή για ακαθαρσίες, χρησιμοποιούνται οι ίδιες προσεγγίσεις - πρέπει να αξιολογηθεί η ειδικότητά της σε σχέση με την αναλυόμενη ουσία, δηλαδή πρέπει να επιβεβαιωθεί πειραματικά ότι η παρουσία συνοδευτικών συστατικών δεν επηρεάζει το αποτέλεσμα της ανάλυσης σε ανεπιθύμητη τρόπος.

Επιτρέπεται η αξιολόγηση της ειδικότητας της επικυρωμένης μεθόδου τόσο με την ανάλυση μιγμάτων μοντέλων γνωστής σύνθεσης που περιέχουν την αναλυόμενη ουσία όσο και με τη σύγκριση των αποτελεσμάτων των αναλύσεων πραγματικών αντικειμένων που λαμβάνονται ταυτόχρονα με τη χρήση των επικυρωμένων και άλλων, προφανώς ειδικών, μεθόδων. Τα αποτελέσματα των σχετικών πειραμάτων θα πρέπει να υποβάλλονται σε στατιστική επεξεργασία.

Η έλλειψη εξειδίκευσης της δοκιμής μπορεί να αντισταθμιστεί με μια άλλη πρόσθετη(ες) δοκιμή(ες).

Κατά την επικύρωση των μεθόδων, εάν χρειάζεται, μπορούν να χρησιμοποιηθούν δείγματα φαρμακευτικών προϊόντων που υποβάλλονται σε ακραίες συνθήκες (φως, θερμοκρασία, υγρασία) ή έχουν τροποποιηθεί χημικά με οποιονδήποτε κατάλληλο τρόπο για τη συσσώρευση ακαθαρσιών σε αυτά.

Για χρωματογραφικές τεχνικές, δείξτε την ανάλυση μεταξύ των δύο ουσιών που εκλούουν περισσότερο στις αντίστοιχες συγκεντρώσεις.

1. ΟΡΙΟ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗΣ

Το όριο ανίχνευσης είναι η μικρότερη ποσότητα (συγκέντρωση) μιας αναλυόμενης ουσίας σε ένα δείγμα που μπορεί να ανιχνευθεί (ή να προσεγγιστεί) χρησιμοποιώντας μια επικυρωμένη τεχνική.

Το όριο ανίχνευσης στις περιπτώσεις που αναφέρονται στον πίνακα εκφράζεται συνήθως ως συγκέντρωση της αναλυόμενης ουσίας (σε % σχετική ή μέρη ανά εκατομμύριο - ppm).

Ανάλογα με τον τύπο της τεχνικής (οπτική ή ενόργανη), χρησιμοποιούνται διαφορετικές μέθοδοι για τον προσδιορισμό του ορίου ανίχνευσης.

2.1 Για μεθόδους με οπτική αξιολόγηση του αποτελέσματος της ανάλυσης

Δοκιμάστε δείγματα με διάφορες γνωστές ποσότητες (συγκεντρώσεις) της αναλυόμενης ουσίας και καθορίστε την ελάχιστη τιμή στην οποία το αποτέλεσμα της ανάλυσης μπορεί να αξιολογηθεί οπτικά. Αυτή η τιμή είναι μια εκτίμηση του ορίου ανίχνευσης.

2.2 Για μεθόδους με οργανική αξιολόγηση του αποτελέσματος της ανάλυσης

2.2.1 Με αναλογία σήματος προς θόρυβο

Αυτή η προσέγγιση εφαρμόζεται σε μεθόδους για τις οποίες παρατηρείται θόρυβος βάσης. Συγκρίνετε τις τιμές σήματος που ελήφθησαν για το πείραμα ελέγχου και για δείγματα με χαμηλές συγκεντρώσεις της αναλυόμενης ουσίας. Ρυθμίστε την ελάχιστη ποσότητα (συγκέντρωση) της αναλυόμενης ουσίας στο δείγμα, στην οποία ο λόγος του αναλυτικού σήματος προς το επίπεδο θορύβου είναι ίσος με 3.

Η τιμή που βρέθηκε είναι μια εκτίμηση του ορίου ανίχνευσης.

2.2.2 Με την τιμή της τυπικής απόκλισης του σήματος και την κλίση της καμπύλης βαθμονόμησης

Το όριο ανίχνευσης (LO) βρίσκεται από την εξίσωση:

ON = 3,3 μικρό/σι,

όπου μικρό

σιείναι ο συντελεστής ευαισθησίας, ο οποίος είναι ο λόγος του αναλυτικού σήματος προς την καθορισμένη τιμή (η εφαπτομένη της κλίσης της καμπύλης βαθμονόμησης).

μικρόκαι σι

μικρό ΑΝΩΝΥΜΗ ΕΤΑΙΡΙΑελεύθερος όρος της εξίσωσης αυτού του γραφήματος. Η λαμβανόμενη τιμή του ορίου ανίχνευσης, εάν είναι απαραίτητο, μπορεί να επιβεβαιωθεί με άμεσο πείραμα σε ποσότητες (συγκεντρώσεις) της αναλυόμενης ουσίας κοντά στην ευρεθείσα τιμή του ορίου ανίχνευσης.

Κατά κανόνα, εάν υπάρχουν στοιχεία για την καταλληλότητα μιας μεθόδου για τον αξιόπιστο προσδιορισμό μιας ουσίας σε συγκεντρώσεις τόσο πάνω όσο και κάτω από το όριο περιεκτικότητάς της που καθορίζεται από την προδιαγραφή, δεν απαιτείται να καθοριστεί το πραγματικό όριο ανίχνευσης για μια τέτοια μέθοδο .

1. ΟΡΙΟ ΠΟΣΟΤΙΚΟΤΗΤΑΣ

Το όριο ποσοτικοποίησης είναι η μικρότερη ποσότητα (συγκέντρωση) μιας ουσίας σε ένα δείγμα που μπορεί να ποσοτικοποιηθεί χρησιμοποιώντας μια επικυρωμένη μέθοδο με την απαιτούμενη ακρίβεια και ακρίβεια εντός του εργαστηρίου (ενδιάμεση).

Το όριο ποσοτικοποίησης είναι ένα απαραίτητο χαρακτηριστικό επικύρωσης των διαδικασιών που χρησιμοποιούνται για την αξιολόγηση μικρών ποσοτήτων (συγκεντρώσεων) ουσιών σε ένα δείγμα και, ειδικότερα, για την αξιολόγηση της περιεκτικότητας σε προσμείξεις.

Ανάλογα με τον τύπο της τεχνικής, χρησιμοποιούνται οι ακόλουθες μέθοδοι για την εύρεση του ορίου ποσοτικοποίησης.

3.1 Για μεθόδους με οπτική αξιολόγηση του αποτελέσματος της ανάλυσης

Δοκιμάστε δείγματα με διάφορες γνωστές ποσότητες (συγκεντρώσεις) της αναλυόμενης ουσίας και καθορίστε την ελάχιστη τιμή στην οποία το αποτέλεσμα της ανάλυσης μπορεί να ληφθεί οπτικά με την απαιτούμενη ακρίβεια και ενδοεργαστηριακή (ενδιάμεση) ακρίβεια.

3.2 Για μεθόδους με οργανική αξιολόγηση του αποτελέσματος της ανάλυσης

3.2.1 Λόγος σήματος προς θόρυβο

Ρυθμίστε την ελάχιστη συγκέντρωση της αναλυόμενης ουσίας στο δείγμα, στην οποία η αναλογία του αναλυτικού σήματος προς το επίπεδο θορύβου είναι περίπου 10:1.

3.2.2 Με την τιμή της τυπικής απόκλισης του σήματος και την κλίση της καμπύλης βαθμονόμησης

Το όριο ποσοτικοποίησης (LOQ) υπολογίζεται χρησιμοποιώντας την εξίσωση:

FSP = 10 μικρό/σι,

όπου μικρόείναι η τυπική απόκλιση του αναλυτικού σήματος.

σιείναι ο συντελεστής ευαισθησίας, ο οποίος είναι ο λόγος του αναλυτικού σήματος προς την καθορισμένη τιμή.

Παρουσία πειραματικών δεδομένων σε ένα ευρύ φάσμα μετρούμενων τιμών μικρόκαι σιμπορεί να υπολογιστεί με τη μέθοδο των ελαχίστων τετραγώνων.

Για ένα διάγραμμα γραμμικής βαθμονόμησης, η τιμή μικρόλαμβάνεται ίση με την τυπική απόκλιση ΑΝΩΝΥΜΗ ΕΤΑΙΡΙΑελεύθερος όρος της εξίσωσης αυτού του γραφήματος. Η λαμβανόμενη τιμή του ορίου ποσοτικού προσδιορισμού, εάν είναι απαραίτητο, μπορεί να επιβεβαιωθεί με άμεσο πείραμα σε ποσότητες (συγκεντρώσεις) της αναλυόμενης ουσίας κοντά στην ευρεθείσα τιμή του ορίου ποσοτικού προσδιορισμού.

Εάν υπάρχουν ενδείξεις για την ικανότητα μιας μεθόδου να ανιχνεύει αξιόπιστα μια αναλυόμενη ουσία σε συγκεντρώσεις πάνω και κάτω από το όριο προδιαγραφής της, συνήθως δεν είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί η πραγματική τιμή του ορίου ποσοτικοποίησης για μια τέτοια μέθοδο.

1. ΑΝΑΛΥΤΙΚΟ ΠΕΔΙΟ ΤΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ

Η αναλυτική περιοχή της τεχνικής είναι το διάστημα μεταξύ των ανώτερων και κατώτερων τιμών των αναλυτικών χαρακτηριστικών του καθορισμένου συστατικού στο αντικείμενο ανάλυσης (την ποσότητα, τη συγκέντρωση, τη δραστηριότητά του κ.λπ.). Εντός αυτού του εύρους, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται χρησιμοποιώντας τη μέθοδο που επικυρώνεται θα πρέπει να έχουν αποδεκτό επίπεδο ακρίβειας και ακρίβειας εντός του εργαστηρίου (ενδιάμεση).

Οι ακόλουθες απαιτήσεις επιβάλλονται στο μέγεθος της αναλυτικής περιοχής των μεθόδων:

– οι μέθοδοι ποσοτικού προσδιορισμού θα πρέπει να εφαρμόζονται στην περιοχή από 80 έως 120% της ονομαστικής τιμής του καθορισμένου αναλυτικού χαρακτηριστικού·

- οι μέθοδοι για την αξιολόγηση της ομοιομορφίας της δόσης θα πρέπει να εφαρμόζονται στην περιοχή από 70 έως 130% της ονομαστικής δόσης.

- οι μέθοδοι ποσοτικού προσδιορισμού που χρησιμοποιούνται στη δοκιμή διάλυσης θα πρέπει γενικά να εφαρμόζονται εντός της περιοχής από 50 έως 120% της αναμενόμενης συγκέντρωσης της δραστικής ουσίας στο μέσο διάλυσης.

- οι μέθοδοι δοκιμών για την καθαρότητα θα πρέπει να εφαρμόζονται στην περιοχή από το "Όριο ποσοτικού προσδιορισμού" ή "Όριο ανίχνευσης" έως το 120% της επιτρεπόμενης περιεκτικότητας της προσδιοριζόμενης ακαθαρσίας.

