24.11.202227.05.2017

]، با این حال، تعریف آنتی اکسیدان ها به عنوان ترکیبات شیمیایی تصویر کاملی از خواص محافظتی شی مورد مطالعه ارائه نمی دهد: آنها نه تنها با مقدار یک آنتی اکسیدان خاص، بلکه با فعالیت هر یک از آنها نیز تعیین می شوند. فعالیت آنتی اکسیدانی یا فعالیت آنتی اکسیدانی، AOA، ثابت سرعت واکنش یک آنتی اکسیدان با یک رادیکال آزاد (kInH) است. روش نورتابی شیمیایی (CL) به شما امکان می دهد مقدار کل رادیکال هایی را که آنتی اکسیدان ها را در یک نمونه متصل می کنند (ظرفیت آنتی اکسیدانی کل، TAU) و هنگام استفاده از روش مدل سازی ریاضی سینتیک CL، میزان تشکیل و واکنش رادیکال ها را تعیین کنید. با آنتی اکسیدان ها، یعنی AOA [،،].

متداول ترین اصلاح روش نورتابی شیمیایی برای تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی کل بر اساس استفاده از لومینول به عنوان یک فعال کننده نورتابی شیمیایی است [،،،،]. نمونه ای با افزودن لومینول، پراکسید هیدروژن و ترکیبی که قادر به تشکیل رادیکال ها در نتیجه تجزیه خود به خود (ترمولیز) است، در یک کووت شیمی لومینومتر قرار می گیرد، به عنوان مثال دی هیدروکلراید 2,2'-azobis-(2-amidinopropane) (ABAP) ): ABAP → 2R. در حضور اکسیژن مولکولی، رادیکال آلکیل R رادیکال پراکسیل ROO را تشکیل می دهد: R + O 2 → ROO. سپس، رادیکال پراکسیل، کاوشگر نورتابی شیمیایی لومینول (LH 2) را اکسید می کند و رادیکال لومینول (LH) تشکیل می شود: ROO + LH 2 → ROOH + LH. از LH از طریق تشکیل مواد میانی (لومینول هیدروپراکسید و لومینول آندوپراکسید)، مولکولی از محصول نهایی اکسیداسیون لومینول، اسید آمینوفتالیک، در حالت برانگیخته الکترونیکی تشکیل می‌شود که فوتون ساطع می‌کند و در نتیجه نورتابی شیمیایی مشاهده می‌شود. . شدت CL با سرعت تولید فوتون متناسب است و به نوبه خود با غلظت ثابت LH در سیستم متناسب است. آنتی اکسیدان ها با برهم کنش با رادیکال ها زنجیره تبدیل توصیف شده را قطع می کنند و از تشکیل فوتون جلوگیری می کنند.

ترکیبات حساس به ترمولیز تنها منبع احتمالی رادیکال در هنگام تجزیه و تحلیل ظرفیت آنتی اکسیدانی یک نمونه با استفاده از روش نورتابی شیمیایی نیستند. سیستم های جایگزین عبارتند از: پراکسیداز ترب کوهی-پراکسید هیدروژن [، ]، هیمین-پراکسید هیدروژن، سیتوکروم با-کاردیولیپین-پراکسید هیدروژن و غیره. طرح واکنش برای اکسیداسیون لومینول توسط پراکسیدازها در کار Cormier و همکاران در نظر گرفته شده است. .

منحنی های جنبشی CL برای این سیستم ها منعکس کننده دو مرحله از واکنش است: مرحله افزایش شدت CL و مرحله یک فلات یا کاهش تدریجی در لومینسانس، زمانی که شدت CL ثابت است یا به آرامی کاهش می یابد. این کار دو رویکرد را برای اندازه گیری ظرفیت آنتی اکسیدانی کل توصیف می کند که این ویژگی منحنی ها را در نظر می گیرد. روش TRAP (Total Reactive Antioxidant Potential) مبتنی بر اندازه گیری دوره نهفته CL است. τ و می توان برای تعیین آنتی اکسیدان هایی مانند ترولوکس یا اسید اسکوربیک استفاده کرد: آنها با ثابت سرعت واکنش با رادیکال ها مشخص می شوند و به همین دلیل می توان آنها را آنتی اکسیدان قوی نامید. در طول دوره نهفته، اکسیداسیون کامل آنها اتفاق می افتد. روش TAR (واکنش پذیری کل آنتی اکسیدان) درجه خاموش شدن نورتابی شیمیایی را اندازه گیری می کند. qدر فلات یا حداکثر منحنی نورتابی شیمیایی: فرمول، که در آن I شدت نورتابی شیمیایی بدون آنتی اکسیدان است و I 1 شدت CL در حضور یک آنتی اکسیدان است. این روش در صورتی استفاده می‌شود که سیستم حاوی آنتی‌اکسیدان‌های غالباً ضعیف با نرخ ثابت برهمکنش با رادیکال‌ها باشد - در مقایسه با ثابت لومینول بسیار کمتر.

اثر آنتی اکسیدان ها نه تنها با شاخص ها مشخص می شود τ و q. همانطور که از آثار [,] مشاهده می شود، اثر آنتی اکسیدان هایی مانند اسید اوریک در سیستم هیمین-H2O2-لومینول یا توکوفرول، روتین و کورستین در سیستم سیتوکروم با-کاردیولیپین-H2O2-لومینول که با تغییر در حداکثر نرخ افزایش CL مشخص می شود. v حداکثر). همانطور که نتایج مدل‌سازی ریاضی سینتیک نشان می‌دهد، مقادیر ثابت‌های سرعت تعامل این آنتی‌اکسیدان‌ها با رادیکال‌ها نزدیک به مقدار ثابت لومینول است، بنابراین چنین آنتی‌اکسیدان‌هایی را می‌توان آنتی‌اکسیدان‌های با قدرت متوسط نامید.

اگر مواد مورد مطالعه، به ویژه مواد خام گیاهی، فقط حاوی یک نوع آنتی اکسیدان باشد، محتوای آنها را می توان با یکی از سه شاخص ذکر شده در بالا مشخص کرد. τ , qیا v حداکثر). اما مواد گیاهی حاوی ترکیبی از آنتی اکسیدان ها با قدرت های متفاوت هستند. برای حل این مشکل، برخی از نویسندگان [ , , , ] از تغییر در مجموع نوری نورتابی شیمیایی در یک زمان معین ∆S استفاده کردند که با فرمول محاسبه شده است، جایی که ∆ S 0و ∆ اس اس- مجموع نور CL برای یک زمان معین تیبه ترتیب در نمونه های کنترل و آزمایش. زمان باید برای اکسیداسیون تمام آنتی اکسیدان های سیستم کافی باشد، یعنی منحنی CL نمونه آزمایشی به سطح منحنی CL نمونه کنترل برسد. دومی فرض می کند که محققان نه تنها باید مجموع نور درخشش را ثبت کنند، بلکه باید منحنی سینتیک CL را برای مدت زمان کافی طولانی ثبت کنند، که همیشه انجام نمی شود.

از آنجایی که تمام شاخص های اندازه گیری شده به دستگاه و شرایط اندازه گیری بستگی دارد، اثر آنتی اکسیدانی ماده در سیستم مورد مطالعه معمولاً با اثر آنتی اکسیدانی که به عنوان استاندارد گرفته می شود، به عنوان مثال Trolox [،] مقایسه می شود.

سیستم پراکسیداز ترب کوهی-پراکسید هیدروژن برای تجزیه و تحلیل ظرفیت آنتی اکسیدانی کل مواد گیاهی توسط بسیاری از نویسندگان استفاده شده است. در آثار [ , ] از دوره نهفته CL (روش TRAP) برای تخمین مقدار آنتی اکسیدان ها در نمونه ها و در آثار [ , , ] - ناحیه زیر منحنی توسعه CL استفاده شد. با این حال، آثار ذکر شده توجیه روشنی برای انتخاب یک یا پارامتر دیگر برای ارزیابی OAU ارائه نمی دهند.

هدف از این مطالعه تعیین چگونگی تأثیر نسبت انواع مختلف آنتی اکسیدان ها بر TOA و اصلاح روش نورتابی شیمیایی به گونه ای بود که بتوان TOA را با دقت بیشتری در مواد گیاهی تعیین کرد. برای انجام این کار، ما چندین وظیفه را برای خود تعیین می کنیم. ابتدا سینتیک CL اجسام مورد مطالعه را با سینتیک آنتی اکسیدان های استاندارد سه نوع (قوی، متوسط و ضعیف) مقایسه کنید تا متوجه شوید کدام نوع آنتی اکسیدان سهم اصلی را در OAU اشیاء مورد مطالعه دارد. ثانیا، OAE اشیاء مورد مطالعه را با اندازه‌گیری کاهش مجموع نور CL تحت تأثیر این اجسام در مقایسه با اثر آنتی اکسیدانی که بیشترین سهم را در OAE ارائه می‌کند، محاسبه کنید.

مواد و روش ها

هدف این مطالعه نمونه‌های صنعتی زالزالک، زالزالک و گل رز تولید شده توسط JSC Krasnogorskleksredstva (روسیه) و همچنین میوه‌های تمشک بود که توسط نویسندگان در منطقه مسکو در شرایط رشد طبیعی جمع‌آوری و در دمای 60 تا 80 درجه خشک شد. C تا زمانی که در هنگام فشار دادن آب و تغییر شکل را متوقف کردند.

معرف برای آنالیز ظرفیت آنتی اکسیدانی با استفاده از روش نورتابی شیمیایی عبارتند از: KH 2 PO 4، محلول بافر 20 میلی مولار (pH 7.4). پراکسیداز از ریشه ترب (فعالیت 112 واحد در میلی گرم، M = 44173.9)، محلول آبی 1 میلی مولار. لومینول (5-آمینو-1،2،3،4-تتراهیدرو-1،4-فتالازین دیون، 3-آمینوفتالیک اسید هیدرازید، M = 177.11)، محلول آبی 1 میلی مولار. پراکسید هیدروژن (H2O2، M = 34.01)، محلول آبی 1 میلی مولار. محلول های آنتی اکسیدان ها (اسید اسکوربیک، کورستین، توکوفرول). تمام معرف ها توسط شرکت سیگما آلدریچ (ایالات متحده آمریکا) تولید می شوند.

جوشانده‌های میوه‌های زالزالک، زالزالک و گل رز و دم کرده میوه‌های تمشک طبق روش‌های فارماکوپه دولتی اتحاد جماهیر شوروی، که در مقاله کلی داروسازی «دمنوش‌ها و جوشانده‌ها» آمده است، تهیه شد.

تعیین ظرفیت تام آنتی اکسیدانی با ثبت نورتابی شیمیایی بر روی یک لومینومتر Lum-100 (DISoft، روسیه) با استفاده از نرم افزار PowerGraph 3.3 انجام شد. برای تعیین OAE در مواد گیاهی، 40 میکرولیتر لومینول در غلظت 1 میلی مولار، 40 میکرولیتر ترب پراکسیداز با غلظت 0.1 میکرومولار، از 10 تا 50 میکرولیتر جوشانده یا دم کرده (بسته به غلظت) و بافر فسفات در مقدار مورد نیاز در کووت دستگاه قرار داده شد تا حجم کل نمونه به 1 میلی لیتر برسد. کووت در دستگاه نصب شد و CL با مشاهده سیگنال پس زمینه ضبط شد. پس از 48 ثانیه از ضبط سیگنال پس زمینه، 100 میکرولیتر H2O2 با غلظت 1 میلی مولار به کووت اضافه شد و ضبط CL به مدت 10 دقیقه ادامه یافت. چهار نمونه با غلظت های مختلف از هر شی گیاهی تهیه شد. CL همچنین برای محلول‌های اسید اسکوربیک، کورستین و توکوفرول در پنج غلظت مختلف برای هر آنتی اکسیدان ثبت شد. پس از آن، OAU نمونه های جوشانده و دم کرده دوباره به کوئرستین محاسبه شد.

غلظت لومینول، پراکسیداز ترب کوهی و پراکسید هیدروژن به گونه ای انتخاب شد که ظرفیت آنتی اکسیدانی عصاره های آبی از مواد گیاهی دارویی در زمان قابل قبولی (بیش از 10 دقیقه) تعیین شود. در طی این مدت، منحنی‌های نورتابی شیمیایی برای آنتی‌اکسیدان‌های آسکوربات و فلاونوئید کوئرستین (آنتی اکسیدان‌های اصلی مواد گیاهی) به یک فلات رسیدند که نشان‌دهنده نابودی کامل آنتی‌اکسیدان‌ها در سیستم است. رقت‌های نمونه‌های مورد مطالعه و غلظت محلول‌های آنتی‌اکسیدان استاندارد (که در شکل‌ها نشان داده شده‌اند) به گونه‌ای انتخاب شدند که تمام منحنی‌های جنبشی CL با حساسیت یکسان دستگاه اندازه‌گیری شدند.

ظرفیت آنتی اکسیدانی از تغییر سطح (∆ اس) تحت منحنی جنبشی نورتابی شیمیایی (مجموع نور) هنگام افزودن ماده حاوی آنتی اکسیدان. برای این منظور محاسبه کردیم S 0برای سیستمی بدون آنتی اکسیدان و مساحت را از آن کم کرد اس اس، مشخص کننده سیستمی است که آنتی اکسیدان به آن اضافه شده است. مقدار ∆ اسبستگی به حساسیت شیمی‌لومینومتر و شرایط اندازه‌گیری دارد. نسبت ∆ S/C V(جایی که سی- غلظت مواد بیولوژیکی مورد مطالعه در کووت، g/l و V- حجم کووت، l) ظرفیت آنتی اکسیدانی 1 گرم از ماده مورد مطالعه، یعنی مواد خام گیاهی را بیان می کند.

