RUSYA FEDERASYONU SAĞLIK BAKANLIĞI
GENEL FARMAKOPEN İZNİ
Analitik prosedürlerin validasyonu OFS.1.1.0012.15
İlk kez tanıtıldı
Bir analitik tekniğin validasyonu, tekniğin amaçlanan problemleri çözmek için uygun olduğunun deneysel kanıtıdır.
Bu Genel Farmakope Monografisi, validasyon amacıyla belirlenen analitik metotların özelliklerini ve tıbbi ürünlerin (farmasötik maddeler ve tıbbi ürünler) kalite kontrolüne yönelik valide edilmiş metotların uygunluğuna ilişkin ilgili kriterleri düzenler.
Safsızlıkları belirlemeye yönelik yöntemler ve içerik sınırını belirlemeye yönelik yöntemler dahil olmak üzere nicel belirleme yöntemleri doğrulamaya tabidir. Kimlik doğrulama yöntemleri, özgünlüklerini doğrulamak için gerekirse doğrulanır.
Doğrulama sırasında analitik yöntem, tabloda verilen tipik tavsiyeler dikkate alınarak seçilen, aşağıda listelenen özelliklere göre değerlendirilir:
- özgüllük;
- algılama sınırı;
- kantitatif belirleme limiti (nicelleştirme limiti);
- analitik alan (aralık);
- doğrusallık (doğrusallık);
- doğruluk (doğruluk);
- kesinlik (kesinlik);
- kararlılık (sağlamlık).
Çizelge 1 - Doğrulama sırasında belirlenen yöntemlerin özellikleri
|
İsim özellikler |
Ana yöntem türleri | ||||
| Orijinallik testi | Yabancı madde | kantitatif | |||
| Nicel yöntemler | içerik sınırı | Ana aktif madde, standartlaştırılmış bileşenler | "Çözünme" testindeki etken madde | ||
| özgüllük **) | Evet | Evet | Evet | Evet | Evet |
| Algılama limiti | HAYIR | HAYIR | Evet | HAYIR | HAYIR |
| Kantitasyon Sınırı | HAYIR | Evet | HAYIR | HAYIR | HAYIR |
| Analitik alan | HAYIR | Evet | HAYIR | Evet | Evet |
| doğrusallık | HAYIR | Evet | HAYIR | Evet | Evet |
| Sağ | HAYIR | Evet | * | Evet | Evet |
| kesinlik :
– tekrarlanabilirlik (yakınsama) - orta seviye (laboratuvar içi) kesinlik |
|||||
| Sürdürülebilirlik | HAYIR | * | * | * | * |
*) gerekirse belirlenebilir;
**) bir analitik yöntemin özgüllüğünün olmaması, başka bir analitik yöntem kullanılarak telafi edilebilir.
Metotların tekrar validasyonu (yeniden validasyon) şu durumlarda gerçekleştirilir:
- analiz nesnesini elde etmek için teknolojiler;
- tıbbi ürünün bileşimi (analiz nesnesi);
- önceden onaylanmış analiz metodolojisi.
özgüllük
Spesifiklik, bir analitik prosedürün, bir analiti eşlik eden bileşenlerin mevcudiyetinde açık bir şekilde değerlendirme yeteneğidir.
Doğrulanmış bir tekniğin özgüllüğünün kanıtı, genellikle, bilinen bileşime sahip model karışımlarının analizinden yararlanılarak elde edilen verilerin dikkate alınmasına dayanır.
Doğrulanmış bir tekniğin özgüllüğü, gerçek nesnelerin analizinin sonuçlarının uygun şekilde istatistiksel olarak işlenmesiyle ve buna paralel olarak başka, açıkça özel bir teknik (özgünlüğü kanıtlanmış bir teknik) kullanılarak da kanıtlanabilir.
1.1 Kimlik testi prosedürleri için
Doğrulanmış bir yöntem (veya bir dizi yöntem), deneysel doğrulamaya tabi olan formülasyonda sağlanan bileşenleri içeriyorsa, belirli bir aktif maddenin bir madde veya dozaj formundaki varlığı hakkında güvenilir bilgi sağlamalıdır.
Farmasötik madde veya tıbbi üründeki aktif maddenin orijinalliği, standart bir numuneyle karşılaştırılarak veya diğer bileşenlerin özelliği olmayan fizikokimyasal veya kimyasal özelliklerle belirlenir.
1.2 Kantitasyon ve safsızlık testi prosedürleri için
Doğrulanmış bir kantifikasyon yöntemi ve safsızlık testi için aynı yaklaşımlar kullanılır - analite göre özgüllüğü değerlendirilmelidir, yani eşlik eden bileşenlerin varlığının istenmeyen bir şekilde analizin sonucunu etkilemediği deneysel olarak doğrulanmalıdır. yol.
Doğrulanmış yöntemin özgüllüğünü, hem analiti içeren bilinen bileşime sahip model karışımlarını analiz ederek hem de doğrulanmış ve açıkça spesifik olan diğer yöntemlerin kullanımıyla aynı anda elde edilen gerçek nesnelerin analiz sonuçlarını karşılaştırarak değerlendirmeye izin verilir. İlgili deneylerin sonuçları istatistiksel olarak işlenmelidir.
Test özgüllüğünün olmaması, başka bir ek test(ler) ile telafi edilebilir.
Yöntemleri doğrularken, uygunsa, aşırı koşullara (ışık, sıcaklık, nem) maruz bırakılan veya herhangi bir uygun şekilde kimyasal olarak değiştirilmiş tıbbi ürün numuneleri, içlerindeki safsızlıkları biriktirmek için kullanılabilir.
Kromatografik teknikler için, ilgili konsantrasyonlarda en yakın şekilde yıkanan iki madde arasındaki çözünürlüğü gösterin.
ALGILAMA LİMİTİ
Tespit limiti, valide edilmiş bir teknik kullanılarak tespit edilebilen (veya yaklaşık olarak tahmin edilebilen) bir numunedeki bir analitin en küçük miktarıdır (konsantrasyon).
Tabloda belirtilen durumlarda tespit sınırı genellikle analitin konsantrasyonu olarak ifade edilir (% bağıl veya milyonda parça - ppm olarak).
Tekniğin türüne bağlı olarak (görsel veya enstrümantal), tespit limitini belirlemek için farklı yöntemler kullanılır.
2.1 Analiz sonucunun görsel olarak değerlendirildiği yöntemler için
Analitin bilinen çeşitli miktarlarına (konsantrasyonlarına) sahip numuneleri test edin ve analiz sonucunun görsel olarak değerlendirilebileceği minimum değeri belirleyin. Bu değer, algılama sınırının bir tahminidir.
2.2 Analiz sonucunun araçsal değerlendirmesine sahip yöntemler için
2.2.1 Sinyal-gürültü oranına göre
Bu yaklaşım, temel gürültünün gözlemlendiği yöntemlere uygulanabilir. Kontrol deneyi için ve düşük analit konsantrasyonlarına sahip numuneler için elde edilen sinyal değerlerini karşılaştırın. Analitik sinyalin gürültü seviyesine oranının 3'e eşit olduğu numunedeki analitin minimum miktarını (konsantrasyon) ayarlayın.
Bulunan değer, algılama sınırının bir tahminidir.
2.2.2 Sinyalin standart sapma değeri ve kalibrasyon eğrisinin eğimi ile
Tespit limiti (LO) aşağıdaki denklemle bulunur:
AÇIK = 3.3 S/B,
Nerede S
B analitik sinyalin belirlenen değere oranı olan hassasiyet katsayısıdır (kalibrasyon eğrisinin eğiminin tanjantı).
S Ve B
S SA bu grafiğin denkleminin serbest terimi. Tespit limitinin elde edilen değeri, gerekirse, tespit limitinin bulunan değerine yakın analitin miktarlarında (konsantrasyonlarında) doğrudan deneyle doğrulanabilir.
Kural olarak, bir maddenin spesifikasyon tarafından belirlenen içerik sınırının hem üzerindeki hem de altındaki konsantrasyonlarda güvenilir bir şekilde belirlenmesi için bir yöntemin uygunluğuna dair kanıt varsa, böyle bir yöntem için gerçek saptama sınırının belirlenmesi gerekli değildir. .
ÖLÇÜM SINIRI
Kantitasyon sınırı, gerekli doğruluk ve laboratuvar içi (ara) kesinlik ile doğrulanmış bir yöntem kullanılarak ölçülebilen bir numunedeki bir maddenin en küçük miktarıdır (konsantrasyon).