Ο αναλυτικός τομέας της τεχνικής μπορεί να οριστεί από το εύρος των πειραματικών δεδομένων που ικανοποιεί το γραμμικό μοντέλο.

1. ΓΡΑΜΜΙΚΟΤΗΤΑ

Η γραμμικότητα της τεχνικής είναι η παρουσία μιας γραμμικής εξάρτησης του αναλυτικού σήματος από τη συγκέντρωση ή την ποσότητα της αναλυόμενης ουσίας στο αναλυόμενο δείγμα εντός της αναλυτικής περιοχής της τεχνικής.

Κατά την επικύρωση μιας μεθόδου, η γραμμικότητά της στην αναλυτική περιοχή επαληθεύεται πειραματικά με μέτρηση αναλυτικών σημάτων για τουλάχιστον 5 δείγματα με διαφορετικές ποσότητες ή συγκεντρώσεις της αναλυόμενης ουσίας. Τα πειραματικά δεδομένα επεξεργάζονται με τη μέθοδο των ελαχίστων τετραγώνων χρησιμοποιώντας ένα γραμμικό μοντέλο:

y = σι · Χ + ένα,

Χ- την ποσότητα ή τη συγκέντρωση της αναλυόμενης ουσίας.

yείναι το μέγεθος της απόκρισης.

σι- γωνιακός συντελεστής.

ένα- ελεύθερος όρος (OFS "Στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτων ενός χημικού πειράματος").

Οι τιμές πρέπει να υπολογίζονται και να παρουσιάζονται. σι, ένακαι συντελεστής συσχέτισης r. Στις περισσότερες περιπτώσεις, χρησιμοποιούνται γραμμικές εξαρτήσεις που πληρούν την συνθήκη 0,99 και μόνο όταν αναλύονται ίχνη, λαμβάνονται υπόψη γραμμικές εξαρτήσεις, για τις οποίες 0,9.

Σε ορισμένες περιπτώσεις, η δυνατότητα γραμμικής προσέγγισης των πειραματικών δεδομένων παρέχεται μόνο μετά τον μαθηματικό μετασχηματισμό τους (για παράδειγμα, με τη λήψη λογαρίθμων).

Για ορισμένες μεθόδους ανάλυσης, οι οποίες κατ' αρχήν δεν μπορούν να βασιστούν σε μια γραμμική σχέση μεταξύ πειραματικών δεδομένων, ο προσδιορισμός της συγκέντρωσης ή της ποσότητας μιας ουσίας πραγματοποιείται με τη χρήση μη γραμμικών γραφημάτων βαθμονόμησης. Στην περίπτωση αυτή, η γραφική παράσταση της εξάρτησης του αναλυτικού σήματος από την ποσότητα ή τη συγκέντρωση της αναλυόμενης ουσίας μπορεί να προσεγγιστεί με μια κατάλληλη μη γραμμική συνάρτηση χρησιμοποιώντας τη μέθοδο ελαχίστων τετραγώνων, η οποία είναι εφικτή με το κατάλληλο επικυρωμένο λογισμικό.

1. ΣΩΣΤΑ

Η ορθότητα της τεχνικής χαρακτηρίζεται από την απόκλιση του μέσου αποτελέσματος των προσδιορισμών που έγιναν με τη χρήση της από την τιμή που λαμβάνεται ως αληθής.

Μια επικυρωμένη τεχνική αναγνωρίζεται ως σωστή εάν οι τιμές που λαμβάνονται ως αληθείς βρίσκονται εντός των διαστημάτων εμπιστοσύνης των αντίστοιχων μέσων αποτελεσμάτων των αναλύσεων που λαμβάνονται πειραματικά χρησιμοποιώντας αυτήν την τεχνική.

Οι ακόλουθες προσεγγίσεις ισχύουν για την αξιολόγηση της εγκυρότητας των διαδικασιών ποσοτικοποίησης:

α) ανάλυση με χρήση επικυρωμένης μεθόδου τυπικών δειγμάτων ή μιγμάτων μοντέλων με γνωστή περιεκτικότητα (συγκέντρωση) της αναλυόμενης ουσίας·

β) σύγκριση των αποτελεσμάτων που προέκυψαν χρησιμοποιώντας την επικυρωμένη μέθοδο και την υποδειγματική μέθοδο, η ορθότητα της οποίας έχει προηγουμένως διαπιστωθεί·

γ) εξέταση των αποτελεσμάτων της μελέτης της γραμμικότητας της επικυρωμένης μεθοδολογίας: εάν ο ελεύθερος όρος στην εξίσωση που δίνεται στην ενότητα 5 δεν διαφέρει στατιστικά σημαντικά από το μηδέν, τότε η χρήση μιας τέτοιας μεθοδολογίας δίνει αποτελέσματα απαλλαγμένα από συστηματικό σφάλμα.

Για τις προσεγγίσεις "a" και "b" είναι δυνατό να παρουσιαστούν τα ληφθέντα δεδομένα με τη μορφή μιας γραμμικής εξίσωσης εξάρτησης (παλίνδρομο) μεταξύ πειραματικά ευρεθέντων και πραγματικών τιμών. Για αυτήν την εξίσωση, ελέγχονται οι υποθέσεις σχετικά με την ισότητα της εφαπτομένης της γωνίας κλίσης στη μονάδα σικαι στην ισότητα προς το μηδέν του ελεύθερου όρου ένα. Κατά κανόνα, εάν αυτές οι υποθέσεις αναγνωρίζονται ως αληθείς με βαθμό αξιοπιστίας ίσο με 0,05, τότε η χρήση μιας επικυρωμένης μεθοδολογίας δίνει σωστά, δηλαδή απαλλαγμένα από συστηματικά σφάλματα, αποτελέσματα.

1. ΑΚΡΙΒΕΙΑ

Η ακρίβεια μιας τεχνικής χαρακτηρίζεται από τη διασπορά των αποτελεσμάτων που λαμβάνονται με τη χρήση της σε σχέση με την τιμή του μέσου αποτελέσματος. Ένα μέτρο τέτοιας διασποράς είναι η τιμή της τυπικής απόκλισης του αποτελέσματος ενός μεμονωμένου προσδιορισμού, που λαμβάνεται για ένα δείγμα επαρκώς μεγάλου μεγέθους.

Η ακρίβεια αξιολογείται για οποιαδήποτε διαδικασία ποσοτικοποίησης με τουλάχιστον τρεις προσδιορισμούς για καθένα από τα τρία επίπεδα αναλυτών (χαμηλό, μεσαίο και υψηλό) που βρίσκονται εντός του αναλυτικού εύρους της μεθόδου. Η επαναληψιμότητα μπορεί επίσης να εκτιμηθεί για οποιαδήποτε τεχνική ανάλυσης από τουλάχιστον έξι προσδιορισμούς για δείγματα με σχεδόν ονομαστική περιεκτικότητα σε αναλυτή. Σε πολλές περιπτώσεις, η αξιολόγηση της ακρίβειας μπορεί να πραγματοποιηθεί με βάση τα αποτελέσματα της επεξεργασίας πειραματικών δεδομένων χρησιμοποιώντας τη μέθοδο των ελαχίστων τετραγώνων, όπως υποδεικνύεται στο GPM "Στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτων ενός χημικού πειράματος".

Η ακρίβεια πρέπει να ελέγχεται σε ομοιογενή δείγματα και μπορεί να αξιολογηθεί με τρεις τρόπους:

– ως επαναληψιμότητα (σύγκλιση)·

– ως ενδοεργαστηριακή (ενδιάμεση) ακρίβεια·

– ως διεργαστηριακή ακρίβεια (αναπαραγωγιμότητα).

Τα αποτελέσματα της αξιολόγησης της μεθόδου ανάλυσης για καθεμία από τις επιλογές για ακρίβεια χαρακτηρίζονται συνήθως από την αντίστοιχη τιμή της τυπικής απόκλισης του αποτελέσματος ενός ξεχωριστού προσδιορισμού.

Συνήθως, κατά την ανάπτυξη μιας πρωτότυπης τεχνικής, προσδιορίζεται η επαναληψιμότητα (σύγκλιση) των αποτελεσμάτων που λαμβάνονται με τη χρήση της. Εάν είναι απαραίτητο να συμπεριληφθεί η αναπτυγμένη μέθοδος στην κανονιστική τεκμηρίωση, προσδιορίζεται επιπλέον η ενδοεργαστηριακή (ενδιάμεση) ακρίβειά της. Η διεργαστηριακή ακρίβεια (αναπαραγωγιμότητα) μιας μεθόδου αξιολογείται όταν υποτίθεται ότι περιλαμβάνεται σε σχέδιο γενικής μονογραφίας φαρμακοποιίας, μονογραφίας φαρμακοποιίας ή στη ρυθμιστική τεκμηρίωση για υλικά αναφοράς φαρμακοποιίας.

7.1 Επαναληψιμότητα (σύγκλιση)

Η επαναληψιμότητα μιας αναλυτικής διαδικασίας αξιολογείται από ανεξάρτητα αποτελέσματα που λαμβάνονται υπό τις ίδιες ρυθμιζόμενες συνθήκες στο ίδιο εργαστήριο (ο ίδιος εκτελεστής, ο ίδιος εξοπλισμός, το ίδιο σύνολο αντιδραστηρίων) σε σύντομο χρονικό διάστημα.

7.2 Ενδοεργαστηριακή (Ενδιάμεση) Ακρίβεια

Η ενδοεργαστηριακή (ενδιάμεση) ακρίβεια της μεθόδου που επικυρώνεται αξιολογείται υπό τις ίδιες εργαστηριακές συνθήκες (διαφορετικές ημέρες, διαφορετικοί εκτελεστές, διαφορετικός εξοπλισμός κ.λπ.).

7.3 Διεργαστηριακή ακρίβεια (αναπαραγωγιμότητα)

Η διεργαστηριακή ακρίβεια (αναπαραγωγιμότητα) μιας επικυρωμένης μεθόδου αξιολογείται κατά τη δοκιμή σε διαφορετικά εργαστήρια.

1. ΣΤΑΘΕΡΟΤΗΤΑ

Η σταθερότητα μιας επικυρωμένης τεχνικής είναι η ικανότητα διατήρησης των χαρακτηριστικών που βρέθηκαν για αυτήν υπό βέλτιστες (ονομαστικές) συνθήκες, που δίνονται στον πίνακα, με πιθανές μικρές αποκλίσεις από αυτές τις συνθήκες ανάλυσης.

Η ευρωστία της μεθόδου δεν θα πρέπει να προσδιορίζεται σε σχέση με εύκολα ελεγχόμενες συνθήκες ανάλυσης. Αυτό μειώνει δραστικά την ανάγκη για ειδική μελέτη σταθερότητας.

Η σταθερότητα θα πρέπει να μελετάται μόνο εάν η μέθοδος που επικυρώνεται βασίζεται στη χρήση ιδιαίτερα περιβαλλοντικά ευαίσθητων μεθόδων ανάλυσης, όπως διάφοροι τύποι χρωματογραφίας και λειτουργικής ανάλυσης. Εάν είναι απαραίτητο, η αξιολόγηση της σταθερότητας της μεθοδολογίας πραγματοποιείται στο στάδιο της ανάπτυξής της. Εάν είναι πιθανή η χαμηλή σταθερότητα της τεχνικής, η καταλληλότητά της ελέγχεται χωρίς αποτυχία απευθείας στη διαδικασία της πρακτικής χρήσης.