ظرفیت آنتی اکسیدانی Δ به روشی مشابه محاسبه شد S Aمحلولی از یک آنتی اکسیدان استاندارد، به عنوان مثال کوئرستین، در همان حجم مخلوط واکنش قرار داده شده است. نسبت ∆ S A / C A V(جایی که C A- غلظت وزنی آنتی اکسیدان در کووت، گرم در لیتر) ظرفیت آنتی اکسیدانی 1 گرم آنتی اکسیدان را بیان می کند.

برای هر یک از آنتی اکسیدان های استاندارد، سیگنال از محلول های چند غلظت ثبت شد تا اطمینان حاصل شود که محاسبات در یک رابطه خطی قرار دارند و نتایج به دست آمده قابل تکرار هستند. در واقع، یک وابستگی خطی به دست آمد (∆ S A = k A C A) سیگنال از غلظتی که ضریب استوکیومتری از آن محاسبه شد k A. با توجه به معیار فیشر، مقادیر به دست آمده برای آنتی اکسیدان های استاندارد k Aاز نظر آماری با احتمال 975/0 معنادار است. سپس سیگنال از چهار غلظت برای هر یک از چهار نمونه گیاهی ثبت شد و برای همه نمونه ها وابستگی خطی سیگنال به غلظت به دست آمد (∆ اس = k·C) که از آن ضریب استوکیومتری محاسبه شد ک. با احتمال 0.975 (آزمون فیشر)، مقادیر k به دست آمده برای نمونه های گیاهی از نظر آماری معنی دار است. ظرفیت آنتی اکسیدانی کل مواد گیاهی بر حسب جرم آنتی اکسیدان استاندارد (mg%) با استفاده از فرمول بدست آمد.

مقادیر به صورت میانگین حسابی ± انحراف معیار (M ± δ) در p ارائه شد

نتایج تحقیق

مطالعه سینتیک لومینسانس شیمیایی در حضور آسکوربات سدیم (شکل 1. اثر آسکوربات سدیم بر سینتیک نورتابی شیمیایی" data-note="غلظت اجزای سیستم: لومینول - 40 میکرومولار، پراکسیداز ترب - 4 نانومولار، پراکسید هیدروژن - 100 میکرومولار منحنی ها: 1 - نمونه شاهد؛ 2 - 0.05 میکرومولار؛ 3 - 0.10 میکرومولار؛ 4 - 0.15 میکرومولار؛ 5 - 0.2 میکرومولار؛ 6 - 0.25 میکرومولار آسکوربات سدیم.">شکل 1) نشان داد که برای این آنتی اکسیدان با یک دوره نهفته که CL تقریباً به طور کامل سرکوب شده است مشخص می شود. مدت زمان آن متناسب با مقدار آنتی اکسیدان در سیستم است. در عین حال، نه شیب منحنی های CL و نه شدت CL در فلات تغییر می کند. این توضیح داده شده است. با این واقعیت که اسید اسکوربیک یک آنتی اکسیدان قوی است که تمام رادیکال های تشکیل شده در سیستم، از جمله رادیکال های لومینول را قطع می کند و تا زمانی که تمام آسکوربات اکسید نشود، CL ایجاد نمی شود.

سایر محققان نیز نشان داده اند که نتایج تجزیه و تحلیل شیمیایی و مقدار TAU تعیین شده با روش نورتابی شیمیایی اغلب با هم مطابقت ندارند. در این کار، ظرفیت آنتی اکسیدانی کل تعیین شده در سیستم پراکسیداز-لومینول-هیدروژن با محتوای ترکیبات تری ترپن در ارتباط است. با این حال، در کار همان نویسندگان، که در آن موضوع مطالعه گیاه دیگری بود، آنها ارتباط OAE را با محتوای هیچ گروهی از مواد، از جمله فلاونوئیدها مشاهده نکردند.

چنین اختلافاتی حداقل با سه عامل مرتبط است. اولاً، فعالیت آنتی اکسیدان ها مهم است، یعنی میزان برهمکنش آنها با رادیکال ها، که برای آنتی اکسیدان های مختلف موجود در نمونه گیاهی متفاوت است. به گفته ایزمایلوف، ثابت سرعت واکنش های مربوطه برای مکیدول، توکوفرول و کورستین به صورت 0.04: 2: 60 همبستگی دارد. طبق کار، اسیدهای کوئرستین، اوریک و اسکوربیک به ترتیب 0.1 ± 3.6، 0.1 ± 1.4 و 0.2 ± 0.5 رادیکال در هر مولکول آنتی اکسیدانی واکنش نشان دادند (سیستم هیمین-H2O2 - لومینول استفاده شد). ثالثاً، نتایج مطالعه می تواند تحت تأثیر وجود فعالیت پراکسیداز در خود نمونه های گیاهی، مانند کار، و همچنین وجود کلسیم در نمونه ها باشد که همانطور که در کار نشان داده شده است، می تواند افزایش یابد. فعالیت پراکسیداز ترب کوهی تحت شرایط خاص. این معمولاً باعث شدت CL بالاتری در فلات نسبت به منحنی‌های کنترل می‌شود که البته ما آن را مشاهده نکردیم.

اولین عامل به شدت استفاده از چنین پارامتری را به عنوان تغییر در مجموع نور محدود می کند، زیرا زمان اندازه گیری نورتابی شیمیایی باید بیشتر از زمان مصرف همه آنتی اکسیدان ها در نمونه آزمایشی باشد. وقوع این لحظه را تنها با اندازه گیری سینتیک نورتابی شیمیایی می توان قضاوت کرد. علاوه بر این، سهم آنتی اکسیدان های ضعیف در TAU به شدت دست کم گرفته می شود، زیرا زمان اکسیداسیون کامل آنها چندین برابر بیشتر از مدت زمان اندازه گیری قابل قبول (10-20 دقیقه) است.

ضریب استوکیومتری آنتی اکسیدان از اهمیت بیشتری برخوردار است. تعداد رادیکال ها nرهگیری شده توسط آن برابر است با ، جایی که ρ ضریب استوکیومتری است و ∆ متر- تغییر در غلظت آنتی اکسیدان در طول اندازه گیری، در مورد ما - غلظت اولیه ماده آزمایش در نمونه آزمایش.

تفاوت در مجموع نور لومینسانس در غیاب یک آنتی اکسیدان و در حضور آن متناسب است. n. تعداد کل رادیکال های رهگیری شده است، که در آن ρ iضریب استوکیومتری یک آنتی اکسیدان خاص است و m i- غلظت آن در حین اندازه گیری بدیهی است که تعداد کل رادیکال های رهگیری شده با مقدار کل آنتی اکسیدان ها برابر نیست، زیرا ضرایب ρ iنه تنها برابر با وحدت نیستند، بلکه برای آنتی اکسیدان های مختلف به طور قابل توجهی متفاوت هستند.

اندازه nمتناسب با تفاوت در مجموع نور اندازه گیری شده در یک زمان معین بین نمونه حاوی آنتی اکسیدان و نمونه شاهد فاقد آنتی اکسیدان است: اس = k n، جایی که ک- ضریب، ثابت در شرایط اندازه گیری یکسان.

روش مورد بحث در مقاله به ما امکان می دهد ظرفیت کل آنتی اکسیدان را تعیین کنیم، در حالی که تجزیه و تحلیل شیمیایی به ما امکان می دهد محتوای کل آنتی اکسیدان ها را در محصول تعیین کنیم. بنابراین، به نظر می‌رسد روش لومینسانس شیمیایی آموزنده‌تر از آنالیزهای شیمیایی است.

شرایطی که ما برای ارزیابی ظرفیت آنتی اکسیدانی کل مواد خام گیاهی با ثبت سینتیک لومینسانس شیمیایی در سیستمی متشکل از پراکسیداز ترب کوهی، پراکسید هیدروژن و لومینول انتخاب کردیم (غلظت‌های جزء - به ترتیب 4 نانومولار، 100 میکرومولار و 40 میکرومولار؛ 20 میلی‌مولار فسفات. بافر، pH 7.4)، اکسیداسیون آنتی اکسیدان های قوی (اسید اسکوربیک) و آنتی اکسیدان های با قدرت متوسط (کوئرستین) را در 10 دقیقه تضمین کرد. این مدت زمان اندازه گیری راحت است و کیفیت اندازه گیری مورد نیاز را تضمین می کند.

تجزیه و تحلیل سینتیک لومینسانس شیمیایی نشان داد که در اشیاء مورد مطالعه (جوشانده‌های میوه‌های باسن، گل رز، زالزالک و دم کرده میوه تمشک) آنتی اکسیدان‌های اصلی آنتی اکسیدان‌های با قدرت متوسط شامل فلاونوئیدها و قدرت ضعیف (توکوفرول و غیره) هستند. بر اساس کاهش مجموع نور شیمی‌تابی، ظرفیت آنتی اکسیدانی کل برای اجسام مورد مطالعه محاسبه شد. مقایسه مقادیر TAU به‌دست‌آمده با نتایج آنالیز شیمیایی نشان داد که محصولات حاوی همان مقدار آنتی‌اکسیدان با نسبت‌های مختلف ممکن است در توانایی آنها برای محافظت مؤثر از بدن در برابر اثرات مضر رادیکال‌های آزاد متفاوت باشد. روش توصیف شده برای مطالعه اشیاء گیاهی که حاوی مخلوطی از آنتی اکسیدان های مختلف هستند امیدوار کننده است. در عین حال، سادگی و هزینه کم تحقیق مشخص می شود. ترکیبی از اندازه‌گیری سینتیک نورتابی شیمیایی با مدل‌سازی ریاضی واکنش‌ها نه تنها فرآیند تعیین TAU را خودکار می‌کند، بلکه سهم گروه‌های جداگانه آنتی‌اکسیدان‌ها را در شاخص تعیین می‌کند.

کلید واژه ها

رادیکال آزاد/آنتی اکسیدان/ فعالیت آنتی اکسیدانی / ظرفیت آنتی اکسیدانی کل / لومینسانس شیمیایی/ لومینول / رادیکال آزاد / آنتی اکسیدان / فعالیت آنتی اکسیدانی / ظرفیت آنتی اکسیدانی کل / لومینسانس شیمیایی / لومینول

حاشیه نویسی مقاله علمی در مورد علوم شیمی، نویسنده کار علمی - گئورگی کنستانتینوویچ ولادیمیروف، ای. وی. سرگونووا، دی. یو. ایزمایلوف، یو. ا. ولادیمیروف

مواد گیاهی دارویی یکی از منابع آنتی اکسیدان برای بدن انسان هستند. در میان روش‌های تعیین محتوای آنتی‌اکسیدان‌ها در اجسام گیاهی، روش آنالیز لومینسانس شیمیایی رایج است. در این کار برای تخمین استفاده شد ظرفیت آنتی اکسیدانی کل(OAE) جوشانده میوه‌های بابونه، گل رز و زالزالک و دم کرده میوه‌های تمشک. سینتیک در آزمایش ثبت شد لومینسانس شیمیاییدر سیستمی متشکل از پراکسیداز ترب کوهی، پراکسید هیدروژن و لومینول. غلظت و حجم اجزای سیستم در نمونه به گونه ای انتخاب شد که آنتی اکسیدان های قوی (اسید اسکوربیک) و آنتی اکسیدان های متوسط (کوئرستین) در طول زمان اندازه گیری (10 دقیقه) کاملاً اکسید شوند. روشی برای محاسبه OAE بر اساس تغییرات در مجموع نور پیشنهاد و توجیه شده است لومینسانس شیمیاییدر حضور نمونه های گیاهی تحلیل سینتیک لومینسانس شیمیایینشان داد که اشیاء مورد مطالعه تحت سلطه آنتی اکسیدان های با قدرت متوسط از جمله فلاونوئیدها و آنتی اکسیدان های ضعیف (توکوفرول و غیره) هستند. مقایسه مقادیر OAE محاسبه‌شده برای اشیاء مورد مطالعه و داده‌های آنالیز شیمیایی آنها نشان داد که محصولات حاوی همان مقدار آنتی‌اکسیدان با نسبت‌های متفاوت بر حسب نوع ممکن است در توانایی آنها در محافظت از بدن در برابر اثرات مضر رادیکال‌های آزاد متفاوت باشد. . روش توصیف شده برای مطالعه اشیاء گیاهی حاوی مخلوطی از انواع آنتی اکسیدان ها امیدوار کننده است.