Kantitasyon limiti, bir numunedeki maddelerin küçük miktarlarını (konsantrasyonlarını) değerlendirmek ve özellikle safsızlıkların içeriğini değerlendirmek için kullanılan prosedürlerin gerekli bir doğrulama özelliğidir.
Tekniğin türüne bağlı olarak, kantitasyon sınırını bulmak için aşağıdaki yöntemler kullanılır.
3.1 Analiz sonucunun görsel olarak değerlendirildiği yöntemler için
Analitin bilinen çeşitli miktarlarına (konsantrasyonlarına) sahip numuneleri test edin ve analiz sonucunun gerekli doğruluk ve laboratuvar içi (ara) hassasiyetle görsel olarak elde edilebileceği minimum değeri belirleyin.
3.2 Analiz sonucunun araçsal değerlendirmesine sahip yöntemler için
3.2.1 Sinyal-gürültü oranı
Analitik sinyalin gürültü seviyesine oranının yaklaşık 10:1 olduğu numunedeki analitin minimum konsantrasyonunu ayarlayın.
3.2.2 Sinyalin standart sapma değeri ve kalibrasyon eğrisinin eğimi ile
Ölçüm limiti (LOQ) aşağıdaki denklem kullanılarak hesaplanır:
FSP = 10 S/B,
Nerede S analitik sinyalin standart sapmasıdır;
B analitik sinyalin belirlenen değere oranı olan duyarlılık katsayısıdır.
Çok çeşitli ölçülen değerlerde deneysel verilerin varlığında S Ve B en küçük kareler yöntemi ile tahmin edilebilir.
Doğrusal bir kalibrasyon grafiği için, değer S standart sapmaya eşit alınır SA bu grafiğin denkleminin serbest terimi. Kantitatif tayin limitinin elde edilen değeri, gerekirse, analitin kantitatif tayin limitinin bulunan değerine yakın miktarlarında (konsantrasyonlarında) doğrudan deneyle doğrulanabilir.
Bir yöntemin, bir analiti spesifikasyon sınırının altındaki ve altındaki konsantrasyonlarda güvenilir bir şekilde tespit etme kabiliyetine dair kanıt varsa, genellikle böyle bir yöntem için niceleme sınırının gerçek değerini belirlemek gerekli değildir.
YÖNTEMİN ANALİTİK ALANI
Tekniğin analitik alanı, analiz nesnesinde belirlenen bileşenin analitik özelliklerinin (miktarı, konsantrasyonu, aktivitesi vb.) Üst ve alt değerleri arasındaki aralıktır. Bu aralık içinde, valide edilen yöntem kullanılarak elde edilen sonuçlar kabul edilebilir bir doğruluk düzeyine ve laboratuvar içi (orta) kesinliğe sahip olmalıdır.
Yöntemlerin analitik alanının boyutuna aşağıdaki gereksinimler uygulanır:
- kantitatif belirleme yöntemleri, belirlenen analitik özelliğin nominal değerinin %80 ila %120'si aralığında uygulanabilir olmalıdır;
- dozlamanın tekdüzeliğini değerlendirme yöntemleri, nominal dozun %70 ila 130'u aralığında uygulanabilir olmalıdır;
- çözünme testinde kullanılan kantitasyon yöntemleri, genellikle çözünme ortamında aktif maddenin beklenen konsantrasyonunun %50 ila 120'si aralığında uygulanabilir olmalıdır;
- saflık için test yöntemleri, belirlenen safsızlığın izin verilen içeriğinin %120'sine kadar "Nicelendirme Sınırı" veya "Tespit Sınırı" aralığında uygulanabilir olmalıdır.
Tekniğin analitik alanı, doğrusal modeli karşılayan deneysel veri aralığı tarafından belirlenebilir.
DOĞRUSALLIK
Tekniğin doğrusallığı, tekniğin analitik alanı içinde analiz edilen numunedeki analitin konsantrasyonuna veya miktarına analitik sinyalin doğrusal bir bağımlılığının varlığıdır.
Bir yöntemi doğrularken, analitik bölgedeki doğrusallığı, analitin farklı miktarlarına veya konsantrasyonlarına sahip en az 5 numune için analitik sinyaller ölçülerek deneysel olarak doğrulanır. Deneysel veriler, doğrusal bir model kullanılarak en küçük kareler yöntemiyle işlenir:
y = B · X + A,
X- analitin miktarı veya konsantrasyonu;
y tepkinin büyüklüğü;
B- açısal katsayı;
A- serbest terim (OFS "Bir kimyasal deneyin sonuçlarının istatistiksel olarak işlenmesi").
Değerler hesaplanmalı ve sunulmalıdır. B, A ve korelasyon katsayısı R. Çoğu durumda, 0,99 koşulunu karşılayan doğrusal bağımlılıklar kullanılır ve yalnızca iz miktarları analiz edilirken, 0,9 olan doğrusal bağımlılıklar dikkate alınır.
Bazı durumlarda, deneysel verilerin doğrusal yaklaşımı olasılığı, yalnızca matematiksel dönüşümlerinden sonra sağlanır (örneğin, logaritmalar alınarak).
Prensipte deneysel veriler arasında doğrusal bir ilişkiye dayanamayan bazı analiz yöntemleri için, bir maddenin konsantrasyonunun veya miktarının belirlenmesi doğrusal olmayan kalibrasyon grafikleri kullanılarak gerçekleştirilir. Bu durumda, analitik sinyalin analitin miktarına veya konsantrasyonuna bağımlılığının çizimi, doğrulanmış uygun yazılımla mümkün olan en küçük kareler yöntemi kullanılarak uygun bir doğrusal olmayan fonksiyonla yaklaşık olarak tahmin edilebilir.
SAĞ
Tekniğin doğruluğu, kullanımıyla yapılan tespitlerin ortalama sonucunun doğru olarak alınan değerden sapması ile karakterize edilir.
Doğru olarak alınan değerler, bu teknik kullanılarak deneysel olarak elde edilen analizlerin karşılık gelen ortalama sonuçlarının güven aralıkları içindeyse, doğrulanmış bir teknik doğru olarak kabul edilir.
Kantitasyon prosedürlerinin geçerliliğini değerlendirmek için aşağıdaki yaklaşımlar uygulanabilir:
a) bilinen bir analit içeriğine (konsantrasyonuna) sahip standart numunelerin veya model karışımların doğrulanmış bir yöntemini kullanarak analiz;
b) valide edilmiş metot ile doğruluğu önceden belirlenmiş örnek metot kullanılarak elde edilen sonuçların karşılaştırılması;
c) valide edilmiş metodolojinin doğrusallığını inceleme sonuçlarının değerlendirilmesi: eğer 5. bölümde verilen denklemdeki serbest terim istatistiksel olarak sıfırdan önemli ölçüde farklı değilse, bu tür bir metodolojinin kullanılması sistematik hata içermeyen sonuçlar verir.
"a" ve "b" yaklaşımları için, elde edilen verileri deneysel olarak bulunan ve gerçek değerler arasında doğrusal bir bağımlılık denklemi (gerileme) şeklinde sunmak mümkündür. Bu denklem için eğim açısının teğetinin bire eşitliği hakkındaki hipotezler kontrol edilir. B ve serbest terimin sıfıra eşitliği üzerine A. Kural olarak, bu hipotezler 0,05'e eşit bir güvenilirlik derecesi ile doğru olarak kabul edilirse, geçerliliği kanıtlanmış bir metodolojinin kullanılması doğru, yani sistematik hata içermeyen sonuçlar verir.
KESİNLİK
Bir tekniğin kesinliği, kullanımıyla elde edilen sonuçların ortalama sonucun değerine göre dağılımı ile karakterize edilir. Bu tür bir dağılımın ölçüsü, yeterince büyük boyutlu bir numune için elde edilen tek bir belirleme sonucunun standart sapmasının değeridir.
Kesinlik, yöntemin analitik aralığı içinde yer alan üç analit seviyesinin (düşük, orta ve yüksek) her biri için en az üç belirleme ile herhangi bir kantifikasyon prosedürü için değerlendirilir. Tekrarlanabilirlik, nominal analit içeriğine sahip numuneler için en az altı tespitten herhangi bir tahlil tekniği için de değerlendirilebilir. Çoğu durumda kesinlik değerlendirmesi, GPM "Bir kimyasal deneyin sonuçlarının istatistiksel olarak işlenmesi"nde belirtildiği gibi, en küçük kareler yöntemi kullanılarak deneysel verilerin işlenmesinin sonuçlarına dayalı olarak gerçekleştirilebilir.