Αναλυτική Επικύρωση Συστήματος

Η επικύρωση της καταλληλότητας ενός αναλυτικού συστήματος είναι μια επαλήθευση της εκπλήρωσης των βασικών απαιτήσεων για αυτό. Το σύστημα του οποίου η καταλληλότητα ελέγχεται είναι μια συλλογή συγκεκριμένων οργάνων, αντιδραστηρίων, προτύπων και δειγμάτων υπό ανάλυση. Οι απαιτήσεις για ένα τέτοιο σύστημα προσδιορίζονται συνήθως στη γενική μονογραφία για την αντίστοιχη αναλυτική μέθοδο. Έτσι, ο έλεγχος της καταλληλότητας του αναλυτικού συστήματος γίνεται μια διαδικασία που περιλαμβάνεται στη μέθοδο που επικυρώνεται.

Παρουσίαση των αποτελεσμάτων επικύρωσης

Το πρωτόκολλο επικύρωσης για την αναλυτική μέθοδο πρέπει να περιέχει:

– η πλήρης περιγραφή του, επαρκής για αναπαραγωγή και αντικατοπτρίζοντας όλες τις απαραίτητες συνθήκες για την εκτέλεση της ανάλυσης·

– αξιολογημένα χαρακτηριστικά·

- όλα τα πρωτογενή αποτελέσματα που συμπεριλήφθηκαν στην επεξεργασία στατιστικών δεδομένων.

– αποτελέσματα στατιστικής επεξεργασίας δεδομένων που λαμβάνονται πειραματικά κατά την ανάπτυξη ή την επαλήθευση μιας επικυρωμένης μεθοδολογίας·

- ενδεικτικά υλικά, όπως αντίγραφα χρωματογραφημάτων που λαμβάνονται με υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης ή αέρια χρωματογραφία· ηλεκτροφορογραφήματα, ηλεκτρονικά και υπέρυθρα φάσματα. φωτογραφίες ή σχέδια χρωματογραφημάτων που λαμβάνονται με χρωματογραφία λεπτής στιβάδας ή χαρτιού. Σχέδια καμπυλών ογκομέτρησης, γραφήματα βαθμονόμησης.

– συμπέρασμα σχετικά με την καταλληλότητα της μεθόδου που επικυρώνεται για συμπερίληψη στο κανονιστικό έγγραφο.

Το υλικό επικύρωσης για μεμονωμένες αναλυτικές μεθόδους θα πρέπει να παρουσιάζεται με τη μορφή συνδυασμένης έκθεσης επικύρωσης.

Κάθε οργανική μέθοδος χαρακτηρίζεται από ένα ορισμένο επίπεδο θορύβου που σχετίζεται με τις ιδιαιτερότητες της διαδικασίας μέτρησης. Επομένως, υπάρχει πάντα ένα όριο αφθονίας κάτω από το οποίο μια ουσία δεν μπορεί να ανιχνευθεί αξιόπιστα καθόλου.

Όριο ανίχνευσης C min , P - το χαμηλότερο περιεχόμενο στο οποίο μπορεί να ανιχνευθεί η παρουσία ενός στοιχείου με δεδομένη πιθανότητα εμπιστοσύνης χρησιμοποιώντας αυτή τη μέθοδο.

Το όριο ανίχνευσης μπορεί επίσης να οριστεί από το ελάχιστο αναλυτικό σήμα y min , το οποίο μπορεί να διακριθεί με σιγουριά από το σήμα του υποβάθρου του πειράματος ελέγχου.

Οι στατιστικές μέθοδοι που χρησιμοποιούν την ανισότητα Chebyshev απέδειξαν ότι το όριο ανίχνευσης μπορεί να προσδιοριστεί ποσοτικά χρησιμοποιώντας την έκφραση

Όπου το φόντο είναι η τυπική απόκλιση του αναλυτικού σήματος φόντου. S είναι ο συντελεστής ευαισθησίας (μερικές φορές ονομάζεται απλώς "ευαισθησία"), χαρακτηρίζει την απόκριση του αναλυτικού σήματος στο περιεχόμενο του στοιχείου. Ο συντελεστής ευαισθησίας είναι η τιμή της πρώτης παραγώγου της συνάρτησης βαθμονόμησης για έναν δεδομένο προσδιορισμό συγκέντρωσης. Για γραφήματα ευθύγραμμης βαθμονόμησης, αυτή είναι η εφαπτομένη της γωνίας κλίσης:

(Προσοχή: μην μπερδεύεσαι παράγοντα ευαισθησίαςμικρόσυν τυπική απόκλισημικρό!)

Υπάρχουν άλλοι τρόποι υπολογισμού του ορίου ανίχνευσης, αλλά αυτή η εξίσωση είναι η πιο συχνά χρησιμοποιούμενη.

Στην ποσοτική χημική ανάλυση, συνήθως δίνεται μια σειρά ανιχνεύσιμων περιεχομένων ή συγκεντρώσεων. Σημαίνει το εύρος τιμών των καθορισμένων περιεχομένων (συγκεντρώσεις) που προβλέπεται από αυτή τη μέθοδο και περιορίζεται από τα κατώτερα και τα ανώτερα όρια των καθορισμένων συγκεντρώσεων.

Το Analytics ενδιαφέρεται συχνότερα για το κατώτερο όριο των καθορισμένων συγκεντρώσεων Με nή περιεχόμενο Μ nσυστατικό που καθορίζεται με αυτή τη μέθοδο. Πέρα από το κατώτερο όριο καθορισμένων περιεχομένωνσυνήθως λαμβάνουν την ελάχιστη ποσότητα ή συγκέντρωση που μπορεί να προσδιοριστεί με μια σχετική τυπική απόκλιση

. .

Παράδειγμα

Η συγκέντρωση μάζας του σιδήρου στο διάλυμα προσδιορίστηκε με τη φασματοφωτομετρική μέθοδο, μετρώντας τις οπτικές πυκνότητες διαλυμάτων που χρωματίστηκαν ως αποτέλεσμα της αλληλεπίδρασης του ιόντος Fe 3+ με σουλφοσαλικυλικό οξύ. Για να κατασκευαστεί μια εξάρτηση βαθμονόμησης, μετρήθηκαν οι οπτικές πυκνότητες διαλυμάτων με αυξανόμενες (δεδομένες) συγκεντρώσεις σιδήρου που υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με σουλφοσαλικυλικό οξύ.

Οι οπτικές πυκνότητες του διαλύματος αναφοράς (πείραμα ελέγχου για αντιδραστήρια, δηλ. χωρίς την προσθήκη σιδήρου, (υπόβαθρο) ήταν 0,002, 0,000, 0,008, 0,006, 0,003.

Υπολογίζωόριο ανίχνευσης σιδήρου.

Λύση

1) Ως αποτέλεσμα των υπολογισμών με τη μέθοδο των ελαχίστων τετραγώνων (δείτε το παράδειγμα για την εργασία ελέγχου Νο. 5), λήφθηκαν οι τιμές για την κατασκευή ενός γραφήματος βαθμονόμησης.

Υπολογισμένες τιμές για τη δημιουργία γραφήματος βαθμονόμησης

2) Υπολογίζουμε τον συντελεστή ευαισθησίας, δηλαδή τον γωνιακό συντελεστή της εξάρτησης βαθμονόμησης (S) σύμφωνα με τον πίνακα.

3) Υπολογίστε τυπική απόκλιση σήματος φόντου, τι είναι 0,0032 μονάδες οπτικής πυκνότητας.

4) Το όριο ανίχνευσης θα είναι, mg / cm 3

Έλεγχος εργασίας αριθμός 6

Προσδιορίστε το όριο ανίχνευσης σιδήρου στο νερό.

Αρχικά στοιχεία : οι τιμές της οπτικής πυκνότητας του φόντου (λύση αναφοράς) κατά την κατασκευή ενός γραφήματος βαθμονόμησης για τον προσδιορισμό του σιδήρου ανήλθαν σε 0,003. 0,001; 0,007; 0,005; 0,006; 0,003; 0,001; 0,005. Οι τιμές των οπτικών πυκνοτήτων που αντιστοιχούν στις συγκεντρώσεις σιδήρου στο διάλυμα παρουσιάζονται στον πίνακα της εργασίας ελέγχου Νο. 5.

Υπολογίστε το όριο ανίχνευσης του σιδήρου σε mg/cm 3 σύμφωνα με τους συντελεστές ευαισθησίας S που υπολογίζονται με βάση τα δεδομένα που ελήφθησαν για την κατασκευή ενός γραφήματος βαθμονόμησης χρησιμοποιώντας τη μέθοδο ελαχίστων τετραγώνων κατά την εκτέλεση της εργασίας ελέγχου Νο. 5.

Όριο Ποσοτικοποίησης

"...Όριο ποσοτικού προσδιορισμού (LOQ) (σε αναλυτικούς ορισμούς): η χαμηλότερη συγκέντρωση ή μιας αναλυόμενης ουσίας σε μια αναλυόμενη ουσία που μπορεί να ποσοτικοποιηθεί με αποδεκτό επίπεδο ακρίβειας και εμπιστοσύνης, όπως μπορεί να αποδειχθεί από συνεργατικές εργαστηριακές δοκιμές ή άλλο κατάλληλο επικύρωση μεθόδου..."

Πηγή:

"ΠΡΟΪΟΝΤΑ ΤΡΟΦΙΜΩΝ. ΜΕΘΟΔΟΙ ΑΝΑΛΥΣΗΣ ΓΙΑ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΓΕΝΕΤΙΚΑ ΤΡΟΠΟΠΟΙΗΜΕΝΩΝ ΟΡΓΑΝΙΣΜΩΝ ΚΑΙ ΠΡΟΪΟΝΤΩΝ ΠΟΥ ΠΑΡΑΓΟΝΤΑΙ ΑΠΟ ΑΥΤΑ. ΓΕΝΙΚΕΣ ΑΠΑΙΤΗΣΕΙΣ ΚΑΙ ΟΡΙΣΜΟΙ. GOST R 53214-202087IS"

(εγκεκριμένο από το διάταγμα του Rostekhregulirovanie της 25ης Δεκεμβρίου 2008 N 708-st)

Επίσημη ορολογία. Akademik.ru. 2012 .

Δείτε ποιο είναι το "Limit of Quantitation" σε άλλα λεξικά:

ποσοτικό όριο- 3,7 όριο ποσοτικού προσδιορισμού [ LOQ ] δεκαπλάσια εκτίμηση της τυπικής απόκλισης της μάζας ενός δείγματος Σημείωση Η τιμή LOQ χρησιμοποιείται ως η τιμή κατωφλίου πάνω από την οποία η μάζα ... ...