مطالب مرتبط آثار علمی در علوم شیمی، نویسنده کار علمی - گئورگی کنستانتینوویچ ولادیمیروف، ای. وی. سرگونوا، دی. یو. ایزمایلوف، یو. ا. ولادیمیروف

2016 / Georgiy Vladimirov, Sergunova E.V., Izmaylov D.Yu., Vladimirov Yu.A.
تعیین آنتی اکسیدان ها با لومینسانس شیمیایی فعال شده با استفاده از 2،2"-azo-bis(2-amidinopropane)
2012 / Alekseev A.V.، Proskurnina E.V.، Vladimirov Yu.A.
اثر آنتی اکسیدانی دی هیدروکورستین و روتین در واکنش های پراکسیداز کاتالیز شده توسط سیتوکروم c
2008 / Demin E.M., Proskurnina E.V., Vladimirov Yu.A.
ارزیابی ظرفیت اکسیداتیو و آنتی اکسیدانی سوبستراهای بیولوژیکی با نورتابی شیمیایی ناشی از واکنش فنتون
2016 / Piskarev Igor Mikhailovich، I.P. ایوانووا
تعیین محتوای لیپو هیدروپراکسیدها در لیپوپروتئین های سرم با استفاده از سیستم میکروپراکسیداز-لومینول
2011 / تسلکین یوری اولگوویچ، بابنکووا ایرینا ولادیمیروا
روش های تحقیق آنتی اکسیدانی
2004 / Khasanov V.V., Ryzhova G.L., Maltseva E.V.
فعالیت آنتی اکسیدانی گیاهان مورد استفاده در طب قومی تووا
2012 / چخانی N.R.، Teselkin Yu.O.، Pavlova L.A.، Kozin S.V.، Lyubitsky O.B.
بررسی خواص آنتی اکسیدانی فوسپرنیل در سیستم های مختلف آزمایش بیولوژیکی
2017 / A. V. Sanin، A. N. Narovlyansky، A. V. Pronin، T. N. Kozhevnikova، V. Yu. Sanina، A. D. Agafonova
تأثیر دوزهای مختلف بی فنیل های پلی کلره بر وضعیت نورتابی شیمیایی خودبخود و وابسته به لومینول ناشی از ایمونوگلوبولین در خون کامل
2016 / Gabdulkhakova I.R., Kayumova A.F., Samokhodova O.V.
ارزیابی سیستم پراکسیداسیون لیپیدی حفاظت آنتی اکسیدانی در کودکان مبتلا به فشار خون شریانی ضروری با استفاده از روش اسپکتروفتومتری و نورتابی شیمیایی
2014 / ناتیاگانوا لاریسا ویکتورونا، گاوریلووا اوکسانا الکساندرونا، کولسنیکووا لاریسا رومانونا

تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی کل در مواد گیاهی دارویی

مواد گیاهی دارویی یکی از منابع آنتی اکسیدان برای بدن انسان است. آنالیز لومینسانس شیمیایی یکی از روش های رایج برای تعیین محتوای آنتی اکسیدان ها در مواد گیاهی است. در کار ما، از آنالیز لومینسانس شیمیایی برای تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی کل (TAC) جوشانده‌های میوه خاکستر کوهی، رز و زالزالک و همچنین تزریق میوه تمشک استفاده شد. آزمایش‌ها سینتیک نورتابی شیمیایی یک سیستم متشکل از پراکسیداز ترب کوهی، پراکسید هیدروژن و لومینول را نشان دادند. غلظت و حجم اجزای سیستم به گونه ای انتخاب شد که آنتی اکسیدان های قوی (اسید اسکوربیک) و آنتی اکسیدان های با نیروی متوسط (کوئرستین) در طول اندازه گیری (10 دقیقه) به طور کامل اکسید شدند. روشی برای محاسبه TAC بر اساس تغییرات در مجموع نور شیمی‌تابی در حضور نمونه‌های گیاهی پیشنهاد و اثبات شد. تجزیه و تحلیل سینتیک نورتابی شیمیایی نشان داد که آنتی اکسیدان هایی با نیروی متوسط در اشیاء مورد مطالعه غالب هستند، از جمله فلاونوئیدها و آنتی اکسیدان های ضعیف (توکوفرول و غیره). مقایسه مقادیر محاسبه‌شده TAC برای اشیاء مورد مطالعه و داده‌های آنالیز شیمیایی آنها نشان داد که محصولات حاوی مقدار یکسان آنتی‌اکسیدان با نسبت‌های متفاوت آنتی‌اکسیدان‌ها بر اساس انواع ممکن است در توانایی آنها برای محافظت از بدن در برابر اثرات مضر رادیکال‌های آزاد متفاوت باشد. . تکنیک توصیف شده برای مطالعه اجسام گیاهی حاوی مخلوطی از انواع مختلف آنتی اکسیدان ها امیدوارکننده است.

متن کار علمی با موضوع "روش شیمیتابی برای تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی کل در مواد گیاهی دارویی"

روش نورتابی شیمیایی برای تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی کل در مواد گیاهی دارویی

G. K. Vladimirov1^, E. V. Sergunova2, D. Yu. Izmailov1, Yu. A. Vladimirov1

1 گروه بیوفیزیک پزشکی، دانشکده پزشکی بنیادی، M.V. Lomonosov دانشگاه دولتی مسکو، مسکو

2 گروه فارماکوگنوزی، دانشکده داروسازی،

اولین دانشگاه دولتی پزشکی مسکو به نام I.M. Sechenov، مسکو

مواد گیاهی دارویی یکی از منابع آنتی اکسیدان برای بدن انسان هستند. در میان روش‌های تعیین محتوای آنتی‌اکسیدان‌ها در اجسام گیاهی، روش آنالیز لومینسانس شیمیایی رایج است. در این کار از آن برای ارزیابی ظرفیت آنتی اکسیدانی کل (TAC) جوشانده‌های میوه‌های گیلاس، گل محمدی و زالزالک و دم کرده میوه‌های تمشک استفاده شد. در این آزمایش، سینتیک نورتابی شیمیایی در سیستمی متشکل از پراکسیداز ترب کوهی، پراکسید هیدروژن و لومینول ثبت شد. غلظت و حجم اجزای سیستم در نمونه به گونه ای انتخاب شد که آنتی اکسیدان های قوی (اسید اسکوربیک) و آنتی اکسیدان های متوسط (کوئرستین) در طول زمان اندازه گیری (10 دقیقه) کاملاً اکسید شوند. روشی برای محاسبه OAE بر اساس تغییرات در مجموع نور شیمی‌لومینسانس در حضور نمونه‌های گیاهی پیشنهاد و توجیه شده است. تجزیه و تحلیل سینتیک لومینسانس شیمیایی نشان داد که آنتی اکسیدان های با قدرت متوسط از جمله فلاونوئیدها و آنتی اکسیدان های ضعیف (توکوفرول و غیره) در اشیاء مورد مطالعه غالب هستند. مقایسه مقادیر OAE محاسبه‌شده برای اشیاء مورد مطالعه و داده‌های آنالیز شیمیایی آنها نشان داد که محصولات حاوی همان مقدار آنتی‌اکسیدان با نسبت‌های متفاوت بر حسب نوع ممکن است در توانایی آنها در محافظت از بدن در برابر اثرات مضر رادیکال‌های آزاد متفاوت باشد. . روش توصیف شده برای مطالعه اشیاء گیاهی حاوی مخلوطی از انواع آنتی اکسیدان ها امیدوار کننده است.

کلمات کلیدی: رادیکال آزاد، آنتی اکسیدان، فعالیت آنتی اکسیدانی، ظرفیت آنتی اکسیدانی کل، لومینسانس شیمیایی، لومینول

بودجه: این کار توسط بنیاد علوم روسیه، کمک مالی شماره 14-15-00375 حمایت شد.

Ex3 برای مکاتبه: گئورگی کنستانتینوویچ ولادیمیروف

119192، مسکو، لومونوسوفسکی pr-t، 31، ساختمان 5; [ایمیل محافظت شده]

دریافت مقاله: 1395/03/10 پذیرش مقاله برای انتشار: 1395/03/18

تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی کل در مواد گیاهی دارویی

1 گروه بیوفیزیک پزشکی، دانشکده پزشکی بنیادی، دانشگاه دولتی لومونوسوف مسکو، مسکو، روسیه

2 گروه فارماکوگنوزی، دانشکده داروسازی،

اولین دانشگاه دولتی پزشکی سچنوف مسکو، مسکو، روسیه

بودجه: این کار توسط بنیاد علوم روسیه پشتیبانی شد، شماره کمک مالی. 14-15-00375.

تشکر و قدردانی: نویسندگان از آندری آلکسیف از دانشگاه دولتی لومونوسوف مسکو برای کمک او در انجام آزمایش تشکر می کنند. مکاتبات باید مورد خطاب قرار گیرد: گئورگی ولادیمیروف

خیابان لومونوسوفکی، د. 31، ک. 5، مسکو، روسیه، 119192; ur [ایمیل محافظت شده]دریافت: 1395/03/10 پذیرش: 1395/03/18

رادیکال های آزاد تشکیل شده در بدن ساختار غشای سلولی را مختل می کنند که به نوبه خود منجر به ایجاد شرایط پاتولوژیک مختلف می شود. از اثرات مخرب اکسیداتیو رادیکال ها توسط سیستم دفاعی آنتی اکسیدانی بدن جلوگیری می شود که در آن ترکیبات با وزن مولکولی کم - رهگیرهای رادیکال (تله ها) - نقش مهمی دارند. یکی از منابع آنتی اکسیدان ها، مواد گیاهی دارویی و همچنین داروهای مبتنی بر آنها است که بررسی پتانسیل آنتی اکسیدانی آنها به افزایش اثر پیشگیرانه و درمانی آنها کمک می کند.

روش های اصلی برای تعیین آنتی اکسیدان ها در آثار مورد بحث قرار می گیرد، با این حال، تعریف آنتی اکسیدان ها به عنوان ترکیبات شیمیایی تصویر کاملی از خواص محافظتی شی مورد مطالعه ارائه نمی دهد: آنها نه تنها با مقدار یک آنتی اکسیدان خاص تعیین می شوند. بلکه با فعالیت هر یک از آنها. فعالیت آنتی اکسیدانی یا فعالیت آنتی اکسیدانی، AOA، ثابت سرعت واکنش یک آنتی اکسیدان با یک رادیکال آزاد (kInH) است. روش نورتابی شیمیایی (CL) امکان تعیین مقدار کل رادیکال‌هایی را که آنتی اکسیدان‌ها را در یک نمونه متصل می‌کنند (ظرفیت کل آنتی‌اکسیدانی، TCA) و هنگام استفاده از روش مدل‌سازی ریاضی سینتیک CL، تعیین سرعت تشکیل و واکنش رادیکال هایی با آنتی اکسیدان ها، یعنی AOA.

متداول ترین اصلاح روش نورتابی شیمیایی برای تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی کل بر اساس استفاده از لومینول به عنوان یک فعال کننده نورتابی شیمیایی است. نمونه ای با افزودن لومینول، پراکسید هیدروژن و ترکیبی که قادر به تشکیل رادیکال در نتیجه تجزیه خود به خود (ترمولیز) است، به عنوان مثال 2،2"-azobis-(2-amidinopropane) dihydrochloride (ABAP):

در حضور اکسیژن مولکولی، رادیکال آلکیل R^ رادیکال پراکسیل ROO^ را تشکیل می دهد:

ROO^ + LH2 ^ ROOH + LHv از LH، از طریق تشکیل مواد واسطه (لومینول هیدروپراکسید و لومینول آندوپراکسید)، مولکولی از محصول نهایی اکسیداسیون لومینول، اسید آمینوفتالیک، در حالت برانگیخته الکترونیکی تشکیل می شود که یک فوتون ساطع می کند. و در نتیجه نورتابی شیمیایی مشاهده می شود. شدت CL با سرعت تولید فوتون متناسب است و به نوبه خود با غلظت ثابت LH در سیستم متناسب است. آنتی اکسیدان ها با برهم کنش با رادیکال ها زنجیره تبدیل توصیف شده را قطع می کنند و از تشکیل فوتون جلوگیری می کنند.

ترکیبات حساس به ترمولیز تنها منبع احتمالی رادیکال در هنگام تجزیه و تحلیل ظرفیت آنتی اکسیدانی یک نمونه با استفاده از روش نورتابی شیمیایی نیستند. جایگزین ها پراکسیداز ترب کوهی-پراکسید هیدروژن، هیمین-پراکسید هیدروژن، سیتوکروم c-کاردیولیپین-پراکسید هیدروژن و غیره هستند. طرح واکنش برای اکسیداسیون لومینول توسط پراکسیدازها در کار Cormier و همکاران مورد بحث قرار گرفته است. .

منحنی های جنبشی CL برای این سیستم ها منعکس کننده دو مرحله از واکنش است: مرحله افزایش شدت CL و مرحله یک فلات یا کاهش تدریجی در لومینسانس، زمانی که

شدت CL یا ثابت است یا به آرامی کاهش می یابد. این کار دو رویکرد را برای اندازه گیری ظرفیت آنتی اکسیدانی کل توصیف می کند که این ویژگی منحنی ها را در نظر می گیرد. روش TRAP (Total Reactive Antioxidant Potential) مبتنی بر اندازه گیری دوره نهفته CL t است و می تواند برای تعیین آنتی اکسیدان هایی مانند Trolox یا اسید اسکوربیک استفاده شود: آنها با ثابت سرعت واکنش بالا با رادیکال ها مشخص می شوند و به همین دلیل می توان آنتی اکسیدان قوی نامیده می شود. در طول دوره نهفته، اکسیداسیون کامل آنها اتفاق می افتد. روش TAR (واکنش‌پذیری کل آنتی‌اکسیدانی) درجه خاموش شدن نور شیمیایی q را در فلات یا حداکثر منحنی نورتابی شیمیایی اندازه‌گیری می‌کند:

که در آن I شدت نورتابی شیمیایی بدون آنتی اکسیدان است و 11 شدت CL در حضور یک آنتی اکسیدان است. این روش در صورتی استفاده می‌شود که سیستم حاوی آنتی‌اکسیدان‌های غالباً ضعیف با نرخ ثابت برهمکنش با رادیکال‌ها باشد - در مقایسه با ثابت لومینول بسیار کمتر.