Kesinlik homojen numuneler üzerinde test edilmelidir ve üç şekilde değerlendirilebilir:
– tekrarlanabilirlik olarak (yakınsama);
– laboratuvar içi (ara) kesinlik olarak;
– laboratuvarlar arası kesinlik (tekrar üretilebilirlik) olarak.
Kesinlik için seçeneklerin her biri için analiz yönteminin değerlendirilmesinin sonuçları, genellikle ayrı bir belirleme sonucunun standart sapmasının karşılık gelen değeri ile karakterize edilir.
Genellikle orijinal bir teknik geliştirirken, kullanımıyla elde edilen sonuçların tekrarlanabilirliği (yakınsama) belirlenir. Geliştirilen yöntemin düzenleyici belgelere dahil edilmesi gerekiyorsa, laboratuvar içi (ara) kesinliği ayrıca belirlenir. Bir yöntemin laboratuvarlar arası kesinliği (tekrarlanabilirliği), bir genel farmakope monografı taslağına, farmakope monografına veya farmakope referans materyalleri için düzenleyici belgelere dahil edilmesi gerektiğinde değerlendirilir.
7.1 Tekrarlanabilirlik (yakınsama)
Bir analitik prosedürün tekrarlanabilirliği, aynı düzenlenmiş koşullar altında aynı laboratuvarda (aynı uygulayıcı, aynı ekipman, aynı reaktif seti) kısa bir süre içinde elde edilen bağımsız sonuçlarla değerlendirilir.
7.2 Laboratuvar içi (Orta) Hassasiyet
Doğrulanan yöntemin laboratuvar içi (ara) kesinliği, aynı laboratuvar koşullarında (farklı günler, farklı uygulayıcılar, farklı ekipman, vb.) değerlendirilir.
7.3 Laboratuvarlar arası kesinlik (tekrarlanabilirlik)
Doğrulanmış bir yöntemin laboratuvarlar arası kesinliği (tekrarlanabilirliği), farklı laboratuvarlarda test yapılırken değerlendirilir.
İSTİKRAR
Doğrulanmış bir tekniğin stabilitesi, tabloda verilen optimal (nominal) koşullar altında, bu analiz koşullarından olası küçük sapmalarla birlikte, kendisi için bulunan özellikleri koruma yeteneğidir.
Metot sağlamlığı, kolayca kontrol edilen tahlil koşullarıyla ilişkili olarak belirlenmemelidir. Bu, özel bir stabilite çalışmasına olan ihtiyacı büyük ölçüde azaltır.
Stabilite, yalnızca valide edilen yöntem, çeşitli kromatografi türleri ve fonksiyonel analizler gibi özellikle çevreye duyarlı analiz yöntemlerinin kullanımına dayalıysa çalışılmalıdır. Gerekirse, metodolojinin kararlılığının değerlendirilmesi, geliştirme aşamasında gerçekleştirilir. Tekniğin düşük kararlılığı muhtemel ise, uygunluğu doğrudan pratik kullanım sürecinde mutlaka kontrol edilir.
Analitik Sistem Validasyonu
Bir analitik sistemin uygunluğunun doğrulanması, sistem için temel gerekliliklerin yerine getirildiğinin doğrulanmasıdır. Uygunluğu test edilen sistem, analiz edilen belirli aletler, reaktifler, standartlar ve numunelerden oluşan bir koleksiyondur. Böyle bir sistem için gereksinimler genellikle ilgili analitik yöntem için genel monografta belirtilir. Böylece, analitik sistemin uygunluğunun test edilmesi, valide edilen yönteme dahil edilen bir prosedür haline gelir.
Doğrulama sonuçlarının sunumu
Analitik yöntem için doğrulama protokolü şunları içermelidir:
– yeniden üretim için yeterli ve analizi gerçekleştirmek için gerekli tüm koşulları yansıtan tam açıklaması;
– değerlendirilen özellikler;
- istatistiksel veri işlemeye dahil edilen tüm birincil sonuçlar;
- valide edilmiş bir metodolojinin geliştirilmesi veya doğrulanması sırasında deneysel olarak elde edilen verilerin istatistiksel olarak işlenmesinin sonuçları;
- yüksek performanslı sıvı kromatografisi veya gaz kromatografisi ile elde edilen kromatogramların kopyaları gibi açıklayıcı materyaller; elektroforegramlar, elektronik ve kızılötesi spektrumlar; ince tabaka veya kağıt kromatografisi ile elde edilen kromatogramların fotoğrafları veya çizimleri; titrasyon eğrilerinin çizimleri, kalibrasyon grafikleri;
- düzenleyici belgeye dahil edilmek üzere doğrulanan yöntemin uygunluğuna ilişkin bir sonuç.
Bireysel analitik yöntemler için doğrulama materyalleri, birleştirilmiş bir doğrulama raporu şeklinde sunulmalıdır.
Her enstrümantal yöntem, ölçüm sürecinin özellikleriyle ilişkili belirli bir gürültü seviyesi ile karakterize edilir. Bu nedenle, her zaman altında bir maddenin güvenilir bir şekilde tespit edilemeyeceği bir bolluk sınırı vardır.
Algılama limiti C min , P - belirli bir güven olasılığına sahip bir bileşenin varlığının bu yöntem kullanılarak tespit edilebileceği en düşük içerik.
Tespit limiti, kontrol deneyi - y arka plan sinyalinden güvenle ayırt edilebilen minimum analitik sinyal y min ile de ayarlanabilir.
Chebyshev eşitsizliğini kullanan istatistiksel yöntemler, tespit sınırının şu ifade kullanılarak nicel olarak belirlenebileceğini kanıtladı:
Burada s arka plan, arka plan analitik sinyalinin standart sapmasıdır; S hassasiyet katsayısıdır (bazen basitçe "hassasiyet" olarak adlandırılır), analitik sinyalin bileşenin içeriğine verdiği yanıtı karakterize eder. Duyarlılık katsayısı, belirli bir konsantrasyon belirlemesi için kalibrasyon fonksiyonunun birinci türevinin değeridir. Doğrusal kalibrasyon grafikleri için bu, eğim açısının tanjantıdır:
(dikkat: karıştırmayın duyarlılık faktörüS ortak standart sapmaS!)
Algılama sınırını hesaplamanın başka yolları da vardır, ancak bu denklem en sık kullanılanıdır.
Kantitatif kimyasal analizde, genellikle bir dizi saptanabilir içerik veya konsantrasyon verilir. Belirlenen içeriklerin (konsantrasyonların) bu yöntemle sağlanan ve belirlenen konsantrasyonların alt ve üst sınırları ile sınırlanan değer aralığı anlamına gelir.
Analitikler daha çok belirlenen konsantrasyonların alt sınırıyla ilgilenir İle N veya içerik M N bileşen bu yöntemle belirlenir. Belirlenen içeriklerin alt sınırının ötesinde genellikle bağıl bir standart sapma ile belirlenebilen minimum miktarı veya konsantrasyonu alır
. .
Örnek
Solüsyondaki demirin kütle konsantrasyonu, Fe3+ iyonunun sülfosalisilik asit ile etkileşimi sonucu renklenen solüsyonların optik yoğunlukları ölçülerek spektrofotometrik yöntemle belirlendi. Kalibrasyon bağımlılığı oluşturmak için, sülfosalisilik asitle işleme tabi tutulan artan (belirli) demir konsantrasyonlarına sahip çözeltilerin optik yoğunlukları ölçüldü.
Referans çözeltinin optik yoğunlukları (reaktifler için kontrol deneyi, yani demir eklenmeden, (arka plan) 0,002; 0,000; 0,008; 0,006; 0,003 idi.
Hesaplamak demir algılama sınırı.
Çözüm
1) En küçük kareler yöntemiyle yapılan hesaplamalar sonucunda (5 numaralı kontrol görevi örneğine bakın), bir kalibrasyon grafiği oluşturmak için değerler elde edildi.
Kalibrasyon grafiği oluşturmak için hesaplanan değerler
2) Duyarlılık katsayısını, yani kalibrasyon bağımlılığının (S) açısal katsayısını tabloya göre hesaplıyoruz.