όριο επαναληψιμότητας- 3,7 όριο επαναληψιμότητας Λεξικό-βιβλίο αναφοράς όρων κανονιστικής και τεχνικής τεκμηρίωσης

όριο αναπαραγωγιμότητας- 2,9 οριακή τιμή αναπαραγωγιμότητας κάτω από την οποία, με πιθανότητα 95 %, βρίσκεται η απόλυτη τιμή της διαφοράς μεταξύ δύο αποτελεσμάτων δοκιμών που λαμβάνονται υπό συνθήκες αναπαραγωγιμότητας Πηγή… Λεξικό-βιβλίο αναφοράς όρων κανονιστικής και τεχνικής τεκμηρίωσης

όριο επαναληψιμότητας (σύγκλισης). 3.11 οριακή τιμή επαναληψιμότητας η οποία, με επίπεδο εμπιστοσύνης 95 %, δεν υπερβαίνει την απόλυτη τιμή της διαφοράς μεταξύ των αποτελεσμάτων δύο μετρήσεων (ή δοκιμών) που λαμβάνονται υπό συνθήκες επαναληψιμότητας ... Λεξικό-βιβλίο αναφοράς όρων κανονιστικής και τεχνικής τεκμηρίωσης

Όριο ενδοεργαστηριακής ακρίβειας- 3.11 όριο ακρίβειας εντός του εργαστηρίου: Η απόλυτη διαφορά επέτρεψε μια υποτιθέμενη πιθανότητα P μεταξύ δύο αναλυτικών αποτελεσμάτων που ελήφθησαν υπό συνθήκες ακρίβειας εντός του εργαστηρίου. Πηγή… Λεξικό-βιβλίο αναφοράς όρων κανονιστικής και τεχνικής τεκμηρίωσης

όριο αναπαραγωγιμότητας R- 2.19.2 Όριο αναπαραγωγιμότητας R 2.19.1, 2.19.2 (Αλλαγή έκδοση, τίτλος = Αλλαγή Αρ. 1, IUS 12 2002). ... ... Λεξικό-βιβλίο αναφοράς όρων κανονιστικής και τεχνικής τεκμηρίωσης

ΜΙ 2881-2004: Σύσταση. GSI. Μέθοδοι ποσοτικής χημικής ανάλυσης. Διαδικασίες για τον έλεγχο της αποδοχής των αποτελεσμάτων της ανάλυσης- Ορολογία MI 2881 2004: Σύσταση. GSI. Μέθοδοι ποσοτικής χημικής ανάλυσης. Διαδικασίες για τον έλεγχο της αποδοχής των αποτελεσμάτων της ανάλυσης: 3.17 κρίσιμη διαφορά: Η απόλυτη διαφορά επιτρέπεται για την αποδεκτή πιθανότητα 95% μεταξύ ... ... Λεξικό-βιβλίο αναφοράς όρων κανονιστικής και τεχνικής τεκμηρίωσης

GOST R 50779.11-2000: Στατιστικές μέθοδοι. Στατιστικός ποιοτικός έλεγχος. Οροι και ορισμοί- Ορολογία GOST R 50779.11 2000: Στατιστικές μέθοδοι. Στατιστικός ποιοτικός έλεγχος. Όροι και ορισμοί πρωτότυπο έγγραφο: 3.4.3 (άνω και κάτω) όρια ρύθμισης Το όριο στον πίνακα ελέγχου, πάνω από το οποίο το ανώτατο όριο, ... ... Λεξικό-βιβλίο αναφοράς όρων κανονιστικής και τεχνικής τεκμηρίωσης

GOST R 50779.10-2000: Στατιστικές μέθοδοι. Πιθανότητες και βάσεις στατιστικών. Οροι και ορισμοί- Ορολογία GOST R 50779.10 2000: Στατιστικές μέθοδοι. Πιθανότητες και βάσεις στατιστικών. Όροι και ορισμοί πρωτότυπο έγγραφο: 2.3. (γενικό) σύνολο Το σύνολο όλων των θεωρούμενων μονάδων. Σημείωση Για μια τυχαία μεταβλητή ... ... Λεξικό-βιβλίο αναφοράς όρων κανονιστικής και τεχνικής τεκμηρίωσης

RMG 61-2003: Κρατικό σύστημα για τη διασφάλιση της ομοιομορφίας των μετρήσεων. Δείκτες ακρίβειας, ορθότητας, ακρίβειας μεθόδων ποσοτικής χημικής ανάλυσης. Μέθοδοι Αξιολόγησης- Ορολογία RMG 61 2003: Κρατικό σύστημα για τη διασφάλιση της ομοιομορφίας των μετρήσεων. Δείκτες ακρίβειας, ορθότητας, ακρίβειας μεθόδων ποσοτικής χημικής ανάλυσης. Μέθοδοι αξιολόγησης: 3.12 Ακρίβεια εντός του εργαστηρίου: Ακρίβεια… Λεξικό-βιβλίο αναφοράς όρων κανονιστικής και τεχνικής τεκμηρίωσης

ΣΑΝΙΔΑ

ΛΥΣΗ

Σύμφωνα με το άρθρο 30 της Συνθήκης για την Ευρασιατική Οικονομική Ένωση της 29ης Μαΐου 2014 και την παράγραφο 2 του άρθρου 3 της συμφωνίας για τις κοινές αρχές και κανόνες για την κυκλοφορία των φαρμάκων εντός της Ευρασιατικής Οικονομικής Ένωσης της 23ης Δεκεμβρίου 2014, το Δ.Σ. της Ευρασιατικής Οικονομικής Επιτροπής

αποφασισμένος:

1. Έγκριση των συνημμένων Οδηγιών για την Επικύρωση Αναλυτικών Μεθόδων Δοκιμών Φαρμακευτικών Προϊόντων.

2. Η παρούσα απόφαση τίθεται σε ισχύ 6 μήνες από την επίσημη δημοσίευσή της.

Πρόεδρος του Δ.Σ
Ευρασιατική Οικονομική Επιτροπή
Τ. Σαρκισιάν

Οδηγίες για την επικύρωση αναλυτικών μεθόδων για τη δοκιμή φαρμακευτικών προϊόντων

ΕΓΚΕΚΡΙΜΕΝΟ
Απόφαση του ΔΣ
Ευρασιατική Οικονομική Επιτροπή
με ημερομηνία 17 Ιουλίου 2018 N 113

I. Γενικές διατάξεις

1. Ο παρών Οδηγός ορίζει τους κανόνες για την επικύρωση των αναλυτικών μεθόδων για τον έλεγχο των φαρμακευτικών προϊόντων, καθώς και έναν κατάλογο χαρακτηριστικών που πρέπει να αξιολογηθούν κατά την επικύρωση αυτών των μεθόδων και περιλαμβάνονται στους φακέλους καταχώρισης που υποβάλλονται στους εξουσιοδοτημένους φορείς των κρατών μελών της Ευρασιατική Οικονομική Ένωση (εφεξής, αντίστοιχα, τα κράτη μέλη, Ένωση).

2. Σκοπός της επικύρωσης μιας αναλυτικής μεθόδου για τη δοκιμή φαρμάκων είναι να τεκμηριωθεί η καταλληλότητά της για τον επιδιωκόμενο σκοπό.

II. Ορισμοί

3. Για τους σκοπούς του παρόντος Οδηγού, χρησιμοποιούνται όροι που σημαίνουν τα ακόλουθα:

"αναλυτική διαδικασία" (αναλυτική διαδικασία) - μια μεθοδολογία για τη δοκιμή φαρμακευτικών προϊόντων, η οποία περιλαμβάνει λεπτομερή περιγραφή της αλληλουχίας των ενεργειών που είναι απαραίτητες για την εκτέλεση μιας αναλυτικής δοκιμής (συμπεριλαμβανομένης περιγραφής της προετοιμασίας δειγμάτων δοκιμής, υλικών αναφοράς, αντιδραστηρίων, χρήσης εξοπλισμός, κατασκευή καμπύλης βαθμονόμησης, χρησιμοποιούμενοι τύποι υπολογισμού κ.λπ.).

"αναπαραγωγιμότητα" - μια ιδιότητα που χαρακτηρίζει την ακρίβεια στις διεργαστηριακές δοκιμές.

"εύρος εφαρμογής (αναλυτική περιοχή)" (εύρος) - το διάστημα μεταξύ της υψηλότερης και της χαμηλότερης συγκέντρωσης (ποσότητα) της αναλυόμενης ουσίας στο δείγμα (συμπεριλαμβανομένων αυτών των συγκεντρώσεων), για το οποίο η αναλυτική μέθοδος αποδεικνύεται ότι έχει αποδεκτό επίπεδο ακρίβειας , ακρίβεια και γραμμικότητα.

"γραμμικότητα" (γραμμικότητα) - ευθέως αναλογική εξάρτηση του αναλυτικού σήματος από τη συγκέντρωση (ποσότητα) της αναλυόμενης ουσίας στο δείγμα εντός του εύρους εφαρμογής (αναλυτική περιοχή) της τεχνικής.

"ανακάλυψη (ανάκτηση)" (ανάκτηση) - η αναλογία μεταξύ του ληφθέντος μέσου όρου και των πραγματικών (αναφοράς) τιμών, λαμβάνοντας υπόψη τα κατάλληλα διαστήματα εμπιστοσύνης.

"repeatability (intra-assay precision)" - η ακρίβεια μιας μεθόδου όταν εκτελούνται επαναλαμβανόμενες δοκιμές υπό τις ίδιες συνθήκες λειτουργίας (για παράδειγμα, από τον ίδιο αναλυτή ή ομάδα αναλυτών, στον ίδιο εξοπλισμό, με τα ίδια και τα ίδια αντιδραστήρια , κ.λπ.) για σύντομο χρονικό διάστημα.

"ορθότητα" (ακρίβεια, αλήθεια) - η εγγύτητα μεταξύ της αποδεκτής πραγματικής τιμής (αναφοράς) και της ληφθείσας τιμής, η οποία εκφράζεται από την τιμή ανοίγματος.

"όριο ποσοτικού προσδιορισμού" (ποσοτικό όριο) - η μικρότερη ποσότητα μιας ουσίας σε ένα δείγμα που μπορεί να προσδιοριστεί ποσοτικά με την κατάλληλη ακρίβεια και ακρίβεια.

"όριο ανίχνευσης" - η μικρότερη ποσότητα μιας αναλυόμενης ουσίας σε ένα δείγμα που μπορεί να ανιχνευθεί, αλλά όχι απαραίτητα να ποσοτικοποιηθεί με ακρίβεια.

"ακρίβεια" (ακρίβεια) - μια έκφραση της εγγύτητας (βαθμός εξάπλωσης) των αποτελεσμάτων (τιμών) μεταξύ σειρών μετρήσεων που πραγματοποιούνται σε πλήθος δειγμάτων που λαμβάνονται από το ίδιο ομοιογενές δείγμα, υπό τις προϋποθέσεις που καθορίζονται από τη διαδικασία.

"ενδιάμεση (ενδοεργαστηριακή) ακρίβεια" (ενδιάμεση ακρίβεια) - η επίδραση των παραλλαγών εντός του εργαστηρίου (διαφορετικές ημέρες, διαφορετικοί αναλυτές, διαφορετικός εξοπλισμός, διαφορετικές σειρές (παρτίδες) αντιδραστηρίων, κ.λπ.) στα αποτελέσματα των δοκιμών πανομοιότυπων δειγμάτων που λαμβάνονται από το ίδια σειρά?