اثر آنتی اکسیدان ها نه تنها با شاخص های t و c مشخص می شود. همانطور که از آثار مشاهده می شود، اثر آنتی اکسیدان هایی مانند اسید اوریک در سیستم هیمین-H2O2-لومینول یا توکوفرول، روتین و کوئرستین در سیستم سیتوکروم c-cardiolipin-H2O2-luminol با تغییر در حداکثر سرعت مشخص می شود. افزایش CL (utx). همانطور که نتایج مدل‌سازی ریاضی سینتیک نشان می‌دهد، مقادیر ثابت‌های سرعت تعامل این آنتی‌اکسیدان‌ها با رادیکال‌ها نزدیک به مقدار ثابت لومینول است، بنابراین چنین آنتی‌اکسیدان‌هایی را می‌توان آنتی‌اکسیدان‌های با قدرت متوسط نامید.

اگر مواد مورد مطالعه، به ویژه مواد خام گیاهی، تنها حاوی یک نوع آنتی اکسیدان باشد، محتوای آنها را می توان با یکی از سه شاخص ذکر شده در بالا (t، c یا V) مشخص کرد. اما مواد گیاهی حاوی ترکیبی از آنتی اکسیدان ها با قدرت های متفاوت هستند. برای حل این مشکل، برخی از نویسندگان از تغییر در مجموع نور شیمی‌تابی در یک زمان معین DE، محاسبه شده با فرمول استفاده کردند.

DE = DE0 - DE،

که در آن DE0 و DE5 مجموع نور CL برای یک زمان معین هستند؟ به ترتیب در نمونه های کنترل و آزمایش. زمان باید برای اکسیداسیون تمام آنتی اکسیدان های سیستم کافی باشد، یعنی منحنی CL نمونه آزمایشی به سطح منحنی CL نمونه کنترل برسد. دومی فرض می کند که محققان نه تنها باید مجموع نور درخشش را ثبت کنند، بلکه باید منحنی سینتیک CL را برای مدت زمان کافی طولانی ثبت کنند، که همیشه انجام نمی شود.

از آنجایی که تمام پارامترهای اندازه گیری شده به دستگاه و شرایط اندازه گیری بستگی دارد، اثر آنتی اکسیدانی ماده در سیستم مورد مطالعه معمولاً با اثر یک آنتی اکسیدان استاندارد، به عنوان مثال Trolox مقایسه می شود.

سیستم پراکسیداز ترب کوهی-پراکسید هیدروژن برای تجزیه و تحلیل ظرفیت آنتی اکسیدانی کل مواد گیاهی توسط بسیاری از نویسندگان استفاده شده است. برای تخمین مقدار آنتی اکسیدان ها در نمونه ها از دوره نهفته CL (روش TRAP) و از سطح زیر منحنی توسعه CL در کارها استفاده شد. با این حال، آثار ذکر شده توجیه روشنی ارائه نمی دهند

انتخاب یک یا پارامتر دیگر برای ارزیابی OAU.

مواد و روش ها

هدف این مطالعه نمونه‌های صنعتی زالزالک، زالزالک و گل رز تولید شده توسط JSC Krasnogorskleksredstva (روسیه) و همچنین میوه‌های تمشک بود که توسط نویسندگان در منطقه مسکو در شرایط رشد طبیعی جمع‌آوری و در دمای 60-80 درجه خشک شد. C تا زمانی که در هنگام فشار دادن آب و تغییر شکل را متوقف کردند.

معرف برای آنالیز ظرفیت آنتی اکسیدانی با استفاده از روش نورتابی شیمیایی عبارتند از: KH2PO4، محلول بافر 20 میلی مولار (PH 7.4). پراکسیداز از ریشه ترب (فعالیت 112 واحد در میلی گرم، M = 44173.9)، محلول آبی 1 میلی مولار. لومینول (5-آمینو-1،2،3،4-تتراهیدرو-1،4-فتالازین دیون، 3-آمینوفتالیک اسید هیدرازید، M = 177.11)، محلول آبی 1 میلی مولار. پراکسید هیدروژن (H2O2، M = 34.01)، محلول آبی 1 میلی مولار. محلول های آنتی اکسیدان ها (اسید اسکوربیک، کورستین، توکوفرول). تمام معرف ها توسط شرکت سیگما آلدریچ (ایالات متحده آمریکا) تولید می شوند.

تعیین ظرفیت تام آنتی اکسیدانی با ثبت نورتابی شیمیایی بر روی یک لومینومتر Lum-100 (DISoft، روسیه) با استفاده از نرم افزار PowerGraph 3.3 انجام شد. برای تعیین OAE در مواد گیاهی، 40 میکرولیتر لومینول در غلظت 1 میلی مولار، 40 میکرولیتر ترب پراکسیداز با غلظت 0.1 میکرومولار، از 10 تا 50 میکرولیتر جوشانده یا دم کرده (بسته به غلظت) و بافر فسفات در مقدار مورد نیاز در کووت دستگاه قرار داده شد تا حجم کل نمونه به 1 میلی لیتر برسد. کووت در دستگاه نصب شد و CL با مشاهده سیگنال پس زمینه ضبط شد. پس از 48 ثانیه از ضبط سیگنال پس زمینه، 100 میکرولیتر H2O2 با غلظت 1 میلی مولار به کووت اضافه شد و ضبط CL به مدت 10 دقیقه ادامه یافت. چهار نمونه با غلظت های مختلف از هر شی گیاهی تهیه شد. همچنین CL برای محلول‌های اسید اسکوربیک، کورستین و توکوفرول در پنج غلظت مختلف برای هر یک از آنتی‌اکسیدان‌ها ثبت شد. پس از آن، OAU نمونه های جوشانده و دم کرده دوباره به کوئرستین محاسبه شد.

به یک فلات رسید که نشان دهنده نابودی کامل آنتی اکسیدان ها در سیستم است. رقت‌های نمونه‌های مورد مطالعه و غلظت محلول‌های آنتی‌اکسیدان استاندارد (که در شرح شکل‌ها مشخص شده است) به‌گونه‌ای انتخاب شدند که تمام منحنی‌های جنبشی CL با حساسیت یکسان دستگاه اندازه‌گیری شدند.

ظرفیت آنتی اکسیدانی از تغییر در مساحت (AS) زیر منحنی جنبشی نورتابی شیمیایی (مجموع نور) پس از افزودن یک ماده حاوی یک آنتی اکسیدان محاسبه شد. برای انجام این کار، ما S0 را برای یک سیستم بدون آنتی اکسیدان محاسبه کردیم و ناحیه SS را از آن کم کردیم، که مشخص کننده سیستمی است که آنتی اکسیدان به آن اضافه شده است. مقدار AS به حساسیت شیمی‌لومینومتر و شرایط اندازه‌گیری بستگی دارد. نسبت AS/C ■ V (که در آن C غلظت ماده بیولوژیکی مورد مطالعه در کووت، g/l، و V حجم کووت، l است) ظرفیت آنتی اکسیدانی 1 گرم از ماده مورد مطالعه را بیان می کند. یعنی مواد خام گیاهی

به روشی مشابه، ظرفیت آنتی اکسیدانی ASa محلولی از یک آنتی اکسیدان استاندارد، به عنوان مثال، کورستین را که در همان حجم مخلوط واکنش قرار داده شده است، محاسبه کردیم. نسبت AS/CÄ ■ V (که در آن CA غلظت وزنی آنتی اکسیدان در کووت، g/l است) ظرفیت آنتی اکسیدانی 1 گرم آنتی اکسیدان را بیان می کند.

برای هر یک از آنتی اکسیدان های استاندارد، سیگنال از محلول های چند غلظت ثبت شد تا اطمینان حاصل شود که محاسبات در یک رابطه خطی قرار دارند و نتایج به دست آمده قابل تکرار هستند. در واقع، یک وابستگی خطی (ASa = kA ■ CA) سیگنال به غلظت به دست آمد که از آن ضریب استوکیومتری kA محاسبه شد. با توجه به معیار فیشر، مقادیر kA به‌دست‌آمده برای آنتی‌اکسیدان‌های استاندارد از نظر آماری با احتمال 975/0 معنی‌دار است. سپس، سیگنال از چهار غلظت برای هر یک از چهار نمونه گیاهی ثبت شد، و برای همه نمونه ها یک وابستگی خطی سیگنال به غلظت به دست آمد (AS = k ■ C)، که از آن ضریب استوکیومتری k محاسبه شد. با احتمال 0.975 (آزمون فیشر)، مقادیر k به دست آمده برای نمونه های گیاهی از نظر آماری معنی دار است. ظرفیت آنتی اکسیدانی کل مواد گیاهی بر حسب جرم آنتی اکسیدان استاندارد (mg%) با استفاده از فرمول بدست آمد.

OAE = k ■ 105. k

مقادیر به صورت میانگین حسابی ± انحراف معیار (M ± 5) در p ارائه شد.<0,05.

نتایج تحقیق

مطالعه سینتیک نورتابی شیمیایی در حضور آسکوربات سدیم (شکل 1) نشان داد که این آنتی اکسیدان با یک دوره نهفته که CL تقریباً به طور کامل سرکوب شده است مشخص می شود. مدت زمان آن متناسب با مقدار آنتی اکسیدان موجود در سیستم است. در این حالت، نه شیب منحنی های CL تغییر می کند و نه شدت CL در فلات. این با این واقعیت توضیح داده می شود که اسید اسکوربیک یک آنتی اکسیدان قوی است که تمام رادیکال های تشکیل شده در سیستم، از جمله رادیکال های لومینول را قطع می کند و CL تا زمانی که تمام آسکوربات اکسید نشود، ایجاد نمی شود.

اثر توکوفرول (شکل 2) با کاهش شدت CL در فلات آشکار شد، که برای آنتی اکسیدان های ضعیف معمول است، اگرچه توکوفرول یکی از مهمترین آنها در نظر گرفته می شود.

آنتی اکسیدان های قوی شاید این اختلاف به این دلیل باشد که در آزمایش ما رادیکال‌های آزاد در یک محلول آبی بودند، در حالی که اثر توکوفرول معمولاً در محیط‌های غیرقطبی مطالعه می‌شود. در مطالعه‌ای که منبع رادیکال‌ها مجموعه‌ای از سیتوکروم c با کاردیولیپین بود و واکنش با لومینول در این کمپلکس انجام شد، توکوفرول دارای خواص یک آنتی‌اکسیدان با قدرت متوسط بود.

با مطالعه تأثیر غلظت‌های مختلف کوئرستین بر روی سیستم ما (شکل 3) و مقایسه منحنی‌های جنبشی آن و سدیم آسکوربات و توکوفرول، می‌توان به این نکته اشاره کرد که اثر اصلی کورستین در تغییر شیب ظاهر می‌شود. منحنی ها، به عنوان مثال، سرعت توسعه CL، که برای آنتی اکسیدان های با قدرت متوسط معمول است.

منحنی‌های CL برای همه جوشانده‌های مورد مطالعه (شکل 4) شبیه منحنی‌های کورستین با کاهش جزئی در شدت CL در انتها، یعنی هنگام رسیدن به

زمان، دقیقه

برنج. 1. اثر آسکوربات سدیم بر سینتیک لومینسانس شیمیایی

غلظت اجزای سیستم: لومینول - 40 میکرومولار، پراکسیداز ترب کوهی - 4 نانومولار، پراکسید هیدروژن - 100 میکرومولار. منحنی ها: 1 - نمونه شاهد. 2 - 0.05 میکرومولار؛ 3 - 0.10 میکرومولار؛ 4 - 0.15 میکرومولار؛ 5 - 0.2 میکرومولار؛ 6 - 0.25 میکرومولار آسکوربات سدیم.

فلات همانطور که در کار نشان داده شده است، این رفتار برای آنتی اکسیدان های با قدرت متوسط معمول است که در مورد ما شامل پلی فنول ها - فلاونوئیدها و تانن ها می شود. برای تزریق میوه های تمشک (شکل 4، D)، کاهش قابل توجهی در نورتابی شیمیایی در سطح فلات وجود دارد که برای آنتی اکسیدان های ضعیف، مانند توکوفرول در این مورد، معمول است. از نظر کورستین و توکوفرول، تزریق تمشک حاوی 4.7 ± 0.9 میکرومول بر گرم کورستین و 11.9 ± 0.8 میکرومول بر گرم توکوفرول است.

هنگام مقایسه منحنی های نورتابی شیمیایی به دست آمده برای غلظت های مختلف از چهار عصاره آبی مورد مطالعه از مواد گیاهی، نشان داده شد که سهم آنتی اکسیدان های متوسط و ضعیف در ظرفیت آنتی اکسیدانی کل نمونه ها در سری های زیر کاهش یافته است: تزریق میوه تمشک (شکل 4). ، د)، جوشانده گل رز (شکل 4، ب)، جوشانده میوه های بادام کوهی (شکل 4، الف)، جوشانده میوه های زالزالک (شکل 4، ب). مقادیر AS بر اساس غلظت C ماده مورد مطالعه در کووت و مقادیر ظرفیت کل آنتی اکسیدانی بر حسب کوئرستین در جدول نشان داده شده است.