3) Hesapla arka plan sinyali standart sapması, nedir 0,0032 optik yoğunluk birimleri.
4) Tespit sınırı, mg/cm3 olacaktır.
6 numaralı kontrol görevi
Sudaki demir için algılama sınırını belirleyin.
İlk veri : demirin belirlenmesi için bir kalibrasyon grafiği oluştururken arka planın optik yoğunluğunun (referans solüsyon) değerleri 0,003'tür; 0,001; 0,007; 0,005; 0,006; 0,003; 0,001; 0,005. Çözeltideki demir konsantrasyonlarına karşılık gelen optik yoğunlukların değerleri, 5 numaralı kontrol görevi tablosunda sunulmaktadır.
5 numaralı kontrol görevini gerçekleştirirken en küçük kareler yöntemini kullanarak bir kalibrasyon grafiğinin oluşturulması için elde edilen verilere dayanarak hesaplanan hassasiyet katsayılarına (S) göre demirin tespit limitini mg/cm3 olarak hesaplayın;
Kantitasyon Sınırı
"...Nicelleştirme sınırı (LOQ) (analitik tanımlarda): işbirlikçi laboratuvar testleri veya diğer uygun yöntemlerle gösterilebilen, kabul edilebilir bir doğruluk ve güvenilirlik düzeyiyle ölçülebilen bir analit içindeki en düşük konsantrasyon veya bir analit yöntem doğrulama..."
Kaynak:
"GIDA ÜRÜNLERİ. GENETİK ORGANİZMALAR VE ONLARDAN TÜREVLENEN ÜRÜNLERİN TESPİTİ İÇİN ANALİZ YÖNTEMLERİ. GENEL GEREKLİLİKLER VE TANIMLAR. GOST R 53214-2008 (ISO 24276:2006)"
(25 Aralık 2008 N 708-st tarihli Rostekhregulirovanie Emri ile onaylanmıştır)
resmi terminoloji. akademik.ru 2012
Diğer sözlüklerde "Kantitasyon Sınırı"nın ne olduğunu görün:
kantitasyon sınırı- 3.7 ölçüm limiti [ LOQ ] bir numunenin kütlesinin standart sapmasının on katı tahmini Not LOQ değeri, üzerinde kütlenin ... ... olduğu eşik değeri olarak kullanılır.
tekrarlanabilirlik sınırı- 3.7 tekrarlanabilirlik limiti Normatif ve teknik dokümantasyon terimlerinin sözlük referans kitabı
tekrar üretilebilirlik sınırı- 2.9 Tekrarlanabilirlik koşulları altında elde edilen iki test sonucu arasındaki farkın mutlak değerinin %95 olasılıkla altında kaldığı tekrarlanabilirlik sınır değeri Kaynak … Normatif ve teknik dokümantasyon terimlerinin sözlük referans kitabı
tekrarlanabilirlik (yakınsama) limiti 3.11 Tekrarlanabilirlik koşulları altında elde edilen iki ölçümün (veya testin) sonuçları arasındaki farkın mutlak değeri ile %95'lik bir güven seviyesiyle aşılmayan tekrarlanabilirlik sınır değeri ... Normatif ve teknik dokümantasyon terimlerinin sözlük referans kitabı
Laboratuvar içi kesinlik sınırı- 3.11 laboratuvar içi kesinlik limiti: Laboratuvar içi kesinlik koşulları altında elde edilen iki analitik sonuç arasında varsayılan P olasılığı için izin verilen mutlak fark. Kaynak … Normatif ve teknik dokümantasyon terimlerinin sözlük referans kitabı
tekrar üretilebilirlik sınırı R- 2.19.2 tekrar üretilebilirlik limiti R 2.19.1, 2.19.2 (Değiştirilen baskı, başlık = Değişiklik No. 1, IUS 12 2002). ... ... Normatif ve teknik dokümantasyon terimlerinin sözlük referans kitabı
MI 2881-2004: Tavsiye. GSI. Kantitatif kimyasal analiz yöntemleri. Analiz sonuçlarının kabul edilebilirliğini kontrol etme prosedürleri- Terminoloji MI 2881 2004: Tavsiye. GSI. Kantitatif kimyasal analiz yöntemleri. Analiz sonuçlarının kabul edilebilirliğini kontrol etme prosedürleri: 3.17 kritik fark: ... arasında kabul edilen %95 olasılık için izin verilen mutlak fark. Normatif ve teknik dokümantasyon terimlerinin sözlük referans kitabı
GOST R 50779.11-2000: İstatistiksel yöntemler. İstatistiksel kalite kontrolü. Terimler ve tanımlar- Terminoloji GOST R 50779.11 2000: İstatistiksel yöntemler. İstatistiksel kalite kontrolü. Terimler ve tanımlar orijinal belge: 3.4.3 (üst ve alt) düzenleme limitleri Kontrol şemasındaki limit, üzerinde üst limit, ... ... Normatif ve teknik dokümantasyon terimlerinin sözlük referans kitabı
GOST R 50779.10-2000: İstatistiksel yöntemler. Olasılık ve istatistiklerin temelleri. Terimler ve tanımlar- Terminoloji GOST R 50779.10 2000: İstatistiksel yöntemler. Olasılık ve istatistiklerin temelleri. Terimler ve tanımlar orijinal belge: 2.3. (genel) küme Tüm dikkate alınan birimlerin kümesi. Not Rastgele bir değişken için ... ... Normatif ve teknik dokümantasyon terimlerinin sözlük referans kitabı
RMG 61-2003: Ölçümlerin tekdüzeliğini sağlamak için durum sistemi. Kantitatif kimyasal analiz yöntemlerinin doğruluk, doğruluk, kesinlik göstergeleri. Değerlendirme yöntemleri- Terminoloji RMG 61 2003: Ölçümlerin tekdüzeliğini sağlamak için durum sistemi. Kantitatif kimyasal analiz yöntemlerinin doğruluk, doğruluk, kesinlik göstergeleri. Değerlendirme yöntemleri: 3.12 laboratuvar içi kesinlik: Kesinlik … Normatif ve teknik dokümantasyon terimlerinin sözlük referans kitabı
PANO
ÇÖZÜM
29 Mayıs 2014 tarihli Avrasya Ekonomik Birliği Antlaşması'nın 30. Maddesi ve 23 Aralık 2014 tarihli Avrasya Ekonomik Birliği İçinde İlaçların Dolaşımına İlişkin Ortak İlkeler ve Kurallar Hakkındaki Anlaşma'nın 3. Maddesinin 2. paragrafı uyarınca, Kurul Avrasya Ekonomik Komisyonu
karar verilmiş:
1. Tıbbi Ürünlerin Test Edilmesine Yönelik Analitik Yöntemlerin Validasyonuna İlişkin ekli Kılavuz İlkeleri onaylayın.
2. Bu Karar, resmi yayım tarihinden itibaren 6 ay sonra yürürlüğe girer.
Yönetim Kurulu Başkanı
Avrasya Ekonomik Komisyonu
T. Sarkisyan
Tıbbi Ürünlerin Test Edilmesine Yönelik Analitik Yöntemlerin Validasyonuna İlişkin Kılavuz
ONAYLI
Kurul kararı
Avrasya Ekonomik Komisyonu
17 Temmuz 2018 tarihli N 113
I. Genel hükümler
1. Bu Kılavuz, tıbbi ürünlerin test edilmesi için analitik yöntemlerin validasyonuna ilişkin kuralların yanı sıra bu yöntemlerin validasyonu sırasında değerlendirilecek ve Üye Devletlerin yetkili organlarına sunulan kayıt dosyalarına dahil edilecek özelliklerin bir listesini tanımlar. Avrasya Ekonomik Birliği (bundan sonra sırasıyla Üye Devletler, Birlik olarak anılacaktır).
2. Tıbbi ürünlerin test edilmesi için bir analitik yöntemin validasyonunun amacı, kullanım amacına uygunluğunu belgelemektir.