"ειδικότητα" (ειδικότητα) - η ικανότητα μιας αναλυτικής τεχνικής να αξιολογεί αναμφίβολα την ουσία που προσδιορίζεται, ανεξάρτητα από άλλες ουσίες (ακαθαρσίες, προϊόντα αποδόμησης, έκδοχα, μήτρα (μέσο) κ.λπ.) που υπάρχουν στο δείγμα δοκιμής.

"σταθερότητα (robustness)" (robustness) - η ικανότητα μιας αναλυτικής διαδικασίας να είναι ανθεκτική στην επίδραση μικρών καθορισμένων αλλαγών στις συνθήκες δοκιμής, γεγονός που υποδεικνύει την αξιοπιστία της σε κανονική (τυπική) χρήση.

III. Τύποι αναλυτικών μεθόδων προς επικύρωση

4. Αυτός ο Οδηγός καλύπτει προσεγγίσεις επικύρωσης για τους 4 πιο συνηθισμένους τύπους αναλυτικών μεθόδων:

α) δοκιμές αναγνώρισης (γνησιότητα)·

β) δοκιμές για τον προσδιορισμό της ποσοτικής περιεκτικότητας σε προσμίξεις (ποσοτικές δοκιμές για την περιεκτικότητα σε προσμίξεις).

γ) δοκιμές για τον προσδιορισμό του ορίου προσμίξεων στο δείγμα (οριακές δοκιμές για τις προσμίξεις ελέγχου).

δ) ποσοτικές δοκιμές (για περιεχόμενο ή δραστικότητα) (ποσοτικές δοκιμές της δραστικής μονάδας) για τον προσδιορισμό του ενεργού μέρους του μορίου της δραστικής ουσίας στο δείγμα δοκιμής.

5. Όλες οι αναλυτικές μέθοδοι που χρησιμοποιούνται για τον ποιοτικό έλεγχο των φαρμακευτικών προϊόντων πρέπει να επικυρώνονται. Ο παρών Οδηγός δεν καλύπτει την επικύρωση αναλυτικών μεθόδων για τύπους δοκιμών που δεν περιλαμβάνονται στην παράγραφο 4 του παρόντος Οδηγού (για παράδειγμα, δοκιμές διάλυσης ή προσδιορισμού του μεγέθους σωματιδίων (διασποράς) μιας φαρμακευτικής ουσίας κ.λπ.).

6. Οι δοκιμές για την ταυτοποίηση (αυθεντικότητα) συνήθως συνίστανται στη σύγκριση των ιδιοτήτων (π.χ. φασματικά χαρακτηριστικά, χρωματογραφική συμπεριφορά, αντιδραστικότητα κ.λπ.) των δειγμάτων δοκιμής και αναφοράς.

7. Οι δοκιμές για τον προσδιορισμό της ποσοτικής περιεκτικότητας σε προσμίξεις και οι δοκιμές για τον προσδιορισμό του ορίου της περιεκτικότητας του δείγματος σε προσμίξεις στοχεύουν στη σωστή περιγραφή των χαρακτηριστικών καθαρότητας του δείγματος. Οι απαιτήσεις για την επικύρωση των μεθόδων για τον ποσοτικό προσδιορισμό των προσμείξεων διαφέρουν από τις απαιτήσεις για την επικύρωση των μεθόδων για τον προσδιορισμό της περιοριστικής περιεκτικότητας σε προσμίξεις σε ένα δείγμα.

8. Οι μέθοδοι ποσοτικών δοκιμών στοχεύουν στη μέτρηση της περιεκτικότητας της αναλυόμενης ουσίας στο δείγμα δοκιμής. Σε αυτές τις κατευθυντήριες γραμμές, η ποσοτικοποίηση αναφέρεται στην ποσοτική μέτρηση των κύριων συστατικών μιας φαρμακευτικής ουσίας. Παρόμοιες παράμετροι επικύρωσης ισχύουν για τον προσδιορισμό της δραστικής ουσίας ή άλλων συστατικών του φαρμακευτικού προϊόντος. Οι ποσοτικές παράμετροι επικύρωσης μπορούν να χρησιμοποιηθούν σε άλλες αναλυτικές διαδικασίες (π.χ. δοκιμή διάλυσης).

Ο σκοπός των αναλυτικών μεθόδων θα πρέπει να ορίζεται με σαφήνεια, καθώς αυτός καθορίζει την επιλογή των χαρακτηριστικών επικύρωσης που θα πρέπει να αξιολογηθούν κατά την επικύρωση.

9. Τα ακόλουθα τυπικά χαρακτηριστικά επικύρωσης μιας αναλυτικής μεθόδου υπόκεινται σε αξιολόγηση:

α) ορθότητα (ακρίβεια (αλήθεια)).

β) ακρίβεια (ακρίβεια):

επαναληψιμότητα·

ενδιάμεση (ενδοεργαστηριακή) ακρίβεια (intermediate precision);

γ) ειδικότητα.

δ) όριο ανίχνευσης.

ε) ποσοτικό όριο.

στ) γραμμικότητα.

ζ) εύρος εφαρμογής (αναλυτική περιοχή) (εύρος).

10. Τα πιο σημαντικά χαρακτηριστικά επικύρωσης για την επικύρωση διαφόρων τύπων αναλυτικών μεθόδων συνοψίζονται στον πίνακα.

Τραπέζι. Χαρακτηριστικά επικύρωσης για την επικύρωση διαφορετικών τύπων αναλυτικών μεθόδων

Επικύρωση		Είδος αναλυτικής μεθόδου
χαρακτηριστικό γνώρισμα		δοκιμές για ταυτοποίηση	δοκιμές ακαθαρσιών		ποσοτικές δοκιμές
		(αυθεντικότητα)	ποσοτικός περιεχόμενο	περιορίσει το περιεχόμενο	διάλυση (μόνο μέτρηση), περιεχόμενο (δραστηριότητα)
σωστά
ακρίβεια
	επαναληψιμότητα
	ενδιάμεση ακρίβεια
Ιδιαιτερότητα**
Όριο ανίχνευσης
Όριο Ποσοτικοποίησης
Γραμμικότητα
Εύρος εφαρμογής

________________
* Εάν προσδιοριστεί η αναπαραγωγιμότητα, δεν απαιτείται προσδιορισμός της ενδιάμεσης ακρίβειας.

** Η ανεπαρκής εξειδίκευση μιας αναλυτικής μεθόδου μπορεί να αντισταθμιστεί χρησιμοποιώντας μία ή περισσότερες πρόσθετες αναλυτικές μεθόδους.

*** Ενδέχεται να απαιτείται σε ορισμένες περιπτώσεις (για παράδειγμα, όταν το όριο ανίχνευσης και το κανονικοποιημένο όριο της περιεκτικότητας της καθορισμένης ακαθαρσίας είναι κοντά).

Σημείωση. "-" - το χαρακτηριστικό δεν αξιολογείται, "+" - το χαρακτηριστικό αξιολογείται.


Η καθορισμένη λίστα θα πρέπει να θεωρείται τυπική κατά την επικύρωση των αναλυτικών μεθόδων. Μπορεί να υπάρχουν εξαιρέσεις που απαιτούν χωριστή αιτιολόγηση από τον κατασκευαστή του φαρμακευτικού προϊόντος. Ένα τέτοιο χαρακτηριστικό της αναλυτικής μεθόδου όπως η σταθερότητα (στιβαρότητα) δεν παρατίθεται στον πίνακα, αλλά θα πρέπει να ληφθεί υπόψη στο κατάλληλο στάδιο στην ανάπτυξη της αναλυτικής μεθόδου.

Η εκ νέου επικύρωση (επανεπικύρωση) μπορεί να είναι απαραίτητη στις ακόλουθες περιπτώσεις (αλλά δεν περιορίζεται σε):

αλλαγή στο σχήμα σύνθεσης της φαρμακευτικής ουσίας·

αλλαγή στη σύνθεση του φαρμακευτικού προϊόντος·

αλλαγή στην αναλυτική μεθοδολογία.

Δεν πραγματοποιείται εκ νέου επικύρωση εάν ο κατασκευαστής παρέχει την κατάλληλη αιτιολόγηση. Η έκταση της επανεπικύρωσης εξαρτάται από τη φύση των αλλαγών που έγιναν.

IV. Μεθοδολογία για την επικύρωση αναλυτικών μεθόδων

1. Γενικές απαιτήσεις για τη μεθοδολογία επικύρωσης αναλυτικών μεθόδων

11. Αυτή η ενότητα περιγράφει τα χαρακτηριστικά που πρέπει να λαμβάνονται υπόψη κατά την επικύρωση των αναλυτικών μεθόδων και παρέχει ορισμένες προσεγγίσεις και συστάσεις για τον καθορισμό των διαφορετικών χαρακτηριστικών επικύρωσης κάθε αναλυτικής μεθόδου.

12. Σε ορισμένες περιπτώσεις (για παράδειγμα, όταν αποδεικνύεται η ειδικότητα), μπορεί να χρησιμοποιηθεί ένας συνδυασμός πολλών αναλυτικών μεθόδων για τη διασφάλιση της ποιότητας μιας φαρμακευτικής ουσίας ή ενός φαρμακευτικού προϊόντος.

13. Όλα τα σχετικά δεδομένα που συλλέχθηκαν κατά την επικύρωση και οι τύποι που χρησιμοποιούνται για τον υπολογισμό της απόδοσης επικύρωσης πρέπει να παρουσιάζονται και να αναλύονται.

14. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν προσεγγίσεις διαφορετικές από αυτές που περιγράφονται στον παρόντα Οδηγό. Η επιλογή της διαδικασίας και του πρωτοκόλλου επικύρωσης είναι ευθύνη του αιτούντος. Στην περίπτωση αυτή, ο κύριος σκοπός της επικύρωσης μιας αναλυτικής μεθόδου είναι να επιβεβαιωθεί η καταλληλότητα της μεθόδου για τον επιδιωκόμενο σκοπό. Λόγω της πολυπλοκότητάς τους, οι προσεγγίσεις σε αναλυτικές μεθόδους για βιολογικά και βιοτεχνολογικά προϊόντα ενδέχεται να διαφέρουν από αυτές που περιγράφονται σε αυτόν τον Οδηγό.

15. Καθ' όλη τη διάρκεια της μελέτης επιδόσεων επικύρωσης, θα πρέπει να χρησιμοποιούνται υλικά αναφοράς με γνωστά, τεκμηριωμένα χαρακτηριστικά. Ο απαιτούμενος βαθμός καθαρότητας των υλικών αναφοράς εξαρτάται από την προβλεπόμενη χρήση.

16. Διάφορα χαρακτηριστικά επικύρωσης συζητούνται σε ξεχωριστές υποενότητες αυτής της ενότητας. Η δομή αυτής της ενότητας αντανακλά τη διαδικασία ανάπτυξης και αξιολόγησης μιας αναλυτικής μεθοδολογίας.

17. Οι πειραματικές εργασίες θα πρέπει να σχεδιάζονται έτσι ώστε τα σχετικά χαρακτηριστικά επικύρωσης να μελετώνται ταυτόχρονα, παρέχοντας αξιόπιστα δεδομένα για τις δυνατότητες της αναλυτικής μεθόδου (π.χ. ειδικότητα, γραμμικότητα, εύρος εφαρμογής, αληθές και ακρίβεια).