بحث در مورد نتایج

داده‌های به‌دست‌آمده در طول آزمایش‌ها و مقادیر OAE اشیاء مورد مطالعه محاسبه‌شده بر اساس آن‌ها با محتوای آنتی‌اکسیدان‌های اصلی موجود در آنها، با استفاده از روش‌های شیمیایی تجزیه و تحلیل، مقایسه شد. با وجود این واقعیت که همبستگی مثبت بین مقدار کل آنتی اکسیدان ها و TAU در اشیاء مختلف غیرقابل انکار است، هنوز تفاوت های قابل توجهی بین این شاخص ها وجود دارد. به عنوان مثال، اگر مجموع محتوای فلاونوئیدها، تانن ها و اسید اسکوربیک را در نظر بگیریم، معلوم می شود که برای همه اشیاء مورد مطالعه، به جز جوشانده میوه های زالزالک (جدول) بیشتر از TAU محاسبه شده است.

سایر محققان نیز نشان داده اند که نتایج تجزیه و تحلیل شیمیایی و مقدار TAU تعیین شده با روش نورتابی شیمیایی اغلب با هم مطابقت ندارند. در عملیات، ظرفیت آنتی اکسیدانی کل، تعیین می شود

46 زمان، دقیقه

من" "ه چی ----.

برنج. 2. اثر توکوفرول بر سینتیک لومینسانس شیمیایی

غلظت اجزای سیستم: لومینول - 40 میکرومولار، پراکسیداز ترب کوهی - 4 نانومولار، پراکسید هیدروژن - 100 میکرومولار. منحنی ها: 1 - نمونه کنترل. 2 - 0.01 میکرومولار؛ 3 - 0.025 میکرومولار؛ 4 - 0.06 میکرومولار؛ 5 - 0.1 میکرومولار؛ 6 - 0.2 میکرومولار توکوفرول.

46 زمان، دقیقه

برنج. 3. اثر کوئرستین بر سینتیک لومینسانس شیمیایی غلظت اجزای سیستم: لومینول - 40 میکرومولار، پراکسیداز ترب - 4 نانومولار، پراکسید هیدروژن - 100 میکرومولار. منحنی ها: 1 - نمونه کنترل. 2 - 0.02 میکرومولار؛ 3 - 0.03 میکرومولار؛ 4 - 0.04 میکرومولار؛ 5 - 0.05 میکرومولار؛ 6 - 0.06 میکرومولار کوئرستین.

زمان، دقیقه

46 زمان، دقیقه

120 I 100 80\60 40 20

46 زمان، دقیقه

برنج. 4. تأثیر جوشانده میوه‌های باسن (A)، زالزالک (B)، گل رز (C) و دم کرده میوه تمشک (D) بر سینتیک نورتابی شیمیایی غلظت اجزای سیستم: لومینول - 40 میکرومولار، پراکسیداز ترب - 4. nM، پراکسید هیدروژن - 100 میکرومولار. (الف) منحنی ها: 1 - نمونه کنترل. 2 - 0.002 گرم در لیتر؛ 3 - 0.004 گرم در لیتر؛ 4 - 0.006 گرم در لیتر؛ 5 - 0.008 گرم در لیتر جوشانده از میوه های بادام کوهی. (ب) منحنی ها: 1 - نمونه کنترل. 2 - 0.005 گرم در لیتر؛ 3 - 0.0075 گرم در لیتر؛ 4 - 0.01 گرم در لیتر؛ 5 - جوشانده 0.0125 گرم در لیتر میوه زالزالک. (ب) منحنی ها: 1 - نمونه کنترل. 2 - 0.001 گرم در لیتر؛ 3 - 0.0015 گرم در لیتر؛ 4 - 0.002 گرم در لیتر؛ 5 - 0.0025 گرم در لیتر جوشانده گل رز. (د) منحنی ها: 1 - نمونه کنترل. 2 - 0.001 گرم در لیتر؛ 3 - 0.003 گرم در لیتر؛ 4 - 0.004 گرم در لیتر؛ 5 - 0.005 گرم در لیتر دم کرده میوه تمشک.

در سیستم پراکسیداز-لومینول-پراکسید هیدروژن با محتوای ترکیبات تری ترپن در ارتباط است. با این حال، در کار همان نویسندگان، که در آن موضوع مطالعه گیاه دیگری بود، آنها ارتباط OAE را با محتوای هیچ گروهی از مواد، از جمله فلاونوئیدها مشاهده نکردند.

چنین اختلافاتی حداقل با سه عامل مرتبط است. اولاً، فعالیت آنتی اکسیدان ها مهم است، یعنی میزان برهمکنش آنها با رادیکال ها، که برای آنتی اکسیدان های مختلف موجود در نمونه گیاهی متفاوت است. به گفته ایزمایلوف، ثابت سرعت واکنش های مربوطه برای مکیدول، توکوفرول و کورستین به صورت 0.04: 2: 60 همبستگی دارد. با توجه به کار، اسیدهای کوئرستین، اوریک و اسکوربیک به ترتیب 0.1 ± 3.6، 0.1 ± 1.4 و 0.2 ± 0.5 رادیکال در هر مولکول آنتی اکسیدانی واکنش نشان دادند (سیستم هیمن-H2O2-لومینول استفاده شد). ثالثاً، نتایج مطالعه می تواند تحت تأثیر وجود فعالیت پراکسیداز در خود نمونه های گیاهی، مانند کار، و همچنین وجود کلسیم در نمونه ها باشد که همانطور که در کار نشان داده شده است، می تواند افزایش یابد. فعالیت پراکسیداز ترب کوهی تحت شرایط خاص. این معمولا منجر به بیشتر می شود

شدت CL بالاتر در فلات نسبت به منحنی های کنترل، که ما، با این حال، مشاهده نکردیم.

اولین عامل به شدت استفاده از چنین پارامتری را به عنوان تغییر در مجموع نور محدود می کند، زیرا زمان اندازه گیری نورتابی شیمیایی باید بیشتر از زمان مصرف همه آنتی اکسیدان ها در نمونه آزمایشی باشد. وقوع این لحظه را تنها با اندازه گیری سینتیک نورتابی شیمیایی می توان قضاوت کرد. علاوه بر این، سهم آنتی اکسیدان های ضعیف در OAU به شدت دست کم گرفته می شود، زیرا زمان اکسیداسیون کامل آنها چندین برابر بیشتر از مدت زمان اندازه گیری قابل قبول (10-20 دقیقه) است.

ضریب استوکیومتری آنتی اکسیدان از اهمیت بیشتری برخوردار است. تعداد رادیکال های n رهگیری شده توسط آن برابر است

که در آن p ضریب استوکیومتری و Am تغییر در غلظت آنتی اکسیدان در طول زمان اندازه گیری است، در مورد ما غلظت اولیه ماده آزمایش در نمونه آزمایشی است.

تفاوت در مجموع نور لومینسانس در غیاب آنتی اکسیدان و در حضور آن متناسب با n است. متر،

که در آن ضریب استوکیومتری یک آنتی اکسیدان خاص است و m غلظت آن در حین اندازه گیری است

هدف مطالعه فلاونوئیدها، mg%* تانن، mg%* اسید اسکوربیک، mg%* AS/C ■ 10-8، arb. واحدها TAU، میلی گرم درصد کورستین

جوشانده میوه روون 8.87 ± 0.01 210.00 ± 10.00 0.67 ± 0.02 7.13 ± 0.96 56.53 ± 7.61

جوشانده گل سرخ 4.66 ± 0.04 850.00 ± 20.00 3.70 ± 0.12 16.60 ± 3.40 131.63 ± 27.26

جوشانده میوه زالزالک 3.01 ± 0.06 12.00 ± 3.00 0.23 ± 0.002 3.18 ± 0.29 25.20 ± 2.32

دم کرده میوه های خشک تمشک 90.00 ± 4.00 40.00 ± 20.00 3.91 ± 0.08 6.65 ± 1.21 52.69 ± 9.56

توجه: * - داده های ادبیات، . AS - تغییر در مجموع نور برای نمونه، rel. واحد، C - غلظت نمونه در کووت، g/l. مقادیر محاسبه شده در p قابل اعتماد هستند<0,05. Число измерений для каждого образца - четыре.

رنیا تعداد کل رادیکال های رهگیری مطمئناً با مقدار کل آنتی اکسیدان ها برابر نیست، زیرا ضرایب pt نه تنها برابر با واحد نیست، بلکه برای آنتی اکسیدان های مختلف نیز به طور قابل توجهی متفاوت است.

مقدار n متناسب با تفاوت در مجموع نور اندازه گیری شده در یک زمان معین بین نمونه حاوی آنتی اکسیدان و نمونه شاهد فاقد آنتی اکسیدان است:

که در آن k ضریبی است که در شرایط اندازه گیری یکسان ثابت است.

ما شرایط را برای ارزیابی ظرفیت آنتی اکسیدانی کل مواد خام گیاهی با ثبت سینتیک لومینسانس شیمیایی در سیستمی متشکل از پراکسیداز ترب کوهی، پراکسید هیدروژن و لومینول انتخاب کردیم (غلظت‌های جزء - به ترتیب 4 نانومولار، 100 میکرومولار و 40 میکرومولار؛ فسفات 20 میلی‌مولار). بافر، pH 7.4)،

اکسیداسیون آنتی اکسیدان های قوی (اسید اسکوربیک) و آنتی اکسیدان های با قدرت متوسط (کوئرستین) را در 10 دقیقه تضمین کرد. این مدت زمان اندازه گیری راحت است و کیفیت اندازه گیری مورد نیاز را تضمین می کند.

ادبیات

1. Proskurnina E. V., Vladimirov Yu. A. رادیکال های آزاد به عنوان شرکت کنندگان در فرآیندهای نظارتی و پاتولوژیک. در: Grigoriev A.I.، Vladimirov Yu.A.، ویراستاران. علوم پایه - پزشکی. بیوفیز. عسل. تکنولوژی M.: MAX Press; 2015. ج 1. ص. 38-71.

3. Khasanov V.V., Ryzhova G.L., Maltseva E.V. روشهای مطالعه آنتی اکسیدانها. شیمی. راست مواد خام. 2004; (3): 63-75.

4. Vasiliev R. F.، Kancheva V. D.، Fedorova G. F.، Butovska D. I.، Trofimov A. V. فعالیت آنتی اکسیدانی چالکون ها. تعیین واکنش‌پذیری شیمیایی و محاسبه شیمیایی کوانتومی انرژی‌ها و ساختار معرف‌ها و واسطه‌ها. سینتیک و کاتالیز. 2010; 51 (4): 533-41.

6. Fedorova GF، Trofimov AV، Vasil"ev RF، Veprintsev TL. Peroxy-

لومینسانس شیمیایی با واسطه رادیکال: تنوع مکانیکی و اصول برای سنجش آنتی اکسیدانی آرکیووک 2007; 8: 163-215.

8. Bastos EL، Romoff P، Eckert CR، Baader WJ. ارزیابی ظرفیت ضد رادیکال توسط نورتابی شیمیایی لومینول ناشی از H2O2-همین. J Agric Food Chem. 3 دسامبر 2003; 51 (25): 7481-8.

9. Vladimirov Yu. A., Proskurnina E. V. رادیکال های آزاد و نورتابی شیمیایی سلولی. اوسپخی بیول. شیمی 2009; 49: 341-88.

10. Vladimirov Yu. A., Proskurnina E. V., Izmailov D. Yu. نورتابی شیمیایی جنبشی به عنوان روشی برای مطالعه واکنش های رادیکال های آزاد. بیوفیزیک. 2011; 56 (6): 1081-90.

11. Izmailov D. Yu.، Demin E. M.، Vladimirov Yu. A. تعیین فعالیت آنتی اکسیدانی با اندازه گیری سینتیک نورتابی شیمیایی. فوتوبیولوژی و فتوپزشکی. 2011; 7 (2): 70-6.

12. Lissi EA، Pascual C، Del Castillo MD. لومینسانس لومینول ناشی از ترمولیز 2.2"-Azo-bis(2-amidinopropane). رایگان

Radic Res Commun. 1992; 17 (5): 299-311.

13. Lissi EA، Pascual C، Del Castillo MD. در مورد استفاده از خاموش کردن لومینسانس لومینول برای ارزیابی فعالیت SOD. رادیک آزاد بیول مد. ژوئن 1994; 16 (6): 833-7.

15. Lissi EA، Salim-Hanna M، Pascual C، Del Castillo MD. ارزیابی پتانسیل آنتی اکسیدانی کل (TRAP) و واکنش آنتی اکسیدانی کل از اندازه گیری های لومینسانس شیمیایی تقویت شده با لومینول. رادیک آزاد بیول مد. فوریه 1995; 18 (2): 153-8.

17. Cormier MJ، Prichard PM. بررسی مکانیسم پراکسیداسیون شب تاب لومینول با تکنیک های جریان متوقف شده جی بیول شیمی. 25 سپتامبر 1968; 243 (18): 4706-14.

21. Alekseev A.V., Proskurnina E.V., Vladimirov Yu.A. تعیین آنتی اکسیدان ها با لومینسانس شیمیایی فعال شده با استفاده از 2،2"-azo-bis(2-amidinopropane). Vestn. MGU. Ser. 2. Chem 2012; 53(3): 187-93.

24. وزارت بهداشت فارماکوپه ایالتی اتحاد جماهیر شوروی شوروی XI ویرایش. جلد 2 «روشهای کلی تحلیل. مواد اولیه گیاهان دارویی." م.: پزشکی; 1987. ص. 147-8.