II. Tanımlar
3. Bu Kılavuzun amaçları doğrultusunda, aşağıdaki anlamlara gelen terimler kullanılmıştır:
"analitik prosedür" (analitik prosedür) - bir analitik testi gerçekleştirmek için gerekli eylem dizisinin ayrıntılı bir tanımını içeren tıbbi ürünlerin test edilmesi için bir metodoloji (test numunelerinin, referans materyallerin, reaktiflerin, ekipman, bir kalibrasyon eğrisinin oluşturulması, kullanılan hesaplama formülleri, vb.);
"tekrarlanabilirlik" - laboratuvarlar arası testlerde kesinliği karakterize eden bir özellik;
"uygulama aralığı (analitik alan)" (aralık) - analitik yöntemin kabul edilebilir bir kesinlik düzeyine sahip olduğunun gösterildiği, numunedeki (bu konsantrasyonlar dahil) analitin en yüksek ve en düşük konsantrasyonları (miktarı) arasındaki aralık , doğruluk ve doğrusallık;
"doğrusallık" (doğrusallık) - tekniğin uygulama aralığı (analitik alan) dahilinde numunedeki analitin konsantrasyonuna (miktarına) analitik sinyalin doğrudan orantılı bağımlılığı;
"keşif (kurtarma)" (kurtarma) - uygun güven aralıklarını dikkate alarak elde edilen ortalama ve gerçek (referans) değerler arasındaki oran;
"tekrarlanabilirlik (tahlil içi kesinlik)" - aynı çalışma koşulları altında (örneğin, aynı analist veya analist grubu tarafından, aynı ekipman üzerinde, aynı ve aynı reaktiflerle) tekrarlanan testler yapıldığında bir yöntemin kesinliği vb.) kısa bir süre için;
"doğruluk" (doğruluk, doğruluk) - açıklık değeri ile ifade edilen, kabul edilen gerçek (referans) değer ile alınan değer arasındaki yakınlık;
"kantitatif belirleme limiti" (nicelleştirme limiti) - bir numunedeki bir maddenin uygun kesinlik ve doğrulukla kantitatif olarak belirlenebilen en küçük miktarı;
"tespit limiti" - bir numunede tespit edilebilen, ancak tam olarak doğru bir şekilde ölçülmesi gerekmeyen en küçük analit miktarı;
"kesinlik" (hassasiyet) - prosedürün öngördüğü koşullar altında, aynı homojen numuneden alınan çok sayıda numune üzerinde gerçekleştirilen ölçüm serileri arasındaki sonuçların (değerlerin) yakınlığının (yayılma derecesinin) ifadesi;
"ara (laboratuar içi) kesinlik" (ara kesinlik) - laboratuvardaki varyasyonların (farklı günler, farklı analistler, farklı ekipman, farklı reaktif serileri (partileri), vb.) laboratuvardan alınan özdeş numunelerin test sonuçları üzerindeki etkisi aynı seri;
"özgünlük" (özgüllük) - bir analitik tekniğin, test örneğinde bulunan diğer maddelere (safsızlıklar, bozunma ürünleri, eksipiyanlar, matris (ortam) vb.) bakılmaksızın belirlenen maddeyi açık bir şekilde değerlendirme yeteneği;
"stabilite (sağlamlık)" (sağlamlık) - bir analitik prosedürün, normal (standart) kullanımdaki güvenilirliğini gösteren, test koşullarında belirtilen küçük değişikliklerin etkisine karşı dirençli olma yeteneği.
III. Doğrulanacak analitik yöntem türleri
4. Bu Kılavuz, en yaygın 4 analitik yöntem türü için doğrulama yaklaşımlarını kapsar:
a) tanımlama testleri (gerçeklik);
b) safsızlıkların kantitatif içeriğini belirlemeye yönelik testler (safsızlık içeriği için kantitatif testler);
c) numunedeki safsızlıkların sınırını belirlemek için testler (kontrol safsızlıkları için sınır testleri);
d) test numunesindeki aktif madde molekülünün aktif kısmını belirlemek için kantitatif testler (içerik veya aktivite için) (aktif kısmın kantitatif testleri).
5. Tıbbi ürünlerin kalite kontrolü için kullanılan tüm analitik yöntemler valide edilmelidir. Bu Kılavuz, bu Kılavuzun 4. paragrafında yer almayan test türleri için analitik yöntemlerin doğrulanmasını kapsamaz (örneğin, farmasötik bir maddenin çözünmesi veya partikül boyutunun (dağılma) belirlenmesi için testler, vb.).
6. Tanımlama (orijinallik) testleri genellikle test ve referans örneklerinin özelliklerinin (örn. spektral özellikler, kromatografik davranış, reaktivite, vb.) karşılaştırılmasından oluşur.
7. Safsızlıkların kantitatif içeriğini belirlemeye yönelik testler ve numunedeki safsızlık içeriğinin sınırını belirlemeye yönelik testler, numunenin saflık özelliklerinin doğru tanımını amaçlamaktadır. Safsızlıkların kantitatif tayini için metotların validasyonuna ilişkin gereksinimler, bir numunedeki safsızlıkların sınırlayıcı içeriğini belirlemeye yönelik metotların validasyonuna ilişkin gerekliliklerden farklıdır.
8. Kantitatif test yöntemleri, test numunesindeki analitin içeriğini ölçmeyi amaçlar. Bu Kılavuz İlkelerde, miktar tayini, bir farmasötik maddenin ana bileşenlerinin kantitatif ölçümünü ifade eder. Benzer validasyon parametreleri, tıbbi ürünün aktif maddesinin veya diğer bileşenlerinin tahlili için geçerlidir. Validasyon kantitasyon parametreleri diğer analitik prosedürlerde kullanılabilir (örn. çözünme testi).
Analitik yöntemlerin amacı, doğrulama sırasında değerlendirilmesi gereken doğrulama özelliklerinin seçimini belirlediği için açıkça tanımlanmalıdır.
9. Bir analitik yöntemin aşağıdaki tipik doğrulama özellikleri değerlendirmeye tabidir:
a) doğruluk (doğruluk (doğruluk));
b) kesinlik (kesinlik):
tekrarlanabilirlik;
ara (laboratuvar içi) kesinlik (ara kesinlik);
c) özgüllük;
d) tespit limiti;
e) miktar sınırı;
f) doğrusallık;
g) uygulama aralığı (analitik alan) (aralık).
10. Çeşitli analitik yöntemlerin doğrulanması için en önemli doğrulama özellikleri tabloda özetlenmiştir.
Masa. Farklı türde analitik yöntemlerin doğrulanması için geçerli kılma özellikleri
Doğrulama | Analitik yöntemin türü |
||||
karakteristik | için testler | kirlilik testleri | kantitatif testler |
||
(özgünlük) | nicel | içeriği sınırla | çözünme (yalnızca ölçüm), içerik (aktivite) |
||
Sağ | |||||
kesinlik | |||||
tekrarlanabilirlik | |||||
ara kesinlik | |||||
özgüllük** | |||||
Algılama limiti | |||||
Kantitasyon Sınırı | |||||
doğrusallık | |||||
Uygulama alanı | |||||
________________
* Tekrar üretilebilirlik belirlenirse, ara kesinlik belirlenmesi gerekli değildir.
** Bir analitik yöntemin yetersiz özgüllüğü, bir veya daha fazla ek analitik yöntem kullanılarak telafi edilebilir.
*** Bazı durumlarda gerekli olabilir (örneğin, tespit limiti ve belirlenen safsızlığın içeriğinin normalleştirilmiş limiti yakın olduğunda).
Not. "-" - özellik değerlendirilmez, "+" - özellik değerlendirilir.
Belirtilen liste, analitik yöntemleri doğrularken tipik olarak kabul edilmelidir. Tıbbi ürünün imalatçısı tarafından ayrıca gerekçelendirilmesini gerektiren istisnalar olabilir. Analitik yöntemin kararlılık (sağlamlık) gibi bir özelliği tabloda listelenmemiştir, ancak analitik yöntemin geliştirilmesinde uygun aşamada dikkate alınmalıdır.
Yeniden doğrulama (tekrar doğrulama) aşağıdaki durumlarda gerekli olabilir (ancak bunlarla sınırlı değildir):
farmasötik maddenin sentez şemasındaki değişiklik;
tıbbi ürünün bileşimindeki değişiklik;
Analitik metodolojide değişiklik.
Üretici uygun bir gerekçe sunarsa, yeniden doğrulama yapılmaz. Temdidin kapsamı, yapılan değişikliklerin niteliğine bağlıdır.
IV. Analitik yöntemlerin validasyonu için metodoloji
1. Analitik yöntemlerin validasyon metodolojisi için genel gereklilikler
11. Bu bölüm, analitik yöntemlerin doğrulanmasında dikkate alınması gereken özellikleri ana hatlarıyla belirtir ve her bir analitik yöntemin farklı doğrulama özelliklerini oluşturmak için bazı yaklaşımlar ve tavsiyeler sunar.