2. Ιδιαιτερότητα

18. Θα πρέπει να διενεργούνται μελέτες ειδικότητας κατά την επικύρωση των δοκιμών για την ταυτοποίηση, τις προσμείξεις και τον ποσοτικό προσδιορισμό. Οι διαδικασίες επικύρωσης ειδικότητας εξαρτώνται από την προβλεπόμενη χρήση της αναλυτικής μεθόδου.

19. Ο τρόπος με τον οποίο μπορεί να επιβεβαιωθεί η ειδικότητα εξαρτάται από τους στόχους για τους οποίους προορίζεται η αναλυτική μέθοδος. Δεν είναι σε όλες τις περιπτώσεις δυνατό να επιβεβαιωθεί ότι η αναλυτική μέθοδος είναι ειδική για αυτήν την αναλυόμενη ουσία (πλήρης επιλεκτικότητα). Σε αυτή την περίπτωση, συνιστάται η χρήση συνδυασμού 2 ή περισσότερων αναλυτικών μεθόδων.

Η έλλειψη ειδικότητας μιας αναλυτικής μεθόδου μπορεί να αντισταθμιστεί με τη χρήση μιας ή περισσότερων επιπρόσθετων αναλυτικών μεθόδων.

20. Εξειδίκευση για διαφορετικούς τύπους δοκιμών σημαίνει τα ακόλουθα:

α) κατά τη δοκιμή για ταυτοποίηση - επιβεβαίωση ότι η μέθοδος σας επιτρέπει να προσδιορίσετε ακριβώς την ουσία που πρόκειται να προσδιοριστεί·

β) κατά τη δοκιμή για ακαθαρσίες, επιβεβαίωση ότι η μέθοδος εντοπίζει σωστά τις ακαθαρσίες στο δείγμα (για παράδειγμα, δοκιμή για σχετικές ενώσεις, βαρέα μέταλλα, υπολειμματικούς διαλύτες κ.λπ.)·

γ) σε ποσοτικές δοκιμές - επιβεβαίωση ότι η μέθοδος σας επιτρέπει να προσδιορίσετε το περιεχόμενο ή τη δραστηριότητα της ουσίας που προσδιορίζεται στο δείγμα.

Ταυτοποίηση

21. Οι ικανοποιητικές δοκιμές ταυτοποίησης θα πρέπει να μπορούν να κάνουν διάκριση μεταξύ δομικά στενά συγγενών ενώσεων που ενδέχεται να υπάρχουν στο δείγμα. Η επιλεκτικότητα μιας αναλυτικής διαδικασίας μπορεί να επιβεβαιωθεί με τη λήψη θετικών αποτελεσμάτων (ίσως σε σύγκριση με ένα γνωστό πρότυπο) για δείγματα που περιέχουν την αναλυόμενη ουσία και αρνητικά αποτελέσματα για δείγματα που δεν την περιέχουν.

22. Για να επιβεβαιωθεί η απουσία ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων, μπορεί να πραγματοποιηθεί δοκιμή ταυτοποίησης για ουσίες με παρόμοια δομή ή ουσίες που σχετίζονται με την αναλυόμενη ουσία.

23. Η επιλογή των δυνητικά παρεμβατικών ουσιών θα πρέπει να αιτιολογείται.

Ποσοτικοποίηση και δοκιμή για ακαθαρσίες

24. Κατά την επιβεβαίωση της εξειδίκευσης για μια αναλυτική διαδικασία με τη χρήση μεθόδου χρωματογραφικού διαχωρισμού, θα πρέπει να παρέχονται αντιπροσωπευτικά χρωματογραφήματα με κατάλληλη αναγνώριση μεμονωμένων συστατικών. Παρόμοιες προσεγγίσεις θα πρέπει να χρησιμοποιούνται σε άλλες τεχνικές που βασίζονται στον διαχωρισμό.

25. Οι κρίσιμοι διαχωρισμοί στη χρωματογραφία θα πρέπει να μελετώνται στο κατάλληλο επίπεδο. Στην περίπτωση κρίσιμων διαχωρισμών, θα πρέπει να ρυθμιστεί η τιμή ανάλυσης των 2 εξαρτημάτων που εκλούονται περισσότερο.

26. Όταν χρησιμοποιείται μια μη ειδική μέθοδος ποσοτικοποίησης, θα πρέπει να χρησιμοποιούνται πρόσθετες αναλυτικές μέθοδοι και να επιβεβαιώνεται η ιδιαιτερότητα ολόκληρου του συνόλου των μεθόδων. Για παράδειγμα, εάν ο ποσοτικός προσδιορισμός πραγματοποιείται με την τιτρομετρική μέθοδο κατά την απελευθέρωση της φαρμακευτικής ουσίας, μπορεί να συμπληρωθεί με κατάλληλη δοκιμή για ακαθαρσίες.

27. Η προσέγγιση είναι παρόμοια τόσο για τον ποσοτικό προσδιορισμό όσο και για τη δοκιμή για προσμείξεις.

Παρουσία δειγμάτων ακαθαρσιών

28. Παρουσία δειγμάτων ακαθαρσιών, ο προσδιορισμός της ειδικότητας της αναλυτικής διαδικασίας έχει ως εξής:

α) κατά τον ποσοτικό προσδιορισμό, είναι απαραίτητο να επιβεβαιωθεί η επιλεκτικότητα του προσδιορισμού μιας ουσίας παρουσία προσμείξεων και (ή) άλλων συστατικών του δείγματος. Στην πράξη, αυτό γίνεται με την προσθήκη ακαθαρσιών και (ή) εκδόχων στο δείγμα (φαρμακευτική ουσία ή φαρμακευτικό προϊόν) στην κατάλληλη ποσότητα και εάν υπάρχουν ενδείξεις απουσίας επιρροής τους στο αποτέλεσμα του ποσοτικού προσδιορισμού της δραστικής ουσίας. ;

β) κατά τη δοκιμή για ακαθαρσίες, η ειδικότητα μπορεί να καθοριστεί με την προσθήκη ορισμένων ποσοτήτων ακαθαρσιών στη φαρμακευτική ουσία ή το φαρμακευτικό προϊόν και εάν υπάρχουν ενδείξεις διαχωρισμού αυτών των προσμίξεων μεταξύ τους και (ή) από άλλα συστατικά του δείγματος.

Χωρίς δείγματα ακαθαρσιών

29. Εάν δεν υπάρχουν διαθέσιμα υλικά αναφοράς για προσμίξεις ή προϊόντα αποδόμησης, η εξειδίκευση μπορεί να επιβεβαιωθεί συγκρίνοντας τα αποτελέσματα δοκιμών δειγμάτων που περιέχουν ακαθαρσίες ή προϊόντα αποδόμησης με τα αποτελέσματα άλλης επικυρωμένης μεθόδου (για παράδειγμα, μιας φαρμακοποιίας ή άλλης επικυρωμένης αναλυτικής (ανεξάρτητης) μέθοδος). Όπου ενδείκνυται, τα πρότυπα αναφοράς ακαθαρσιών θα πρέπει να περιλαμβάνουν δείγματα που αποθηκεύονται υπό καθορισμένες συνθήκες καταπόνησης (φως, θερμότητα, υγρασία, όξινη (βασική) υδρόλυση και οξείδωση).

30. Σε περίπτωση ποσοτικού προσδιορισμού, πρέπει να συγκριθούν 2 αποτελέσματα.

31. Στην περίπτωση δοκιμών ακαθαρσιών, τα προφίλ προσμίξεων πρέπει να συγκρίνονται.

32. Για να αποδειχθεί ότι η κορυφή της αναλυόμενης ουσίας αντιστοιχεί μόνο σε ένα συστατικό, συνιστάται η διεξαγωγή μελετών για την καθαρότητα των κορυφών (για παράδειγμα, η χρήση ανίχνευσης διάταξης διόδων, φασματομετρία μάζας).

3. Γραμμικότητα

33. Μια γραμμική σχέση πρέπει να αξιολογείται σε όλο το φάσμα της εφαρμογής της αναλυτικής τεχνικής. Μπορεί να επιβεβαιωθεί απευθείας στη φαρμακευτική ουσία (με αραίωση του κύριου πρότυπου διαλύματος) και (ή) σε ξεχωριστά δείγματα τεχνητών (μοντέλων) μειγμάτων συστατικών του φαρμάκου χρησιμοποιώντας την προτεινόμενη μέθοδο. Η τελευταία πτυχή μπορεί να μελετηθεί κατά τον προσδιορισμό του εύρους εφαρμογής (αναλυτική περιοχή) της μεθοδολογίας.

34. Η γραμμικότητα αξιολογείται οπτικά με τη γραφική παράσταση του αναλυτικού σήματος ως συνάρτηση της συγκέντρωσης ή της ποσότητας της αναλυόμενης ουσίας. Εάν υπάρχει σαφής γραμμική σχέση, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται πρέπει να υποβάλλονται σε επεξεργασία με κατάλληλες στατιστικές μεθόδους (για παράδειγμα, με τον υπολογισμό της γραμμής παλινδρόμησης χρησιμοποιώντας τη μέθοδο των ελαχίστων τετραγώνων). Μπορεί να απαιτείται μαθηματικός μετασχηματισμός των αποτελεσμάτων των δοκιμών για να επιτευχθεί γραμμικότητα μεταξύ των αποτελεσμάτων ποσοτικοποίησης και των συγκεντρώσεων του δείγματος πριν από την ανάλυση παλινδρόμησης. Τα αποτελέσματα της ανάλυσης της γραμμής παλινδρόμησης μπορούν να χρησιμοποιηθούν για μια μαθηματική εκτίμηση του βαθμού γραμμικότητας.

35. Εάν δεν υπάρχει γραμμικότητα, τα δεδομένα της δοκιμής θα πρέπει να υποβληθούν σε μαθηματικό μετασχηματισμό πριν από την ανάλυση παλινδρόμησης.

36. Για να επιβεβαιωθεί η γραμμικότητα, πρέπει να καθοριστεί και να παρουσιαστεί ο συντελεστής συσχέτισης ή ο συντελεστής προσδιορισμού, ο σταθερός όρος της γραμμικής παλινδρόμησης, η εφαπτομένη της κλίσης της γραμμής παλινδρόμησης και το υπολειπόμενο άθροισμα των τετραγώνων αποκλίσεων και ένα γράφημα με όλα τα πειραματικά επισυνάπτονται δεδομένα.

37. Εάν δεν παρατηρείται γραμμικότητα σε κανένα τύπο μαθηματικού μετασχηματισμού (για παράδειγμα, κατά την επικύρωση μεθόδων ανοσοδοκιμασίας), το αναλυτικό σήμα πρέπει να περιγράφεται χρησιμοποιώντας την κατάλληλη συνάρτηση της συγκέντρωσης (ποσότητας) της αναλυόμενης ουσίας στο δείγμα.

V. Εύρος Εφαρμογής (Αναλυτική Περιοχή)

39. Το εύρος εφαρμογής μιας αναλυτικής τεχνικής εξαρτάται από τον σκοπό της και καθορίζεται στη μελέτη της γραμμικότητας. Εντός του εύρους εφαρμογής, η τεχνική πρέπει να παρέχει την απαιτούμενη γραμμικότητα, ορθότητα και ακρίβεια.