25. Sergunova E. V., Sorokina A. A., Kornyushina M. A. مطالعه آماده سازی های استخراج گل رز. داروخانه. 2012; (2): 14-6.

26. Sergunova E. V., Sorokina A. A., Avrach A. S. مطالعه میوه های زالزالک با استفاده از روش های مختلف نگهداری و استخراج آبی. داروخانه. 2010; (5): 16-8.

27. Avrach A. S., Sergunova E. V., Kuksova Ya. V. مواد فعال بیولوژیکی میوه ها و عصاره های آبی تمشک معمولی. داروخانه. 2014; (1): 8-10.

28. Avrach A. S., Samylina I. A., Sergunova E. V. مطالعه مواد فعال بیولوژیکی میوه های زالزالک - مواد خام برای تهیه تنتورهای ماتریکس هومیوپاتی. در روز شنبه علمی tr. بر اساس مواد XXIV مسکو. بین المللی هومیوپاتیست conf. "توسعه روش هومیوپاتی در پزشکی مدرن"؛ 24-25 ژانویه 2014; مسکو. م. 2014. ص. 146-7.

29. Sergunova E. V., Sorokina A. A. مطالعه ترکیب مواد فعال بیولوژیکی در مواد خام گیاهی دارویی روشهای مختلف نگهداری. در روز شنبه پایان نامه ها بر اساس مواد XX Ross. ملی congr. "انسان و پزشکی"؛ 15-19 آوریل 2013; مسکو. M.: EKOOnis; 2013. ص. 184-90.

30. Aleksandrova E. Yu., Orlova M. A., Neiman P. L. مطالعه فعالیت پراکسیداز در عصاره های ریزوم و ریشه ترب و پایداری آن در برابر تأثیرات مختلف. وستن دانشگاه دولتی مسکو. سر. 2. شیمی. 2006; 47 (5): 350-2.

1. Proskurnina EV، Vladimirov YuA. Svobodnye radikaly kak uchastniki regulyatornykh i patologicheskikh protsessov. در: Grigor"ev AI، Vladimirov YuA، ویراستاران. Fundamental"nye nauki - medicitsine. Biofizicheskie Meditsinskie Technologii. مسکو: MAKS Press; 2015.v. 1. ص. 38-71. روسی.

2. چاندا اس، دیو آر. مدل های آزمایشگاهی برای ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی و برخی گیاهان دارویی دارای خواص آنتی اکسیدانی: یک مرور کلی. Afr J Microbiol Res. دسامبر 2009; 3 (13): 981-96.

3. Khasanov VV, Ryzhova GL, Mal"tseva EV. Metody issledovaniya antioksidantov. Khimija Rastitel"nogo Syr"ja. 2004؛ (3): 63-75. روسی.

4. Vasil"ev RF، K""ncheva VD، Fedorova GF، B""tovska DI، Trofimov AV. Antioksidantnaya aktivnost" khalkonov. Khemilyuminestsentnoe opredelenie reaktsionnoi sposobnosti i kvantovo-khimicheskii raschet energii و stroeniya reagentov و intermediatov. سینتیک و کاتالیز. 2010; 51 (4): 533-41. روسی.

5. Slavova-Kazakova AK، Angelova SE، Veprintsev TL، Denev P، Fabbri D، Dettori MA، و همکاران. پتانسیل آنتی اکسیدانی ترکیبات مرتبط با کورکومین که توسط سینتیک لومینسانس شیمیایی، راندمان شکستن زنجیره، فعالیت مهار (ORAC) و محاسبات DFT مورد مطالعه قرار گرفت. Beilstein J Org Chem. 11 آگوست 2015; 11: 1398-411.

6. Fedorova GF، Trofimov AV، Vasil"ev RF، Veprintsev TL. نورتابی شیمیایی با واسطه پراکسی رادیکال: تنوع مکانیکی و اصول برای سنجش آنتی اکسیدانی. Arkivoc. 2007؛ 8: 163-215.

7. Fedorova GF، Menshov VA، Trofimov AV، Vasil"ev RF. سنجش نورتابی شیمیایی آسان برای خواص آنتی اکسیدانی لیپیدهای گیاهی: مبانی و نمونه های گویا. تحلیلگر اکتبر 2009؛ 134 (10): 2128-34.

8. Bastos EL، Romoff P، Eckert CR، Baader WJ. ارزیابی ظرفیت ضد رادیکال توسط لومینول ناشی از H2O2-همین

9. Vladimirov YuA، Proskurnina EV. Svobodnye radikaly i kletochnaya khemilyuminestsentsiya. اوسپ بیول خیم. 2009; 49: 341-88. روسی.

10. Vladimirov YuA، Proskurnina EV، Izmailov DYu. Kineticheskaya khemilyuminestsentsiya kak metod izucheniya reaktsii svobodnykh radikalov. بیوفیزیک. 2011; 56 (6): 1081-90. روسی.

11. Izmailov DYu، Demin EM، Vladimirov YuA. Opredelenie aktivnosti antioksidantov metodom izmereniya kinetiki khemilyuminestsen-tsii. فوتوبیولوژی و عکس مدیتسینا. 2011; 7 (2): 70-6. روسی.

12. Lissi EA، Pascual C، Del Castillo MD. لومینسانس لومینول ناشی از گرماسازی 2،2"-Azo-bis(2-amidinopropane). Free Radic Res Commun. 1992؛ 17 (5): 299-311.

14. Lissi EA، Escobar J، Pascual C، Del Castillo MD، Schmitt TH، Di Mascio P. نورتابی شیمیایی قابل مشاهده مرتبط با واکنش بین متهموگلوبین یا اکسی هموگلوبین با پراکسید هیدروژن. Photochem Photobiol. نوامبر 1994; 60 (5): 405-11.

16. Landi-Librandi AP، de Oliveira CA، Azzolini AE، Kabeya LM، Del Ciampo JO، Bentley MV، و همکاران. ارزیابی در شرایط آزمایشگاهی فعالیت آنتی اکسیدانی فلاونول های لیپوزومی توسط سیستم HRP-H2O2-luminol. J میکرو کپسول. 2011; 28 (4): 258-67.

17. Cormier MJ، Prichard PM. بررسی مکانیسم

پراکسیداسیون شب تاب لومینول با تکنیک های جریان متوقف شده جی بیول شیمی. 25 سپتامبر 1968; 243 (18): 4706-14.

18. Chang CL، Lin CS، Lai GH. ویژگی های فیتوشیمیایی، فعالیت های مهار رادیکال های آزاد و محافظت عصبی از پنج عصاره گیاه دارویی Evid Based Complement Alternat Med. 2012; 2012: 984295. doi: 10.1155/2012/984295. Epub 2011 10 اوت.

19. Chang CL، Lin CS. ترکیب فیتوشیمیایی، فعالیت آنتی اکسیدانی و اثر محافظتی عصبی عصاره Terminalia chebula Retzius. Evid Based Complement Alternat Med. 2012; 2012: 125247. doi: 10.1155/2012/125247. Epub 2011 5 ژوئیه.

20. Georgetti SR، Casagrande R، Di Mambro VM، Azzolini AE، Fonseca MJ. ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی فلاونوئیدهای مختلف به روش نورتابی شیمیایی. AAPS PharmSci. 2003; 5 (2): 111-5.

21. Alekseev AV، Proskurnina EV، Vladimirov YuA. Opredelenie antioksidantov metodom aktivirovannoi khemilyuminestsentsii s ispol"zovaniem 2,2"-azo-bis(2-amidinopropana). بولتن شیمی دانشگاه مسکو. 2012; 53 (3): 187-93. روسی.

22. Pogacnik L، Ulrih NP. استفاده از روش بهینه لومینسانس شیمیایی برای تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی عصاره های گیاهی. لومینسانس. نوامبر-دسامبر 2012; 27 (6): 505-10.

23. صالح L، Plieth C. مجموع آنتی اکسیدان های با وزن مولکولی کم به عنوان یک پارامتر خلاصه، در نمونه های بیولوژیکی با روش مهار نورتابی شیمیایی کمی سازی شده است. پروتوک Nat. سپتامبر 2010; 5 (10): 1627-34.

24. Ministrystvo zdravookhraneniya SSSR. Gosudarsvennaya farmakopeya SSSR. ویرایش یازدهم Iss. 2. «تحلیل روش اوبشچیه».

Lekarstvennoe rastitel "noe syr"e". مسکو: Medltsina؛ 1987. ص 147-8. روسی.

25. Sergunova EV، Sorokina AA، Kornyushina MA. Izuchenie ekstraktsionnykh preparatov shipovnika. داروخانه. 2012; (2): 14-6. روسی.

26. Sergunova EV، Sorokina AA، Avrach AS. ایزوچنیه پلودوف بویریشنیکا رازلیچنیخ اسپوسوبوف کنسرواتسیی ای وودنیخ ایزولوچنیئی. فارماتسیا. 2010; (5): 16-8. روسی.

27. Avrach AS، Sergunova EV، Kuksova YaV. بیولوژیچسکی اکتیوینیه وشچستوا پلودوف و ودنیخ ایزولهچینی مالینی اوبیکنونوی. فارماتسیا. 2014; (1): 8-10. روسی.

28. Avrach AS, Samylina IA, Sergunova EV. Izuchenie biologicheski aktivnykh veshchestv plodov boyaryshnika - syr"ya dlya prigotovleniya nastoek gomeopaticheskikh matrichnykh. مجموعه مقالات چهاردهمین کنفرانس بین المللی هومیوپاتی مسکو "Razvitie gomeopaticheskogo methoda v sovremennoi p.2014 Moscow;20.2014; 146- 7. روسی.

29. Sergunova EV، Sorokina AA. Izuchenie sostava biologicalheski aktivnykh veshchestv v lekarstvennom rastitel "nom syr"e razlichnykh sposobov konservatsii. مجموعه مقالات بیستمین کنگره ملی روسیه "Chelovek i lekarstvo"؛ 2013 Apr 1519; مسکو. مسکو: EkOOnis; 2013. ص. 184-90. روسی.

30. Aleksandrova EYu، Orlova MA، Neiman PL. Izuchenie peroksidaznoi aktivnosti v ekstraktakh iz kornevishcha i kornei khrena i ee stabil"nosti k razlichnym vozdeistviyam. بولتن شیمی دانشگاه مسکو. 2006؛ 47 (5): 350-2. روسی.

1 بولشاکوا L.S. 1Milentyev V.N. 2Sannikov D.P. 3Kazmin V.M. 2

1 موسسه آموزشی بودجه ایالتی فدرال آموزش عالی حرفه ای "موسسه اقتصاد و تجارت ایالت اوریول"

2 موسسه بودجه ایالتی فدرال "مرکز شیمیایی سازی و رادیولوژی کشاورزی "اورلوفسکی"

3 موسسه آموزشی بودجه دولت فدرال آموزش عالی حرفه ای "دانشگاه دولتی - مجتمع آموزشی، پژوهشی و تولیدی"

امکان استفاده از لومینسانس شیمیایی برای ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی مواد مغذی مورد بررسی قرار گرفت. روش پیشنهادی مبتنی بر نورتابی شیمیایی لومینول در یک محیط قلیایی است که شدت آن به مقدار پراکسیدهای نمونه نورتابی شیمیایی بستگی دارد. نورتابی شیمیایی با استفاده از یک تاسیسات توسعه یافته شامل یک پمپ دوز، یک محفظه ضد نور، یک فتومولتیپلایر خلاء شیشه ای و یک سیستم کامپیوتری ثبت شد. برای افزایش نورتابی شیمیایی، محلولی از سولفید آهن پتاسیم به لومینول اضافه شد. تغییرات در شدت نورتابی شیمیایی در لحظه معرفی نمونه تجزیه و تحلیل شده به محلول لومینول ثبت شد. عصاره قاصدک حاصل از تقطیر خشک در دمای پایین به عنوان نمونه مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. حاوی ترکیبات فنلی است که به دلیل فعالیت آنتی اکسیدانی بالا شناخته شده است. مشخص شده است که روش لومینسانس شیمیایی می تواند برای تعیین خواص آنتی اکسیدانی ترکیبات غذایی مختلف استفاده شود.

پیوند کتابشناختی

پانیچکین A.V.، Bolshakova L.S.، Milentyev V.N.، Sannikov D.P.، Kazmin V.M. استفاده از شیمی‌لومینسانس برای ارزیابی خواص آنتی اکسیدانی مواد غذایی // تغذیه منطقی، افزودنی‌های غذایی و محرک‌های زیستی. – 2014. – شماره 6. – ص 36-37;
آدرس اینترنتی: http://journal-nutrition.ru/ru/article/view?id=283 (تاریخ دسترسی: 2019/12/17). مجلات منتشر شده توسط انتشارات "آکادمی علوم طبیعی" را مورد توجه شما قرار می دهیم.

کار فارغ التحصیل

1.4 روش های تحقیق آنتی اکسیدانی

فعالیت آنتی اکسیدانی طبقه بندی می شود: با توجه به روش های ثبت AOA آشکار (حجمی، فتومتریک، نورتابی شیمیایی، فلورسنت، الکتروشیمیایی). بر اساس نوع منبع اکسیداسیون؛ بر اساس نوع ترکیبی که اکسید می شود؛ با روش اندازه گیری ترکیب اکسید شده.

با این حال، شناخته شده ترین روش ها برای تعیین فعالیت آنتی اکسیدانی عبارتند از:

1 TEAC (ظرفیت آنتی اکسیدانی معادل ترولاکس): روش بر اساس واکنش زیر است:

متمیوگلوبین + H 2 O 2 > فریل گلوبین + ABTS > ABTS * + AO.