12. Bazı durumlarda (örneğin, özgüllük kanıtlanırken), bir farmasötik maddenin veya ilaç ürününün kalitesinden emin olmak için birkaç analitik yöntemin bir kombinasyonu kullanılabilir.
13. Doğrulama sırasında toplanan tüm ilgili veriler ve doğrulama performansını hesaplamak için kullanılan formüller sunulmalı ve analiz edilmelidir.
14. Bu Kılavuzda belirtilenlerin dışındaki yaklaşımlar kullanılabilir. Validasyon prosedürünün ve protokolünün seçimi başvuru sahibinin sorumluluğundadır. Bu durumda, bir analitik yöntemin validasyonunun temel amacı, yöntemin amaçlanan amaca uygunluğunu teyit etmektir. Biyolojik ve biyoteknolojik ürünler için analitik yöntemlere yönelik yaklaşımlar, karmaşıklıkları nedeniyle bu Kılavuzda açıklananlardan farklı olabilir.
15. Validasyon performans çalışması boyunca bilinen, belgelenmiş özelliklere sahip referans malzemeler kullanılmalıdır. Referans malzemelerin gereken saflık derecesi kullanım amacına bağlıdır.
16. Çeşitli doğrulama özellikleri bu bölümün ayrı alt bölümlerinde ele alınmaktadır. Bu bölümün yapısı, analitik bir metodoloji geliştirme ve değerlendirme sürecini yansıtır.
17. Deneysel çalışma, analitik yöntemin yetenekleri (örn., özgüllük, doğrusallık, uygulama aralığı, doğruluk ve kesinlik) hakkında güvenilir veriler sağlayarak, ilgili doğrulama özelliklerinin aynı anda çalışılacağı şekilde planlanmalıdır.
2. Spesifiklik
18. Tanımlama, safsızlıklar ve kantitasyon için testlerin validasyonu sırasında özgüllük çalışmaları yapılmalıdır. Spesifiklik doğrulama prosedürleri, analitik yöntemin kullanım amacına bağlıdır.
19. Spesifikliğin nasıl doğrulanabileceği, analitik yöntemin amaçlandığı hedeflere bağlıdır. Analitik yöntemin bu analite özel olduğunu doğrulamak her durumda mümkün değildir (tam seçicilik). Bu durumda, 2 veya daha fazla analitik yöntemin bir kombinasyonunun kullanılması önerilir.
Bir analitik yöntemin özgüllüğünün olmaması, bir veya daha fazla ek analitik yöntemin kullanılmasıyla telafi edilebilir.
20. Farklı test türleri için özgüllük şu anlama gelir:
a) tanımlama için test yaparken - yöntemin belirlenecek maddeyi tam olarak tanımlamanıza izin verdiğinin teyidi;
b) safsızlıklar için test yapılırken, yöntemin numunedeki safsızlıkları doğru bir şekilde tanımladığının doğrulanması (örneğin, ilgili bileşikler, ağır metaller, artık çözücüler, vb. için test);
c) kantitatif testlerde - yöntemin, numunede belirlenen maddenin içeriğini veya aktivitesini belirlemenize izin verdiğinin doğrulanması.
Tanılama
21. Tatmin edici tanımlama testleri, numunede bulunabilecek yapısal olarak yakından ilişkili bileşikler arasında ayrım yapabilmelidir. Analitik bir prosedürün seçiciliği, analit içeren numuneler için pozitif sonuçlar (belki bilinen bir standartla karşılaştırılarak) ve analit içermeyen numuneler için negatif sonuçlar elde edilerek doğrulanabilir.
22. Yanlış pozitif sonuçların bulunmadığını doğrulamak için, benzer yapıya sahip maddeler veya analitle ilişkili maddeler için bir tanımlama testi yapılabilir.
23. Potansiyel olarak müdahale eden maddelerin seçimi gerekçelendirilmelidir.
Safsızlıklar için kantifikasyon ve test
24. Bir kromatografik ayırma yöntemi kullanan bir analitik prosedür için özgüllüğü doğrularken, ayrı ayrı bileşenlerin uygun şekilde tanımlandığı temsili kromatogramlar sağlanmalıdır. Diğer ayırmaya dayalı teknikler için de benzer yaklaşımlar kullanılmalıdır.
25. Kromatografide kritik ayrımlar uygun seviyede çalışılmalıdır. Kritik ayrımlar durumunda, en yakın ayrıştırma yapan 2 bileşenin çözünürlük değeri ayarlanmalıdır.
26. Spesifik olmayan bir kantifikasyon yöntemi kullanılırken, ek analitik yöntemler kullanılmalı ve tüm yöntem setinin özgüllüğü doğrulanmalıdır. Örneğin, farmasötik maddenin salımı sırasında kantitatif belirleme titrimetrik yöntemle gerçekleştirilirse, safsızlıklar için uygun bir testle desteklenebilir.
27. Yaklaşım, hem kantifikasyon hem de safsızlık testi için benzerdir.
Safsızlık örneklerinin varlığı
28. Safsızlık numunelerinin varlığında, analitik prosedürün özgüllüğünün belirlenmesi aşağıdaki gibidir:
a) nicelleştirme yapılırken, safsızlıkların ve (veya) numunenin diğer bileşenlerinin varlığında bir maddenin tayininin seçiciliğinin doğrulanması gerekir. Uygulamada bu, numuneye (farmasötik madde veya tıbbi ürün) uygun miktarda safsızlıklar ve (veya) yardımcı maddeler ekleyerek ve bunların aktif maddenin kantitatif tayininin sonucu üzerinde etkisinin olmadığına dair kanıt varsa yapılır. ;
b) safsızlıklar için test yapılırken, farmasötik maddeye veya tıbbi ürüne belirli miktarlarda safsızlıklar eklenerek ve bu safsızlıkların birbirinden ve (veya) numunenin diğer bileşenlerinden ayrıldığına dair kanıt varsa, özgüllük belirlenebilir.
Safsızlık örneği yok
29. Safsızlıklar veya bozunma ürünleri için referans malzemeler mevcut değilse, safsızlıklar veya bozunma ürünleri içeren numunelerin test sonuçları başka bir doğrulanmış yöntemin (örneğin, bir farmakope veya diğer doğrulanmış analitik (bağımsız)) sonuçlarıyla karşılaştırılarak özgüllük doğrulanabilir. yöntem). Uygun olduğunda, safsızlık referans standartları, belirtilen stres koşulları (ışık, ısı, nem, asit (baz) hidrolizi ve oksidasyon) altında saklanan numuneleri içermelidir.
30. Kantitatif belirleme durumunda 2 sonuç karşılaştırılmalıdır.
31. Safsızlık testleri söz konusu olduğunda, safsızlık profilleri karşılaştırılmalıdır.
32. Analitin tepe noktasının yalnızca bir bileşene karşılık geldiğini kanıtlamak için, tepe noktalarının saflığı üzerine çalışmalar yapılması tavsiye edilir (örneğin, diyot dizisi tespiti, kütle spektrometresi kullanımı).
3. Doğrusallık
33. Analitik tekniğin tüm uygulama alanı boyunca doğrusal bir ilişki değerlendirilmelidir. Önerilen yöntem kullanılarak doğrudan farmasötik madde üzerinde (ana standart solüsyonu seyrelterek) ve (veya) ilaç bileşenlerinin yapay (model) karışımlarının ayrı numuneleri üzerinde doğrulanabilir. İkinci yön, metodolojinin uygulama aralığının (analitik alan) belirlenmesi sürecinde incelenebilir.
34. Doğrusallık, analitin konsantrasyonunun veya miktarının bir fonksiyonu olarak analitik sinyalin grafiği çizilerek görsel olarak değerlendirilir. Açık bir doğrusal ilişki varsa, elde edilen sonuçlar uygun istatistiksel yöntemlerle (örneğin, en küçük kareler yöntemi kullanılarak regresyon çizgisi hesaplanarak) işlenmelidir. Kantitasyon sonuçları ile regresyon analizinden önce numune konsantrasyonları arasında doğrusallık elde etmek için test sonuçlarının matematiksel dönüşümü gerekebilir. Regresyon çizgisinin analizinin sonuçları, doğrusallık derecesinin matematiksel bir değerlendirmesi için kullanılabilir.