40. Οι ακόλουθες περιοχές εφαρμογής (αναλυτικές περιοχές) αναλυτικών μεθόδων θα πρέπει να θεωρούνται ως οι ελάχιστες επιτρεπόμενες:

α) για τον ποσοτικό προσδιορισμό της δραστικής ουσίας σε μια φαρμακευτική ουσία ή ένα φαρμακευτικό προϊόν - από συγκέντρωση (περιεκτικότητα) 80 τοις εκατό σε συγκέντρωση (περιεκτικότητα) 120 τοις εκατό της ονομαστικής συγκέντρωσης (περιεκτικότητας)·

β) για ομοιομορφία δοσολογίας - από συγκέντρωση (περιεκτικότητα) 70 τοις εκατό σε συγκέντρωση (περιεκτικότητα) 130 τοις εκατό, εκτός εάν δικαιολογείται ευρύτερο φάσμα για το φαρμακευτικό προϊόν ανάλογα με τη μορφή δοσολογίας (για παράδειγμα, εισπνευστήρες μετρημένης δόσης).

γ) για τη δοκιμή διάλυσης, ±20 τοις εκατό (απόλυτο) της ονομαστικής περιοχής εφαρμογής. Για παράδειγμα, εάν οι προδιαγραφές για ένα προϊόν τροποποιημένης κυκλοφορίας καλύπτουν ένα εύρος από 20 τοις εκατό την πρώτη ώρα έως το 90 τοις εκατό του περιεχομένου που αξιώνεται σε 24 ώρες, το επικυρωμένο εύρος χρήσης θα πρέπει να είναι από 0 έως 110 τοις εκατό του περιεχομένου που έχει αξιωθεί.

δ) για τον προσδιορισμό των προσμίξεων - από το όριο ανίχνευσης μιας ακαθαρσίας έως το 120% της τιμής που καθορίζεται στην προδιαγραφή.

ε) για προσμίξεις που είναι εξαιρετικά ισχυρές ή έχουν τοξική ή απροσδόκητη φαρμακολογική επίδραση, το όριο ανίχνευσης και το όριο ποσοτικοποίησης θα πρέπει να είναι ανάλογα με το επίπεδο στο οποίο πρόκειται να ελέγχονται αυτές οι προσμίξεις. Προκειμένου να επικυρωθούν οι μέθοδοι δοκιμής ακαθαρσιών που χρησιμοποιούνται κατά την ανάπτυξη, μπορεί να είναι απαραίτητο να ρυθμιστεί η αναλυτική περιοχή κοντά στο αναμενόμενο (πιθανό) όριο.

ε) εάν η ποσοτικοποίηση και η καθαρότητα μελετώνται ταυτόχρονα με την ίδια δοκιμή και χρησιμοποιείται μόνο πρότυπο 100%, η σχέση θα πρέπει να είναι γραμμική σε όλο το εύρος εφαρμογής της αναλυτικής μεθόδου από το όριο αναφοράς για την ακαθαρσία (σύμφωνα με την κανόνες για τη μελέτη των προσμείξεων σε φαρμακευτικά προϊόντα και τον καθορισμό απαιτήσεων σε αυτές στις προδιαγραφές που έχουν εγκριθεί από την Ευρασιατική Οικονομική Επιτροπή) περιεκτικότητα έως και 120 τοις εκατό που καθορίζεται στην προδιαγραφή για ποσοτικό προσδιορισμό.

VI. σωστά

41. Πρέπει να διαπιστωθεί η ορθότητα για το πλήρες φάσμα εφαρμογής της αναλυτικής διαδικασίας.

1. Ποσοτικός προσδιορισμός της δραστικής φαρμακευτικής ουσίας

Φαρμακευτική ουσία

42. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν διάφορες μέθοδοι αξιολόγησης της ορθότητας:

εφαρμογή αναλυτικής τεχνικής σε αναλυόμενη ουσία με γνωστό βαθμό καθαρότητας (για παράδειγμα, σε τυπικό υλικό).

σύγκριση των αποτελεσμάτων της ανάλυσης που ελήφθησαν χρησιμοποιώντας μια επικυρωμένη αναλυτική μέθοδο, και των αποτελεσμάτων που προέκυψαν χρησιμοποιώντας μια μέθοδο, η ορθότητα της οποίας είναι γνωστή, και (ή) μια ανεξάρτητη μέθοδο.

Το συμπέρασμα σχετικά με την ορθότητα μπορεί να γίνει αφού διαπιστωθεί η ακρίβεια, η γραμμικότητα και η ειδικότητα.

φαρμακευτικό προϊόν

43. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν διάφορες μέθοδοι αξιολόγησης της ορθότητας:

εφαρμογή αναλυτικής τεχνικής σε τεχνητά (μοντέλα) μείγματα συστατικών ενός φαρμακευτικού προϊόντος, στα οποία έχει προστεθεί μια προηγουμένως γνωστή ποσότητα αναλυόμενης ουσίας·

Ελλείψει δειγμάτων όλων των συστατικών του φαρμακευτικού προϊόντος, είναι δυνατή η προσθήκη μιας προηγουμένως γνωστής ποσότητας της φαρμακευτικής ουσίας στο φαρμακευτικό προϊόν ή η σύγκριση των αποτελεσμάτων που λαμβάνονται χρησιμοποιώντας άλλη μέθοδο, η ορθότητα της οποίας είναι γνωστή και (ή) μια ανεξάρτητη μέθοδος.

Το συμπέρασμα για την ορθότητα μπορεί να γίνει αφού προσδιοριστεί η ακρίβεια, η γραμμικότητα και η ειδικότητα.

2. Ποσοτικοποίηση ακαθαρσιών

44. Η ακρίβεια προσδιορίζεται σε δείγματα (φαρμακευτική ουσία και φαρμακευτικό προϊόν) στα οποία έχει προστεθεί γνωστή ποσότητα ακαθαρσιών.

45. Ελλείψει δειγμάτων ανιχνεύσιμων προσμείξεων και (ή) προϊόντων αποδόμησης, είναι αποδεκτή η σύγκριση των αποτελεσμάτων με τα αποτελέσματα που λαμβάνονται χρησιμοποιώντας μια ανεξάρτητη μέθοδο. Επιτρέπεται η χρήση αναλυτικού σήματος της δραστικής ουσίας.

46. ​​Είναι απαραίτητο να υποδεικνύεται ο συγκεκριμένος τρόπος έκφρασης της περιεκτικότητας σε επιμέρους ακαθαρσίες ή το άθροισμά τους (για παράδειγμα, σε ποσοστό μάζας ή σε ποσοστό σε σχέση με την περιοχή κορυφής, αλλά σε όλες τις περιπτώσεις σε σχέση με την κύρια αναλυόμενη ουσία) .

47. Η ακρίβεια αξιολογείται για τουλάχιστον 9 προσδιορισμούς σε 3 διαφορετικές συγκεντρώσεις που καλύπτουν ολόκληρο το εύρος εφαρμογής (δηλαδή 3 συγκεντρώσεις και 3 επαναλήψεις για κάθε συγκέντρωση). Οι ορισμοί θα πρέπει να περιλαμβάνουν όλα τα βήματα της μεθοδολογίας.

48. Η ακρίβεια εκφράζεται από την τιμή διαφάνειας ως ποσοστό με βάση τα αποτελέσματα ποσοτικού προσδιορισμού μιας ουσίας που προστίθεται σε γνωστή ποσότητα στο αναλυόμενο δείγμα ή τη διαφορά μεταξύ της λαμβανόμενης μέσης και πραγματικής τιμής (αναφοράς), λαμβάνοντας υπόψη τα κατάλληλα διαστήματα εμπιστοσύνης.

VII. ακρίβεια

49. Η επικύρωση των δοκιμών για την ποσοτικοποίηση και τις προσμείξεις περιλαμβάνει τον προσδιορισμό της ακρίβειας.

50. Η ακρίβεια ορίζεται σε 3 επίπεδα: επαναληψιμότητα, ενδιάμεση ακρίβεια και αναπαραγωγιμότητα. Η ακρίβεια πρέπει να καθορίζεται με τη χρήση ομοιόμορφων, αυθεντικών δειγμάτων. Εάν είναι αδύνατο να ληφθεί ένα ομοιογενές δείγμα, επιτρέπεται ο προσδιορισμός της ακρίβειας χρησιμοποιώντας τεχνητά παρασκευασμένα δείγματα (μοντέλο) ή διάλυμα δείγματος. Η ακρίβεια μιας αναλυτικής διαδικασίας εκφράζεται συνήθως με όρους διακύμανσης, τυπικής απόκλισης ή συντελεστή διακύμανσης μιας σειράς μετρήσεων.

VIII. Επαναληψιμότητα

51. Η επαναληψιμότητα προσδιορίζεται εκτελώντας τουλάχιστον 9 προσδιορισμούς συγκέντρωσης εντός του εύρους εφαρμογής της αναλυτικής μεθόδου (3 συγκεντρώσεις και 3 επαναλήψεις για κάθε συγκέντρωση) ή τουλάχιστον 6 προσδιορισμούς συγκέντρωσης για δείγματα με 100% περιεκτικότητα στην αναλυόμενη ουσία.

IX. Ενδιάμεση (ενδοεργαστηριακή) ακρίβεια

52. Ο βαθμός στον οποίο καθορίζεται η ενδιάμεση ακρίβεια εξαρτάται από τις συνθήκες υπό τις οποίες χρησιμοποιείται η αναλυτική μέθοδος. Ο αιτών πρέπει να διαπιστώσει την επίδραση τυχαίων παραγόντων στην ακρίβεια της αναλυτικής διαδικασίας. Τυπικοί (μεταβλητοί) παράγοντες που διερευνώνται είναι διαφορετικές ημέρες, αναλυτές, εξοπλισμός κ.λπ. Δεν είναι απαραίτητο να μελετήσουμε αυτές τις επιρροές χωριστά. Κατά τη μελέτη της επίδρασης διαφόρων παραγόντων, είναι προτιμότερο να χρησιμοποιείται ο σχεδιασμός του πειράματος.

Χ. Αναπαραγωγιμότητα

53. Η αναπαραγωγιμότητα χαρακτηρίζει την ακρίβεια σε ένα διεργαστηριακό πείραμα. Η αναπαραγωγιμότητα θα πρέπει να καθορίζεται στην περίπτωση τυποποίησης μιας αναλυτικής μεθόδου (για παράδειγμα, όταν περιλαμβάνεται στη Φαρμακοποιία της Ένωσης ή στις φαρμακοποιίες των κρατών μελών). Δεν απαιτείται η συμπερίληψη δεδομένων αναπαραγωγιμότητας στον φάκελο καταχώρισης.

XI. Αναπαράσταση δεδομένων

54. Για κάθε τύπο ακρίβειας, θα πρέπει να αναφέρονται η τυπική απόκλιση, η σχετική τυπική απόκλιση (συντελεστής διακύμανσης) και το διάστημα εμπιστοσύνης.

XII. Όριο ανίχνευσης

55. Διαφορετικές προσεγγίσεις για τον προσδιορισμό του ορίου ανίχνευσης είναι δυνατές ανάλογα με το αν η τεχνική είναι ενόργανη ή μη. Μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν και άλλες προσεγγίσεις.