روش معادل ترولوکس (TEAC) مبتنی بر توانایی آنتی اکسیدان ها برای کاهش کاتیون های رادیکال 2،2-آزینوبیس (ABTS) و در نتیجه مهار جذب در ناحیه طول موج بلند طیف (600 نانومتر) است. یک نقطه ضعف قابل توجه روش، واکنش دو مرحله ای برای تولید رادیکال است. این امر زمان تجزیه و تحلیل را طولانی می کند و می تواند پراکندگی نتایج را افزایش دهد، علیرغم این واقعیت که مجموعه استاندارد شده ای از معرف ها برای تجزیه و تحلیل استفاده می شود.

2 FRAP (قدرت آنتی اکسیدانی کاهنده آهن): این روش بر اساس واکنش زیر است:

Fe(III)-Tripyriditriazine+AO>Fe(II)-Tripyridyltriazine.

ظرفیت کاهش دهنده/آنتی اکسیدانی آهن (FRAP). واکنش مورد استفاده در اینجا کاهش Fe(III)-tripyridyltriazine به Fe(II)-tripyridyltriazine است. با این حال، این روش نمی تواند تعیین برخی از آنتی اکسیدان ها مانند گلوتاتیون را تعیین کند. این روش امکان تعیین مستقیم آنتی اکسیدان های با وزن مولکولی کم را فراهم می کند. در pH پایین، کاهش کمپلکس Fe(III)-tripyridyltriazine به کمپلکس Fe(II) با ظاهر یک رنگ آبی شدید همراه است. اندازه گیری ها بر اساس توانایی آنتی اکسیدان ها برای سرکوب اثر اکسیداتیو گونه های واکنش تولید شده در مخلوط واکنش است. اجرای این روش ساده، سریع و کم هزینه است.

3 ORAC (ظرفیت جذب رادیکال اکسیژن): روش بر اساس واکنش زیر است:

Fe(II)+H2O2 >Fe(III) + OH*+AO>OH* + Luminol.

تعیین ظرفیت جذب رادیکال اکسیژن (ORAC). در این روش، فلورسانس یک بستر (فیکواریترین یا فلورسین) که در نتیجه برهمکنش آن با ROS ایجاد می شود، ثبت می شود. اگر نمونه آزمایشی حاوی آنتی اکسیدان باشد، کاهش فلورسانس نسبت به نمونه شاهد مشاهده می شود. این روش در ابتدا توسط دکتر Guohua Kao در موسسه ملی پیری در سال 1992 توسعه یافت. در سال 1996، دکتر کائو با دکتر رونالد پرایر در یک گروه مشترک در مرکز تحقیقات سالمندی USDA، که در آن روش نیمه خودکار بود، همکاری کرد. ایجاد شده.

4 TRAP (پارامتر آنتی اکسیدانی به دام انداختن کل رادیکال): روش بر اساس واکنش زیر است:

AAPH+AO>AAPH* + PL (FE).

این روش از توانایی آنتی اکسیدان ها برای تعامل با رادیکال پراکسیل 2،2-آزوبیس (2-آمیدینوپروپان) دی هیدروکلراید (AAPH) بهره می برد. تغییرات TRAP شامل روش هایی برای ضبط سیگنال تحلیلی است. اغلب، در مرحله نهایی تجزیه و تحلیل، رادیکال پراکسی AAPH با یک سوبسترای نوری (لومینول)، فلورسنت (دی کلرو فلورسین دی استات، DCFH-DA) یا سایر بسترهای فعال نوری برهمکنش می‌کند.

مشتقات ویتامین E محلول در آب Trolox (6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxy acid) به عنوان استاندارد برای روش های TEAC، ORAC و TRAP استفاده می شود.

اخیراً علاقه به استفاده از روش های الکتروشیمیایی برای ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی افزایش یافته است. این روش ها دارای حساسیت بالا و تجزیه و تحلیل سریع هستند.

ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی برخی از محصولات غذایی با روش پتانسیومتری بر اساس استفاده از خاصیت مواد آنتی اکسیدانی برای شرکت در واکنش های ردوکس ناشی از گروه های انول (-OH) و سولفیدریل (-SH) انجام می شود.

تعیین خواص آنتی اکسیدانی محلول ها بر اساس برهمکنش شیمیایی آنتی اکسیدان ها با سیستم واسطه است که منجر به تغییر پتانسیل ردوکس آن می شود. یک سلول الکتروشیمیایی محفظه ای است حاوی محلول بافر K-Na- فسفات، یک سیستم واسطه Fe(III)/Fe(II) و یک الکترود پیچیده قبل از اندازه گیری پتانسیل ردوکس. فعالیت آنتی اکسیدانی بر حسب g-eq/l ارزیابی می شود.

روش آمپرومتریک برای تعیین فعالیت آنتی اکسیدانی بر اساس اندازه گیری جریان الکتریکی است که در طول اکسیداسیون ماده آزمایش بر روی سطح الکترود کار که تحت پتانسیل خاصی است، رخ می دهد. حساسیت روش آمپرومتریک هم بر اساس ماهیت الکترود کار و هم پتانسیل اعمال شده به آن تعیین می شود. حد تشخیص آشکارساز آمپرومتریک پلی‌فنل‌ها و فلاونوئیدها در سطح نانو پیکوگرام است؛ در چنین غلظت‌های پایین، احتمال تأثیر متقابل آنتی‌اکسیدان‌های مختلف در کنار هم، به‌ویژه تجلی پدیده هم‌افزایی، کمتر است. . از معایب این روش می توان به ویژگی آن اشاره کرد: تحت این شرایط، آنتی اکسیدان هایی که خود در ناحیه پتانسیل های کاهش الکتریکی اکسیژن اکسید یا کاهش می یابند قابل تجزیه و تحلیل نیستند. از مزایای روش می توان به سرعت، پروستات و حساسیت آن اشاره کرد.

روش کولومتری گالوانوستاتیک با استفاده از اکسیدان های تولید شده الکتریکی - این روش برای تجزیه و تحلیل آنتی اکسیدان های محلول در چربی قابل استفاده است.

روش های مختلفی برای تعیین اسید اسکوربیک ایجاد شده است:

روش آمپرومتریک با استفاده از یک الکترود آلومینیوم اصلاح شده با یک فیلم از نیکل (II) hexacyanoferrate با غوطه وری ساده در یک محلول.

روشی برای تعیین فاز جامد اسپکتروفتومتری و آزمایش بصری اسید آسکوربیک با استفاده از ژروژل اسید سیلیسیک اصلاح شده با معرف Wawele و مس (II) به عنوان پودر نشانگر.

تعیین نورتابی شیمیایی اسید اسکوربیک را می توان با روش تزریق جریان با استفاده از واکنش نورتابی شیمیایی رودامین B با سریم (IV) در یک محیط اسید سولفوریک انجام داد.

تعیین اسید اسکوربیک در محدوده 10-8-10-3 g/cm3 توسط ولتامتری آندی در محیط های آبی و آبی-آلی.

رایج ترین روش FRAP است، زیرا سریع و بسیار حساس است. در طی چند دهه گذشته، تعداد زیادی روش برای تعیین فعالیت آنتی اکسیدانی با استفاده از روش FRAP توسعه یافته است (جدول 1).

جدول 1 توسعه روش FRAP و کاربرد آن برای تعیین فعالیت آنتی اکسیدانی اشیاء مختلف

	اشیاء تجزیه و تحلیل	یادداشت
	پلاسمای خون	t=4 دقیقه استوکیومتری واکنش و افزایشی مورد مطالعه قرار گرفت.
	چای، شراب	تعیین AOA ناشی از پلی فنل ها
		مقادیر AOA انواع مختلف چای مقایسه شد
پولیدو، براوو، سائورا- کالیکستو	راه حل های مدل	t=30 دقیقه تأثیر یک حلال غیر آبی نشان داده شد
	گیاهان
	خون، بافت	روش PIA تأثیر مواد خارجی آزمایش شده است.
فیروزی، لاکانا، پتروچی ای.ا.	راه حل های مدل	حساسیت تعیین AOهای مختلف به عنوان تابعی از ساختار و پتانسیل ردوکس آنها مورد مطالعه قرار گرفت.
کاتالینیک، میلوس،	شراب های مختلف
تمرداشف، تسیوپکو و دیگران.	مخلوط های مدل
لوژینوا، کونوالوا	داروها داروها	روش آزمون
تمرداشف، تسیوپکو و دیگران.	شراب های قرمز خشک	همبستگی AOA با سایر شاخص های کیفیت شراب
ادامه جدول 1
	مخلوط های مدل	حساسیت تعیین AOs مختلف مورد مطالعه قرار گرفت
ورشینین، ولاسوا، تسیوپکو	مخلوط های مدل	هنگامی که فقدان عامل اکسید کننده وجود داشت سیگنال غیرافزایشی بود
آنیسیموویچ، دینکا و دیگران.	راه حل های مدل	پارامترهای جنبشی برای ارزیابی AOA پیشنهاد شده است.

یادداشت‌ها: به طور معمول مشخص می‌شود: آنالیز تزریق جریان FIA، TPTZ-tripyridyltriazine، DIP-2،2،-dipyridyl، PHEN-o-phenanthroline، DPA-pyridinedicarboxylic acid، FZ-ferrozine، AA-ascorbic acid، CT-catechol، t- زمان نوردهی، حداقل

برهمکنش بین پروتئین ها و پلی الکترولیت ها در محلول های آبی

روش های تحلیلی مختلفی برای توصیف کمپلکس های پروتئین-پلی الکترولیت استفاده می شود. روش‌های ابزاری اطلاعاتی در مورد خواص ساختاری و نوری ارائه می‌دهند و همچنین دینامیک و ماهیت اتصال PEC را تعیین می‌کنند.

تأثیر ترکیبات d-metal بر سرعت تفکیک یک مولکول آب در یک غشای دوقطبی

در فرآیند سنتز BPM های جدید، باید توجه زیادی به مطالعه خواص نمونه های به دست آمده برای انتخاب بعدی شرایط سنتز شود که بهبود خصوصیات الکتروشیمیایی غشاهای سنتز شده را تضمین می کند.

داروهای طراح و کانابینوئیدهای مصنوعی

تشخیص کانابینوئیدهای مصنوعی در مخلوط‌های گیاهی می‌تواند با روش‌های مختلف فیزیکوشیمیایی مانند کروماتوگرافی-طیف‌سنجی جرمی، کروماتوگرافی گازی، کروماتوگرافی لایه نازک و کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا انجام شود.

توسعه روشی برای تعیین فلاونوئیدها در مواد گیاهی دارویی

سنتز و خواص فارماکولوژیکی کینولینون ها-2

موضوع مطالعه: کینولینون-2. روش تحقیق: با استفاده از برنامه کامپیوتری Marvin JS ساختار ماده ایجاد شد. سپس برای تحقیقات بیشتر به سایت "http://www.way2drug.com/PASSONline/predict.php" فرستاده شد...

روش طیفی حرارتی برای مطالعه محصولات تبخیر پلیمری اپوکسی

فناوری برای تولید کیتوزان بسیار خالص از پوسته سخت پوستان

تعیین وزن مولکولی کیتوزان وزن مولکولی کیتوزان به روش ویسکومتری و با استفاده از روش استاندارد تعیین شد. محلول هایی با غلظت 05/0 و 5/0 گرم در دسی لیتر با حل کردن نمونه ای از پودر پلیمر در بافر استات (0...

ویژگی های فیزیوگرافیک قلمرو پارک طبیعی

1 Milentyev V.N. 2Sannikov D.P. 3Kazmin V.M. 2

1 موسسه آموزشی بودجه ایالتی فدرال آموزش عالی حرفه ای "موسسه اقتصاد و تجارت ایالت اوریول"

2 موسسه بودجه ایالتی فدرال "مرکز شیمیایی سازی و رادیولوژی کشاورزی "اورلوفسکی"

3 موسسه آموزشی بودجه دولت فدرال آموزش عالی حرفه ای "دانشگاه دولتی - مجتمع آموزشی، پژوهشی و تولیدی"

لومینسانس شیمیایی

فعالیت آنتی اکسیدانی

پراکسیدها

مواد مغذی

1. واسیلیف R.F. درخشش شیمیایی // شیمی و شیمیدانان، 01.21.10. – آدرس اینترنتی: http://chemistry-chemists.com. (تاریخ دسترسی: 22/08/13).

2. ولادیمیروف یو.آ. رادیکال های آزاد و آنتی اکسیدان ها // Vestn. RAMS. – 1998. – شماره 7. – ص 43–51.

3. کوندراشووا E.A. لومینسانس شیمیایی به عنوان حساس ترین روش ایمونواسی آنزیمی و کاربرد آن // تشخیص آزمایشگاهی بالینی. – 1999. – شماره 9. – ص 32.

4. لیوبیموف، جی.یو. تجزیه و تحلیل شیمیایی لومینسانس // ایمونولوژی. – 1991. – شماره 1. – ص 40–49.

5. Mayansky A.N., Nevmyatullin A.L., Chebotar I.V. نورتابی شیمیایی واکنشی در سیستم فاگوسیتوز // میکروبیولوژی. – 1987. – شماره 1. – ص 109–115.

6. Sherstnev M.P. مسیرهای وابسته به کلسیم و مستقل از کلسیم برای تولید نورتابی شیمیایی سلولی // سوالات نورتابی شیمیایی. – 1991. – شماره 2. – ص 1–4.