35. Doğrusallık yoksa test verileri regresyon analizinden önce matematiksel dönüşüme tabi tutulmalıdır.
36. Lineerliği doğrulamak için, korelasyon katsayısı veya belirleme katsayısı, lineer regresyonun sabit terimi, regresyon çizgisinin eğiminin teğeti ve sapmaların karelerinin artık toplamı belirlenmeli ve sunulmalı ve tüm deneysel değerleri içeren bir grafik sunulmalıdır. veriler ektedir.
37. Herhangi bir matematiksel dönüşüm altında doğrusallık gözlemlenmiyorsa (örneğin, immünoassay yöntemlerini doğrularken), analitik sinyal, numunedeki analitin konsantrasyonunun (miktarının) uygun fonksiyonu kullanılarak tanımlanmalıdır.
V. Uygulama Aralığı (Analitik Alan)
39. Bir analitik tekniğin uygulama aralığı, amacına bağlıdır ve doğrusallık çalışmasında belirlenir. Uygulama alanı içinde, teknik gerekli doğrusallığı, doğruluğu ve kesinliği sağlamalıdır.
40. Analitik yöntemlerin aşağıdaki uygulama aralıkları (analitik alanlar) izin verilen minimum olarak kabul edilmelidir:
a) bir farmasötik madde veya tıbbi üründeki aktif maddenin kantitatif tayini için - yüzde 80'lik bir konsantrasyondan (içerik) nominal konsantrasyonun (içerik) yüzde 120'lik bir konsantrasyona (içerik) kadar;
b) dozaj tekdüzeliği için - dozaj formuna bağlı olarak tıbbi ürün için daha geniş bir aralık gerekçelendirilmedikçe (örneğin, ölçülü doz inhalerler);
c) çözünme testi için, nominal uygulama aralığının ± yüzde 20'si (mutlak). Örneğin, değiştirilmiş sürüme sahip bir ürünün spesifikasyonları, ilk saatte talep edilen içeriğin yüzde 20'si ile 24 saat içinde talep edilen içeriğin yüzde 90'ı arasındaki bir aralığı kapsıyorsa, doğrulanmış kullanım aralığı, talep edilen içeriğin yüzde 0 ila 110'u olmalıdır;
d) safsızlıkların belirlenmesi için - bir safsızlığın tespit limitinden, şartnamede belirtilen değerin %120'sine kadar;
e) son derece güçlü veya toksik veya beklenmeyen bir farmakolojik etkiye sahip olan safsızlıklar için tespit limiti ve miktar tayini limiti, bu safsızlıkların kontrol edileceği seviye ile orantılı olmalıdır. Geliştirme sırasında kullanılan safsızlık testi yöntemlerini doğrulamak için analitik alanı beklenen (olası) sınıra yakın ayarlamak gerekebilir;
e) aynı testle eş zamanlı olarak kantitasyon ve saflık çalışılıyorsa ve yalnızca %100 standart kullanılıyorsa, ilişki, safsızlık için raporlama eşiğinden itibaren analitik yöntemin tüm uygulama aralığı boyunca doğrusal olmalıdır (uygun olarak) tıbbi ürünlerdeki safsızlıkları incelemek ve Avrasya Ekonomik Komisyonu tarafından onaylanan spesifikasyonlarda bunlara yönelik gereklilikleri belirlemek için kurallar) kantitatif belirleme spesifikasyonunda belirtilen yüzde 120'ye kadar içerik.
VI. Sağ
41. Analitik prosedürün tüm uygulama yelpazesi için doğruluk sağlanmalıdır.
1. Aktif farmasötik maddenin kantitatif tayini
farmasötik madde
42. Doğruluğu değerlendirmek için çeşitli yöntemler kullanılabilir:
bilinen bir saflık derecesine sahip analiz edilmiş bir maddeye (örneğin, standart bir malzemeye) bir analitik tekniğin uygulanması;
valide edilmiş bir analitik yöntem kullanılarak elde edilen analiz sonuçlarının ve doğruluğu bilinen bir yöntem ve/veya bağımsız bir yöntem kullanılarak elde edilen sonuçların karşılaştırılması.
Kesinlik, doğrusallık ve özgüllük belirlendikten sonra doğrulukla ilgili sonuca varılabilir.
tıbbi ürün
43. Doğruluğu değerlendirmek için çeşitli yöntemler kullanılabilir:
Analitik bir tekniğin, önceden bilinen miktarda bir analitin eklendiği bir tıbbi ürünün bileşenlerinin yapay (model) karışımlarına uygulanması;
Tıbbi ürünün tüm bileşenlerine ait numunelerin bulunmaması durumunda, farmasötik maddenin önceden bilinen bir miktarının tıbbi ürüne eklenmesi veya doğruluğu bilinen başka bir yöntemle elde edilen sonuçların karşılaştırılması mümkündür ve (veya) bağımsız bir yöntem.
Kesinlik, doğrusallık ve özgüllük belirlendikten sonra doğrulukla ilgili sonuca varılabilir.
2. Safsızlıkların miktarının belirlenmesi
44. Doğruluk, bilinen miktarda safsızlık eklenmiş numuneler (farmasötik madde ve tıbbi ürün) üzerinde belirlenir.
45. Tespit edilebilir safsızlıklar ve/veya bozunma ürünleri numunelerinin yokluğunda, sonuçların bağımsız bir yöntem kullanılarak elde edilen sonuçlarla karşılaştırılması kabul edilebilir. Aktif maddenin analitik sinyalinin kullanımına izin verilir.
46. Bireysel safsızlıkların içeriğini veya bunların toplamını ifade etmenin özel yolunu belirtmek gerekir (örneğin, kütle yüzdesi veya pik alanına göre yüzde olarak, ancak her durumda ana analite göre) .
47. Doğruluk, tüm uygulama aralığını kapsayan 3 farklı konsantrasyonda en az 9 belirleme için değerlendirilir (yani, her konsantrasyon için 3 konsantrasyon ve 3 tekrar). Tanımlar, metodolojinin tüm adımlarını içermelidir.
48. Doğruluk, analiz edilen numuneye bilinen bir miktarda eklenen bir maddenin kantitatif tayininin sonuçlarına dayanan açıklık değeri veya elde edilen ortalama ve gerçek (referans) değerler arasındaki fark dikkate alınarak yüzde olarak ifade edilir. uygun güven aralıkları.
VII. kesinlik
49. Kantitasyon ve safsızlıklar için testlerin validasyonu kesinliğin belirlenmesini içerir.
50. Kesinlik 3 düzeyde belirlenir: tekrarlanabilirlik, ara kesinlik ve yeniden üretilebilirlik. Kesinlik, tek tip, orijinal numuneler kullanılarak oluşturulmalıdır. Homojen bir numune elde etmek mümkün değilse, yapay olarak hazırlanmış (model) numuneler veya bir numune çözeltisi kullanılarak kesinliğin belirlenmesine izin verilir. Bir analitik prosedürün kesinliği genellikle bir dizi ölçümün varyansı, standart sapması veya varyasyon katsayısı cinsinden ifade edilir.
8. tekrarlanabilirlik
51. Tekrarlanabilirlik, analitik yöntemin uygulama aralığı içinde en az 9 konsantrasyon belirlemesi (her konsantrasyon için 3 konsantrasyon ve 3 tekrar) veya %100 analit içeriğine sahip numuneler için en az 6 konsantrasyon belirlemesi yapılarak belirlenir.
IX. Ara (laboratuvar içi) kesinlik
52. Ara kesinliğin ne ölçüde oluşturulduğu, analitik yöntemin kullanıldığı koşullara bağlıdır. Başvuru sahibi, rastgele faktörlerin analitik prosedürün kesinliği üzerindeki etkisini belirlemelidir. Araştırılan tipik (değişken) faktörler farklı günler, analistler, ekipman vb. Bu etkileri ayrı ayrı incelemek gerekli değildir. Çeşitli faktörlerin etkisini incelerken, deney tasarımının kullanılması tercih edilir.
X. Tekrarlanabilirlik
53. Tekrar üretilebilirlik, laboratuvarlar arası bir deneyde kesinliği karakterize eder. Tekrar üretilebilirlik, bir analitik yöntemin standardizasyonu durumunda belirlenmelidir (örneğin, Birlik Farmakopesine veya Üye Devletlerin farmakopelerine dahil edildiğinde). Tekrar üretilebilirlik verilerinin kayıt dosyasına dahil edilmesi gerekli değildir.