XIII. οπτική αξιολόγηση

56. Η οπτική αξιολόγηση μπορεί να χρησιμοποιηθεί τόσο για μη ενόργανες όσο και για ενόργανες μεθόδους. Το όριο ανίχνευσης καθορίζεται με την ανάλυση δειγμάτων με γνωστές συγκεντρώσεις της αναλυόμενης ουσίας και τον προσδιορισμό της ελάχιστης περιεκτικότητάς της στην οποία ανιχνεύεται αξιόπιστα.

XIV. Αξιολόγηση του ορίου ανίχνευσης ως προς την αναλογία σήματος προς θόρυβο

57. Αυτή η προσέγγιση ισχύει μόνο για αναλυτικές διαδικασίες για τις οποίες παρατηρείται θόρυβος βάσης.

58. Ο προσδιορισμός της αναλογίας σήματος προς θόρυβο πραγματοποιείται συγκρίνοντας τα σήματα που λαμβάνονται από δείγματα με γνωστές χαμηλές συγκεντρώσεις με τα σήματα που λαμβάνονται από τυφλά δείγματα και καθορίζοντας την ελάχιστη συγκέντρωση στην οποία μπορεί να ανιχνευθεί αξιόπιστα η αναλυόμενη ουσία. Για την εκτίμηση του ορίου ανίχνευσης, μια αναλογία σήματος προς θόρυβο 3:1 έως 2:1 θεωρείται αποδεκτή.

XV. Εκτίμηση του ορίου ανίχνευσης από την τυπική απόκλιση του αναλυτικού σήματος και την κλίση της καμπύλης βαθμονόμησης

59. Το όριο ανίχνευσης (LO) μπορεί να εκφραστεί ως εξής:

όπου:

60. Η τιμή του k υπολογίζεται από την καμπύλη βαθμονόμησης για την αναλυόμενη ουσία. Η εκτίμηση των s μπορεί να γίνει με διάφορους τρόπους:

β) σύμφωνα με την καμπύλη βαθμονόμησης. Είναι απαραίτητο να αναλυθεί η προκύπτουσα καμπύλη βαθμονόμησης, που έχει κατασκευαστεί για δείγματα με την περιεκτικότητα της αναλυόμενης ουσίας κοντά στο όριο ανίχνευσης. Ως τυπική απόκλιση μπορεί να χρησιμοποιηθεί η υπολειπόμενη τυπική απόκλιση της γραμμής παλινδρόμησης ή η τυπική απόκλιση του σημείου τομής με τον άξονα y (τυπική απόκλιση του ελεύθερου όρου της γραμμικής παλινδρόμησης).

XVI. Αναπαράσταση δεδομένων

61. Είναι απαραίτητο να καθοριστεί το όριο ανίχνευσης και η μέθοδος προσδιορισμού του. Εάν ο προσδιορισμός του ορίου ανίχνευσης βασίζεται σε οπτική εκτίμηση ή εκτίμηση της αναλογίας σήματος προς θόρυβο, η παρουσίαση των σχετικών χρωματογραφημάτων κρίνεται επαρκής για να τον δικαιολογήσει.

62. Εάν η τιμή του ορίου ανίχνευσης λαμβάνεται με υπολογισμό ή παρέκταση, η εκτίμηση πρέπει να επιβεβαιώνεται με ανεξάρτητη δοκιμή επαρκούς αριθμού δειγμάτων με το περιεχόμενο της αναλυόμενης ουσίας να αντιστοιχεί στο όριο ανίχνευσης ή κοντά σε αυτό.

XVII. Όριο Ποσοτικοποίησης

63. Το όριο ποσοτικοποίησης είναι απαραίτητο χαρακτηριστικό επικύρωσης των διαδικασιών που χρησιμοποιούνται για τον προσδιορισμό της χαμηλής περιεκτικότητας σε ουσίες σε ένα δείγμα, ιδίως για τον προσδιορισμό προσμείξεων ή/και προϊόντων αποδόμησης.

64. Είναι δυνατές διάφορες προσεγγίσεις για τον προσδιορισμό του ορίου ποσοτικοποίησης, ανάλογα με το εάν η τεχνική είναι ενόργανη ή μη. Επιτρέπονται άλλες προσεγγίσεις.

XVIII. οπτική αξιολόγηση

65. Η οπτική αξιολόγηση μπορεί να χρησιμοποιηθεί τόσο για μη ενόργανες όσο και για ενόργανες μεθόδους.

66. Το όριο ποσοτικοποίησης καθορίζεται συνήθως με την ανάλυση δειγμάτων με γνωστές συγκεντρώσεις της αναλυόμενης ουσίας και την εκτίμηση της ελάχιστης περιεκτικότητας στην οποία η αναλυόμενη ουσία είναι ποσοτικοποιήσιμη με αποδεκτή ακρίβεια και ακρίβεια.

XIX. Αξιολόγηση του ορίου ποσοτικοποίησης κατά λόγο σήματος προς θόρυβο

67. Αυτή η προσέγγιση εφαρμόζεται μόνο σε μεθόδους μέτρησης όπου παρατηρείται θόρυβος βάσης.

68. Ο προσδιορισμός της αναλογίας σήματος προς θόρυβο πραγματοποιείται συγκρίνοντας τα μετρούμενα σήματα που λαμβάνονται από δείγματα με γνωστές χαμηλές συγκεντρώσεις της αναλυόμενης ουσίας, με τα σήματα που λαμβάνονται από τυφλά δείγματα και προσδιορίζοντας την ελάχιστη συγκέντρωση στην οποία μπορεί να γίνει η αναλυόμενη ουσία αξιόπιστα ποσοτικοποιημένα. Η τυπική αναλογία σήματος προς θόρυβο είναι 10:1.

XX. Εκτίμηση του ορίου ποσοτικοποίησης από την τυπική απόκλιση του σήματος και την κλίση της καμπύλης βαθμονόμησης

69. Το όριο ποσοτικοποίησης (LOQ) μπορεί να εκφραστεί ως εξής:

όπου:

s είναι η τυπική απόκλιση του αναλυτικού σήματος.

k είναι η εφαπτομένη της κλίσης της καμπύλης βαθμονόμησης.

70. Η τιμή του k υπολογίζεται από την καμπύλη βαθμονόμησης για την αναλυόμενη ουσία. Η εκτίμηση των s μπορεί να γίνει με διάφορους τρόπους:

α) σύμφωνα με την τυπική απόκλιση ενός τυφλού δείγματος. Το μέγεθος του αναλυτικού σήματος μετράται για επαρκή αριθμό κενών δειγμάτων και υπολογίζεται η τυπική απόκλιση των τιμών τους.

β) σύμφωνα με την καμπύλη βαθμονόμησης. Είναι απαραίτητο να αναλυθεί η προκύπτουσα καμπύλη βαθμονόμησης, που έχει κατασκευαστεί για δείγματα με την περιεκτικότητα της αναλυόμενης ουσίας κοντά στο όριο του ποσοτικού προσδιορισμού. Ως τυπική απόκλιση μπορεί να χρησιμοποιηθεί η υπολειπόμενη τυπική απόκλιση της γραμμής παλινδρόμησης ή η τυπική απόκλιση του σημείου τομής με τον άξονα y (τυπική απόκλιση του ελεύθερου όρου της γραμμικής παλινδρόμησης).

XXI. Αναπαράσταση δεδομένων

71. Είναι απαραίτητο να καθοριστεί το όριο ποσοτικοποίησης και η μέθοδος προσδιορισμού του.

72. Το όριο ποσοτικοποίησης πρέπει στη συνέχεια να επιβεβαιωθεί με ανάλυση επαρκούς αριθμού δειγμάτων που περιέχουν αναλυόμενες ουσίες ίσες ή πλησίον του ορίου ποσοτικού προσδιορισμού.

73. Άλλες προσεγγίσεις από αυτές που αναφέρονται παραπάνω ενδέχεται να είναι αποδεκτές.

XXII. Σταθερότητα (στιβαρότητα)

74. Η μελέτη της ευστάθειας (στιβαρότητας) θα πρέπει να διεξάγεται στο στάδιο ανάπτυξης, το εύρος των μελετών εξαρτάται από την αναλυτική μέθοδο που εξετάζεται. Είναι απαραίτητο να δείξουμε την αξιοπιστία της ανάλυσης κάτω από σκόπιμες μεταβολές των παραμέτρων (συνθηκών) της μεθόδου.

75. Εάν τα αποτελέσματα των μετρήσεων εξαρτώνται από αλλαγές στις συνθήκες εφαρμογής της αναλυτικής διαδικασίας, είναι απαραίτητο να ελέγχεται αυστηρά η συμμόρφωση με αυτές τις προϋποθέσεις ή να προβλεφθούν προφυλάξεις κατά τη διάρκεια της δοκιμής.

76. Προκειμένου να διασφαλιστεί ότι διατηρείται η εγκυρότητα μιας αναλυτικής μεθόδου όταν χρησιμοποιείται, μία από τις συνέπειες μιας μελέτης ευρωστίας θα πρέπει να είναι ο καθορισμός μιας σειράς παραμέτρων καταλληλότητας συστήματος (π.χ. δοκιμή ανάλυσης).

77. Κοινές παραλλαγές παραμέτρων είναι:

σταθερότητα των διαλυμάτων που χρησιμοποιούνται σε αναλυτικές διαδικασίες.

χρόνος εξαγωγής.

Οι παράμετροι μεταβολής για την υγρή χρωματογραφία είναι:

αλλαγή του pH της κινητής φάσης.

αλλαγή στη σύνθεση της κινητής φάσης.

διαφορετικές στήλες (διαφορετικές σειρές και προμηθευτές).

θερμοκρασία;

ταχύτητα κινητής φάσης (ρυθμός ροής).

Οι παράμετροι μεταβολής για την αέρια χρωματογραφία είναι:

διαφορετικές στήλες (διαφορετικές σειρές και προμηθευτές).

θερμοκρασία;

ταχύτητα φέροντος αερίου.

XXIII. Αξιολόγηση καταλληλότητας συστήματος

78. Η αξιολόγηση της καταλληλότητας του συστήματος αποτελεί αναπόσπαστο μέρος πολλών αναλυτικών διαδικασιών. Αυτές οι δοκιμές βασίζονται στην ιδέα ότι ο εξοπλισμός, τα ηλεκτρονικά, οι αναλυτικές λειτουργίες και τα δείγματα υπό ανάλυση αποτελούν ένα πλήρες σύστημα και πρέπει να αξιολογούνται ως έχουν. Κριτήρια καταλληλότητας συστήματος θα πρέπει να καθορίζονται για μια συγκεκριμένη μέθοδο και να εξαρτώνται από τον τύπο της αναλυτικής μεθόδου που επικυρώνεται. Μπορείτε να λάβετε πρόσθετες πληροφορίες από τη Φαρμακοποιία της Ένωσης ή τις φαρμακοποιίες των κρατών μελών.



Ηλεκτρονικό κείμενο του εγγράφου
εκπονήθηκε από την Kodeks JSC και επαληθεύτηκε έναντι:
επίσημη ιστοσελίδα
Ευρασιατική Οικονομική Ένωση
www.eaeunion.org, 20.07.2018