امروزه، شیمی‌تابی نشان‌دهنده حوزه وسیعی از علم است که در حد فاصل بین شیمی، فیزیک و زیست‌شناسی قرار دارد. با نورتابی شیمیایی، تبدیل مستقیم انرژی شیمیایی به انرژی ارتعاشات الکترومغناطیسی رخ می دهد، به عنوان مثال. در جهان با استفاده از نورتابی شیمیایی، می توانید دریابید که واکنش چگونه پیش می رود، مکانیسم آن چیست، برای اجرای موثر و کارآمد فرآیندهای تکنولوژیکی چه چیزی لازم است. اگر فرآیند تکنولوژیکی تولید یک محصول شیمیایی با نورتابی شیمیایی همراه باشد، شدت آن می‌تواند به عنوان معیاری برای سرعت فرآیند عمل کند: هر چه واکنش سریع‌تر باشد، درخشش درخشان‌تر است. در طی واکنش نورتابی شیمیایی، محصولات غنی از انرژی به دست می آیند که سپس با انتشار نور، انرژی آزاد می کنند، یعنی انرژی شیمیایی به انرژی تابش الکترومغناطیسی تبدیل می شود.

هدف از این مطالعه بررسی امکان استفاده از لومینسانس شیمیایی برای ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی مواد مغذی است.

نتایج تحقیق و بحث

مشکل ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی مواد مغذی بسیار مرتبط است. استفاده از اصطلاح "فعالیت آنتی اکسیدانی" برای نشان دادن سودمندی یک محصول خاص اغلب بدون هیچ گونه استدلال شیمیایی یا بیوشیمیایی انجام می شود. به عنوان یک قاعده، فعالیت آنتی اکسیدانی هر ماده به معنای اثربخشی کاهش ارزش پراکسید است. مفهوم ارزش پراکسید نیز جوهر شیمیایی آن را به طور کامل آشکار نمی کند، زیرا به طور کامل با سینتیک و ترمودینامیک مراحل متابولیسم یک محصول غذایی خاص مطابقت ندارد. علاوه بر این، این مقدار برای مشخص کردن لیپیدها به شکل چربی استفاده می شود. با این حال، فرآیندهای اکسیداسیون و تشکیل پراکسیدها در بدن نه تنها هنگام مصرف چربی، بلکه سایر غذاها نیز رخ می دهد. به عبارت دیگر، محتوای پراکسید در یک محصول خاص را می توان گفت که در یک نوع ترازو "وزن" می شود، که در آن "وزن مرجع" واحد غلظت در یک محیط اسیدی یون یدید اکسید شده توسط پراکسیدها است. در نتیجه ید مولکولی تشکیل می شود:

I- - e → I; (1)

I + I → I20. (2)

هنگامی که ید مولکولی با محلولی حاوی تیوسولفات سدیم تیتر می شود، غلظت آن مشخص می شود و بنابراین، مقدار یون های یدید اکسید کننده تعیین می شود. ترکیبات پراکسید که در واقع عدد پراکسید نامیده می شود. تعیین عدد پراکسید با استفاده از این نوع "توزین" بر اساس واکنش نشان داده شده در شکل است. 1.

برنج. 1. تعیین مقدار پراکسید با استفاده از تیوسولفات سدیم

بنابراین، غلظت پراکسیدها از معادله تعیین می شود

С(I2) = ϒ(C[-O-O-])، (3)

که در آن ϒ ضریب همبستگی بین غلظت ید مولکولی و غلظت پراکسیدها است.

روش پیشنهادی ما برای تعیین پراکسیدها در محصولات مبتنی بر لومینسانس شیمیایی لومینول (C[lm]) در یک محیط قلیایی است که شدت (Ichl) آن به غلظت پراکسیدها (C[-O-O-]) در یک نورتابی شیمیایی بستگی دارد. نمونه:

IHL = Ϧхл ω، (4)

که در آن Ϧhl بازده کوانتومی لومینسانس شیمیایی است. ω - سرعت واکنش شامل پراکسیدها:

khlC[-O-O-] C[lm] = ω، (5)

که در آن khl ثابت سرعت واکنش است یا در:

C[lm] khl Ϧkhl = K، (6)

IHL = K C[ -O-O- ]. (7).

مقدار پراکسیدها (-O-O-) با مجموع نور (S) تعیین می شود:

مقدار S به میزان مصرف کامل پراکسید در واکنش نورتابی شیمیایی بستگی دارد.

برای تعیین ثابت K، یک منحنی کالیبراسیون برای وابستگی مجموع نور S به غلظت پراکسید ساخته می شود که با تیتراسیون ایجاد می شود:

S = f (C[-O-O-]). (9)

پراکسید هیدروژن H2O2 به عنوان پراکسید استفاده می شود.

سپس داده های به دست آمده از رابطه (3) و (9) با هم مقایسه می شوند. بر اساس مقایسه ϒ و K، نتیجه‌گیری در مورد توافق مکانیسم‌های واکنش زیربنای تعیین پراکسیدها با این روش‌ها انجام می‌شود. مشخص شد که در این محدوده غلظت پراکسید ϒ و K در واقع با یکدیگر همخوانی دارند و بنابراین می توان از آنها برای تعیین عدد پراکسید استفاده کرد.

نورتابی شیمیایی در یک محیط قلیایی حاوی لومینول (5-آمینو-1،2،3،4-تتراهیدرو-1،4-فتالازین دیون، 3-آمینوفتالیک اسید هیدرازید، H2L) مشاهده شد. این با استفاده از یک تنظیم نورتابی شیمیایی شامل یک فتومولتیپلایر خلاء شیشه ای ثبت شد. فتومولتیپلایر توسط یک یکسو کننده ولتاژ بالا (7) که به یک بلوک (9) کوپل شده است تغذیه می شود که سیگنال فتومولتیپلایر را تقویت می کند که روی نمایشگر مانیتور کامپیوتر (5) ثبت می شود.

برنج. 2. ثبت لومینسانس شیمیایی محصول مورد تجزیه و تحلیل: 1 - پمپ دوز. 2 - محفظه ضد نور; 3 - آینه; 4 - کووت؛ 5 - سیستم کامپیوتری; 6 - فتو ضربی; 7 - یکسو کننده فشار قوی; 8 - دستگاهی که به شما امکان می دهد منطقه طیفی تابش نورتابی شیمیایی را تعیین کنید. 9 - بلوکی که سیگنال فتومولتیپلایر را تقویت می کند

یک پمپ دوز (1) برای وارد کردن نمونه آنالیز شده به یک کووت (4) حاوی محلول نورتابی شیمیایی لومینول ضروری است. این دیسپنسر به عنوان یک میکسر برای نمونه تزریق شده با محلول نورتابی شیمیایی عمل می کند. برای افزایش سرعت واکنش و شدت نورتابی شیمیایی، محلولی از سولفید آهن پتاسیم به لومینول اضافه شد. اختلاط توسط حباب های هوا که از پمپاژ هوا از طریق مایع محلول بدست می آید انجام می شود. آینه (3)، واقع در محفظه ضد نور (2)، برای جمع‌آوری بهتر نور تشعشعات شیمی‌تابنده بر روی فوتوکاتد مولتی‌پلایر نوری (6)، نصب شده در محفظه ضد نور، خدمت می‌کند. دیسپنسر به شما این امکان را می دهد که اجزای مایع مورد نیاز را بدون باز کردن محفظه محکم (2) در طول آزمایش وارد کووت کنید. در این حالت این مایعات از طریق لوله های شیشه ای یا پلاستیکی وارد کووت (4) می شوند. سیستم کامپیوتری امکان ثبت وابستگی شدت درخشش I به زمان t را فراهم می کند، یعنی سینتیک نورتابی شیمیایی:

سیستم کامپیوتری ثابت‌های صعود و سقوط را در تابع I = f(t) منعکس می‌کند، که با ثابت‌های سرعت واکنش‌هایی که باعث نورتابی شیمیایی می‌شوند، یعنی با سینتیک آنها مرتبط هستند. یک دستگاه (8) در محفظه نورتابی شیمیایی گنجانده شده است که امکان تعیین ناحیه طیفی تابش نورتابی شیمیایی، یعنی وابستگی را ممکن می سازد:

I = f1 (λ). (یازده)

این بلوک یک کاست دیسکی شکل است که فیلترهای مرزی در آن نصب شده اند. تغییر فیلترها با چرخاندن کاست دیسک نسبت به محور افقی که مراکز صفحه فیلترها و صفحه فوتوکاتد فتومولتیپلایر را به هم متصل می کند انجام می شود.

فرآیند اندازه گیری به شرح زیر انجام می شود:

1. واکنش فتومولتیپلایر به تغییرات ولتاژ تغذیه آن و تغییرات در شدت منبع نور مرجع که روی کاتد آن می افتد برقرار می شود.

2. کووت با محلول لومینول در یک محیط قلیایی پر می شود.

3. دیسپنسر با نمونه آنالیز شده پر می شود.

4. وابستگی شدت نورتابی شیمیایی به زمان t ثبت می شود. مشاهدات نورتابی شیمیایی تا زمان t1 انجام می شود، که در آن تغییر در I1 از زمان t حداقل است: I1 = f1 (t).

5. بخشی از محلول تجزیه و تحلیل شده با استفاده از یک دیسپنسر عرضه می شود.

6. نورتابی شیمیایی نمونه آنالیز شده مشاهده می شود که سینتیک آن I=f(t) است.

در شکل شکل 3 نموداری از وابستگی توابع (I1 = f1(t))، مرتبط با نمودار (I = f(t))، پس از معرفی راه حل تحلیل شده را نشان می دهد.

همانطور که در شکل دیده میشود. 3، شدت نورتابی شیمیایی لومینول تغییر می کند: پس از افزودن نمونه تجزیه و تحلیل شده، یک افزایش شدید با کاهش شدید در لومینسانس همراه است.

از آنجایی که افزایش نورتابی شیمیایی در طول اکسیداسیون لومینول با تشکیل پراکسیدها همراه است، کاهش شدت نورتابی شیمیایی پس از معرفی نمونه آنالیز شده نشان دهنده کاهش کمیت آنها است. در نتیجه، می توان در مورد وجود فعالیت آنتی اکسیدانی در ترکیبات موجود در نمونه مورد تجزیه و تحلیل صحبت کرد.

لازم به ذکر است که نمونه مورد تجزیه و تحلیل عصاره قاصدک حاصل از تقطیر خشک در دمای پایین است که حاوی ترکیبات فنلی است که به دلیل فعالیت آنتی اکسیدانی بالا شناخته شده است.

برنج. 3. نمودار وابستگی تابع (I1 = f1(t))، همراه با نمودار (I = f(t))، پس از معرفی راه حل تحلیل شده

علاوه بر این، آزمایش نشان داد که با استفاده از لومینسانس شیمیایی می توان مقدار پراکسیدها را در سیستم های فوق رقیق تعیین کرد، که برای ارزیابی شروع اکسیداسیون محصولات، به عنوان مثال، در طول ذخیره سازی مهم است.

بنابراین، مطالعات نشان داده است که روش تعیین پراکسیدها در فرآورده ها، بر اساس لومینسانس شیمیایی لومینول در یک محیط قلیایی، ارزیابی فعالیت آنتی اکسیدانی مواد غذایی را ممکن می سازد و می توان از آن برای تعیین خواص آنتی اکسیدانی ترکیبات مختلف غذایی استفاده کرد. .

داوران:

Litvinova E.V.، دکترای علوم فنی، استاد گروه فناوری، سازماندهی و بهداشت مواد غذایی، موسسه آموزشی بودجه دولت فدرال آموزش عالی حرفه ای "OrelGIET"، Orel.

Kovaleva O.A.، دکترای علوم زیستی، مدیر مؤسسه، مؤسسه آموزشی بودجه ایالتی فدرال آموزش عالی حرفه ای "دانشگاه کشاورزی ایالتی اوریول"، اورل.

این اثر در 8 نوامبر 2013 توسط سردبیر دریافت شد.

پیوند کتابشناختی

پانیچکین A.V.، Bolshakova L.S.، Milentyev V.N.، Sannikov D.P.، Kazmin V.M. استفاده از شیمی‌لومینسانس برای ارزیابی خواص آنتی اکسیدانی مواد غذایی // تحقیقات بنیادی. – 2013. – شماره 10-11. – ص 2436-2439;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=32810 (تاریخ دسترسی: 12/17/2019). مجلات منتشر شده توسط انتشارات "آکادمی علوم طبیعی" را مورد توجه شما قرار می دهیم.

حاشیه نویسی مقاله علمی در مورد علوم شیمی، نویسنده کار علمی - گئورگی کنستانتینوویچ ولادیمیروف، ای. وی. سرگونووا، دی. یو. ایزمایلوف، یو. ا. ولادیمیروف

مطالب مرتبط آثار علمی در علوم شیمی، نویسنده کار علمی - گئورگی کنستانتینوویچ ولادیمیروف، ای. وی. سرگونوا، دی. یو. ایزمایلوف، یو. ا. ولادیمیروف

تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی کل در مواد گیاهی دارویی

متن کار علمی با موضوع "روش شیمیتابی برای تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی کل در مواد گیاهی دارویی"

پیوند کتابشناختی

1.4 روش های تحقیق آنتی اکسیدانی

پیوند کتابشناختی

عملکرد اندامک های سلولی

الگوریتم نگارش مقاله در مطالعات اجتماعی

چرنوبیل در خاطرات شاهدان عینی داستان های ترسناک چرنوبیل