11. Temsili veri
54. Her kesinlik türü için standart sapma, bağıl standart sapma (değişim katsayısı) ve güven aralığı rapor edilmelidir.
12. Algılama limiti
55. Tekniğin aletli veya aletsiz olmasına bağlı olarak tespit limitinin belirlenmesine yönelik farklı yaklaşımlar mümkündür. Diğer yaklaşımlar da kullanılabilir.
13. görsel değerlendirme
56. Görsel değerlendirme hem araçsız hem de araçsal yöntemler için kullanılabilir. Tespit sınırı, analitin bilinen konsantrasyonlarına sahip numunelerin analiz edilmesi ve güvenilir bir şekilde tespit edildiği minimum içeriğinin belirlenmesiyle belirlenir.
XIV. Sinyal-gürültü oranı açısından algılama sınırının değerlendirilmesi
57. Bu yaklaşım yalnızca temel gürültünün gözlemlendiği analitik prosedürler için geçerlidir.
58. Sinyal-gürültü oranının belirlenmesi, bilinen düşük konsantrasyonlara sahip numunelerden elde edilen sinyallerin boş numunelerden elde edilen sinyallerle karşılaştırılmasıyla ve analitin güvenilir bir şekilde tespit edilebileceği minimum konsantrasyonun belirlenmesiyle gerçekleştirilir. Tespit limitini tahmin etmek için, 3:1 ila 2:1 sinyal-gürültü oranı kabul edilebilir olarak kabul edilir.
XV. Analitik sinyalin standart sapmasından ve kalibrasyon eğrisinin eğiminden tespit limitinin tahmini
59. Algılama sınırı (LO) aşağıdaki gibi ifade edilebilir:
Nerede:
60. k değeri analit için kalibrasyon eğrisinden hesaplanır. Tahmini s birkaç şekilde yapılabilir:
b) kalibrasyon eğrisine göre. Analiz limitine yakın analit içeriğine sahip numuneler için oluşturulan sonuçtaki kalibrasyon eğrisini analiz etmek gerekir. Regresyon çizgisinin artık standart sapması veya y ekseni ile kesişme noktasının standart sapması (lineer regresyonun serbest teriminin standart sapması) standart sapma olarak kullanılabilir.
XVI. Temsili veri
61. Saptama sınırını ve belirleme yöntemini belirtmek gerekir. Tespit sınırının belirlenmesi, görsel bir değerlendirmeye veya sinyal-gürültü oranının değerlendirilmesine dayanıyorsa, ilgili kromatogramların sunumu, bunu doğrulamak için yeterli kabul edilir.
62. Tespit limitinin değeri hesaplama veya ekstrapolasyon yoluyla elde edilirse, tahmin, tespit limitine karşılık gelen veya ona yakın analit içeriğine sahip yeterli sayıda numunenin bağımsız test edilmesiyle doğrulanmalıdır.
17. Kantitasyon Sınırı
63. Kantitasyon limiti, özellikle safsızlıkların ve/veya bozunma ürünlerinin belirlenmesi için bir numunedeki maddelerin düşük içeriğini belirlemek için kullanılan prosedürlerin gerekli bir doğrulama özelliğidir.
64. Tekniğin aletli ya da aletsiz olmasına bağlı olarak niceleme sınırını belirlemek için çeşitli yaklaşımlar mümkündür. Diğer yaklaşımlara izin verilir.
XVIII. görsel değerlendirme
65. Görsel değerlendirme hem araçsız hem de araçsal yöntemler için kullanılabilir.
66. Kantitasyon limiti genellikle analitin bilinen konsantrasyonlarına sahip numunelerin analiz edilmesi ve analitin kabul edilebilir doğruluk ve kesinlik ile ölçülebildiği minimum içeriğin tahmin edilmesiyle belirlenir.
19. Sinyal-gürültü oranı ile ölçüm limitinin değerlendirilmesi
67. Bu yaklaşım yalnızca temel gürültünün gözlemlendiği ölçüm yöntemleri için geçerlidir.
68. Sinyal-gürültü oranının belirlenmesi, analitin bilinen düşük konsantrasyonlarına sahip numunelerden elde edilen ölçülen sinyallerin boş numunelerden elde edilen sinyallerle karşılaştırılmasıyla ve analitin olabileceği minimum konsantrasyonun belirlenmesiyle gerçekleştirilir. güvenilir bir şekilde ölçüldü. Tipik sinyal-gürültü oranı 10:1'dir.
XX. Sinyalin standart sapmasından ve kalibrasyon eğrisinin eğiminden kantitasyon limitinin değerlendirilmesi
69. Ölçüm limiti (LOQ) aşağıdaki gibi ifade edilebilir:
Nerede:
s, analitik sinyalin standart sapmasıdır;
k, kalibrasyon eğrisinin eğiminin tanjantıdır.
70. k değeri analit için kalibrasyon eğrisinden hesaplanır. Tahmini s birkaç şekilde yapılabilir:
a) boş numunenin standart sapmasına göre. Yeterli sayıda boş numune için analitik sinyalin büyüklüğü ölçülür ve değerlerinin standart sapması hesaplanır;
b) kalibrasyon eğrisine göre. Analit içeriği kantitatif belirleme sınırına yakın olan numuneler için oluşturulan sonuçtaki kalibrasyon eğrisini analiz etmek gerekir. Regresyon çizgisinin artık standart sapması veya y ekseni ile kesişme noktasının standart sapması (lineer regresyonun serbest teriminin standart sapması) standart sapma olarak kullanılabilir.
XXI. Temsili veri
71. Kantitasyon sınırını ve belirleme yöntemini belirtmek gereklidir.
72. Kantitasyon limiti, daha sonra kantitasyon limitine eşit veya bu limite yakın analit içeren yeterli sayıda numune analiz edilerek doğrulanmalıdır.
73. Yukarıda sıralananlar dışındaki yaklaşımlar da kabul edilebilir.
XXII. Stabilite (sağlamlık)
74. Stabilite (sağlamlık) çalışması, geliştirme aşamasında yapılmalıdır, çalışmaların kapsamı, incelenen analitik yönteme bağlıdır. Metodun parametrelerinin (koşullarının) kasıtlı varyasyonları altında analizin güvenilirliğini göstermek gereklidir.
75. Ölçüm sonuçları, analitik prosedürün uygulama koşullarındaki değişikliklere bağlıysa, bu tür koşullara uygunluğun sıkı bir şekilde kontrol edilmesi veya test sırasında önlemlerin şart koşulması gerekir.
76. Kullanıldığında bir analitik yöntemin geçerliliğinin korunmasını sağlamak için, bir sağlamlık çalışmasının sonuçlarından biri, bir dizi sistem uygunluk parametresi (örneğin bir çözünürlük testi) oluşturmak olmalıdır.
77. Yaygın parametre varyasyonları şunlardır:
analitik prosedürlerde kullanılan çözeltilerin stabilitesi;
çıkarma süresi.
Sıvı kromatografi için varyasyon parametreleri şunlardır:
mobil fazın pH'ını değiştirmek;
mobil fazın bileşimindeki değişiklik;
farklı sütunlar (farklı seriler ve tedarikçiler);
sıcaklık;
mobil faz hızı (akış hızı).
Gaz kromatografisi için varyasyon parametreleri şunlardır:
farklı sütunlar (farklı seriler ve tedarikçiler);
sıcaklık;
taşıyıcı gaz hızı
XXIII. Sistem Uygunluk Değerlendirmesi
78. Sistem uygunluk değerlendirmesi, birçok analitik prosedürün ayrılmaz bir parçasıdır. Bu testler, ekipman, elektronik, analitik işlemler ve analiz edilen numunelerin eksiksiz bir sistem oluşturduğu ve bu şekilde değerlendirilmesi gerektiği konseptine dayanmaktadır. Sistem uygunluk kriterleri belirli bir metot için belirlenmeli ve valide edilen analitik metodun tipine bağlı olmalıdır. Ek bilgiler Birlik Farmakopesinden veya Üye Devletlerin farmakopelerinden elde edilebilir.
Belgenin elektronik metni
Kodeks A.Ş. tarafından hazırlanmış ve aşağıdakilere göre doğrulanmıştır:
resmi site
Avrasya Ekonomik Birliği
www.eaeunion.org, 20.07.2018
